DE Agropecuarias: Universidad Nacional de Trujillo

Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
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UNT
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FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
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ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
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Cuantificación de ácido clorogénico, ácido cafeico y vainillina en papa
AG
nativa orgánica para exportación variedad Sumacc Soncco
Quantification of chlorogenic acid, caffeic acid and vanillin in exportable

DE
organic native “Sumacc Soncco” potato variety

CA
TESIS
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PARA OPTAR EL TITULO PROFESIONAL DE:
INGENIERO AGROINDUSTRIAL
IO
AUTORES: Cortijo Mendoza, Paul Ericson

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Narro Lucano, Yrvin Martin

BI
ASESOR: Dr. Vásquez Villalobos, Víctor Javier
TRUJILLO – PERÚ
2019
Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú.
Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-ca/2.5/pe/
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DEDICATORIA
A Dios, que en Cristo Jesús, por Su Soberana Gracia y Providencia, me ha permitido
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llegar a esta etapa, guiándome permanentemente en todo lo concerniente a mi vida
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universitaria así como en el desarrollo y conclusión de mis estudios y proyectos de vida.
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A mis padres, Beto y María, por su constante guía y sabios consejos que me han permitido
llegar a la conclusión de mis estudios exitosamente, además de su cuidado y amor que
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me han permitido tener las herramientas necesarias para afrontar la vida, impulsándome
en todo momento a dar lo mejor de mí cualesquiera sean las circunstancias.
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A mi hermano mayor, Marcos, por ser ejemplo de profesionalismo, además de su
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constante ánimo y soporte en mi formación y desarrollo como profesional.
A mis amistades y líderes espirituales de la iglesia cristiana donde congrego, por sus
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consejos y edificante compañerismo en esta travesía de la vida.
Paul Ericson Cortijo Mendoza

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A mis padres, Silvia Lucano y Andrés Narro, con mucho amor para ustedes, quienes
mediante sus consejos y esfuerzos me guiaron y apoyaron durante todo mi vida
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universitaria, siempre inculcándome valores de respeto, honestidad, humildad y

perseverancia, permitiendo lograr mis objetivos trazados.
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A mi hermana, Vanessa, uno de los pilares y soporte en todas las etapas de mi vida.
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Yrvin Martín Narro Lucano
iii
AGRADECIMIENTOS
En primer lugar, a Dios, por habernos otorgado las habilidades necesarias para culminar
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el presente trabajo que es de importancia en nuestra formación profesional.
IA
A nuestras familias, por su apoyo durante los años de estudio, por su paciencia, cuidado
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y constante preocupación.
CU
A Al Dr. Víctor Javier Vásquez Villalobos, por su constante asesoramiento y apoyo en
las actividades de desarrollo del presente trabajo de investigación.
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A los docentes de la escuela de Ingeniería Agroindustrial, quienes con sus enseñanzas
impartidas desde las aulas aportaron significativamente en nuestro desarrollo profesional.
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Un agradecimiento especial al Ing. Anthony Sifuentes y a todos los que laboran en el
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laboratorio de Tecnologías Limpias y/o emergentes de la Escuela de Ingeniería Ambiental

por habernos facilitado el uso del equipo UHPLC.
DE
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Los autores
TE
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iv
INDICE
RESUMEN ..................................................................................................................... vi
ABSTRACT .................................................................................................................. vii
I. INTRODUCCIÓN ..................................................................................................... 1
S
II. MATERIALES Y MÉTODOS .................................................................................. 3
IA
2.1. Materiales y equipo ........................................................................................................ 3
AR
2.1.1. Materia prima ...................................................................................................... 3
2.1.2. Reactivos químicos y solventes............................................................................ 3
CU
2.1.3. Material de vidrio................................................................................................. 3
2.1.4. Materiales de plástico y otros .............................................................................. 3
PE
2.1.5. Equipos.................................................................................................................. 4
2.2. Método ............................................................................................................................. 4
RO
2.2.1. Tratamiento de la muestra para el análisis de compuestos fenólicos .............. 4
2.2.2. Extracción de ACG, AC y VAN .......................................................................... 4
AG
2.2.3. Curva de calibración de los estándares ACG, AC y VAN ................................ 5

2.2.4. Identificación y cuantificación de ACG, AC y VAN ......................................... 5
2.2.5. Análisis estadístico ............................................................................................... 6
DE
III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................................. 7
3.1. Curva de calibración de los estándares en el UHPLC ................................................ 7

CA
3.2. Identificación y cuantificación de ACG, AC y VAN ................................................... 7
IV. CONCLUSIONES ................................................................................................. 16

TE
V. RECOMENDACIONES ......................................................................................... 17
IO
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ................................................................ 18

BL
ANEXOS ...........................................................................................................................
BI
RESUMEN
El objetivo de la investigación fue cuantificar tres compuestos fenólicos: ácido

clorogénico (ACG), cafeico (AC) y vainillina (VAN) en papa nativa variedad Sumacc
Soncco (SS). Con el fin de extraer los metabolitos, se utilizó una solución de extracción
S
metanol/agua (v/v: 4/1) para cada muestra (cáscara y pulpa de papa), las cuales, luego de
IA
ser centrifugadas (18000 g), se filtraron (0.45 µm); obteniendo un sobrenadante que fue
AR
analizado en un equipo UHPLC – DAD, usando una columna C18 a velocidad de flujo
de 1.0 mL/min. Los solventes usados como fase móvil fueron: (A) acetonitrilo y (B) ácido
CU
fórmico 0.5% en agua, los cuales fueron usados en gradiente lineal: A= 5% (0-5 min),
18% (5.1 – 30 min), 53% - 90% (30.1 – 40 min), 5% (40.1 – 50 min) y B= 95% (0-5 min),
PE
82% (5.1 – 30 min), 47% - 10% (30.1 – 40 min), 95% (40.1 – 50 min). Los picos se
monitorearon a longitudes de onda de 280 y 320 nm, durante 50 min. La cantidad
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resultante de compuestos fenólicos que se halló fue (en mg/ 100 g MS): ACG: 2353.684
± 80.781 (cáscara) y 63.399 ± 2.191 (pulpa); AC: 236.600 ± 6.202 (cáscara) y 0.551 ±
AG
0.057 (pulpa); VAN: 53.394 ± 1.940 (cáscara) y 0.768 ± 0.059 (pulpa). Los resultados
mostraron que la cantidad total de compuestos fenólicos identificados en la cáscara, fue
en promedio 40.8 veces más que en la pulpa. Al comparar los resultados con los reportes
DE
de otros investigadores respecto a otras variedades, se encontró que la variedad SS es

