Laboratorio 1 Normas de seguridad en el laboratorio.

Cuestionario

1.1 ¿Que es bioseguridad?

La bioseguridad, es la aplicación del conocimiento, de las normas y técnicas en el

desarrollo de las prácticas que se realizan en el laboratorio para prevenir la exposición
del personal y del medio ambiente a cualquier riesgo.

1.2 ¿Cuáles serían para usted las normas básicas de bioseguridad en el laboratorio
de biología?

 No se debe consumir alimentos ni bebidas.

 Está prohibido fumar.
 No se deben llevar materiales a la boca.
 Se debe mantener el laboratorio limpio y aseado.
 Las manos se deben lavar después de manipular material infeccioso, y al
salir del laboratorio.
 Se debe hacer uso de la bata blanca.
 No se debe pipetear con la boca, se debe utilizarse siempre un dispositivo de
pipeteo
 Todas las pipetas deben tener tapones de algodón para reducir la contaminación
de los dispositivos de pipeteo.
 Deben usarse guantes. Los guantes deben ser desechados antes de salir del
área de trabajo.
 Marcar y rotular adecuadamente las láminas con el nombre o identificación del
grupo de trabajo, practica realizada y fecha.
 Al terminar la práctica se debe organizar el sitio de trabajo, desinfectando el
mesón con toallas de papel humedecidas con hipoclorito de sodio o alcohol y dejando
tanto el material y el equipo utilizado limpio y en el lugar adecuado.
 Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse
de que es el que se necesita y de los posibles riesgos de su manipulación.
 Es necesario conocer el manejo de cada uno de los equipos existentes en el
laboratorio y debe manejarse con cuidado evitando los golpes o el forzar sus
mecanismos. Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo
después de haberlos calentado con el fin de evitar roturas.
 En neveras que no posean un sistema de protección antideflagración no deben
almacenarse reactivos que contengan compuestos volátiles inflamables como éter
etílico.
 Los productos inflamables como gases, alcohol, éter, entre otros deben
mantenerse alejados de la llama del mechero. Si hay que calentar tubos de ensayo con
estos productos, se hará al baño María, nunca directamente a la llama. Si se manejan
mecheros de gas se debe tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar la
llama.
 Se debe lavar muy bien la cristalería que se utilice.
 En el laboratorio habrá un recipiente plástico, para cristalería rota y para
plásticos que hayan estado en contacto con cultivos de células o virus. Por favor,
deseche cada cosa en el envase apropiado.
 mantenga despejadas las áreas. Trate de traer la menor cantidad posible de
pertenencias al laboratorio. Coloque sus pertenencias en un área designada o donde no
estorben.

1.3 ¿Cómo puede usted evitar en el laboratorio daños a su salud?

Se puede evitar daños a la salud Cumpliendo cada una de las anteriores normas de
bioseguridad.

1.4 Conclusiones

Cuando estemos en el laboratorio se deben poner en practica las normas de

bioseguridad para evitar riesgos para nosotros o para el medio ambiente.

Laboratorio 2: El Microscopio

PROCEDIMIENTO:

1. En la siguiente representación gráfica de un microscopio, reconozca y ubique cada

una de las siguientes partes:

Tubo, Oculares, Brazo, Objetivos de 4x, 10x, 40x y 100x, Platina, Condensador,
Fuente de iluminación, Tornillo macrométrico y micrométrico, Pie

2. Clasifique en el cuadro las partes mecánicas y ópticas del microscopio.

Partes mecánicas Partes ópticas

 Ocular  Cabezal
 Objetivos  Portaobjetivos
 Diafragma  Brazo
 Condensador  Tornillo de carro móvil
 Tornillos macrometrico,
micrométrico y condensador.
 Platina
  Diafragma
 Base

3. Aumento del tamaño del objeto observado

Observe cuál es el valor del ocular_________________

Observe cual es el valor de cada uno de los objetivos 4x, 10x, 40x y 100x

Al multiplicar el valor del ocular por el valor del objetivo se obtiene el aumento del
tamaño del objeto que observamos.

