1

1. Elaboración del Pre- informe de laboratorio

- Flujograma horizontal de los

procedimientos

2. Elaboración del informe

- Número y nombre de la práctica

- Objetivo General

- Marco Conceptual Referenciado

- Materiales utilizados

- Resultados y discusión (Cuestionario)

- Conclusiones

- Referencias Bibliográficas

- Anexos: Evidencias de la práctica (una

captura de pantalla de los videos y del

simulador Amrita donde aplique).

 2

1. Elaboración del Pre- informe de laboratorio

file:///C:/Users/PC2/Downloads/Diagrama%20en%20blanco%20(1).pdf
 3

BIOLOGIA Y MICROBIOLOGIA GENERAL

PRACTICA#2

MICROSCOPIA

VALENTINA GARCIA FRANCO

LUZ MARY MONTEZ

UNIVERSIDAD DE CALDAS

INGENIERIA DE ALIMENTOS

18 DE MARZO DE 2021

OBJETIVO GENERAL
 4

Conocer y aprender el protagonismo que tiene la invención del microscopio dentro de un

laboratorio de tipo biológico, su importancia en la historia y en la biología celular, las partes que

lo componen y el funcionamiento de este.

OBJETIVOS GENERALES

 Comprender la importancia de la invención del microscopio en la historia, conoce el

inventor de este artefacto y la evolución de este a lo largo del tiempo.

 Identificar el uso adecuado del microscopio en el laboratorio

 Identificar las partes que compone un microscopio y su funcionamiento

 Conocer los tipos de microscopios usados en el laboratorio para observar los

microorganismos

MARCO CONCEPTUAL REFERENCIADO

MICROSCOPIO QUÉ ES?

 5

El microscopio es una herramienta que permite observar objetos que son demasiado pequeños

para ser observados a simple vista. El tipo más común y el primero que fue inventado es el

microscopio óptico. Se trata de un instrumento que contiene dos lentes que permiten obtener una

imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que investiga los objetos

pequeños utilizando este instrumento se llama microscopía.

PARTES MECÁNICAS DEL MICROSCOPIO

Las partes mecánicas de un microscopio óptico son aquellos elementos estructurales con la

función de dar estabilidad al aparato y que permiten que los componentes ópticos del

microscopio estén en el lugar adecuado para permitir la visualización de las muestras. A

continuación repasaremos las partes mecánicas de todo microscopio, su nombre y para qué

sirven exactamente.
 6

1. Pie o base

Como su propio nombre indica, el pie es la estructura que se sitúa en la parte inferior del

microscopio. Es la base por encima de la cual se encuentran el resto de componentes. Para la

correcta visualización de muestras es necesario que el microscopio se mantenga lo más inmóvil

posible, pues cualquier mínimo cambio de posición afecta a la tarea.

2. Tornillo macrométrico

El tornillo macrométrico es una estructura giratoria situada en un lateral del microscopio

que hace que la muestra se desplace verticalmente. Este componente es imprescindible para la

visualización, pues cada muestra requiere estar a una distancia concreta del objetivo.

3. Tornillo micrométrico

Constituyendo un anexo del macrométrico, el tornillo micrométrico es la estructura que permite,

una vez logrado un enfoque preliminar, ajustar la distancia de manera mucho más precisa.

4. Platina

La platina es la superficie sobre la cual se deposita la muestra a observar. Tiene un agujero en el

centro a través del cual la luz llegará a la muestra.

5. Pinzas

Las pinzas están adheridas a la platina y tienen la función de mantener fija la muestra para no

perder el enfoque una vez ya estemos trabajando en la visualización. Estamos visualizando la

 7

muestra a muchos aumentos, por lo que cualquier movimiento haría que perdiéramos todo el

trabajo.

6. Brazo

El brazo es la columna vertebral del microscopio. Naciendo en la base de este, es la pieza

estructural que conecta todos los demás componentes entre sí. Debe ser también muy estable

para evitar alteraciones en la posición de la muestra.

7. Revólver

El revólver es una estructura giratoria situada en la parte superior del microscopio y donde están

montados los objetivos. Mediante su rotación se permite al usuario del microscopio alternar entre

los diferentes objetivos de los que esté dotado el microscopio.

