TALLER: GENERACIÓN DE ENERGÍA ÚTIL.

VIAS METABOLICAS
Por: ALVARO ROZO BAUTISTA

OBJETIVO.
Se pretende que el taller sea un apoyo para que el estudiante se apropie del conocimiento básico relacionado con las
estrategias metabólicas empleadas por los microorganismos para la generación de energía útil.

FUNDAMENTO TEÓRICO.
Una de las características sobresalientes de los microorganismos es su gran diversidad metabólica. Basados en la
clasificación de los organismos hecha en el taller anterior, nos centraremos en el estudio de las vías metabólicas
empleadas por los microorganismos para la generación de energía útil.

Los microorganismos obtienen energía en forma de ATP de reacciones redox que implican la oxidación de compuestos
orgánicos a través de las vías de respiración y de las fermentaciones. En las fermentaciones las oxidaciones ocurren
anoxigénicamente, es decir en ausencia de aceptores terminales de electrones añadidos. La respiración, en la que el
oxígeno (respiración oxigénica, antes llamada aerobia) u otros agentes oxidantes (anoxigénicos) son los aceptores
finales de electrones.

1. Los microorganismos quimiolitótrofos obtienen energía de la oxidación de donadores inorgánicos de

electrones, consulte algunos de ellos indicando sus estados de oxido reducción.

Para muchos quimioorganótrofos los donadores de electrones más importantes son las hexosas, particularmente la
glucosa. Las hexosas son también importantes como componentes estructurales de las paredes celulares microbianas,
de cápsulas, capas mucosas y de materiales de reserva. Las fuentes más importantes de hexosas son los disacáridos
(sacarosa) y los polisacáridos (almidón y glucógeno).

La glucosa es uno de los sustratos preferidos por las células para la obtención de la energía y por esta razón ocupa una
posición central en el metabolismo. La glucosa no solamente es un excelente combustible, sino también un precursor de
intermediarios metabólicos y síntesis de otros carbohidratos.

La naturaleza química de la glucosa le impide difundir directamente dentro de la célula, por lo que necesita sistemas de
transporte como la difusión facilitada por proteínas transportadoras presentes en la membrana de la célula. Una vez que
la glucosa ingresa a la célula, ésta debe ser activada para impedir el escape y para que la célula disponga de ella según
sus necesidades metabólicas.

2. La glucosa se activa mediante la transferencia de un grupo fosforilo del ATP al C6 mediante una transferasa
(Hexoquinasa). Escriba la reacción para la activación de la glucosa

Dependiendo de las condiciones y necesidades de las células la glucosa puede ser oxidada a piruvato vía glicólisis, en
condiciones oxigénicas hasta CO2, H2O y en la vía de pentosas fosfato para generar ribosa 5P y equivalentes de
reducción en forma de NADPH (Esquema No.1).
1
 Glucógeno, Almidón
Sacarosa

Glucosa 6P

Glicólisis Vía Pentosas P

Piruvato + ATP Ribosa y NADPH

CO2 + H2O + ATP

Esquema No. 1 Vías de utilización de la glucosa

METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS EN VACAS LECHERA.

El metabolismo de la energía enmarca una gran cantidad de procesos de alta incidencia en el estado de transición en
las vacas lechera. Dentro del metabolismo de la energía podemos distinguir nutrientes de tipo energético, entre los
cuales encontramos Carbohidratos, las grasas e incluso las proteínas, las cuales en condiciones extremas ( posparto)
son utilizadas como fuente de energía.
El metabolismo de los carbohidratos está compuesto por varias vías metabólicas de importancia como la glicolisis, la
vía de las pentosas fosfato, el ciclo del acido tricarboxilico, sin embargo es importante describir a grandes rasgos
por el proceso fisiológico general así como realizar una descripción Bioquímica de su estructura y función.
Para el metabolismo energético en rumiantes los monosacáridos de mayor importancia son:
Aldopentosas como: A. ________________________, B_____________________.
Aldohexosas como: A. ________________________. B.______________________. C.________________
Cetohexosa como: A. ________________________.
Dentro de los oligosacaridos como: A.__________________. B.________________. C. _________________.
Luego de la fermentación de los carbohidratos y de los azucares simples procedentes de la dieta hasta llegar a la
formación de piruvato como metabolito intermediario, este compuesto es fermentado a su vez por un grupo especifico de
bacterias como: ____________________, _____________________ para la formación de acidos de cadena corta
denominados. _______________.

GLICÓLISIS.
Filogenéticamente la glucólisis es la vía metabólica más antigua, consiste en una secuencia de reacciones en las cuales
se degrada la glucosa (de 6 carbonos) a dos moléculas de piruvato (de 3 carbonos cada una), con la generación neta de
2ATP y de 2NADH + H. Se caracteriza por ser un proceso anoxigénico que ocurre en el citosol de todas las células
aerobias o anaerobias y el aceptor de electrones es el NAD +. La glicólisis además proporciona energía e intermediarios
para otras vías metabólicas.