Calcule el aumento para cada objetivo del microscopio con el cual le correspondió
trabajar.

Qué es un montaje húmedo

Conclusiones: cuáles son las propiedades del microscopio?

4. Uso del microscopio:

4.1. De la muestra de agua estancada tome una gota y colóquela en una lámina
portaobjetos, cubra con una laminilla.

4.2. Retire el exceso de agua por los bordes usando papel absorbente.

4.3. Observe el montaje realizado al microscopio en 4x, 10x y 40x.

Dibuje sus observaciones anotando el aumento utilizado

4.4. Tome la lámina con el extendido coloreado y obsérvela en el microscopio
enfocando primero con el objetivo de 10x, luego ponga una gota de aceite de
inmersión sobre el extendido y ubique el objetivo de 100x.

Anote sus observaciones realizando un dibujo.

4.5 Al finalizar el trabajo deje el microscopio en su correcta posición, limpie los

objetivos, colóquele la funda y guarde en su puesto.

Laboratorio 3: La Célula

Observación de tejido epidermal de cebolla

1. Tome la cebolla y sobre la epidermis de la misma utilizando la cuchilla, haga un

corte

2. Levante suavemente con la pinza una capa delgada y transparente de la parte

interna, éste es el tejido epidermal.

3. Extiéndalo sin invertirlo sobre una lámina porta objetos.

4. Coloque una gota de lugol sobre el tejido epidermal. O si prefiere adicione una gota
de agua.
5. Deje actuar el colorante lugol durante 5 minutos.

6. Acerque una laminilla, en posición oblicua, y apoyando una arista sobre la lámina al
lado de la gota, déjela caer suavemente sobre la gota.

7. Enseguida proceda a la observación de la preparación con pequeño aumento de 10x.

Anote sus observaciones

8. A continuación revise la preparación con el objetivo de 40x .Anote sus

observaciones

Observación de tejido parenquimatoso en un corte transversal de papa:

Elabore un montaje para observación del tejido parenquimatoso en un corte

transversal de papa:

1. Tome el bisturí y haga un corte transversal de la papa, este corte debe ser tan fino
que la apariencia de la porción que obtenga sea transparente.

2. En una caja de petri con agua, enjuague el corte para sacar el exceso de almidón,
contenido en las células de los tejidos de la papa.

3. Elabore un montaje húmedo como se indicó anteriormente.

4. Observe con el objetivo de 10x. Anote sus observaciones

5. Observe el montaje con el objetivo de 40x

Observación de tejido epidermal y parénquima clorofílico en hoja de Elodea

Para observación de tejido epidermal y parénquima clorofílico utilice una hoja de

Elodea:

1. Tome con la pinza una ramita de Elodea y corte con las tijeras una hojita.
2. Extiéndala sin invertirla sobre una lámina portaobjetos, adicione una gota de agua
y cúbrala con una laminilla.

3. Observe detenidamente a través del microscopio con aumento 10x, 40x y 100x.
Anote sus observaciones

Observación de cromoplastos en pulpa de tomate

Para continuar realice un montaje con pulpa de tomate e identifique los cromoplastos:

1. Con una hoja de afeitar o bisturí, haga una incisión y separe la cáscara.
2. Extraiga una pequeña porción de pulpa con el extremo de una aguja y espárzalo
sobre un porta objetos seco. No adicione agua.

3. Coloque encima un cubreobjetos y comprima suavemente con los dedos hasta

obtener un completo aplastamiento del fragmento de pulpa de tomate.