8. Tubo

El tubo es una estructura cilíndrica situada en la parte superior que, unida al brazo del

microscopio, conecta el ocular con el revólver. Es el elemento a través del cual la luz llega hasta

el observador.

PARTES ÓPTICAS DEL MICROSCOPIO

Los componentes ópticos son aquellos que se encargan de la visualización de muestras, pues

están incluidos los elementos encargados de generar y dar direccionalidad a la luz.

 8

1. Foco o fuente de luz

Los microscopios ópticos más usados tienen un generador de luz, aunque los más tradicionales

disponen de un espejo que refleja la luz natural del lugar donde se está trabajando. Sea del tipo

que sea, es un elemento indispensable del microscopio, pues la visualización depende

enteramente de la luz. 

En el caso de contar con su propio foco, este genera un haz de luz que es dirigido hacia arriba en

dirección a la muestra y que la traspasará para llegar a los ojos del observador.

2. Condensador

El condensador es el elemento óptico que concentra el haz de luz, pues los rayos salen del foco

de forma dispersa. Es por ello que, para estar centrados en la muestra, se tienen que aglomerar en

un punto concreto.

3. Diafragma

El diafragma es una estructura que abriéndose y cerrándose regula el paso de luz hacia la

muestra. Suele estar junto el condensador en la parte baja de la platina y su punto óptimo de

abertura depende de la transparencia de la muestra observada.

Muestras muy densas requerirán dejar pasar mayor cantidad de luz, pues de lo contrario lo

veríamos todo oscuro. En cambio, muestras muy finas exigen que cerremos más el diafragma

porque de estar muy abierto observaríamos la muestra con demasiada luz, viéndolo todo blanco.
 9

4. Objetivos

Los objetivos son las estructuras mediante las cuales decidimos a cuántos aumentos queremos

ver la muestra. Son un conjunto de lentes ordenados de menor a mayor aumento (con su

respectivo aumento de tamaño) que concentran la luz procedente de la muestra para producir una

imagen real que pueda ser observada.

Cada objetivo tiene un color asociado para identificar rápidamente a cuántos aumentos (x)

estamos trabajando:

 Negro: 1x / 1,5 x

 Marrón: 2x / 2,5x

 Rojo: 4x / 5x

 Amarillo: 10x

 Verde claro: 16x / 20x

 Verde oscuro: 25x / 32x

 Azul cielo: 40x / 50x

 Azul oscuro: 60x / 63x

 Blanco: 100x / 150x / 250x

En función del tamaño de la muestra elegiremos un objetivo u otro.

 10

5. Ocular

El ocular es el componente a través del cual observamos la muestra y, además, es la segunda fase

de ampliación del microscopio. El ocular amplía la imagen que procede de los objetivos, por lo

que la combinación entre los aumentos del ocular y del objetivo nos dice a cuántos aumentos

estamos observando la muestra.

Así, si el ocular tiene un aumento de 2x y el objetivo con el que trabajamos es de 40x, la muestra

la estamos viendo 80 veces ampliada.

USO DEL MICROSCOPIO PASÓ A PASO

Un paso previo importante es la preparación de la muestra que quieres observar. Para preparar

una muestra puedes seguir los pasos descritos en esta guía. En nuestro artículo de experimentos

puedes encontrar una lista de muestras que puedes observar en el microscopio. También son

interesantes las muestras preparadas que ya están listas para su observación.

Paso 1: Mediante el revólver del microscopio, coloca el objetivo de menor aumento

(normalmente 4x). Las observaciones se empiezan siempre con el aumento mínimo, a partir del

cual se va aumentando hasta llegar al nivel de aumento deseado.

Paso 2: Enciende la luz del microscopio. Esto puede requerir enchufarlo primero a la corriente

eléctrica o asegurarte de que las baterías están cargadas.

 11

Paso 3: Coloca el portaobjetos con la muestra en el centro de la platina. Asegúrate de que la

muestra se encuentra aproximadamente sobre el agujero de la platina. Una muestra bien

preparada estará cubierta con un cubreobjetos para evitar el contacto entre el objetivo y la

muestra. Puedes fijar correctamente la muestra mediante las pinzas de la platina.

