En la Citometría hemática una de las determinaciones Esta sencilla prueba se emplea

METODO DE universalmente como un indicador de

es la hemoglobina la cual se expresa en g/dl. El método METODO DE WINTROBE PARA la presencia de enfermedades activas,
de la Cianometahemoglobina es el más empleado,
CIANOMETAHEMOGLOBINA SEDIMENTACION ?ya que permite conocer las
debido a que es colorimétrico, es barato y permite medir
todas las hemoglobinas presentes en la sangre
GLOBULR características físicas del ambiente en
el que se encuentran los eritrocitos?.

PROCEDIMIENTO:
1) Se marcan 2 tubos de ensayo, uno como blanco (B) y otro como problema (P) y se colocan 5 ml. del Reactivo
de Drabkin en cada uno.
2) Con la pipeta de Shali, se toma 0.02 ml (20 l) de sangre limpiando perfectamente la pipeta por fuera con un
segmento de papel desechable humedecido con solución salina, se pasan al tubo, lavando la pipeta 2 o 3 veces,
por aspiración y expulsión del reactivo dentro de la misma.
3) Se mezcla vigorosamente con cuidado. Dejar reposar la mezcla por 5 minutos. Pasar a las celdas.
4) Ajustar el espectrofotómetro a cero de absorbancia con el blanco de reactivo (B) a 540 nm. y se lee la
absorbancia del tubo problema.
5) Calcular la concentración de la Hemoglobina, a partir de la Ley de Beer o bien extrapolando en la Curva de
calibración
FUNDAMENTO:
Consiste en dejar que la sangre sedimente por la acción de la gravedad formando un paquete más o menos compacto separado del
plasma, ello depende de varios factores como son:
a. Factores plasmáticos: En donde los niveles elevados en la concentración de fibrinógeno y/o de globulinas originan la disminución del
potencial Z de los eritrocitos, favoreciendo la formación del fenómeno de ?Rouleaux?.
b. Factores eritrocitarios: Cuando aumenta tamaño de los eritrocitos (macrocitos), se sedimentan más rápido que los de tamaño normal
(normocitos) o los de menor tamaño (microcitos).
c. En los pacientes con anemia se disminuye la relación ?eritrocitos/plasma?, lo que favorece el apilamiento de los eritrocitos y el
aumento de la VSG.

PRECAUCIONES VENTAJAS

a) El tubo de Wintrobe deberá llenarse desde el fondo a) Pequeña cantidad de muestra.

hasta la marca cero, evitando la formación de burbujas. b) Es sencillo.
b) Durante el proceso de reposo deberá verificarse que c) Puede calcularse el valor del
se encuentre exactamente vertical, de lo contrario el hematocrito con la misma preparación
valor determinado será erróneo. después de haber determinado la
c) Verificar que el reposo del tubo de Wintrobe este velocidad de sedimentación globular.
VENTAJAS DESVENTAJAS DETERMINACION DE exento de vibraciones. (VSG).
HEMOGLOBINA, d) La sangre debe de estar perfectamente mezclada
HEMATOCRITO, VSG, para evitar un cambio en la relación, eritrocitos-plasma.
CUENTA DE ERITROCITOS
E INDICES
1. El método de 1. La única desventaja es que se ERITROCITARIOS.
Cianometahemoglobina posee ciertas trabaja con pequeños volúmenes
ventajas, ya que la mayoría de las de sangre (20 µl) por lo que
formas de hemoglobina que se aumenta la probabilidad de error.
puedan encontrar en la sangre (a DESVENTAJAS VALORES DEREFERENCIA
excepción de Hb S) se convierten a
Cianometahemoglobina con la adición
del reactivo de Drabkin. 2. La máxima
absorción de la
Cianometahemoglobina a 540 nm, Se altera fácilmente con movimientos, HOMBRES 0 a 7 mm/hr.
permite la utilización de fotómetros vibraciones y sangres hemolizadas. MUJERES 0 a 15 mm/hr.
con rangos de lectura cortos.