4. Identifique las células con el objetivo de 10X

5. Seleccione el mejor grupo de células y luego pase al objetivo de 40x.
Anote sus observaciones
Observación de células escamosas epiteliales

1. Coloque una pequeña gota de solución salina en el centro del portaobjetos.

2. Con un palillo raspe suavemente el interior de su mejilla, de abajo hacia arriba.

3. Coloque el producto de este raspado en la gota de solución salina.

4. Coloree con una gota de acetocarmin, azul de metileno o safranina.

6. Coloque el cubre objetos y observe al microscopio con objetivo de 40x y 100x e

identifique las células de forma irregular
Anote sus observaciones

Observación de células sanguíneas

A continuación realice un extendido para observación de células sanguíneas:

1. Desinfecte con un algodón humedecido en alcohol la punta del dedo anular o

índice, deje secar el alcohol y con la lanceta, haga una punción en la yema del
dedo.
2. Coloque una pequeña gota en una lámina portaobjetos limpia y seca.
3. Coloque otra lámina en ángulo agudo sobre la primera, acérquela a la sangre y
deslice suavemente en forma continua hasta formar una capa o frotis delgado.
4. Deje secar la preparación al medio ambiente.
5. Una vez seca la lamina aplique sobre el frotis el colorante de Wright y déjelo
actuar durante cuatro minutos. Con este procedimiento el colorante fijará la
preparación.
6. Lave el exceso de colorante con agua de la llave y deje secar la lámina
verticalmente.

7. Observe al microscopio con el objetivo de pequeño y mediano aumento e

identifique los glóbulos rojos, leucocitos y plaquetas.
8. Posteriormente observe la preparación con el objetivo de 100X y detalle la forma
de los eritrocitos, plaquetas y neutro filos. Anote sus observaciones
Formato de observaciones y datos importantes.

Epidermis de Cebolla.

Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

10X sin colorante 10 X con colorante

40 X sin colorante 40 x con colorante

Parénquima de papa.

Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

10X sin colorante 10 X con colorante

 40 X sin colorante 40 x con colorante

Epidermis y parénquima de Elodea.

Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

10X 40 X
Cromoplastos en pulpa de tomate.

Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

10X 40 X

Células escamosas epiteliales.

Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

40X 100 X
Células sanguíneas

Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

40X 100 X

Conclusiones: Deben estar relacionadas con la diferencia entre las células

epidérmicas vegetales y parenquimatosas vegetales; diferencias entre las células
animales y vegetales, (forma tamaño, distribución, entre otros)

Laboratorio 5: Diversidad de Microorganismos

Entre los principales grupos de microorganismos se encuentran: bacterias, hongos,

algas y protozoarios.

Observación microscópica de colonias

1. realice una descripción macroscópica de las colonias bacterianas y de hongos

entregadas en las cajas de Petri. Haga un cuadro donde describa la forma
(puntiforme, circular, rizoide, irregular y filamentosa), el borde (entero, ondulado o
filamentoso), la elevación (plana, elevada, convexa, crateriforme y acuminada) y la
superficie (lisa o rugosa, mate o brillante, seca o cremosa, invasiva o superficial).

COLORACION DE GRAM

A partir de una de las colonias de los cultivos dados realice un frotis de la siguiente
manera:

1. Tome una lamina portaobjetos limpia y en ella coloque una gota de solución salina.

2. Con un asa previamente esterilizada a la llama del mechero, obtenga una pequeña
muestra de las colonias observadas. Mézclela en la gota de solución salina que
coloco en el portaobjetos.
3. Déjela secar al aire libre y fíjela pasándola por la llama del mechero.

Posteriormente proceda a colorear con la tinción de gram de la siguiente manera:

1. Cubra la preparación con cristal violeta y déjela actuar por 1 minuto. Lave con agua
corriente.

2. Cubra la preparación con lugol y déjelo actuar por 1 minuto. Lave con agua
corriente.

3. Agregue alcohol acetona y déjelo actuar por 5 segundos. Lave con agua corriente.

4. Adicione safranina y déjela actuar por 30 segundos. Lave con agua corriente y
ponga a secar la lámina.

5. Ubique la lámina en el microscopio, localice las bacterias con el objetivo de menor

aumento y observe en detalle a mayor aumento.