aquella con la mayor cantidad de componentes fenólicos.
CA
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IO
BL
Palabras clave: anticancerígeno, compuestos fenólicos, Solanum tuberosum, sumacc

soncco, ácido clorogénico, ácido cafeico, vainillina.
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vi
ABSTRACT
The objective of this research was to quantify three phenolic compounds: chlorogenic
(CGA), caffeic (CA) acid and Vanillin (VAN) in native potato variety Sumacc Soncco
(SS). In order to extract the metabolites, a methanol / water extraction solution (v/v: 4/1)
S
was used for each sample (skin and flesh), which after being centrifuged (18000 g), were
IA
filtered (0.45 µm); obtaining a supernatant that was analyzed in an UHPLC-DAD using
AR
a C18 column at a flow rate of 1.0 mL/min. The solvents used as the mobile phase were:
(A) acetonitrile and (B) 0.5% formic acid in water, which were used in linear gradient: A
CU
= 5% (0-5 min), 18% (5.1-30 min); 53% - 90% (30.1 - 40 min), 5% (40.1 - 50 min) and
B= 95% (0-5 min), 82% (5.1 – 30 min), 47% - 10% (30.1 – 40 min), 95% (40.1 – 50 min).
PE
Peaks were monitored at wavelengths of 280 and 320 nm, during 50 min. The resulting
amount of phenolic compounds found was (mg / 100 g DM): ACG: 2353.684 ± 80.781
RO
(skin) and 63.399 ± 2.191 (flesh); AC: 236.600 ± 6,202 (skin) and 0.551 ± 0.057 (flesh);
VAN: 53,394 ± 1,940 (skin) and 0.768 ± 0.059 (flesh). The results showed that the total
AG
amount of phenolic compounds identified in the flesh were on average 40.8 times than in
the skin. When comparing the results with the reports of other researchers regarding other
varieties, it was found the SS variety contains a greater amount of phenolic compounds.
DE
CA
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Keywords: anticancerogenic, phenolic compounds, Solanum tuberosum, sumacc

BL
soncco, chlorogenic acid, caffeic acid, vanillin

BI
vii
I. INTRODUCCIÓN
La papa fue introducida por primera vez fuera de la región de los andes hace cuatro siglos
y actualmente se ha vuelto una parte integral de la cocina en el mundo. Es el cuarto cultivo
alimentario más grande del mundo, después del arroz, trigo y el maíz (Mahgoub et al.,
2015). De las alrededor de cinco mil variedades de papa que existen en el mundo, en el
Perú se cultivan aproximadamente más de tres mil, las cuales poseen diferentes colores,
S
formas y tamaños (IDEXCAM, 2018). En reportes oficiales de organismos
IA
internacionales, Perú figura como el primer productor en Latinoamérica y el Caribe, con
AR
4 707 987 t en el año 2014, y el quinto producto más cultivado en este país (FAO, 2017),
siendo considerado la nación de origen y domesticación de este tubérculo (Spooner et al.,
CU
2005)
Sin embargo, uno de los temas que a nivel mundial ha despertado gran interés, es que en
PE
las últimas décadas algunas variedades de papa están desapareciendo poco a poco por
causa de la actividad humana (Calliope et al., 2018); en ese sentido se hace necesario
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promover la conservación y caracterización de las variedades locales, recuperando la
biodiversidad nacional (De Haan & Otiniano Villanueva, 2015). En el Perú, destaca la
AG
actividad agrícola e industrial que desarrolla la cooperativa AGROPIA en la sierra sur del
Perú (región de Huancavelica, provincia de Tayacaja), la misma que ha logrado convertir
DE
el cultivo de papa convencional, en un sistema de producción orgánico, con

aproximadamente 300 variedades de papas nativas. Entre sus productos, no solo
comercializa semillas, sino tubérculos, así hojuelas (chips), con fines de exportación al
CA
mercado europeo, dentro de un marco de estándares internacionales de responsabilidad

social y comercio justo (“Fair trade”) (Universidad San Ignacio de Loyola, 2018; Vargas
TE
et al., 2016). De esta manera, los agricultores obtienen mejoras económicas (Andrade-
Piedra, 2015).
IO
Este tubérculo no solamente es una buena fuente de carbohidratos, sino también de

BL
compuestos bioactivos, tales como, ácidos fenólicos, antocianinas y carotenoides, que

BI
han sido hallados tanto en pulpa como en cáscara (Akyol et al., 2016). Estos compuestos
poseen una alta capacidad antioxidante, sustituyendo en algunos casos a algunos
preservantes alimentarios sintéticos (Dastmalchi et al., 2016). Algunos autores reportaron
que estos compuestos intervienen en la ruptura de radicales libres (Emanuele & Falcioni,
2016; Shin et al., 2017), razón por la cual se les atribuyen propiedades antibacteriales,
antialérgicas y anticancerígenas (De la Rosa-Hernández et al., 2016; Tian et al., 2016).
Los compuestos antioxidantes sintetizados presentes en la papa, mayormente son

analizados siguiendo el método de Folin-Ciocalteu, la cual determina su actividad
antioxidante (Rahman et al., 2017; Santos et al., 2017). No obstante, esta técnica no es la
más adecuada si se desea identificar y cuantificar este tipo de metabolitos, ya que existe
un alto riesgo de incluir también en la cuantificación erróneamente a otro tipo de
compuestos como por ejemplo: azúcares reductores, ácido ascórbico, aminoácidos,
S
glucosa y fructosa (Muñoz-Bernal et al., 2017); en consecuencia, en los últimos años se
IA
ha incrementado el uso de técnicas analíticas avanzadas, que se caracterizan por su alta
AR
sensibilidad, robustez y optimización en el rendimiento, para el análisis de una gran
cantidad de muestras; siendo una de las principales la Cromatografía Líquida de Alta /
CU
Ultra alta resolución (HPLC / UHPLC) (Saavedra-Charca et al., 2015), que generalmente
se acopla a un Espectrómetro de Masas (MS) (Kromidas, 2016). La identificación y
PE
cuantificación de los compuestos fenólicos en HPLC/UHPLC, generalmente se realizan
en fase reversa, con una columna C18 en gradiente de elusión, donde se varían las
RO
concentraciones de los solventes, originando que los compuestos hidrofílicos eluyan
primero con tiempos de retención cortos (Nollet y Toldrá, 2013).
AG
En el caso de la papa, se ha encontrado que los estudios en la cuantificación de

compuestos fenólicos en variedades de papa nativa peruana son escasos, salvo algunos
DE
pocos estudios; como es el caso de Rojas-Padilla y Vásquez-Villalobos (2016), quienes

identificaron y cuantificaron 13 metabolitos secundarios en pulpa y cáscara, de una papa
nativa variedad Huagalina de la sierra norte del Perú, cultivadas en diferentes pisos
CA
altitudinales. Los principales compuestos fenólicos encontrados en la papa fueron, el

ACG y sus isómeros (como el ácido cafeico), la vainillina, entre otros (Akyol et al., 2016;
TE
Friedman et al., 2017).