El hematocrito es un parámetro indispensable para poder calcular los

índices eritrocitarios y se define como ?el volumen que representa el
paquete globular en el total del volumen sanguíneo?. El hematocrito en
porcentaje (%) representa aproximadamente tres veces el valor de la
concentración de hemoglobina y su valor será siempre fraccionario, es
decir menor a uno (en el sistema internacional de unidades).
El recuento de glóbulos en la sangre es una práctica habitual
DETERMINACION DE en el laboratorio clínico, en el cual se determina el número de
HEMATOCRITO RECUENTO CELULAR ERITROCITARIO eritrocitos, leucocitos y plaquetas por mm3 de sangre, con la
ayuda de la cámara de Neubauer o hemocitómetro.

METODO DEL CONTEO

La cámara de Neubauer es un grueso portaobjetos de vidrio, en el

MACCROHEMATOCRITO
PROCEDIMIENTO.
Después de haber determinado la VSG con el tubo
Wintrobe.
a) Calcule el hematocrito, centrifugando el tubo a 3500
r.p.m. durante 30 minutos. En caso de no contar con
esta preparación efectuar el procedimiento (2).
Procedimiento (2).
b) Con una pipeta Pasteur llénese de sangre el tubo
Wintrobe hasta la marca de ?0? cero. c) Centrifúguese
el tubo A 3500 r.p.m. durante 30 minutos.
MICROHEMATOCRITO centro de su superficie se encuentra un cuadrado de 3 mm de lado El conteo se inicia por la parte superior de izquierda a derecha y luego de derecha
dividido en 9 cuadros grandes cada uno de 1 mm, los cuadros a izquierda sucesivamente, teniendo la precaución de contar las células que tocan
marcados con la letra L son utilizados para el recuento de leucocitos y una de cualquiera de las tres líneas como si estuvieran en los cuadros y teniendo
se encuentran divididos por 16 cuadros más pequeños. El cuadro la precaución de no contar una célula dos veces.
central está dividido en 25 cuadros los marcados con la letra E son
PROCEDIMIENTO. utilizados para el recuento de eritrocitos y los marcados con P para
plaquetas.
a) Llenar con sangre capilar o venosa un tubo capilar Cada uno de estos cuadros se divide en 16 cuadros más pequeños
aproximadamente tres cuartas partes del total de su longitud. dando un total de 400 en el cuadro central.
b) Cierre el extremo del tubo capilar distante de la sangre Área total = 9 mm2.
acercándolo a la flama del mechero y rotándolo, también se Área de cada cuadro marcado como L = 1 mm2 .
puede sellar con plastilina (cerciórese de que el cierre de Área de cada cuadro marcado como e y P = 0.04 mm2
dicho extremo haya sido completo). Área total de los cinco cuadros centrales E= 0.2 mm2 .
c) Centrifúguese en la centrífuga para microhematocrito Área de cada cuadrito marcado como ?e? 0 0.0025 mm2 .
durante 5 min. d) Leer en el lector del microhematocrito.

LECTURA:
En la graduación en la que el ?0? cero está en el fondo
del tubo, léase a que nivel está el límite superior de la
columna roja (la sangre se ha separado en cuatro capas:
roja formada por los eritrocitos, blanca grisácea por
leucocitos, amarillenta cremoso por plaquetas y la última
líquida formada por plasma habitualmente de color
amarillento.).
VENTAJAS Y DESVENTAJAS.
a) El micro método es el más empleado debido a que
requiere menos tiempo de centrifugación, y cantidad de
muestra, se puede utilizar sangre capilar o venosa en
comparación con el macro método.
b) Se prefiere el micro método debido a que existen
diferentes marcar comerciales de tubos de Wintrobe
para el macro método con lo que se obtienen diferentes
resultados del hematocrito.
c) La cantidad de plasma atrapado es mayor en el
macro método dando valores más elevados.

VALOR DE
REFERENCIA.
HOMBRES 46 a 56 %
MUJERES 39 a 50 %