Paso 4: A continuación, sin todavía mirar por el ocular, ajusta el tornillo macrométrico para

acercar la platina al objetivo. Intenta acercar la muestra al objetivo tanto como sea posible pero

evitando siempre que lleguen a tocarse ya que esto podría dañar la muestra y el objetivo.

Paso 5: Mirando por el ocular, ajusta ahora el condensador y el diafragma para maximizar la

cantidad de luz que llega a la muestra. Algunos microscopios tienen un pequeño espejo que

dirige la luz hacia la muestra. Si este es el caso de tu microscopio, ajusta también la posición del

espejo para que la muestra esté totalmente iluminada.

Paso 6: A continuación ajusta nuevamente el tornillo macrométrico para aumentar la distancia

entre muestra y objetivo mientras miras por el ocular. Mueve suavemente el tornillo hasta

detectar el punto en que la imagen de la muestra se enfoca.

Paso 7: Ajusta el tornillo micrométrico para mejorar el enfoque de la imagen y obtener una

observación nítida de la muestra.

Paso 8: Una vez puedas ver una imagen enfocada de la muestra a través del ocular, mueve con

cuidado el portaobjetos para que los detalles de la muestra que te interesan entren en tu campo de

visión. Si tu platina está equipada con un carro móvil, puedes utilizar los tornillos del carro móvil

para ajustar la posición del portaobjetos.

 12

Paso 9: Para mejorar la calidad de la imagen puedes ajustar de nuevo el condensador o el

diafragma para regular la cantidad de luz que ilumina la muestra.

Paso 10: A partir de este punto, si quieres observar la muestra con un mayor aumento puedes

seleccionar el siguiente objetivo (10x) mediante el revólver. Es posible que sea necesario un

pequeño ajuste del tornillo micrométrico para mantener el enfoque. Si no consigues enfocar la

muestra puedes repetir los procedimientos descritos a partir del paso 3 con el nuevo objetivo.

Puedes de nuevo ajustar la posición de la muestra y a continuación cambiar una vez más al

siguiente objetivo en caso que sea necesario.

Paso 11: Cuando finalices la observación apaga la luz y ajusta el tornillo macrométrico para

maximizar la distancia entre la muestra y el objetivo. A continuación retira la muestra y deja

seleccionado el objetivo de mínimo aumento. Si has terminado de utilizar el microscopio puedes

taparlo con una funda para evitar la acumulación de polvo.

https://www.mundomicroscopio.com/como-usar-el-microscopio/

IMPORTANCIA:

Uno de los grandes avances que tuvo el mundo de la ciencia se dio con la llegada del

Microscopio Óptico, que consistió en la combinación de al menos Dos Lentes para lograr un

aumento más que considerable de lo que estamos observando, llevando nuestra atención a más

allá de lo que nuestros ojos pueden apreciar, inclusive con la ayuda de una Lupa de Aumentos,

llevando la exploración de nuestro entorno a nuevos mundos.

 13

La importancia de este radica en que fue el punto de partida de una gran variedad de avances en

el mundo de la ciencia, que partieron desde el mundo de la Microscopía y que además cambiaron

la forma de ver el mundo, desde la posibilidad de estudiar las Bacterias y Microbios (lo que dio

marcha a la Bacteriología) hasta el análisis de nuestra propia sangre con el descubrimiento de los

Glóbulos Rojos y Blancos, que supuso un fuerte avance en el mundo de la medicina.

También se aplica la Microscopía a la resolución de conflictos de índole legal, con las distintas

disciplinas científicas vinculadas a la Criminalística, que derivan de otras ciencias como lo es la

Bioquímica, permitiendo además mayor precisión a la hora de realizar Reacciones Químicas,

mejorando notoriamente la precisión a la hora de interpretar resultados.

HISTORIA DEL MICROSCOPIO Y SU REPERCUSIÓN EN LA MICROBIOLOGÍA

COMIENZO DE LA MICROSCOPIA

A pesar de que los microorganismos ya existían antes que el hombre y de haber sido durante

milenios los responsables de las enfermedades infecciosas, epidemias y pandemias, los

conocimientos que tuvo el individuo sobre el origen de las enfermedades eran precarios y

meramente especulativos debido al tamaño minúsculo de estos gérmenes y de no disponer de

instrumentos técnicos como el microscopio que facilitaran su observación, es decir, los hombres

sabios, los investigadores de aquellas épocas estaban ciegos hasta que se inventó esta

herramienta. La Microscopía es la ciencia que se ocupa de los usos y de las aplicaciones

interpretativas de los microscopios.