IO
En este sentido, el presente trabajo de investigación tuvo como objetivo la identificación

y cuantificación tres compuestos fenólicos: ACG, AC y VAN, en la variedad de papa
BL
nativa orgánica Sumacc Soncco, la cual es destinada mayormente para la exportación.

BI
II. MATERIALES Y MÉTODOS
2.1. Materiales y equipo
2.1.1. Materia prima

Papa (Solanum tuberosum L.) variedad Sumacc Soncco (que traducido del quechua
significa: “corazón hermoso”) con corazón morado y cáscara color rojo, cultivada
S
mediante un sistema orgánico con certificación Europea EU 834/2007 – EU 889/2008
IA
destinada a la exportación, con certificación de comercio justo y responsabilidad social
AR
por ECOCER, NATURLAND y SSP (Sellos de pequeños productores). El material fue
procedente del distrito de Pazos (3840 m.s.n.m), Provincia de Tayacaja, departamento de
CU
Huancavelica, de los productores Socios de Aymará, pertenecientes a la Cooperativa
AGROPIA. Según mencionaron, para sus cultivos se usaron técnicas agrícolas ancestrales
PE
(“majeo”: siembra de papa en corrales de ovejas, que permiten obtener un rendimiento de
10 a 20 toneladas por hectárea). Esta variedad fue escogida por su adaptabilidad al
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proceso de fritura (AGROPIA, 2019).
2.1.2. Reactivos químicos y solventes

AG
Estándares ACG (≥ 95%), AC (≥ 98%) y VAN (≥ 99%) adquiridos en Sigma-aldrich.

DE
Acetonitrilo y metanol (grado HPLC, J. T. Baker), ácido fórmico (glacial, J. T. Baker)

adquiridos en Mercantil Lab (Lima, Perú), agua ultrapura obtenida de un sistema de
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purificación GenPure (ThermoFisher Scientific).
2.1.3. Material de vidrio

TE
Vasos de precipitación de 10, 20, 50, 100 y 250 mL, probetas graduadas de 50, 100 y 250
IO
mL, frascos de vidrio con tapa hermética, pipetas de 1.5 y 10 mL, fiolas Boecco de 5, 10
y 25 mL, tubos de ensayo, frascos ámbar, embudos, mortero y viales de 1.5 mL de
BL
capacidad.
BI
2.1.4. Materiales de plástico y otros
Bisturí desinfectado, cuchillo de acero inoxidable desinfectado, tubos eppendorf de 2 mL,

filtro jeringas de nylon de 0.45 µm, filtro membrana, gradilla de plástico, marcador,
micropipetas, papel aluminio, papel toalla, pinzas y tabla para cortar.
2.1.5. Equipos
Cromatógrafo líquido de ultra alta resolución (UHPLC) modelo “Thermo Scientific
Ultimate 3000” acoplado a un detector de arreglo de diodos modelo “DAD-3000 (RS)
DIONEX UltiMate”. El UHPLC consistió de: bomba modelo “DIONEX UltiMate PG-
3400RS” (presión de operación de 103 MPa), automuestreador modelo “WPS-3000RS
DIONEX UltiMate 3000”, compartimento (horno) de columna modelo “TCC-3000RS
S
DIONEX UltiMate” y columna cromatográfica Venusil XBP (5 µm, 4.6 mm d.i. × 250
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mm).
AR
Ultracongeladora marca “ARCTIKO”, liofilizador modelo “LABCONCO Free Zone 3.5
Plus”, centrífuga refrigerada modelo “Hettich® MIKRO 220R”, equipo ultrasonido
CU
modelo “JP SELECTA - ULTRASONS-HD”.
PE
2.2. Método
RO
2.2.1. Tratamiento de la muestra para el análisis de compuestos fenólicos
La papa se lavó con agua potable (1.2 – 1.5 kg), luego se cortaron en rodajas de
AG
aproximadamente 5 mm con un cuchillo de acero inoxidable en condiciones de asepsia.

Inmediatamente, se almacenaron a una temperatura de -80 °C, hasta su posterior análisis.
DE
Luego, se procedió a la deshidratación de las muestras (aproximadamente 0.450 kg),

utilizando un liofilizador por aprox. 62 horas, a una presión de vacío de 0.05 – 0.120 mbar
CA
y una temperatura de condensación de -90°C. Posteriormente, con ayuda de un bisturí

previamente esterilizado, se separó cuidadosamente la cáscara de la pulpa, para luego
TE
moler la pulpa y la cáscara por separado, utilizando un mortero de porcelana.

Obteniéndose un polvo fino, tanto de la cáscara como de la pulpa; los que fueron
IO
guardados en frascos de vidrio ámbar, y almacenados en refrigeración a 5 °C.

BL
2.2.2. Extracción de ACG, AC y VAN

Para la extracción, se preparó la solución de extracción (S.E.): 80% de metanol en agua
BI
UP (20%). Las muestras pulverizadas de cáscara y pulpa por separado: 0.3 g y 2.0 g, se
colocaron en fiolas y se aforaron a 5 y 10 mL, respectivamente. A continuación, se
introdujeron dichos frascos volumétricos en baño ultrasonido por 60 minutos a 30 °C.
Posterior a ello, se trasvasaron en tubos eppendorf de 2 mL, centrifugándose a 18000 G
durante 10 min a 1 °C. Los sobrenadantes se recogieron en tubos cónicos de 15 mL de
capacidad, e inmediatamente se forraron con papel aluminio y llevaron a refrigeración

hasta su posterior análisis en UHPLC (Friedman et al., 2017).
2.2.3. Curva de calibración de los estándares ACG, AC y VAN

