INFORME DE DETERMINACIÓN DE BIOINDICADORES

PINTRODUCCION

Este informe se realizará con base a identificar presencia de microorganismos

dentro de la industria, a través de sus procesos y actividades generadas que
involucran indicadores que evidencien resultados de mejora, los cuales nos
mostraran presencia de microorganismos al momento de realizarles pruebas en
laboratorio que identificaran causas de generadoras de impactos en sus procesos.
OBJETIVOS

 Reconocer las normas de bioseguridad y equipos involucrados en los

procesos de análisis microbiológicos dentro del laboratorio.

 Elaborar medios de cultivo sólidos y líquidos para los análisis microbiológicos

de las muestra recolectada u obtenidas de la empresa proyecto.

 Realizar montajes para el recuento en placa de indicadores como bacterias

totales, hongos, levaduras, coliformes totales y Escherichia coli.

 Realizar los montajes para el recuento para la técnica de NMP de indicadores

como coliformes totales y coliformes termo tolerantes.

 Determinar los recuentos microbiológicos de los microorganismos que indican

la muestra procesada de la empresa proyecto.

 Adquirir destrezas en los montajes de técnica para recuento en superficie de

placa y recuento de placa en profundidad.
 PREPARACION DE DILUCIONES SERIADAS 10-1, 10-2, 10-3,10-4

INICIO

Marque el frasco de 90 ml con disolución

de (10-3) y tres tubos con posteriores
disoluciones

Se inicia con la muestra después de su

recolección o se mantiene en refrigeración
sin exceder las 24 horas.

En la muestra líquida, la disolución (10-1),

se prepara midiendo 10 ml de la muestra
en frascos de disolución que contengan 90
ml de agua peptonada con pipeta.

Para la muestra sólida, pese 10 g del total

de la muestra y llévela a frascos de
disolución que contengan 90 ml de agua
peptonada, utilice utensilios estériles

agite el frasco vigorosamente y deje en

reposo de 2 a 5 minutos, luego transfiera
(1) mililitro de la disolución (10-1) a tubo
que contenga 90 ml de diluyente para
obtenerla disolución (10-2).
Con pipeta de 1 ml, mezcle
cuidadosamente la disolución por
agitación, luego transfiera 1 ml a otro tubo
que contenga 9 ml del diluyente para
obtener la disolución (10-3)

repita estos pasos hasta obtener el número

de disoluciones deseadas, cada disolución
disminuirá 10 veces la concentración.

Guarde una cantidad de muestra para

eventuales verificaciones en condiciones de
refrigeración, congelación o medio ambiente
de acuerdo a las características de
almacenamiento del productos
 RECUENTO EN SUPERFICIE DE HONGOS Y LEVADURAS

INICIO

Hacer disoluciones en base de 10 de la

muestra de acuerdo al numeral 4,1

Adicione de 10 a 20 ml de agar papa

dextrosa agar, el cual debe estar 45 ° C
a las cajas de Petri estériles.

Marque las cajas de petri ya gelificadas

con las disoluciones a sembrar.

Tome las disoluciones (10-1, 10-2, 10-3 y

10-4)un volumen de 0,1 ml con pipeta de
1 ml estéril y sembrar en la superficie.

Distribuir el inóculo sobre la caja con el

bastón de vidrio, espátula de drigralsky

Deje secar en incubadora a 25°c +/- 2°c

durante por 5 días.
 RECUENTO EN PROFUNDIDA DE BACTERIAS TOTALES

INICIO

Mantenga el agar en el baño

termostático a una temperatura de 60
°C hasta su posterior uso para evitar
que se gelifique en el frasco.

Haga disoluciones en base de 10 de la

muestra de acuerdo al numeral 4.1

Sembrar en profundidad 1 ml de cada

una de las disoluciones seleccionadas
y siempre trabaje tres disoluciones
sucesivas.

Adicionar de 15 a 20 ml de agar plate

count, este agar debe estar a
temperatura de 45 °C, durante el
tiempo transcurrido entre la adición de
la muestra a las cajas de petri y la
adición de agar, no deje sobrepasar
los 20 minutos, se aconseja 10
minutos.

Mezclar de inmediato en las cajas de

petri el medio acordado a los siguientes
movimientos, estos movimientos se
deben realizar 5 veces.

Dejar solidificar e incluye a 33+/- 2°C

durante 48 aires.
RECUENTO EN PROFUNDIDA DE COLIFORMES TOTALES Y ESCHERICHIA COLIC

INICIO

Mantengas el agar en el baño termos

tastado a una temperatura de 60° C
hasta su posterior uso y evitar que se
gelifique en los frascos

Hacer disoluciones en base de 10 °C

de la muestra, de acuerdo al numeral
4.1.

Siembre en profundiad1 ml de cada

una de las diluciones, siempre trabaje
con tres diluciones sucesivas.

Adicione de 15 a 20 ml de agar
chromocoul, el cual debe estar a 45°C,
el tiempo transcurrido entre la adición
de la muestra a las cajas de petri.

La adición de agar no debe sobrepasar

los 20 minutos, se recomienda 10
minutos.

Mezclar de inmediato los medios que

están en las cajas de Petri de acuerdo
a los siguientes movimientos, estos
movimientos debe pegar.

Deje solidificar la muestra en incubadora a

35°C / 2°C durante las 48 horas.