En el año 3000 a.C.

 14

Aproximadamente se considera que, por vez primera, se produjo el vidrio. Existen cuentas

egipcias de cristal del 2500 a.C. El lente conocido más antiguo estaba hecho de cristal de roca

pulido de 4 centímetros de ancho y fue encontrado en la antigua Nínive, en la legendaria

Mesopotamia. Se han hallado en Creta lentes biconvexos que datan de entre 3000 y 1200 antes

de Cristo.

Entre los años 965 y 1020, Ibn-al-Haitham (también conocido como Alhazen) utilizó para sus

investigaciones espejos esféricos y parabólicos. En el año 1000, un inventor desconocido realiza

el primer objeto para ayuda visual, llamado la piedra de leer, era un segmento de una esfera de

cristal que al ser colocada sobre el material de lectura amplificaba las letras.

EN EL SIGLO XVI 

Leonardo da Vinci y Francisco Maurolyco insisten en las ventajas de aplicación de estas lentes

para el estudio de los pequeños objetos. Se destacan también durante esta época en los estudios

de óptica Leonardo y Thomas Digges, Juan Bautista De La Porta y Thomas Moufet que se

dedican especialmente a la observación de pequeños insectos.

- En el libro "Magia Naturalis" de Juan Bautista Della Porta, publicado en 1588 se establecen los

principios de las lentes de cristal.7

 15

El sistema de lentes del microscopio es fundamental para lograr una eficaz resolución de este,

pues del lente o lentes deriva en gran medida la calidad de la imagen percibida por el ojo

humano.

EN 1590 

 Dos constructores holandeses de gafas, Hans Janssen y su hijo Zacharias (finales del siglo XVI

y principios del XVII), construyeron un aparato con lentes de aumento que permitía ver los

objetos más pequeños. Combinaron dos lentes convexos en un tubo opaco y obtuvieron de esta

manera una mayor perfección en la observación de pequeños objetos con lo cual se fundan los

principios del microscopio compuesto y el telescopio.

EN 1609: El microscopio de Zacharias es utilizado y perfeccionado por varios experimentadores

y conocido en todos los países, se empleó su sistema óptico en astronomía por Galileo Galilei

quien publicó sus observaciones al igual que Kepler. En 1609 Galileo Galilei construyó el primer

microscopio simple.

De 1617 a 1619

Apareció ya un microscopio de dos lentes con un solo objetivo convexo y un ocular, cuyo autor,

según se supone, fue el físico Cornelius Drebbel. En 1637 René Descartes en su libro

"Dioptrique", describe un microscopio compuesto, constituido por dos lentes, un ocular plano-

cóncavo y un objetivo biconvexo.

En el siglo XVII
 16

Athanasius Kircher (1602-1680), sacerdote jesuita alemán, en 1659, con ayuda de un adecuado

microscopio compuesto, habría visto bacterias, que también son células, describiéndolas en la

sangre de enfermos de peste como unas culebrillas o pequeñísimos gusanillos. Su microscopio

consistía en un tubo con un lente en cada extremo con el tubo dispuesto horizontalmente.

DESTACAR: Pese a los progresos, aún en estas épocas, la imperfección de los microscopios

unido a la concepción metafísica del mundo no permitió dar pasos esenciales con respecto al

conocimiento de las regularidades de la estructura microscópica de los animales y las plantas.

En 1665

El físico inglés Robert Hooke se interesó por todas las ciencias: astronomía, microscopía,

mecánica, óptica, geología, fisiología. Inventó multitud de aparatos para observar, medir y

registrar fenómenos de la naturaleza. Hooke se esforzó en aumentar el alcance de los sentidos,

para observar, medir, registrar, analizar y entender lo percibido. 

Micrographia (Pequeños dibujos) es de 1665, cuando Hooke tenía treinta años. La escribió en

inglés y la dedicó a Carlos II. Fue un éxito e influyó sobre interesados en la ciencia y legos.

Hooke registra e ilustra con su propia mano cincuenta y siete observaciones microscópicas de

minerales, vegetales (entre ellas la observación de la estructura del corcho) y animales.