6. Identifique las células observadas. Anote sus observaciones.

OBSERVACION DE ESPORAS

A partir del cultivo en caja de petri marcado como Bacillus, prepare un extendido del
microorganismo.

1. Fije por calor y cubra todo el portaobjetos con una solución de verde de Malaquita.

2. Caliente hasta emisión de vapores y siga dicho calentamiento durante 3 minutos.

3. Lave con agua y cubra con solución de safranina. Deje actuar 30 segundos. Lave
con agua y deje secar la lámina.

4. Enfoque con el objetivo de inmersión y observe los bacilos y en su interior las

esporas ubicadas en un extremo. Anote sus observaciones.
BACTERIAS DE LA CAVIDAD BUCAL

1. Prepare una lámina portaobjetos limpia y sin grasa.

2. Tome un escotillón desechable, páselo por el borde de la encía en la parte que hace
contacto con los dientes.

3. La muestra extraída con el escotillón colóquela sobre una lámina portaobjetos.

4. Deje secar por sí sola la lámina durante unos minutos con el fin de definir el frotis.

5. Pase lentamente el portaobjetos a través de la llama del mechero, con esto se fija el
frotis.

6. Deje enfriar y coloree con la tinción de Gram como se indicó anteriormente.

7. Deje secar la lámina y ubique las células con el objetivo de menor aumento y luego
observe con el objetivo de inmersión.

8. Tenga en cuenta que las bacterias Gram positivas toman coloración violeta y las Gram negativas
coloración roja. Anote sus observaciones.

OBSERVACION DE MOHOS
1. Prepare una solución de agua azucarada y agregue 20 gotas de esta a una tajada
de pan, déjela por espacio de media hora al aire libre.

2. Almacénela en una bolsa plástica y ciérrela. Guárdela en un lugar oscuro a 30°C

y obsérvela diariamente.

3. Cuando el pan esté enmohecido, coloque en un portaobjetos una pequeña gota de

solución de lactófenol.

4. Luego con un trozo de cinta adhesiva transparente de aproximadamente 2 cm

toque la superficie del pan enmohecido.

5. Pegue la cinta adhesiva sobre la gota del portaobjetos.

Elimine el colorante sobrante con un papel de filtro.

6. Observe al microscopio con objetivo de 40X e identifique el micelio y las hifas.

El procedimiento anterior también puede hacerlo con frutas u hortalizas dañadas que
presenten en su superficie mohos. Anote sus observaciones.

OBSERVACION DE LEVADURAS

1. Tome un poco de levadura de panadería y colóquela en un tubo de ensayo que

contenga agua con azúcar.

2. Incube a 37°C durante 15 minutos esto producirá el desarrollo de las levaduras.

3. Con una varilla de vidrio tome una gota del cultivo anterior y extiéndala en el
portaobjetos. Deje secar al aire

4. Adicione dos gotas de azul de metileno y deje actuar durante tres minutos

5. Coloque una laminilla y elimine el exceso de colorante con papel de filtro.

6. Observe al microscopio e identifique las levaduras por su forma ovalada.

Observe que algunas presentan gemaciones. Anote sus observaciones.

BACTERIAS DEL YOGUR

1. Tome una lámina portaobjetos y en ella coloque una gota de agua destilada.

2. Con un asa de argolla, obtenga una gota de yogur y mézclela con la gota de agua
colocada en el portaobjetos.

3. Deje secar completamente la lámina. Pásela 3 veces por la llama del mechero.
Tenga cuidado de no sobre calentar la muestra.

4. Cubra la preparación con alcohol o metanol por unos segundos para eliminar la
parte grasa.

5. Escurra el alcohol y deje secar al aire. Luego cubra el extendido con azul de
metileno durante 2 minutos. Lave el exceso de colorante y deje secar.

6. Enfoque el microscopio con el objetivo de mayor aumento e identifique los

estreptococos y los lactobacilos. Anote sus observaciones.