La curva de calibración de cada estándar se realizó, utilizando la misma solución de
S
extracción, que se usó para las muestras (80% metanol grado HPLC en agua UP). Ocho
IA
concentraciones fueron considerados para el ACG y la VAN (4, 8, 16, 32, 64, 128, 256 y
AR
512 ppm), y siete, para el AC (4, 8, 16, 32, 64, 128 y 256 ppm). Cada concentración se
inyectó en el equipo UHPLC por triplicado.
CU
PE
2.2.4. Identificación y cuantificación de ACG, AC y VAN
El sobrenadante obtenido (20 µL) de la extracción se filtró (0.45 µm) y se inyectó en una
RO
columna C18 en fase reversa. La fase móvil, consistió en un gradiente lineal: (A)
acetonitrilo y (B) solución acuosa de ácido fórmico 0.5%: A = 5% (0-5 min), 18% (5.1 –
AG
30 min); 53% - 90% (30.1 – 40 min), 5% (40.1 – 50 min); mientras que para B = 95% (0
– 5 min), 82% (5.1 – 30 min), 47% - 10% (30.1 – 40 min), 95% (40.1 – 50 min). La
velocidad de flujo fue de 1.0 mL/min a una temperatura de 35 °C; los picos fueron
DE
monitoreados a 280 y 320 nm en la región espectral del UV/Vis (Friedman et al., 2017).
Para la identificación de los compuestos fenólicos, se compararon los tiempos de

CA
retención cromatográficos de la muestra con los del estándar de los ácidos fenólicos.
Mientras que para la cuantificación, se utilizó el software Chromeleon™ (el cual es propio
TE
del sistema UHPLC utilizado), donde las áreas integradas de los picos de los extractos de
la muestra, fueron comparadas con las áreas de los picos de cantidades conocidas del
IO
estándar de ácidos fenólicos. Cabe señalar, que para la cuantificación del ACG en la
BL
cáscara, se requirió diluir en su 1/6 parte la solución de extracción de la muestra. Para la

cuantificación del ácido cafeico y vainillina, se le adicionó solución estándar (100 ppm)
BI
a las muestras (spiked samples – “muestras enriquecidas”) (Meyer, 2013).
2.2.5. Análisis estadístico
Mediante el software estadístico IBM SPSS Statistics (Versión de Prueba; ID de

suscripción: 504330213), donde se llevaron a cabo dos análisis:
A. Prueba t student
S
Se utilizó con el fin de determinar las diferencias significativas (p < 0.05) entre las
IA
cantidades de compuestos fenólicos tanto en pulpa como en cáscara, con un nivel de
AR
confianza del 95%.
B. Test de Tamhane
CU
Al determinar significancia estadística, mediante esta prueba se evaluó entre qué
PE
tratamientos existen diferencias significativas (p < 0.05).
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

3.1. Curva de calibración de los estándares en el UHPLC
En la Tabla 1 se muestran las ecuaciones de regresión para los estándares en cada nivel.
Se realizaron 3 repeticiones y se verificó el ajuste de una ecuación lineal. Para el ACG y
la VAN, la concentración máxima fue de 512 ppm, mientras que para el ácido cafeico
S
256 ppm.
IA
Tabla 1. Ajuste de curvas de calibración de los estándares
AR
Coeficiente de Rango
Estándares Ecuación lineal
determinación (R2) (ppm)
CU
ACG(a) y = 0.3297 x + 0.0894 0.9996 2 – 512
PE
AC(a) y = 1.4595 x – 0.8789 0.9993 2 – 256
RO
VAN(b) y = 0.9464 x + 0.761 0.9997 2 – 512
a
Longitud de onda a 320 nm
b
Longitud de Onda a 280 nm
AG
*Los valores de “y” están expresados en mAU.min y “x” en ppm
Las ecuaciones de regresión lineal (Tabla 1) resultaron con un coeficiente de

determinación R2 cercano a la unidad, en este sentido, se pueden considerar válidas para
DE
los cálculos.
CA
3.2. Identificación y cuantificación de ACG, AC y VAN
Se observó que las desviaciones estándar de los tiempos de retención (tr) fue baja, entre
TE
0.02% y 0.17%, lo que indica la confiabilidad de la identificación de los ácidos

clorogénico, cafeico y vainillina (Tabla 2). La cantidad de ácidos clorogénico, cafeico y
IO
vainillina en la papa nativa orgánica para la cáscara fue de 2353.684, 236.6 y 53.394
BL
mg/100 g MS, respectivamente. Mientras que para la pulpa, fue de 63.399, 0.551 y 0.768
mg/100 g MS. El compuesto de mayor y menor cantidad en este estudio fue el ácido
BI
clorogénico y la vainillina, respectivamente; siendo en la cáscara la que presenta mayor

contenido de estos 3 compuestos (Figura 1), sin embargo, en la pulpa; se observa que el
compuesto de menor cantidad es el ácido cafeico.
Tabla 2. Concentración de compuestos fenólicos en cáscara y pulpa de papa variedad

Sumacc Soncco
Desviación
Cantidad (mg/
Muestra Compuesto tr estándar/promedio
100g MS)
de los tr
S
ACG(a) 2353.684 ± 80.781 10.482 ± 0.018 0.17%
IA
Cáscara AC 236.6 ± 6.202 12.422 ± 0.014 0.11%
AR
VAN 53.394 ± 1.94 17.829 ± 0.121 0.08%
ACG 63.399 ± 2.191 10.468 ± 0.002 0.02%
CU
Pulpa AC(b) 0.551 ± 0.057 12.469 ± 0.005 0.04%
PE
VAN(b) 0.768 ± 0.059 RO 17.972 ± 0.011 0.06%
(a) La muestra fue diluida a la sexta parte.

(b) Las muestras fueron compensadas y recalculadas con adición de estándar (Meyer, 2013).
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
Figura 1. Concentración de ácidos clorogénico, cafeico y vainillina (mg/100g MS).
Las medias de las cantidades de ACG, VAN y AC tanto en cáscara como en pulpa son
significativas (p<0.05), siendo el ácido clorogénico aquel metabolito de mayor
concentración en contraste con los demás (Tabla 3). Estos resultados en la variación de
compuestos fenólicos en cáscara de papa sugieren que los productores, consumidores e

investigadores pueden seleccionar la cáscara de papa para futuras investigaciones ya que
aportarían con un gran contenido de compuestos fenólicos individuales y serían
responsables de darle a estos tubérculos, sus excelentes propiedades antioxidantes y otros
beneficios adicionales.
S
Tabla 3. Comparación de medias de la cantidad de compuestos fenólicos en la papa
IA
variedad Sumacc Soncco mediante Prueba de Tamhane
AR
Dif. de medias Sig.
Cáscara ACL
AC 2117.0842* 0.0014
VAN 2300.3999* 0.0012
CU
AC ACL -2117.0842* 0.0014
VAN 183.3157* 0.0004
VAN ACL -2300.3999* 0.0012
PE
AC -183.3157* 0.0004
Pulpa ACL AC 62.8481* 0.0012
VAN 62.6304* 0.0012
RO
AC ACL -62.8481* 0.0012
VAN -0.2177* 0.0301
AG
VAN ACL -62.6304* 0.0012