3. Escriba una reacción general que defina la glucólisis.

En la glicólisis se efectúan los siguientes modelos de reacciones:

2
Esta vía metabólica puede dividirse en dos fases: una de activación consumidora de energía y una oxidativa
generadora de energía. La primera fase consiste en la transferencia de grupos fosforilo provenientes del ATP a la
glucosa y su ruptura en dos moléculas de gliceraldehído 3P. En la segunda fase o fase oxidativa el gliceraldehído 3P es
transformado en dos moles de piruvato con la obtención de ATP por reacciones de fosforilación a nivel de sustrato. Los
NADH generados durante la glicólisis son reoxidados a NAD + por reacciones de fermentación o por la transferencia de
sus electrones a la cadena respiratoria para la síntesis de ATP.

4. Las siguientes son las reacciones de la primera fase, no se encuentran en secuencia lógica, ordénelas, complételas e indique las
enzimas.

A. Glucosa – 6P Fructosa- 6P

B. Fructosa –1,6-Bi-P Gliceraldehído –3P + Dihidroxiacetona-P

C. Glucosa Glucosa-6P

D. Fructosa- 6P Fructosa- 1,6- Bi-P

E. Dihidroxicetona-P Gliceraldehído –3P

Dos de estas reacciones involucran la activación o transferencia de fosforilo y son irreversibles. ¿ Cuáles son?
______________, _______________, ______________, ______________, ________________

GLUCONEOGENESIS.

Otra de las formas en el que el animal puede obtener energía para satisfacer sus requerimientos, aparte del suministro
exógeno es la generación de glucosa a partir de sustratos potencialmente energéticos denominados glucogénicos por
medio de un proceso anabólico denominado gluconeogenesis(GNG) .
Normalmente los animales deben mantener un nivel constante de glucosa en la sangre (glicemia) y al no tener un
suministro constante de energía (glucosa) o al agotar las reservas de azucares el animal debe sintetizar glucosa por
medio de la gluconeogenesis.
Indique tres procesos interrelacionados para que se dé el equilibrio de glucosa en sangre:

1. ____________________________________________________________.
2. ____________________________________________________________.
3. ____________________________________________________________.

Cuantitativamente el precursor más importante de la glucosa por vía de la gluconeogenesis es: ______________

Es una reacción anabólica. Es la vía que permite la síntesis de glucosa a partir de precursores no glucídicos (ni
provienen ni son glucosa). Es muy importante en animales. Permite ver la regulación de las vías metabólicas. Es
necesaria porque muchos tejidos de los animales no necesitan glucosa, mientras que otros son completamente   glucosa
dependientes (cerebro, eritrocitos, médula renal...). Es imprescindible tener siempre glucosa disponible.
Se puede hacer glucosa a partir de: _____________, _____________, _______________
Cada precursor tiene un significado diferente. La gluconeogénesis ocurre sólo en algunos órganos muy concretos,
sobretodo en hígado. La corteza renal también puede llevarla  cabo.
Las plantas no lo hacen porque pueden fabricar glucosa a partir de CO 2 mediante fotosíntesis. Pasar
de Pyruvato a Glucosa es lo contrario de hacer glucólisis. La glucólisis tiene 3 reacciones irreversibles. Estas 3
reacciones son las únicas diferentes. La gluconeogénesis, con la excepción del paso de pyruvato a OAA, que ocurre en
la membrana mitocondrial, ocurre en el citosol. Sólo el paso de PEP a Pyr, de  Fructosa1,6-bisfosfato a Fructosa-6-
Fosfato y de Glucosa-6-Fosfato a Glucosa es diferente.
Los animales hacen gluconeogénesis:
-Omnívoro: sólo cuando no tenga aporte de glucosa por la dieta. La gluconeogénesis se hace a partir del _________ y,
si no, de aminoácidos de proteínas. Si además, hace glucólisis anaeróbica, lo hace del ____________.

3
-Rumiante: los microorganismos del rumen transforman la glucosa en __________, ____________ y _________.
Siempre deben fabricar glucosa. La gluconeogénesis siempre es activa o muy activa. Además, en lactantes, deben
formar mucha lactosa, que lleva glucosa.
-Carnívoros: tienen pocos carbohidratos. Deben hacer glucosa a partir de glicerol o aminoácidos (proteínas de la dieta).

 
5. Cuáles son las reacciones de la gluconeogenesis, indíquelas con sus respectivas enzimas.

6. Indique cual es el control hormonal de la Gluconeogénesis en el contexto del Rumiante.

VÍA DE LAS PENTOSAS FOSFATO.