Micrographia se trata en realidad de un tratado sobre los descubrimientos físicos y biológicos

que hizo, con la aplicación de un microscopio que él mismo había construido.

 17

IMPORTANCIA: Se valora de primordial el trabajo realizado por Hooke en esta época quien

perfeccionó aún más el microscopio, permitiéndole realizar la primera descripción de la célula,

observar la estructura fina de los tejidos; su obra "Micrografía de algunas descripciones

fisiológicas de cuerpos diminutos realizado por lentes de ampliación" fue editada por la Real

Sociedad de Londres y logró gran repercusión en su tiempo.

El microscopio compuesto diseñado y construido por el inglés Robert Hooke en el año 1665, se

basó en el principio funcional del telescopio astronómico, inventado a principios de ese siglo por

el físico-matemático, italiano, Galileo Galilei.

Siglo xviii y principios del xix

Se coincide al caracterizar los finales del siglo XVIII y principios del XIX como productivos

puesto que, debido al concurso de muchos científicos y maestros que crearon los microscopios

acromáticos, se lograron observaciones microscópicas más auténticas y fue posible pasar al

estudio sistemático de los tejidos animales y vegetales más diversos.

El médico y fisiólogo italiano Marcello Malpighi sería de los primeros en ver tejidos vivos

bajo el lente.

A Malpighi se le considera el fundador de la Anatomía Microscópica y uno de los más

importantes biólogos de todos los tiempos.

ENTRE 1623 Y 1723 (PADRE DEL MICROSCOPIO)

 18

Entre 1623 y 1723 vivió el hombre considerado padre del microscopio, el holandés Anton van

Leeuwenhoek. Fue el primero que vio y describió las bacterias, la levadura, la vida existente

dentro de una gota de agua y la circulación de corpúsculos sanguíneos en los vasos capilares

pues inventó el microscopio en las Provincias Unidas.

Leeuwenhoek llevó a cabo improvisadamente sus investigaciones, por afición, pasión hacia los

descubrimientos; estas investigaciones fueron dispersas y diversas según su insaciable curiosidad

En 1668

Anton van Leeuwenhoek tomando como referencia el invento de Hooke, fabricó un microscopio

al cual dotó de poderosos lentes de aumentos y empleando técnicas más efectivas, logró observar

todo lo visto por Hooke. Así con la aparición del microscopio óptico, observó microbios, sangre,

plumas, pólvora, pelos, insectos, minerales, fibras musculares, peces, espermios, semillas,

árboles y plantas. Observó también la placa dental compuesta por depósitos blandos con

microbios y restos de comida.

COMO HIZO EL MICROSCOPIO

Van Leeuwenhoek era un óptico, un tallador de lentes. Su habilidad radicaba en el pulido de sus

pequeños lentes, que montaba en estructuras metálicas, de bronce, plata y de oro. Eran

microscopios simples, pues sólo disponían de un lente, permitiendo un campo de visión muy

estrecho, el sistema de iluminación nunca lo comunicó. El microscopio de mayor aumento

conocido es el conservado en el Museo de la Universidad de Utrecht, capaz de aumentar la

imagen 275 veces, con un poder de resolución de 1,4 um. Sus microscopios que sumaban en total
 19

247 aparatos con 419 lentes se caracterizaban generalmente por tener objetivos de pequeño

diámetro y corta distancia confocal.

RESULTADOS DEL TRABAJO DE LEEUWENHOEK

 describió con gran detalle un mundo impensable hasta entonces y logró ser un hombre

reconocido en su momento por el resto de la sociedad. Su mejor conclusión fue la

negación de la generación espontánea, derivada del descubrimiento de los

espermatozoides, que constituirían la semilla humana, y de otras observaciones sobre la

reproducción en insectos, como la presencia de huevos en la hembra del piojo.

 Quedaría para períodos posteriores la relación de la presencia de los microorganismos en

los tejidos y líquidos humanos con la génesis y transmisión de las enfermedades, la

explicación de la fermentación, la putrefacción y otros procesos biológicos.

