Tema 23: Transcripción del ADN

Transcripción:

Es la síntesis de una molécula de ARN complementaria de una hebra de ADN.

Eso se refiere a
que sí el gen es 5´ ATGCCGTTAGACCGTTA… 3´ su cadena complementaria es 3´
TACGGCAATCTGGCAAT… 5´ por lo que se debe leer es el complemento del gen,
sacarle copia al complemento del gen para poder obtener 5´
AUGCCGUUAGACCGUUA… 3´ que será mi ARNm. Esto lo hace la ADN Polimerasa.

La ADN Polimerasa solo es capaz de leer en dirección 3´ -> 5´ y solo capaz de

sintetizar 5´ -> 3´.

La información codificada en la secuencia de bases de ADN se “transcribe” a la

versión de ARN del mismo código. Esto se refiere a que cada vez que se venga una Timina
en la secuencia del ADN vendrá un Uracilo en la transcripción del ARN, igual si viene una
Adenina en el ADN, vendrá una Adenina en el ARN.

La transcripción utiliza una de las cadenas del ADN como molde. Se desplaza del
extremo 3´ al 5´, por lo que el ARN crece en dirección 5´ a 3´. Por lo tanto en el caso de la
siguiente imagen el gen se encuentra en la cadena de arriba y su complemento en la de
abajo, la que se debe leer es la de abajo para obtener mi ARNm exacto al gen que en ese
caso la cadena molde es la de arriba. En el caso del 2do Gen se encuentra en la cadena de
abajo por lo que se debe leer es la de arriba para que la cadena molde de ese ARNm sea la
de abajo. Dependiendo de donde se ubique el gen sea arriba o abajo es la complementaria,
la contraria, la que se va a leer, independientemente del sentido de la transcripción.
 La secuencia de ARNm es complementaria a la cadena molde del ADN utilizada
para su síntesis. Se trata de calcar una cadena molde, teniendo una antisentido, apareciendo
una copia del otro lado idéntica a la cadena antisentido, por lo que el ARN siempre va a ser
idéntica a la cad. Antisentido, esto no quiere decir que esta cadena no pueda ser el gen solo
se denomina antisentido porque comienza por el 5´.

ADVERTENCIA: Aún cuando la secuencia de ARNm provenga de la cadena de

ADN molde (3´ - 5´), por convención (los científicos) se emplea la secuencia de la cadena
antisentido (5´ - 3´), ya que esta última posee la misma secuencia que el ARNm. Ya que es
la complementaria la que luego dará origen al gen.

Fases de la Transcripción:

1. Iniciación: ocurre la unión de la ARN polimerasa al ADN, tras lo cual se produce la

migración a un lugar de iniciación del ADN, el promotor. El sitio promotor es el
sitio de anclaje o la pista de aterrizaje para comenzar una lectura para la
transcripción del ARNm por medio de la ARN polimerasa.

Allí se ve la ARN polimerasa que denota un facto p, ese factor p es necesario como
cofactor para completar la Holoenzima que es la única manera que la enzima este completa
y activa, ese factor p es el que en realidad ubica al promotor por su gran afinidad a el. La
mayoría de los promotores tienen secuencias específicas que se denominan cajas, la más
famosa porque se repite en muchos organismos es la caja TATA que es donde se repite
mucho T A T A T A T A ó T T T T A A A A T A T A… se encontraran muchas timinas y
adeninas repetidamente, por lo que se denomina caja TATA. De manera que la ARN
polimerasa logra ubicar ese promotor y se ubica encima de él, listo ya para comenzar la
lectura del ADN. En el caso de la imagen anterior la lectura como lo indica la flecha se esta
dando en sentido 3´ - 5´ por lo que se esta leyendo es el complemento del gen y el gen por
consiguiente se encuentra en la cadena de arriba y el complemento abajo. Se lee el
complemento para crear el complemento del complemento que será el ARNm.

2. Elongación: La ARN polimerasa provoca una “burbuja” de transcripción y añade

ribonucleótido trifosfatados libres complementarios a la siguiente base expuesta del
ADN molde.

Aquí se forma un complejo promotor

abierto, en donde entra una purina y se inicia
la síntesis del ARNm.