Las vías de tipo anabólico, además de energía, necesitan poder reductor. La célula distingue los electrones de destino de
la cadena de  transporte de electrones de los que están involucrados en reacciones red-ox biosintéticas. Están colocadas
en el NADH (electrones catabólicos para dar energía) y NADPH (electrones para reducir moléculas).
 
El NADPH tiene en el C 2´ un fosfato. La vía de las pentosas fosfato es una vía importante para fabricar NADPH (poder
reductor para los procesos sintéticos). Además, fabrica pentosas fosfato.

4
6. Indique la reacción Neta:

Además, también fabrica ribosa-5-P. Es una molécula importante para la célula como el RNA, NAD, ATP, FAD... Es una
vía citosólica. También se puede llamar como vía del fosfogluconato. En su 1ª fase es una fase oxidativa: 1 C salta como
CO2.
La G6P es oxidada a 6-Fosfoglucono-d-lactona mediante la G6P deshidrogenasa, que trabaja con NADP y la transforma
en NADPH. En la célula no hay suficiente NAD para que lo use. La 6-Fosfoglucono-d-lactona, mediante la lactonasa, se
hidroliza en 6-fosfogluconato que, mediante la 6-fosfogluconato deshidrogenasa (también trabaja con NADP que lo pasa
a NADPH), oxida el OH en cetona y forma un b-cetoácido (son inestables y se descarboxilan). El producto que queda es
un CO2 + ribulosa-5-P.
La fase oxidativa fabrica 2 moléculas de NADPH. A partir de la ribulosa-5-P no hay más proceso oxidativo.
La ribulosa-5-P es la forma ceto y la ribosa-5-P es la forma aldehido. Se transforma mediante un enodiol intermedio por
la fosfopentosa isomerasa. Se obtiene ribosa-5-P.
Además, existe la posibilidad que de la ribulosa-5-P se puede obtener la xilulosa-5-P (se diferencia sólo en la
estereoisomeria de un solo centro asimétrico). Son epímeros. Se hace por la fosfopentosa epimerasa.
La 1ª deshidrogenasa (Glucosa-6-P deshidrogenasa) es el primer enzima que regula la vía de las pentosas fosfato. Está
inhibida por NADPH (el exceso de NADPH inhibe a la Deshidrogenasa).
En la célula es bastante normal encontrarse con que los requerimientos de NADPH son mayores que los de ribosa-5-P.
Para evitar generar un residuo de Ribosa-5-P, se aprovecha en la glucólisis. Puede transformarla Ribosa-5-P en
Fructosa-6-P y en G3P.

7. Indique los reactivos, enzimas y productos en cada una de las reacciones presentes en la vía de las pentosas fosfato.

8.Cuál es la importancia de esta vía en el contexto animal.

5
 Ciclo de Krebs.
El ciclo de Krebs o ciclo de los ácidos tricarboxílicos es una vía metabólica que realizan las células eucarióticas en la
matriz mitocondrial y las procarióticas en la membrana plasmática, con el objeto de:

 El ciclo de Krebs es la etapa final del catabolismo de todas las moléculas combustibles, su objetivo es pues oxidar a
CO2 la unidad de dos carbonos, el Acetil-SCoA proveniente del piruvato, de los ácidos grasos y de algunos
aminoácidos con el fin de generar energía en forma de ATP o GTP y en forma de NADH y FADH 2
 Suministrar precursores para la biosíntesis de diferentes clases de biomoléculas.

El Ciclo de krebs o ruta central del metabolismo aeróbico consta de varias reacciones catalizadas enzimáticamente, en donde
grupo acetilo del acetil-SCoA es oxidado en el ciclo de Krebs hasta CO2 y H2O generando equivalentes de reducción

En el ciclo intervienen las siguientes reacciones, enzimas, coenzimas e intermediarios.

 Reacciones de: Oxido-reducción descarboxilativas, de óxid-reducción no descarboxilativas, condensación, hidratación y

fosforilación a nivel de sustrato destinadas a la regeneración del aceptor de Acetil-CoA, y que corresponde al
oxalacetato.

 Enzimas: Fumarasa, Aconitasa,  Cetoglutarato deshidrogenasa, Citrato sintasa, Tioquinasa succínica, Isocitrato
deshidrogenasa, Malato deshidrogenasa, Succinato deshidrogenasa y Fumarasa.

 Intermediarios Malato, Succinato, Cetoglutarato, Citrato, Oxalacetato, Fumarato, Succinil-CoA, e Isocitrato.

