Efectos sinérgicos específicos de los síntomas de ketorolac-tramadol y ketorolac-pregabalina en un modelo de rata

de neuropatía periférica Revista de la Asociación Médica China, 2019

RESUMEN Antecedentes: Aunque las directrices actuales para el tratamiento del dolor neuropático no recomiendan el uso de
antiinflamatorios no esteroideos (AINE), sigue sin estar claro si los AINE pueden servir como coadyuvantes útiles del tratamiento
multimodal convencional.

Métodos: Las ratas con lesión nerviosa preservada (SNI) desarrollaron rápidamente comportamientos de dolor espontáneo y
evocado profundos y duraderos, incluyendo alodinia mecánica y fría de la pata trasera ipsilateral. En el día 5, caracterizamos
primero las respuestas nociceptivas al ketorolac, el tramadol, la pregabalina y sus combinaciones.

Resultados: Descubrimos que el tramadol y la pregabalina ejercían efectos analgésicos dependientes de la dosis tanto en los
comportamientos espontáneos como en los evocados. Sin embargo, el ketorolac por sí solo no suprimió ningún
comportamiento, independientemente de la dosis. Ketorolac-tramadol y ketorolac-pregabalina produjeron grados variables de
supresión aditiva de las respuestas conductuales espontáneas y evocadas. La alodinia al frío disminuyó profundamente después
de añadir ketorolac a la pregabalina o al tramadol inefectivos. La alodinia mecánica fue notablemente atenuada por el ketorolac-
pregabalina, pero menos por las mezclas de ketorolac-tramadol.

Conclusión: Nuestros datos demostraron que un AINE por sí solo no alivió las conductas de dolor espontáneo o evocado en el
modelo SNI de rata, pero cuando se combinó con un opioide débil y un α-2-δ-ligando produjo un profundo efecto analgésico
sinérgico sobre la alodinia fría y una eficacia discrepante para la alodinia mecánica y el dolor espontáneo

INTRODUCCIÓN

El dolor neuropático periférico es uno de los tipos de dolor crónico más desastrosos ya que provoca un dolor
espontáneo continuo y amplifica las respuestas de dolor a estímulos nocivos o incluso inocuos. No se recomiendan los
AINEs como tratamiento eficaz. En su lugar, se recomiendan los antidepresivos tricíclicos, los bloqueadores de la
subunidad α-2-δ (alfa2delta) y los inhibidores de la recaptación de serotonina-noradrenalina como medicamentos de
primera línea, y como medicamento de segunda línea el tramadol. Sin embargo, los AINE se siguen utilizando. Los
AINE, que actúan inhibiendo la enzima ciclooxigenasa (COX) y suprimiendo la síntesis de prostaglandinas, se utilizan
sobre todo para tratar el dolor inflamatorio y el dolor postoperatorio agudo.

En cambio, la pregabalina y el tramadol se recetan con frecuencia para tratar los síntomas de dolor neuropático. El
clorhidrato de tramadol es un agonista débil de los receptores μ-opioides (mu) y un inhibidor de la recaptación de
serotonina y norepinefrina. La pregabalina, un anticonvulsivo, inhibe la liberación de neurotransmisores excitatorios al
unirse selectivamente a la subunidad α-2-δ del canal de calcio presináptico.

No se ha investigado a fondo La farmacoterapia óptima para el dolor neuropático. La monoterapia se ha asociado a

una eficacia limitada y a efectos adversos relacionados con la dosis. Por otra parte, La terapia multimodal que utiliza
varias vías mecánicas puede maximizar el efecto analgésico y minimizar los efectos adversos de la monoterapia
individual. Por ello, la hipótesis que plantean los autores es que las combinaciones de ketorolac y tramadol o
pregabalina, podrían tener un efecto analgésico sinérgico en las respuestas al DN. Los cuales se probaron en un
modelo de rata con lesión nerviosa (SNI) que incluía dolor espontáneo y alodinia mecánica y fría.

MÉTODOS

Animales que se utilizaron fueron ratas macho Sprague Dawley de entre 8 y 10 semanas de edad con un peso entre
250 y 350 g. que se aclimataron a la sala de la colonia durante al menos 7 días antes de participar en los experimentos.
Se alojaron dos ratas por jaula y se mantuvieron en un entorno estándar con un ciclo de luz y oscuridad de 12 horas y
una temperatura de 22ºC. Con comida y agua a su voluntad. Todos los procedimientos fueron aprobados por el
Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Nacional de Taiwán.

Para la Cirugía de la lesión del nervio ciático se realizó bajo anestesia mediante una inyección intraperitoneal (i.p.) de
ketamina/xilazina (en relación de 75:7,5mg/kg). Posteriormente, se realizó una incisión en la piel de la cara lateral del
muslo izquierdo y se seccionó el músculo bíceps femoral separandolo con un retractor, exponiendo asi tres ramas
terminales del nervio ciático: el nervio sural, el peroneo común y el tibial. Se ató una ligadura con un hilo de seda de
6/0 alrededor de los nervios tibial y peroneo común y se seccionó distalmente a la ligadura, luego se hizo la
eliminación de 2 a 3 mm del nervio distal a la ligadura. Tras la intervención, se cerró el músculo con un hilo de seda de
6/0 y la piel con un hilo de seda de 4/0.
Fármacos se administraron inyecciones iv a ratas no anestesiadas. Tanto el clorhidrato de tramadol como el ketorolac
trometamina se inyectaron por vía ip en ratas no anestesiadas a dosis de 2,5, 5 y 10mg/kg. La pregabalina se inyectó
en dosis de 3, 10 y 30mg/kg. Para evaluar la interacción entre los fármacos, se administró una combinación de 5mg/kg
de ketorolac y 5mg/kg de tramadol o 10mg/kg de pregabalina para investigar su efecto analgésico sinérgico.