Luego se le va agregando ribonucleótido ya fosfatados inmediatamente después de

la purina en concordancia a lo que se esta leyendo que no es la principal sino la
complementaria al gen para que de un ARNm muy parecida al gen que será el leído allá en
el ribosoma.
 Modelo de Burbuja: la polimerasa avanza de manera contínua y el transcrito se
retiene en el complejo mediante la formación de pares de base con el molde. En la imagen
siguiente se denota que la cadena molde va en sentido 3´ - 5´ por lo que la polimerasa esta
leyendo bien y se esta sintetizando en sentido 5´ - 3´ por que lo esta haciendo
correctamente, el gen esta en la parte de arriba y el complemento de él en la parte de abajo
siendo leído.

3.
Terminación: Reconocimiento de secuencias específicas en el ADN molde que actúan
como señales para la terminación de la transcripción. La cadena de ARN y la
polimerasa se disocian del molde de ADN. Con respecto a esto se encuentran varios
tipos de terminación pero se resaltan dos que son las principales.

Cualquier forma de terminación implica la separación del cofactor p, este sale de la

polimerasa y ella pierde afinidad hacia el ADN terminando soltándose del ADN y al mismo
tiempo pierde afinidad por el ARN que sale de esa unión con el ADN.

Una de las principales formas de terminar con la

transcripción es la horquilla de terminación, o que el
ARN forme una horquilla de terminación, debido a la
complementariedad entre las bases de la propia cadena
de ARN. Esta complementariedad generalmente se
realiza entre C y G, creando un bucle que no le permite a
la polimerasa continuar.
 El otro tipo de terminación es la dependiente del factor p, en donde este factor que
es una proteína muy grande tiene sitios de reconocimiento y catálisis en el ARNm y una
vez que hay este sitio actúa sobre él causando un superenrrollamiento que le obliga al ARN
a romperse y salir de la estructura de la burbuja he inmediatamente desarma la burbuja y
causa la terminación.

La ARN polimerasa al igual que en las células eucariotas también están encargadas
de la transcripción en las células procariotas. Pero en estos la secuencia AAUAAA, cerca
del extremo 3´, actúa como señal para que ocurra una reacción de corte unos 20 pares de
bases “aguas abajo”. Esta reacción de corte unos 20 pb “aguas abajo” del ARNm es por
parte de una endonucleasa. La enzima polimerasa de poli (A) añade una cola de poli (A),
compuesta por 150 a 200 residuos de adenosina al extremo 3´ del sitio de corte.
Produciendo así el ARNm completo.

Para la mayoría de los genes eucariotas, los transcritos portadores de caperuza

(m7Gppp) y cola de poli (A) se acortan mediante la eliminación de intrones internos,
empalmándose las regiones informativas (exones), cuya secuencia es colineal con la de la
proteína a ser formada, antes de ser transportados al citosol.

Intrones:

Son las regiones del ADN que deben ser eliminadas de la transcripción primaria de
ARN, estos son regiones que NO codifican para una determinada proteína, por lo que se
consideran ADN o ARN basura.

Exones:

Son regiones de un gen que no es separada durante el proceso de corte y empalme y,

por tanto, se mantienen en el ARNm maduro. En los genes que codifican una proteína, son
los exones los que contienen la información para producir la proteína codificada en el gen.
En estos casos, cada exón codifica una porción específica de la proteína completa, de
manera que el conjunto de exones forma la región codificante del gen.

Cambios Postranscripcionales:

El primer cambio postranscripcional en procariotas es la degradación del mismo

ARNm (2 a 3 min.). El segundo cambio importante es el mecanismo de corte y empalme
(splicing).

El splicing de
ARN o empalme de ARN es un proceso postranscripcional de maduración del ARN del
cual eliminan ciertos fragmentos secuenciales. Normalmente consiste en eliminar los
intrones y posteriormente unir los exones.

Diferencias en la transcripción entre Procariotas y Eucariotas:

 En las eucariotas la maquinaria de transcripción es mucha más compleja.

 Poseen varias ARN polimerasas diferentes, con funciones especializadas.
 Todas las enzimas eucariotas requieren factores proteicos adicionales (factores de
transcripción).

Ideas Fundamentales:

La mayoría de los genes determinan proteínas; unos pocos determinan ARN no

traducibles que son componentes funcionales del aparato de transcripción.
En el caso de los genes que determinan proteínas, el ADN se transcribe a ARNm,
que se traduce a una cadena polipeptídica.
Sólo una cadena de ADN se utiliza como molde para la transcripción de un gen
específico.
La función proteica depende de la secuencia de aa primaria, a su vez determinada
por la secuencia nucleotídica.