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principales métodos para clasificar a las bacterias en dos grandes grupos: Gram positivos y
Gram negativos gracias a la acción de compuestos químicos colorantes que interactúan y
penetran la pared celular bacteriana dando color a las bacterias.Las gran positivas se tiñen de azul
violaceo y las gran negativas se tiñen de rojo .
procedimiento
1. extensión o frotis : Del cultivo tomar el inóculo con el asa de siembra , previamente
esterilizada . Extender sobre la lámina portaobjetos
2. Fijar nuestra muestra a la llama del mechero , por pasadas ligeras
3. Cubrir con la solución Cristal Violeta por 1 minuto : este compuesto químico tiene afinidad
a los peptidoglicanos presente en la pared bacteriana por lo tanto quedan fijadas
4. Lavar ligeramente con agua
5. Cubrir la preparación con Lugol : actúa como mordiente ( fijador de color ) impedirá la
salida de cristal violeta mediante la formación de un complejo cristal violeta-yodo que
satura los espacios del peptidoglucano presente en la pared bacteriana
6. Lavar ligeramente con agua
7. Añadir alcohol : deshidrata la pared bacteriana disuelve la membrana externa de las
bacterias Gram negativas) extrayendo el cristal violeta a comparación de gram positivas
que retienen el complejo cristal violeta- yodo por la presencia de mayor cantidad de
peptidoglucano
8. Lavar ligeramente con agua
9. Contrastar con el colorante Fucsina básica o Safranina por 1 minuto : es un colorante
secundario o de contra tinción el cual se encarga de teñir las bacterias que no pudieron
retener el complejo cristal violeta-yodo.
Lavar con agua corriente
Secar al ambiente o con ayuda del mechero.
Observar el microscopio con lente de inmersión y aceite de inmersión. Conviene primero
enfocar con lente de menor aumento
Ya tal como vemos en la imagen
Reconocer el tipo Gram: Gram positivas ( teñidas de azul violaceo)y Gram negativas ( teñidas de
rojo)
Reconocer diversos tipos de morfología celular: cocos, bacilos
Reconocer las agrupaciones celulares: aislados o en parejas: racimos o en cadenas.