 Coenzimas : NAD+, FAD+, CoA-SH, GDP + Pi

En el inicio de una vuelta del ciclo, el acetil-CoA transfiere el grupo acetilo a un cetoácido de 4C, el resultado es la formación
de un hidroxiácido de 6C. En la siguiente reacción ocurre un cambio en la posición del hidroxilo con la formación de un
intermediario que da el nombre a la enzima que cataliza esta reacción. En la siguiente reacción ocurre la primera
descarboxilación oxidativa catalizada por una dehidrogenasa dependiente de un oxidante no

Si el aceptor final de electrones es el oxígeno, el piruvato continua oxidándose hasta CO 2 y H2O; la energía potencial de
las oxidaciones es captada por el NAD + y el FAD+ generando equivalentes (NADH y FADH2) para la reducción del O 2 y
producción de ATP en la fosforilación oxidativa. Una muy buena fuente de equivalentes de reducción es el ciclo de Krebs.

Una reacción previa al ciclo de Krebs es la oxidación del piruvato a acetil-CoA mediante la Piruvato deshidrogenasa. La
reacción se realiza en las mitocondrias de los organismos aerobios (u oxigénicos) y en la membrana plasmática de las
bacterias.

CO2
COO- CoASH
O
C O H3C C SCoA

CH3 NAD+ NADH + H+

muy fuerte (NAD+). La siguiente reacción también es una oxidación decarboxilante, pero a diferencia de la anterior parte del
potencial redox se utiliza para la formación de un tioéster de alta energía), el cual se hidroliza en la siguiente reacción para
formar un anhídrido de fósforo (GTP). De este punto en adelante el proceso tiene como finalidad regenerar el aceptor de

6
acetil-CoA para el cual se sigue el modelo general de oxidación, es decir la oxidorreducción asociada a un oxidante fuerte
(FAD+), Hidratación, y Oxidorreducción asociada a NAD+ (Esquema No.4).

9. Complete el esquema del ciclo de Krebs con los intermediarios, enzimas, coenzimas y haciendo énfasis en el tipo de
cada reacción.
10. Escriba el balance estequiométrico por cada acetil-SCoA que es oxidado en el ciclo.

11. De acuerdo al ejemplo incluido, resuma en el siguiente cuadro las reacciones del ciclo de Krebs.

ENZIMA CLASE TIPO DE REACCION COFACTOR COENZIMA

Citrato sintasa Liasa condensación CoA-SH
Aconitasa
Isocitrato
deshidrogenasa
Alfa-Cetoglutarato
deshidrogenasa
Tioquinasa succínica
Succinato
Deshidrogenasa
Fumarasa
Malato deshidrogenasa

Fosforilación oxidativa.
En la mayoría de las células aerobias, la acción acoplada del ciclo de Krebs y de la cadena respiratoria transportadora de
electrones es la responsable de la producción de la mayor parte de energía.

El proceso final de la respiración oxigénica es la síntesis de ATP o fosforilación oxidativa. Este es un proceso acoplado al
flujo de electrones desde el NADH + H+ y el FADH2 al oxígeno (aceptor final de electrones).

La localización de las enzimas en la mitocondria permite la interacción directa de los pares de electrones removidos durante
la oxidación del acetil-SCoA con la cadena transportadora de electrones y la reducción final del O 2 (proceso que ocurre a

7
través de la membrana mitocondrial interna). Además, a medida que los pares de electrones son transferidos a lo largo de la
cadena respiratoria, liberan energía cada vez que pasan de una

molécula transportadora a la siguiente, esta energía es utilizada para bombear los protones a través de la membrana, y este
flujo a través de gradiente desde el espacio intermembranal a la matriz mitocondrial es utilizado por la enzima ATP Sintetasa
para impulsar la fosforilación del ADP y formar ATP.

Acetil- CoA

1
Citrato 2

Isocitrato

Oxalacetato
3

Cetoglutarato

Malato
4

7
Succinil - CoA

Fumarato
5

6
Succinato

FAD+ / FADH2
NAD+ / NADH + H+ Enzima
H2O, CoASH
Esquema No. 4 Ciclo de Krebs.
CO2, GTP
GDP + Pi

8
Bibliografía.
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Boyer, R. Conceptos de bioquímica. 2000 Thomson.
Horton, H. R., et al., Bioquímica, 1995. Prentice-Hall Hispanoamericana, S. A.
Madigan, M. et al. 2000. Brock Biología de los microorganismos. 8 Ed. Prentice Hall, México.
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Cunningham James . E. fisiologia veterinaria tercera edición 2003
Conn. E. Stumpf P. Bruening G, Bioquímica Fundamental,. 5ta edición 2000
Correa H.J. Limitante nutricionales y metabólicos para la producción bovina en el trópico alto: el caso de los
sistemas de producción de leche, facultad de ciencias agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia,
Medellín 2009

NOMBRES Y APELLIDOS: __________________________________________________. Nº LISTA:______

___________________________________________________.Nª LISTA.______
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