AC 0.2177* 0.0301
*Significancia entre medias: p<0.05
DE
Según Shahidi & Ambigaipalan (2015), los compuestos fenólicos son sintetizados de
forma natural en las plantas, de acuerdo a ciertas rutas metabólicas. El AC (ácido 3,4-
dihydroxicinámico) es un compuesto aromático que se obtiene como un producto
CA
intermedio de la ruta del fenilpropanoide. En plantas, la síntesis de AC inicia con una

reacción de desaminación del aminoácido L-fenilalanina catalizado por la enzima
TE
fenilalanina amoniaco liasa para producir ácido cinámico. El compuesto es hidroxilado

IO
en la cuarta posición del anillo bencilo para generar ácido p-cumárico en una reacción
catalizada por la cinamato 4-hidroxilasa, y, finalmente, es nuevamente hidroxilado en la
BL
tercera posición por la enzima p-cumarato 3-hidroxilasa para obtener AC. De manera
similar, para la producción del ACG en tubérculos, su biosintentización se produce a
BI
partir de la ruta del fenilpropanoide, especialmente a partir de la fenilalanina. Partiendo

de aquella proteína, se siguen los mismos mecanimos de reacción del AC hasta llegar a
formar ácido p-cumárico, que luego es catalizado por la enzima 4CL (4-cumarato-CoA)
obteniendo como producto p-cumaroil-CoA (Valiñas et al., 2017). A partir de este último
producto, según este autor, la ruta del ácido clorogénico puede seguir dos posibles vías:
(I) donde intervienen las enzimas HQT (hidroxicinamoil-CoA quinato hidroxicinamoil

transferasa), HCT (hidroxicinamoil-CoA shikimato/quinato hidroxicinamoiltransferasa)
para formar ácido p-cumaroil quínico, que luego de ser catalizado por la enzima C3H (p-
cumarato-3-hidroxilasa), da lugar al ACG; la ruta (II), donde primero interviene la enzima
HCT y se obtiene ácido p-cumaroil shiquímico, luego, por la acción de la enzima C3H
resulta el ácido cafeoil shiquímico, para después ser catalizado nuevamente por la enzima
S
HCT, siendo el producto cafeoil-CoA, finalmente, mediante la enzima HQT se obtiene
IA
ACG.
AR
Respecto a la VAN, Khoyratty et al. (2018) indicaron que la biosíntesis de este
componente, especialmente los precursores que están involucrados aún es materia de
CU
debate por la comunidad científica, si bien es cierto que diversos estudios han adoptado
diferentes modelos y esquemas. Esto se debería a las diversas enzimas que actúan en las
PE
rutas metabólicas. No obstante, este mismo autor ha propuesto que el compuesto podría
ser un derivado del ácido benzoico, que a su vez provendría del ácido cinámico; este
RO
último, como ya se explicó anteriormente, proviene de la ruta de los fenilpropanoides.
Otra posible explicación para la biosíntesis de la vainillina es que esta se originaría a
AG
partir del compuestos fenólico llamado ácido ferúlico, que por acción de las pseudomonas
(bacterias presentes en los suelos) se transformaría en vainillina (Khoyratty et al., 2018;
DE
Gallage & Møller, 2015). Debido a que en la variedad de papa SS se halló 53.394 ± 1.94
mg/100 g MS en la cáscara y 0.768 ± 0.059 mg/100 g MS en la pulpa, es muy probable
la presencia de ácido ferúlico en la muestra. Por ello, se recomienda que para futuros
CA
estudios, este sea incluido en la identificación y cuantificación de compuestos fenólicos

en papa.
TE
De acuerdo a los resultados de la Tabla 2, el 98% de los compuestos fenólicos se

IO
encuentran en la cáscara, coincidiendo con varios estudios (Dastmalchi et al., 2016;

BL
Friedman et al., 2017; Rojas-Padilla y Vásquez-Villalobos, 2016; Silva-Beltrán et al.,

2017); sin embargo, las concentraciones tanto en cáscara como en pulpa difieren con otras
BI
variedades, esto debido a que la concentración de compuestos fenólicos son afectados por
diferentes factores tales como: las altas o bajas temperaturas, infección por patógenos,
pisos altitudinales, formas de cultivo, diferentes procesamientos, deficiencia de nutrientes
y estrés hídrico (Arun et al., 2015; Delgado et al., 2001; Rytel et al., 2014); lo que podría
implicar una influencia en la expresión de genes relacionados a la biosíntesis de
compuestos fenólicos (Fanciullino et al., 2014).
10
Valiñas et al. (2017) establecieron que existe una alta variación tanto cualitativa como
cuantitativa en los compuestos fenólicos, entre las variedades de papa andinas de
diferentes regiones en Argentina, a la vez, se halló que las condiciones agroclimáticas
tienen una influencia directa en los compuestos. Estos mismos autores reportaron que en
papas, la biosíntesis de estos metabolitos es principalmente controlada a nivel de la
transcripción del ADN, por lo que cabe la posibilidad de reorientar las rutas de biosíntesis
S
de compuestos deseados.
IA
Cuéllar-Cepeda et al. (2019) sostienen que la influencia de las condiciones agroclimáticas
AR
(longitud, latitud, altura y precipitación) y la variedad (genotipos), influyen en las
concentraciones de ACG y AC. Papa cruda con mayor cantidad de compuestos fenólicos
CU
fue cultivada entre los meses de Diciembre a Mayo a 3152 m.s.n.m., con una precipitación
media de 138.4 mm. Esto indica que la concentración de los compuestos fenólicos de la
PE
variedad SS, que fue cultivada a aproximadamente 4000 m.s.n.m., fueron influenciados
por las condiciones agroclimáticas; este aspecto debería ser estudiado adecuadamente con
RO
el fin de hallar los parámetros agroclimáticos que permitan aumentar la concentración.
Orsák et al. (2019) estudiaron la influencia de la variedad, lugar de cultivo y
AG
almacenamiento a largo plazo en el contenido de ácido clorogénico en papa con cáscara

color púrpura o roja en la República Checa. Los autores lograron demostrar que el
DE
genotipo tiene un efecto significativo en la concentración de ACG, especialmente en

aquella con cáscara de color morada con 1.19 – 2.6 veces más que las demás variedades
(cáscara amarilla). Respecto a las condiciones climáticas, se halló que las variedades que
CA
se cultivaron en lugares con periodos más secos y cálidos obtuvieron 1.18 veces más
concentración de ACG en relación con aquellas cultivadas en climas más lluviosos y fríos.
TE
A su vez, se identificó que el almacenamiento postcosecha en condiciones de frío (4°C

por 06 meses con una humedad relativa de 90% – 94%) tiene como consecuencia el
IO
incremento de ACG entre 33.2% - 210.6%.