BACTERIAS DEL SUELO

1. Entierre horizontalmente un portaobjetos en la tierra de una maceta o de un jardín,

déjela allí durante 5 días.

2. Transcurrido este tiempo saque la lamina y fíjela pasándola tres veces por la llama
del mechero.

3. Limpie los bordes del portaobjetos y la parte que no va a teñir.

4. Luego coloree la lamina con safranina al 0.5% durante 1 minuto. Lave el exceso de
colorante y deje secar.

5. Observe al microscopio con el objetivo de mayor aumento y anote sus

observaciones.
ALGAS Y PROTOZOOS

1. Tome una muestra de agua estancada con un cuentagotas y deposítela en el centro

de un portaobjetos. Coloque un cubreobjetos.

2. Observe la preparación al microscopio. Mueva lentamente la preparación, e

identifique las algas y los protozoos.

3. Añada unas gotas de rojo neutro por el borde del cubre para que penetre en la
preparación y puedas ver los microorganismos, que por su transparencia son difíciles
de observar.

4. Anote sus observaciones.

Laboratorio 6: Tejidos Vegetales

PROCEDIMIENTO:

En esta práctica observe a través del microscopio la morfología de los distintos

tejidos vegetales.

TEJIDO PROTECTOR

1. Tome una hoja de lirio y con un bisturí haga una pequeña incisión en el limbo

2. Con ayuda de una pinza levante la capa externa para obtener una lámina fina.

3. Coloque la lámina fina obtenida en el portaobjetos y agregue una gota agua.

4. Enfoque al microscopio con objetivo de 10x y 40x. Identifique los ostiolos y los
cloroplastos. Anote sus observaciones.
Observe otro ejemplo de tejido epidérmico realizando un montaje con cebolla como se
explico en la práctica de la célula.

Observe al microscopio con el objetivo de menor aumento e identifique la forma de las

células epiteliales. Con el objetivo 40X identifique los nucleolos.

Otro ejemplo de tejido protector puede observarlo en la hoja de olivo.

Raspe el envés de una hoja de olivo.

Coloque el raspado en una lámina y adicione una gota de agua.

Observe los pelos escamiformes con forma de sombrilla. Anote sus observaciones

TEJIDO PARENQUIMÁTICO DE ALMACENAMIENTO.

Realice un montaje con pulpa de tomate como se explicó en la práctica de la célula.

Observe al microscopio y anote sus observaciones.

Realice un montaje con el raspado de papa como se indico en la práctica de la célula.

Observe al microscopio y anote sus observaciones.

Realice un montaje con la hoja de Elodea como se indico en prácticas anteriores.

Observe al microscopio y anote sus observaciones.
TEJIDOS MECÁNICOS O DE SOSTÉN.

Raspe con un cuchillo o bisturí una parte pequeña de mesocarpio de pera y colóquela
en un portaobjetos.

Cubra la muestra con fluoroglucina durante 2 minutos.

Elimine el exceso y cubra con ácido clorhídrico.

Coloque una lámina portaobjetos y observe el microscopio con objetivo de 40x. Anote
sus observaciones.

TEJIDOS CONDUCTORES

Realice un corte longitudinal y fino de un lápiz de madera de cedro. Coloque las

virutas en un portaobjetos, adicione agua. Coloque una laminilla y observe al
microscopio.

Realice finos cortes perpendiculares del pecíolo de la hiedra, a la dirección del tallo;
mínimo cuatro cortes.

Deposítelos en una lámina y adicione verde brillante durante 5 minutos. Lave con
agua corriente.

Cubra la lámina con fluoroglucina durante 2 minutos.

Transcurridos los 2 minutos elimine el exceso de colorante.

Cubra con ácido clorhídrico, coloque un cubreobjetos y observe al microscopio. Anote sus
observaciones.
TEJIDO MERISTEMATICO

Realice un montaje con la raíz de la cebolla como se indico en la práctica de mitosis.

Observe las células que se encuentran en mitosis.