Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias Químicas TUBOS

TUBOS
Carrera: Química y Farmacia
COMPONENTES (ml)
COMPONENTES (ml) Laboratorio de IBioquímica
I IIII
II III
III IV
IV V
Buffer
Buffer fosfato
fosfato 0.10.1
MM pHpH
7.47.4 2020 – 2021
1 1 CI 51 15 15 15
P- 2-6 Diclorofenolindo
fenilendiamina fenol + indicador)
1% (sustrato 15 15 51 51 51
Succinato
Fracción de sodio 0.1 M
nuclear 2- 25 -2 -2 2-
Taller
Fracción nuclear - - 5-
Fracción DOCENTE:
mitocondrial Dra. Aida Castro Posligua SEMESTRE: 5-
Quinto GRUPO:-- 1A --
Fracciónmicrosomal- MÉTODOS DEL LABORATORIO
mitocondrial - - DONDE - - SE APLIQUE LA CADENA
Fracción soluble TRANSPORTADORA DE ELECTRONES -5 5- --
Fracción microsomal- soluble - - - 5 -
Homogenizado
Objetivos total de laboratorio
de la práctica - - - - 5
Homogenizado total - - - - 5
Mezclar y dejar en reposo a temperatura ambiente. Observar los cambios constantemente
Mezclar
1. Observar yFigura
como dejar en1. Cadena trasnportadora de electrones. Fuente:
la cadenareposo a temperatura
respiratoria oxida y ambiente.
reduce losObservar los cambios
transportadores constantemente
de electrones para liberar
https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/cellular-
energía. energetics/cellular-respiration-ap/a/oxidative-phosphorylation-etc
2. Determinar la distribución intracelular de las enzimas de óxido-reducción de la cadena respiratoria
usando los indicadores 2-6 diclorofenilindofenol y la p-fenilendiamina, y los componentes celulares
de un homogenizado de hígado de rata por centrifugación diferencial mediante el método de Schreider
y col.

Introducción

A través de las distintas rutas catabólicas analizadas hasta este punto, se ha ido produciendo una liberación de
energía neta, en forma de ATP, y un segundo tipo de energía denominado poder reductor, en forma de
coenzimas reducidos. Las principales coenzimas, que han participado en reacciones de óxido-reducción tanto
en el citoplasma como en la mitocondria, son NADH y FADH2; los cuales iniciarán ahora, una ruta
metabólica, la cadena de transporte electrónico o cadena respiratoria, que permitirá, por un lado, la
recuperación de las coenzimas en su forma oxidada, y por otro, que los electrones sean conducidos a través
de una serie de etapas sucesivas hasta el O2, para formar agua. En este proceso de transferencia electrónica es
donde se producirá un fuerte desprendimiento energético aprovechado para la formación de enlaces de alta
energía en forma de ATP. La fosforilación oxidativa se define como la formación de ATP generada por la
transferencia de electrones. Todas las rutas catabólicas, en los organismos aerobios, convergen para permitir
el flujo de electrones hasta el oxígeno, produciendo energía para la generación de ATP constituyendo la etapa
final del catabolismo de todas las biomoléculas[ CITATION Voe06 \l 2058 ]

Demostración de la distribución intracelular de las enzimas de óxido-reducción biológica

Existen sistemas enzimáticos capaces de realizar oxidaciones en el organismo, siendo sus sustratos
carbohidratos, ácidos grasos, aminoácidos y algunas otras sustancias orgánicas. Los sistemas antes
mencionados están constituidos por proteínas, fosfolípidos, grupos prostéticos además de iones metálicos. De
acuerdo a su estructura y función las enzimas que intervienen es esos procesos se encuentran clasificadas en
diversos grupos y tienen denominaciones especiales dentro dela literatura enzimológica. Las enzimas de
óxido-reducción, tienen una distribución característica intracelular, encontrándose de modo fundamental en
una subestructura celular en donde la energía derivada de las oxidaciones es captada en forma de trifosfato de
adenosina (ATP).[ CITATION Ara18 \l 12298 ]

Los carbohidratos, ácidos grasos, aminoácidos y algunas otras sustancias, sufren oxidaciones en el
organismo. Estos sistemas están constituidos por proteínas solo o con cofactores: grupos prostéticos
(coenzimas o metales unidos en forma estable), coenzimas o metales libres. La cadena de transporte de
electrones o cadena respiratoria se encuentra localizada en una subestructura (organela) específica de la
célula, en donde la energía derivada de las oxidaciones es capturada en forma de ATP por la fosforilación
oxidativa. [ CITATION Ara18 \l 12298 ]