En la Prueba de comportamiento e inyección de droga Se evaluaron tres índices conductuales inducidosAlodinia:porsensación

el daño
del nervio periférico, estos índices son dolor espontáneo, la alodinia mecánica y la alodinia al frío.
de La eficacia dedolor
los
fármacos en estas tres conductas nociceptivas se analizó hasta 2 horas después de su administración desencadenada
i.p. Cada grupopor
estímulos
constaba de 4 a 6 ratas; cada rata recibió aleatoriamente uno de los cinco fármacos inyectados de una dosis baja a unaque
normalmente no
alta, con un intervalo de al menos 3 días entre las dosis para el aclaramiento del fármaco.
causan dolor
El comportamiento de dolor espontáneo se probó al menos 5 días después de la cirugía. Las ratas se colocaron
primero en una placa de cristal a una temperatura controlada de 30ºC ± 1ºC para una adaptación de 5 minutos. Como
valor de referencia Se registró el número acumulado de la elevación anormal de la pata trasera ipsilateral durante 30
minutos antes de la inyección, y se registraron tb los valores post-inyección cada 30 minutos hasta 120 minutos
después de la inyección.

Para evaluar la Alodinia mecánica se utiliza el (test de von Frey) al menos 5 días después de la cirugía. Durante la
prueba, se aplicaron filamentos de von Frey de fuerza creciente a la superficie plantar de la pata trasera. La respuesta
al dolor se determinó cuando la rata retiró enérgicamente su pie del filamento de flexión. El umbral de retirada del
50% se probó antes de la inyección del fármaco, y los valores posteriores se obtuvieron cada 30 minutos hasta 120
minutos después de la inyección. Las pruebas se repitieron tres veces en cada intervalo.

Y Para evaluar la Alodinia al frío se utiliza la (prueba de la acetona) al menos 10 días después de la cirugía se utilizó
una gota de acetona para tocar la superficie plantar de la pata trasera. Y para evaluar la respuesta nociceptiva se
registró la duración acumulada de la elevación de la pata inmediatamente después de la pulverización de acetona. Tb
Se registró la duración de la respuesta de retirada con un mínimo de 0,5 segundos y un máximo de 20 segundos. La
duración se probó antes de la inyección del fármaco, y los valores posteriores cada 30 minutos hasta 120 minutos
después de la inyección. Las pruebas se repitieron cinco veces en cada intervalo.

Análisis de datos y estadísticas Los efectos analgésicos de los fármacos se presentan como un porcentaje del efecto
máximo posible (% MPE) según las siguientes fórmulas: % de MPE para el dolor espontáneo; % de MPE para la
alodinia mecánica ; % de MPE para la alodinia fría. Para analizar el efecto de todo el curso de un agente único o
combinado, se presenta el área bajo la curva (AUC), que es el % acumulado de MPE durante 2 horas obtenido
mediante la regla trapezoidal (AUC = % MPE × h). Se evaluaron las diferencias en el AUC mediante un análisis de la
varianza (ANOVA) de una vía, seguido de una prueba t entre dos grupos.

RESULTADOS

Efecto del tramadol, el ketorolaco y la pregabalina Los resultados de las pruebas conductuales previas a los fármacos
mostraron una elevación espontánea de referencia de 0,9, un umbral mecánico de referencia de 2,3 y una duración de
la retirada del frío de referencia de 16,44 segundos (n = 54). No se observaron diferencias significativas entre los grupos
de tramadol, ketorolac y pregabalina. Estos resultados indicaron que no había diferencias individuales en todos los
grupos antes del tratamiento farmacológico.

El AUC del efecto máximo posible de dosis altas de pregabalina y tramadol fue de 128 y 91 en el dolor espontáneo; 86 y
61 en la alodinia fría; y 64 y 72 en la alodinia mecánica. Estos resultados indicaron que el tramadol y la pregabalina
atenuaron los tres comportamientos de dolor neuropático de forma dependiente de la dosis (Fig. 1A, B). Por otra parte, el
ketorolaco no fue eficaz como agente único para atenuar las respuestas de dolor neuropático, inclusive a una dosis alta
de 10mg/kg. Sólo se observó un efecto analgésico parcial del ketorolaco en la alodinia fría, con un AUC del máximo
efecto posible de 45 (Fig. 1C).

Fig. 1 Curva dosis-respuesta de los efectos del tramadol (A), la pregabalina (B) y el ketorolaco (C) en tres conductas
diferentes de dolor neuropático. El tramadol y la pregabalina ejercieron buenos efectos analgésicos a dosis más altas.