BL
Torres-Contreras et al. (2014) realizaron un estudio de cuantificación de ACG y sus

isómeros en papa, luego de ser sometida a tratamientos post cosecha, tales como el
BI
almacenamiento hasta 140 h a 10 °C y diferentes tipos de cortes (enteras, en rodajas,

rodajas seccionadas en cuatro partes y tiras delgadas), determinando que la papa en
rodajas seccionada en cuatro partes es la que presentó mayor cantidad de compuestos
fenólicos, seguidas de las cortadas en rodajas.
11
Gugała et al. (2017) sostiene que los mejoradores de suelo (UGmáx, compuesto de
levadura, bacterias fotosintéticas y ácido lácticas) también afectan el contenido de
compuestos fenólicos. Al respecto, realizaron un estudio en dos variedades de papa y
cinco niveles de aplicación del mejorador, encontrando que la mayor cantidad de
compuestos fenólicos se presentó cuando se aplicó el mejorador de suelo en una
proporción de1 L/ha antes de la siembra, 0.5 L/ha cuando tenían una altura de 10-15 cm
S
y 0.5 L/ha en la etapa de botones florales. Aunque en el cultivo de papa variedad SS no
IA
se utilizó mejoradores de suelo, para la adecuación y preparación del suelo, se utilizó
AR
guano de animales de rebaño, lo que explicaría la alta concentración de compuestos
fenólicos. Así mismo, Keutgen et al. (2019) evaluaron el efecto de la producción orgánica
CU
e integrada en las propiedades antioxidantes de papas, donde se aplicaron técnicas de
mejoramiento genético. Se halló que la producción orgánica (abono de compostaje)
PE
influyó significativamente en la capacidad antioxidante, siendo mayor que aquellas
variedades labradas bajo el sistema de producción agrícola integrado (Fertilizantes N-P-
RO
K). A su vez, los autores encontraron una correlación directa entre la capacidad
antioxidante y el contenido de ACG. La variedad SS que se estudió en la presente
AG
investigación también fue cultivada bajo un sistema agrícola orgánico, lo cual explicaría
el alto contenido de ACG hallado.
DE
Estudios realizados por Arun et al. (2015) y Brazinskiene et al. (2017) revelan, también,
que el estado de madurez de la papa influye en el contenido de compuestos fenólicos; así,
una papa más joven posee mayor fuente de compuestos biactivos. Otro factor que influye
CA
es la patología en la planta, Chamoun et al. (2015) encontró que la cantidad de ácido

clorogénico disminuye en papas infectadas con Rhizoctonia Solani (causantes del
TE
marchitamiento fúngico), mientras el contenido de tocotrienol y el ácido ferúlico

aumentan. El estrés hídrico también aumentaría la cantidad de compuestos fenólicos; en
IO
un estudio realizado por Drapal et al. (2017) en cinco genotipos de papa, se encontró que
BL
el contenido de los precursores e intermediarios de la ruta del fenilpropanoide (por

ejemplo, fenilalanina, ACG y otros ácidos fenilpropanoicos) aumentaron pero con
BI
diferente intensidad en cada genotipo estudiado. Aunque no se haya controlado estos

factores en la variedad SS, es muy probable que las diferencias en cáscara como en pulpa
probablemente hayan sido influenciados por el estado de madurez de la papa así como
posibles plagas durante su cultivo.
12
Otro de los factores que puede influenciar en la identificación y cuantificación de los

metabolitos, es el tipo de solvente utilizado en la solución de extracción (Arun et al.,
2015). Este autor reportó que luego de hacer una comparación entre tres tipos de
solventes: hexano, metanol y etil acetato, halló que en la solución de etil acetato se obtuvo
la mayor concentración de compuestos fenólicos; no obstante, solo en la solución de
metanol se logró identificar el perfil completo de los compuestos fenólicos presentes en
S
la matriz alimentaria. De manera similar, Silva-Beltrán et al., (2017) utilizaron tres
IA
diferentes tipos de solventes, resultando que cuando se utiliza una solución acidificada de
AR
etanol, los niveles de ácido ferúlico fueron menores a los otros tipos de compuestos
fenólicos (ACG, AC y gálico). En este sentido, en el presente estudió se utilizó metanol,
CU
el cual presumiblemente no habría permitido obtener la mayor cantidad de compuestos
fenólicos.
PE
En la Figura 2 (b) se puede observar un pico con una altura elevada a los 15.5 min, que
es mucho mayor que la vainillina, lo que implica la existencia de un compuesto, también
RO
mayoritario e importante, presente en esta variedad. Además existen compuestos
minoritarios (en la cáscara) y mayoritarios (en la pulpa) que no se pueden cuantificar
AG
debido a que el UHPLC no presenta elevada resolución y detección frente a otros

instrumentos analíticos más avanzados, que sí los pueden cuantificar (Saavedra-Charca
DE
et al., 2015). Cabe señalar que la presencia de un pico en a los aproximadamente 15.5
minutos en la figura 2 (b) podría ser del ácido ferúlico, considerando que este compuesto
fenólico se biosintetiza a partir de la vainillina gracias a la acción de bacterias
CA
pseudomonas presentes en el suelo (Khoyratty et al., 2018; Gallage & Møller, 2015). Por
otro lado, la presencia de pequeños picos alrededor de los 27 – 30 minutos, se podría
TE
explicar por el ruido que se genera al término del ensayo, por la diferencia de gradiente
de los solventes al pasar del 18% al 53% de solvente A (acetonitrilo) y del 82% al 47%
IO
de solvente B (solución acuosa de ácido fórmico 0.5%) (Meyer, 2013).

