se clasifican en coenzimas y cofactor.

Las
coenzimas son sustancias orgánicas y los
cofactores generalmente son iones inorgánicos
como el calcio, magnesio y zinc.

Debido a su naturaleza proteínica los enzimas

pueden ser afectadas en su actividad por factores
de tipo físico, temperatura, pH, fuerza iónica,
Guía de Laboratorio factores químicos e inhibidores.

Lab. Biología Celular MATERIALES Y EQUIPOS

Mechero
Toallas de papel
Enzimas Pipetas
Pinzas para tubo de ensayo
Objetivo general Tubos de ensayo
Baño de maría
Conocer lo relacionado con la catálisis enzimática
Gradilla
en los medios biológicos.
Termómetro
. Objetivos específicos Cinta de enmascarar
Pitillos
Reconocer en la catálisis enzimática las Mortero
enzimas y el sustrato. Sharpie
Determinar el efecto del pH, la
REACTIVOS
temperatura y la concentración en la
actividad enzimática Alcohol
Identificar la importancia de la catálisis Agua destilada
enzimática en los medios biológicos Solución salina
Peróxido de hidrogeno
Introducción Hielo
Ácido acético
Las enzimas son proteínas que disminuyen la Hidróxido de sodio o amoniaco
cantidad de energía que se requiere para realizar
una reacción, la actividad catalítica es especifica.
Para realizar su función se unen a las moléculas
por catalizar, llamadas sustrato
(S) en el sitio activo para establecer un complejo
llamado enzima- sustrato (ES), el cual se puede
disociar en sus moléculas originales enzima y
sustrato o bien generar producto(P) y la enzima
libre.

Las enzimas se clasifican de acuerdo con la

reacción que catalizan en oxidoreductasas,
transferasas, hidrolasas, isomerasas, ligasas,
liasas.
Algunas enzimas necesitan para su
funcionamiento una o más moléculas de carácter
no proteico, que participan de maneradirecta en la
reacción química durante la catálisis. Se le
denomina grupos prostéticos y
MATERIAL BIOLÓGICO
Muestra de hígado de res
NOTA: Para realizar las prácticas con el
extracto de hígado, los estudiantes
previamente deben tomar un trozo de
hígado de animal en buen estado y
macerarlo en un mortero con agua
destilada. Posteriormente deben filtrarlo
con un trozo de tela o algodón y
conservar el filtrado para los
procedimientos en el laboratorio.
Las muestras de la solución de
hidrógeno se deben tener por
separado en tubos de ensayos antes de
añadir la muestra de extracto de
hígado en los tubos de ensayos. Todocon
el objeto de que las soluciones de
peróxido sean añadidas al mismo tiempo
en cada uno de los tubos que contengan
la muestra.
PROCEDIMIENTOS
Parte 1- Efecto de la cantidad de enzima
Tome 4 tubos de ensayo y rotúlelos
tubos de la siguiente manera
Número de Volumen (ml) Peróxido de
tubo de extracto hidrogeno
de hígado
1 0 2ml
2 1.0ml 2ml
3 2.0ml 2ml
4 4.0ml 2ml
Adicione el extracto de hígado, agite
cada uno de los tubos y posteriormente
añada al mismo tiempo 2ml de peróxido
de hidrógeno en cada uno de los tubos.
Describa lo observado y justifique
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¿Cómo puede la cantidad de enzima
afectar la actividad enzimática?
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Parte 2. Efecto de la cantidad de
sustrato
• Tome 5 tubos de ensayo y rotúlelos
tubos de la siguiente manera
Numero de
Cantidad en
Peróxido de
ml de extracto
tubo hidrogeno
de
hígado
1 1.0ml 0ml
2 1.0ml 1ml
3 1.0ml 2ml
4 1.0ml 4ml
5 1.0ml 6ml
• Adicione el extracto de hígado, agite
cada uno de los tubos y posteriormente
añada al mismo instante las siguientes
cantidades de peróxido de hidrógeno:
tubo 1 ; 0ml; tubo 2 : 1ml ; tubo 3 : 2ml
; tubo 4 : 4ml ; tubo 5 : 6ml . Describalo
observado y justifique
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¿Cómo puede la cantidad de
sustrato afectar la actividad
enzimática?
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 Parte 3- Efecto de la temperatura Adicione 3 gotas de una de las soluciones (acida,
neutra y básica), agite cada uno de lo tubos, mida
• Tome 3 tubos de ensayo y rotúlelos tubos de la el pH con una cinta indicadora de pH, ajuste de
siguiente manera ser necesario. Al mismo tiempo adicione 2ml
Nota: Espere que el material que este dentro de peróxido de hidrógeno en cada uno de lostubos.
los tubos tenga la misma temperatura que la de Describa lo observado y justifique
los respectivos baños.
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Numero Cantidad Temperatura Peróxido --------------------------------------------------
de tubo en ml de de
extracto hidrogeno --------------------------------------------------
de hígado --------------------------------------------
¿Cómo puede el pH afectar la velocidad
de la actividad enzimática?
1 2 Ambiental 2ml

2 2 Agua 2ml --------------------------------------------------

hirviendo
3 2 Baños con 2ml --------------------------------------------------
hielo
Adicione el extracto de hígado y posteriormente
añada al mismo instante 2ml peróxido de
hidrógeno en cada uno de los tubos. Describa lo
observado y justifique
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¿Cómo puede la temperatura afectar lavelocidad de la

actividad enzimática?

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Parte 4 –Efecto del pH
Tome 3 tubos de ensayo y rotúlelos tubos de lasiguiente
manera

Número Volumen pH Peróxido

de tubo (ml) de de
extracto hidrógeno
de hígado
1 2 ml Ácido 2 ml
2 2 ml Neutro 2 ml
3 2 ml Básico 2 ml