División de Ciencias Biológicas y de la Salud

Departamento de Ciencias Químico Biológicas

Lic. Químico Biólogo Clínico

Laboratorio Genética

Práctica #3:

Extracción de ADN

Laboratorio impartido por

Dra. IRACEMA DEL CARMEN RODRIGUEZ HERNANDEZ

Integrantes

Aldo Airam Ruiz García

Irving André Becuar Valle
Michelle Gpe Gamboa Lacarra
Ana Lizbeth García López
l. Sección 1
1. Realizar una tabla donde mencione todo el Equipo, los materiales y
soluciones empleadas.

Equipos Materiales Soluciones

Centrifugadora Micropipetas Solución de lisis
Baño maría Hisopo bucal Solución salina concentrada
Tubos de muestra Etanol
Alcohol isopropílico
Resuspensión de Buffer
2. ¿Qué muestra biológica se utiliza?
Células de la mejilla

3. Describe detalladamente ¿Cómo se obtiene la muestra del paciente?

Con un hisopo para colectar la muestra se introduce en la boca del paciente y se
arrastra el hisopo por la mejilla para obtener la muestra.

ll. Sección Lisis celular

 1. ¿Cómo se llevo a cabo la lisis celular?
Se corto la parte de arriba del hisopo donde estaba la muestra para que entrara en
el tubo y se le agrego un poco de la solución de lisis.

2. ¿Qué pasa a nivel celular?

Ya que la solución de lisis contiene detergente, este hizo que alterara la
membrana celular y la envoltura nuclear, quedando el ADN libre de ellas.
3. ¿Qué pasa a nivel genómico?
Ya que la solución de lisis contiene una enzima llamada proteinasa K esta corto
las histonas que están alrededor del ADN quedando así libre de ella.

III.-Sección Uso de sales

1. ¿Qué función tiene la solución de sales?
La solución de sales hace que las proteínas, la membrana celular y la envoltura
nuclear se agrupe separado del ADN.
2. ¿Para qué y cómo centrifugamos?
Se centrifuga para para que lo mas pesado se baje que en este caso es las
proteínas, la membrana celular y la envoltura nuclear, y en la parte superior se
queda el ADN con el liquido.
Para balancear la centrifugadora donde colocamos la muestra enfrente se coloca
un mismo tubo con agua y esta gira a una velocidad muy alta.
3. Describa como separamos la fracción orgánica contaminante.
Se utiliza una micropipeta para separar el liquido que es donde se encuentra el
ADN colocándolo en un nuevo tubo y la fase orgánica contaminante se queda en
el mismo tubo.
IV.-Sección: Uso de Alcoholes
1. Explica el efecto que se genera al añadir el isopropanol en la
extracción de ADN.
El ADN al no ser soluble en isopropanol hace que se separe de la solución.
2. ¿Para qué invertir el tubo?
Para que se mezcle correctamente el isopropanol con el ADN
3. ¿Qué fracción de la muestra representan las hebras blancas
observadas en el microtubo? ¿por qué las podemos observar?
Las hebras blancas son solamente el ADN extraído se pueden ver gracias al
isopropanol.
V.-Sección: extracción de ADN

1. La imagen representa la ultima etapa de la extracción de ADN. ¿Que

fracción (A ó B) representada en el microtubo lo contiene?

La fraccion A son las soluciones que se utilizaron en toda la practica y la fraccion

B es el ADN extraido.

2. La imagen representa la ultima etapa de la extracción de ADN. ¿Cómo

lo separaría adecuadamente?

Se utiliza una micropipeta ya que con esta se puede retirar el liquido en pequeñas
cantidades sin tener que tocar la extraccion de ADN.

3. ¿Bajo que condiciones se deben almacenar el ADN para resguardar su

integridad?

Congelación a -20ºC es la técnica de elección para almacenar muestras biológicas

durante cortos periodos de tiempo y la Ultracongelación a -80ºC es el método de
elección para almacenar muestras biológicas a largo plazo, ya que previene la
degradación de ácidos nucleicos.

REFERENCIAS

 https://learn.genetics.utah.edu/content/labs/extraction/

 Arianna Duque-Ortiz, Damarys Relova-Vento, Anisleidys Perez-Castillo.

(2017). Termoestabilidad del ADN deshidratado de Mycoplasma
gallisepticum. 24/03/21, de Rev. Salud Anim. Sitio web:
http://scielo.sld.cu/pdf/rsa/v39n3/rsa02317.pdf