Universidad Autónoma de Nuevo León

Facultad de Ciencias Biológicas

Químico Bacteriólogo Parasitólogo

PRÁCTICA 3:
Cinética de crecimiento

Dra. Katiushka Arévalo Niño

Unidad de aprendizaje:
Biotecnología Industrial

Grupo 271
7mo. Semestre
Nombre Matrícula

Aguilar Saldaña Ilse Jaqueline 1615683

López Rayas Yessika Eleyn 1819754

Maldonado Covarrubias Jezabel 1752231

Mendoza Barco Crystal Estephania 1657059

Montemayor Ibarra Andrea Fátima 1651712

Perales Morales Karen Lizbeth 1663040

Santos Chávez Rosa Elizabeth 1625755

San Nicolás de los Garza, Nuevo León a 30 de octubre de 2020

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Químico Bacteriólogo Parasitólogo
RESULTADOS
→ Situación 1. Cultivo Independiente del cultivo continuo

Gráfica 1.1 Tiempo vs. absorbancia del cultivo independiente del cultivo continuo.

Abs * UFC/mL del estándar correspondiente

_________________________________________ = UFC/mL

Abs del estándar correspondiente

● Absorbancia 0.309

● Absorbancia 0.448
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● Absorbancia 0.442

● Absorbancia 0.529

● Absorbancia 0.629

● Absorbancia 0.655

● Absorbancia 0.785
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Gráfica 1.2 Tiempo vs. número de células del cultivo independiente del
cultivo continuo.

→ Situación 2. Cultivo Acoplado

Gráfica 2.1 Tiempo vs. absorbancia del cultivo acoplado

● Absorbancia 0.453

● Absorbancia 0.559

● Absorbancia 0.515

● Absorbancia 0.558
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● Absorbancia 0.814

Gráfica 2.2 Tiempo vs. número de células del cultivo acoplado

Cálculo de μ y Td del cultivo independiente del cultivo continuo

Tiempo X(no. células) In X

0 3.78E+08 19.75

1 6.40E+08 20.27

2 6.31E+08 20.26

3 7.56E+08 20.44

4 9.65E+08 20.68

5 1.00E+09 20.72

6 1.20E+09 20.90
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Gráfica 3. Tiempo vs. ln número de células del cultivo independiente del cultivo continuo.

La pendiente de la recta es µ

µ= 0.17 h-1

µ= 0.693/td

td= 0.693/0.17 h-1

td= 4.07 h
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Cálculo de μ y Td del cultivo acoplado

Tiempo (h) X (No. células) InX

1 6.47E+08 20.28

2 7.99E+08 20.49

3 7.36E+08 20.41

4 7.97E+08 20.49

5 1.26E+09 20.95

Gráfica 4. Tiempo vs. ln número de células del cultivo acoplado

La pendiente de la recta es µ

µ= 0.13 h-1

µ= 0.693/td

td= 0.693/0.13 h-1

td= 5.33 h
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Discusión

Con el objetivo de observar el aumento en la absorbancia en la fase de crecimiento,