BL
BI
13
(a
)
S
IA
AR
CU
PE
RO
(b
AG
)
DE
CA
TE
IO
BL
BI
Figura 2. Cromatogramas del UHPLC para los tres compuestos fenólicos

(Clor=ácido clorogénico, Caf= ácido cafeico y Van= vainillina. A una longitud de onda
de 320 nm. (a)Estándares; (b) Cáscara
14
En este sentido, es necesario integrar al análisis el apoyo de técnicas avanzadas como

espectrometría de masas (Malongane et al., 2018). Estos investigadores hicieron uso de
un equipo UPLC acoplado a un espectrómetro de masas cuadrupolo con tiempo-de-vuelo
(ultra performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry:
UPLC- Q-TOF/MS) con el fin de evaluar el perfil fenólico en muestras de té. Este tipo
de tecnología permite una mejor comprensión del perfil metabolómico de estos
S
componentes secundarios en las plantas, así como una sensibilidad de detección de rango
IA
de masa total y una exactitud de masa idónea.
AR
Si bien la cantidad de compuestos fenólicos en papa variedad SS es mayor respecto a
otras variedades, no implicaría necesariamente una mayor actividad anticancerígena
CU
(Madiwale et al., 2011). Los autores mencionados estudiaron el efecto del
almacenamiento de papas de color morado, rojizo y convencional sobre el contenido de
PE
ácidos fenólicos, capacidad antioxidantes y propiedades antiproliferativas de células
cancerígenas de colon humano, hallando que si bien es cierto luego de noventa días de
RO
almacenamiento, aumentó la concentración de ácidos fenólicos (siendo las de mayor
cantidad en aquellas de color morado), la actividad biológica de supresión de células
AG
cancerígenas del colón disminuyó considerablemente. Cabe señalar que estos estudios
fueron llevados a cabo utilizando células in-vitro de colón HCT-116 y HT-29; el método
DE
utilizado para medir la apoptosis fue mediante el ensayo Caspase-Glo 3/7.

CA
En futuras investigaciones, se deberían controlar variables agronómicas tales como el

modo de cultivo, estrés hídrico, relieve, etc; y, de postcosecha: manipulación,
TE
procesamiento, etc., lo cual optimizaría la concentración de compuestos fenólicos,

especialmente en la papa nativa, logrando una clasificación de acuerdo a sus
IO
características funcionales, nutricionales e industriales (Calliope et al., 2018; Navarre

BL
et al., 2010).
BI
15
IV. CONCLUSIONES
Se identificaron los tres compuestos fenólicos mayoritarios de la papa nativa orgánica

variedad Sumacc Soncco con una cantidad (en mg/ 100 g MS): ACG: 2353.684 ± 80.781
(cáscara) y 63.399 ± 2.191 (pulpa); AC: 236.600 ± 6.202 (cáscara) y 0.551 ± 0.057
(pulpa); VAN: 53.394 ± 1.940 (cáscara) y 0.768 ± 0.059 (pulpa). La cáscara presenta
S
aproximadamente en promedio 40.8 veces más de estos tres compuestos fenólicos
IA
respecto a la pulpa. La variación en las cantidades fue explicada por diversos factores que
intervienen en la biosíntesis de los mencionados compuestos fenólicos, los cuales deben
AR
ser considerados para futuras investigaciones.
CU
PE
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
16
V. RECOMENDACIONES
En futuros trabajos se recomienda integrar espectrometría de masas, utilizar resonancia

magnética nuclear, para la determinación de los compuestos fenólicos lo que debe de
llevar a la optimización mediante la variabilidad externas de clima, humedad, formas de
S
cultivos, estrés hídrico, patógenos, humedad, etc.; paralelo a secuenciamiento genético.
IA
AR
Se debe buscar la industrialización de este producto para darle un valor, mediante
procesos de tecnología ya sea como extractos, nanoencapsulados, chips de papa,
CU
liofilizados, etc.
PE
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
17
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TE
variedad de papa (Solanum tuberosum I.) nativa, ojo de muerto de Chugay (región La
Libertad) (Tesis de pregrado). Universidad Nacional de Trujillo, Trujillo, Perú.
IO
BL
BI
23
S
IA
AR
CU
PE
RO
ANEXOS
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
ANEXO 1. CURVA DE CALIBRACIÓN

Tabla 4. Datos para elaborar la curva de calibración curva de calibración de los estándares
de los compuestos fenólicos
Concentración ACG AC VAN
S
2 0.6608 2.8266 2.2268
IA
2 0.6457 2.8554 2.2334
2 0.6975 2.8617 2.2201
AR
4 1.0871 5.4621 4.4285
4 1.0551 5.4596 4.4077
CU
4 1.0696 5.462 4.4315
8 1.6379 9.224 6.7101
PE
8 1.6695 9.2041 6.691
8 1.6194 9.1985 6.6768
RO
16 5.3381 23.9489 14.6228
16 5.3426 23.8885 14.6757
16 5.3276 23.8458 14.6893
AG
32 9.9421 39.7456 29.6306

32 10.1006 39.2044 29.4886
32 10.419 39.6109 29.4911
DE
64 22.0184 95.0666 62.1128

64 21.9619 95.3591 62.18
64 22.1268 95.0576 62.129
CA
128 43.2115 191.9954 123.4394

128 43.0156 190.4674 123.3693
TE
128 43.1065 190.1099 123.4385

256 85.2664 370.1783 249.4745
IO
256 88.3428 370.8785 249.8988

256 83.5222 370.0949 249.5963
BL
512 167.2783 - 481.656

512 168.1122 - 481.6836
BI
512 168.6761 - 482.1486

La concentración de la solución se encuentra en ppm y los resultados para cada ácido son el área
del pico integrado (mAU.min)
180
160
140
120
100
80
Área (mAU.min)
60
40
S
20
0
IA
0 100 200 300 400 500
Concentración (ppm)
AR
Figura 3. Curva de calibración de ACG.
CU
400
PE
350
300
Area (mAU.min)
RO
250
200
150
AG
100
50
0
0 50 100 150 200 250 300
DE
Figura 4. Curva de calibración de AC.

