COLIFORMES

a. A​similación del citrato

1.​Sembrar siempre a partir de la cepa de un medio sólido trazando una
línea central en superficie NUNCA en forma abundante. ​con la cepa del
cultivo fresco e incubarlos a 35-37ºC por 24 horas
2. Observar el v​iraje del verde (pH 7) al azul marino (pH 8) o por encima

b.​ ​Formación de indol.

1. Mediante azada sembrar cepa en el caldo Triptonado​. e incubarlos a
35-37ºC por 24 - 48 horas
2. A​dicionar 0.5 ml de reactivo de Kovacs ,se forma un anillo rojo ​(+) en
la fase alcohólica

c.​ Prueba de rojo de metilo

1. Inocular los tubos con caldo MR_VP e incubarlos a 35ºC por 3 a 5 días
2. Adicionar gotas de r​ojo de metilo al 0.04%
3. Agitar el tubo y observar :​ (+): ​color rojo
(-): ​color amarillo

d. Prueba de Vogues Proskauer

1. Inocular los tubos con caldo MR_VP e incubarlos a 37ºC por 48 horas
2. Pipetear, por separado; 1 mL del cultivo a un tubo de prueba vacío,
adicionar 0.6 mL de solución de α​- naftol (5%) y 0.2 mL de
solución de KOH (40%)
3. Agitar el tubo, dejar en reposo por 2-4 horas y observar los resultados.
Anotar el desarrollo de un color rosado a carmesí como prueba positiva

e. ​Test de Mackenzie, Gilbert y Taylor

1. Sembrar cepa en estudio en caldo lactosado bilis verde brillante.
2. Incubar a ​44ºC +- 0.1ºC 24-48 horas
3. Observar : ​formación de gas en la campana de Durham.
Cambio del color verde del medio a amarillo.

f.​ Prueba de termotolerancia de Eijkman.

​1. Sembrar cepa en estudio en caldo ​ ​triptonado
2. Incubar a ​44ºC +- 0.1ºC 24-48 horas
3. Observar a​l adicionar 0.5 ml de reactivo de Kovacs que se forma un
anillo rojo ​(+)​ en la fase alcohólica.