la incubación de S. exiguus se llevó a cabo en un lapso de 22 horas. En 1981, Galán
demostró que durante el crecimiento de Saccharomyces exiguus en medios con
etanol como principal fuente de energía, había un mayor rendimiento Y (x/s) de 0.75
g. de células secas/litro en medios de cultivo enriquecidos con extracto de levadura,
concluyendo que esta levadura es capaz de obtener proteína unicelular.
Se realizaron los cálculos correspondientes para determinar la velocidad de
crecimiento y tiempo de duplicación de crecimiento en dos cultivos diferentes de los
cuales se reportaron los siguientes datos. Del cultivo independiente del continuo
obtuvimos como resultado la velocidad de crecimiento µ= 0.17 h-1, µ= 0.693/td, td=
0.693/0.17 h-1 y tiempo de duplicación td= 4.07 h. En el cultivo acoplado los resultados
fueron de la velocidad de crecimiento µ= 0.13 h -1, µ= 0.693/td, td= 0.693/0.13 h-1,
tiempo de duplicación td= 5.33 h
Se ha demostrado que Saccharomyces exiguus presenta una buena capacidad para
desarrollarse en medio mineral czapek modificado pH 4.5. Los resultados obtenidos
muestran que el ácido acético al 0.75% (v/v) es adecuado para la producción de
proteína unicelular de acuerdo al rendimiento (178 g/l) bajo las condiciones de
fermentación encontradas a nivel de matraz (Sánchez, 2006). Por tal motivo el cultivo
independiente del continuo presentó crecimiento de forma lineal siendo estas las
condiciones óptimas para su desarrollo, sin embargo el cultivo acoplado al biorreactor
mostró mayor crecimiento ya que este reportó aumento exponencial en número de
células y mayor turbidez.
La velocidad de crecimiento en medio mineral fue de µ ( h) 0.119 reportada por
(Saldaña, 2017) y en los cálculos realizados en esta práctica fue de 0.13 (h) siendo
menor la velocidad de crecimiento, esto podría ser debido a diversos parámetros que
influyen en el biorreactor desde su preparación como el seguimiento al mismo, la
cantidad de oxígeno disuelto, pH, etc (Galán, 2008)
El mejor desarrollo de la levadura en medio mineral se observó en densidad óptica
alcanzando un valor de 0.72 (Bon, 2010) y en los resultados presentes se demostró
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que a una densidad óptica de 0.814 hubo mayor crecimiento siendo de
1.26x109UFC/ml. En los otros valores probados no tuvo un buen desarrollo.
Se utilizó una fórmula para obtener el número de células, en donde solo se nos
brindaron las absorbancias las cuales comparamos con la escala de McFarland para
así obtener el estándar correspondiente y la absorbancia del estándar
correspondiente.

Conclusión

Se determinó que la cinética de crecimiento de la levadura Saccharomyces exiguus

independiente al cultivo continuo tuvo una velocidad de crecimiento mayor a la
velocidad de crecimiento acoplada, en cambio al tiempo de duplicación de manera
acoplada tuvo un resultado mayor a diferencia de la cinética de crecimiento
independiente al cultivo continuo siendo este menor, recordando así que la densidad
óptica está asociada directamente al crecimiento y es comparable con estándares ya
establecidos, como son los de McFarland.
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Bibliografía
● Galán, L. (1981). Obtención de proteína unicelular de Saccharomyces exiguus
crecida en etanol como principal fuente de carbono y energía. Universidad
Autónoma de Nuevo León.
● Saldaña, J., & Zapata, E. (2017). Obtención de proteína unicelular (SCP) a
partir de ácido acético por Saccharomyces exiguus. Revista de Investigación
y Desarrollo. Vol. 3 No. 9. México
● Zapata, J., Hoyos, M., & Quinchía, L. (2015). Parámetros cinéticos de
crecimiento de Saccharomyces exiguus en presencia de un campo magnético
variable de baja intensidad y alta frecuencia. Universidad de Antioquía.
● Bon, E., Neuvéglise, C., Lépingle, A., Wincker, P., Artiguenave, F., Gaillardin,
C. y Casaregola, S. (2010). Exploración genómica de las levaduras
hemiascomicetas: 6. Saccharomyces exiguus. Cartas FEBS , 487 (1), 42-46.
● Galán Wong, L. J. (2008). Obtención de proteína unicelular de Saccharomyces
exiguus crecida en etanol como principal fuente de carbono y energía (Doctoral
dissertation, Universidad Autónoma de Nuevo León).
● SALDAÑA-ACOSTA Jorge Miguel1*† & ZAPATA MOREIRA Emilia2. (3 de
Julio, 2017). Obtención de Proteína Unicelular (SCP) a partir de Ácido Acético
por Saccharomyces exiguus . Revista de Investigación y Desarrollo, Vol.3
No.9, 1-10
● Sánchez-Yáñez, J. M., & Galán-Wong, L. J. Síntesis de biomasa o proteína de
origen unicelular de Saccharomyces exiguus en ácido acético. Síntesis, 1, 06-
2006.