CA
TE
IO
BL
Figura 5. Estructura química del AC, ACG y VAN (de izquierda a derecha).
BI
600.0000
500.0000
400.0000
Area (mAU.min)
300.0000
S
200.0000
IA
100.0000
AR
0.0000
0 100 200 300 400 500 600
CU
Figura 6 Curva de calibración de VAN.
PE
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
ANEXO 2. CROMATOGRAMAS DE LAS MUESTRAS
S
IA
AR
CU
PE
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
Figura 7. Cromatogramas de muestra de cáscara de papa variedad SS a 320 nm (3

repeticiones).
S
IA
AR
CU
PE
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
Figura 8. Cromatogramas de muestra de cáscara de papa variedad SS diluida a su sexta

parte, a 320 nm (3 repeticiones).
S
IA
AR
CU
PE
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
Figura 9. Cromatogramas de muestra de pulpa de papa variedad SS a 320 nm (3

repeticiones).
ANEXO 3. CUANTIFICACIÓN DE COMPUESTO FENÓLICOS
Tabla 5. Cantidad, tiempo de retención y concentración final de compuestos fenólicos
Cantidad
Tiempo de Concentración
Metabolito Muestra (mg/ 100g
retención (min) final
MS)
S
ACG Cáscara 1 2260.643547 10.50333333 2353.684±80.781
Cáscara 2 2394.441956 10.47333333
IA
Cáscara 3 2405.967389 10.47
Pulpa 1 64.54676163 10.46666667 10.468±0.002
AR
Pulpa 2 60.87192927 10.47
Pulpa 3 64.77793863 10.46666667
AC Cáscara 1 242.898426 12.40666667 236.6±6.202
CU
Cáscara 2 230.4990953 12.43333333
Cáscara 3 236.4027295 12.42666667
Pulpa 1 0.485672028 12.47333333 12.469±0.005
PE
Pulpa 2 0.579220941 12.47
Pulpa 3 0.587375781 12.46333333
RO
VAN Cáscara 1 54.6330692 17.69 53.284±1.942
Cáscara 2 54.16163538 17.91
Cáscara 3 51.05853051 17.88666667
AG
Pulpa 1 0.699795468 17.98 17.972±0.011

Pulpa 2 0.803767752 17.97666667
Pulpa 3 0.801901998 17.96
DE
CA
TE
IO
BL
BI
ANEXO 4. MATERIALES Y EQUIPOS
S
IA
AR
Figura 10. Papa Sumacc Soncco
Figura 11. Micropipeta
CU
PE
RO
AG
DE
Figura 12. Baño de ultrasonido Figura 13. Vortex

CA
TE
IO
BL
Figura 14. Muestras en tubo eppendorf Figura 15. Extracción de las muestras en
las fiolas
BI
S
IA
AR
Figura 16. Centrífuga refrigerada Figura 17. Sedimentos de la muestra
CU
luego de ser centrifugados
PE
RO
AG
DE
CA
Figura 18. Equipo UHPLC

TE
IO
BL
BI
S
IA
AR
CU
PE
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI
S
IA
AR
CU
PE
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI

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Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas y Comunicaciones

nativa orgánica para exportación variedad Sumacc Soncco

Quantification of chlorogenic acid, caffeic acid and vanillin in exportable

organic native “Sumacc Soncco” potato variety

PARA OPTAR EL TITULO PROFESIONAL DE:

AUTORES: Cortijo Mendoza, Paul Ericson

Narro Lucano, Yrvin Martin

ASESOR: Dr. Vásquez Villalobos, Víctor Javier

A Dios, que en Cristo Jesús, por Su Soberana Gracia y Providencia, me ha permitido

consejos y edificante compañerismo en esta travesía de la vida.

Paul Ericson Cortijo Mendoza

universitaria, siempre inculcándome valores de respeto, honestidad, humildad y

Yrvin Martín Narro Lucano

laboratorio de Tecnologías Limpias y/o emergentes de la Escuela de Ingeniería Ambiental

ABSTRACT .................................................................................................................. vii

2.2.3. Curva de calibración de los estándares ACG, AC y VAN ................................ 5

III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................................. 7

3.1. Curva de calibración de los estándares en el UHPLC ................................................ 7

3.2. Identificación y cuantificación de ACG, AC y VAN ................................................... 7

IV. CONCLUSIONES ................................................................................................. 16

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ................................................................ 18

El objetivo de la investigación fue cuantificar tres compuestos fenólicos: ácido

de otros investigadores respecto a otras variedades, se encontró que la variedad SS es

Palabras clave: anticancerígeno, compuestos fenólicos, Solanum tuberosum, sumacc

Keywords: anticancerogenic, phenolic compounds, Solanum tuberosum, sumacc

soncco, chlorogenic acid, caffeic acid, vanillin

el cultivo de papa convencional, en un sistema de producción orgánico, con

mercado europeo, dentro de un marco de estándares internacionales de responsabilidad

Este tubérculo no solamente es una buena fuente de carbohidratos, sino también de

compuestos bioactivos, tales como, ácidos fenólicos, antocianinas y carotenoides, que

Los compuestos antioxidantes sintetizados presentes en la papa, mayormente son

En el caso de la papa, se ha encontrado que los estudios en la cuantificación de

pocos estudios; como es el caso de Rojas-Padilla y Vásquez-Villalobos (2016), quienes

altitudinales. Los principales compuestos fenólicos encontrados en la papa fueron, el

Friedman et al., 2017).

En este sentido, el presente trabajo de investigación tuvo como objetivo la identificación

nativa orgánica Sumacc Soncco, la cual es destinada mayormente para la exportación.

II. MATERIALES Y MÉTODOS

2.1. Materiales y equipo

2.1.1. Materia prima

2.1.2. Reactivos químicos y solventes

Estándares ACG (≥ 95%), AC (≥ 98%) y VAN (≥ 99%) adquiridos en Sigma-aldrich.

Acetonitrilo y metanol (grado HPLC, J. T. Baker), ácido fórmico (glacial, J. T. Baker)

purificación GenPure (ThermoFisher Scientific).

2.1.3. Material de vidrio

2.1.4. Materiales de plástico y otros

Bisturí desinfectado, cuchillo de acero inoxidable desinfectado, tubos eppendorf de 2 mL,

aproximadamente 5 mm con un cuchillo de acero inoxidable en condiciones de asepsia.

Luego, se procedió a la deshidratación de las muestras (aproximadamente 0.450 kg),

y una temperatura de condensación de -90°C. Posteriormente, con ayuda de un bisturí

moler la pulpa y la cáscara por separado, utilizando un mortero de porcelana.

guardados en frascos de vidrio ámbar, y almacenados en refrigeración a 5 °C.

2.2.2. Extracción de ACG, AC y VAN

capacidad, e inmediatamente se forraron con papel aluminio y llevaron a refrigeración

2.2.3. Curva de calibración de los estándares ACG, AC y VAN

Para la identificación de los compuestos fenólicos, se compararon los tiempos de

cáscara, se requirió diluir en su 1/6 parte la solución de extracción de la muestra. Para la

a las muestras (spiked samples – “muestras enriquecidas”) (Meyer, 2013).

2.2.5. Análisis estadístico

Mediante el software estadístico IBM SPSS Statistics (Versión de Prueba; ID de

III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

*Los valores de “y” están expresados en mAU.min y “x” en ppm

Las ecuaciones de regresión lineal (Tabla 1) resultaron con un coeficiente de