 Entre finales del siglo XIX y principios del siglo XX

Cuando se habla de los padres de la microbiología vienen a la mente los nombres de

Koch y de Pasteur.18 Se descubrieron muchos gérmenes responsables de enfermedades

infecciosas gracias a los trabajos de ambos y al impulso que le dieron a la Microbiología

entre finales del siglo XIX y principios del siglo XX, donde se destacan el aislamiento de

los agentes causales de gonorrea (Neisser, 1879), difteria (Klebs, 1883 y Loeffler,1884),

tétanos (Nicolaier, 1885 y Kitasato, 1889), neumonía (Fraenkel, 1886), meningitis

(Weichelbaun, 1887), ENTRE OTROS

 20

CAMBIO DEL ESTILO DE CONSTRUCCION DEL MICROSCOPIA

En esta época se lograron progresos en la óptica del microscopio que siguen siendo el

fundamento de la microscopía moderna, en cambio el estilo de su construcción y

estructura mecánica son casi los mismos.

 Amici en 1812, perfecciona las lentes e implanta la observación con inmersión al agua

 Brewster, en el mismo año usa la inmersión con otros líquidos con índice de refracción

más elevado

 En 1820 Chevalier introduce los objetivos compuestos y son perfeccionados por Joseph

Jackson Lister, en 1830, el inventor de las lentes apocromáticas.

 En 1866 Carlos Abbe establece el uso de objetivos apocromáticos mejor perfeccionados

junto a la técnica de la inmersión homogénea con aceite de cedro, descubierta antes por

Stephen y expone los fundamentos matemáticos que condicionan la formación de la

imagen en el microscopio compuesto en 1873 crea la subplatina y en 1899 los distintos

tipos de condensadores

EN LAS POSTRIMERÍAS DEL SIGLO XIX Y EN LOS INICIOS DEL XX

El microscopio ya se presenta en la forma con la cual lo relacionamos con los maestros

de la microbiología. Este instrumento va a tener el ya conocido pie en forma de herradura

que servirá de soporte para la platina, el condensador y el espejo.

 21

Kohler en 1904

Emplea las radiaciones ultravioletas, con un sistema de lentes de cuarzo, sustancia permeable a

las radiaciones de corta longitud de onda; marca con ello una nueva etapa en el estudio de

microorganismos cuyo tamaño los hacía invisibles a la observación con microscopio corriente.

En 1930 se crean los estativos de diferentes gamas. El portatubos cambió, al presentar una

estructura completamente nueva derivada de la forma parabólica. En lugar de la visual vertical

incómoda, se modificó y se adaptó un eje montado entre el pie y el portatubos, mediante un

ángulo visual fisiológico de 45 grados con relación a la superficie de la platina, que permitía una

gran mejora en la observación.

QUÉ PERMITIO EL PROGRESO DEL MICROSCOPIO

El progreso en sí estuvo dado por la creación de equipos más funcionales, por la simplificación

del manejo, en el sentido de adaptación cada vez mayor a las condiciones anatómicas y

fisiológicas del usuario; el microscopio pasó a ser un equipo tipo norma cuyas posibilidades de

adaptación a los deseos del usuario abarcaban toda una gama de posibilidades de aplicación,

desde los más sencillos análisis de rutina hasta los más complicados trabajos científicos.

Se sumaron la incorporación de la fuente de luz al pie, la disposición coaxial del mecanismo

para el enfoque aproximado (macro) y el de precisión (micro), así como los botones para el

movimiento en dos coordenadas de la platina cuadrada de movimiento en cruz, que permitió

desplazamientos de dos lados, de la platina deslizante y el revólver giratorio intercambiable.

 22

El desarrollo contiguo creó otros tipos de microscopios que utilizaban la fuente de luz visible

como el microscopio de polarización, de contraste de fases, de interferencia y campo oscuro o

los que usaban fuente de luz invisible como el de luz ultravioleta y gracias a los trabajos de

Max Knoll y Ernst Ruska el moderno microscopio electrónico

MICROSCOPIO ELECTRONICO

Gracias a los trabajos de Max Knoll y Ernst Ruska SE CREA el moderno microscopio

electrónico Se estima que este último tipo de microscopio, el electrónico, ha hecho posible

resolver el detalle celular a nivel molecular y ha permitido a los científicos poder observar las

estructuras detalladas de organismos procariotas y eucariotas; en el campo de la virología es

valiosísimo pues ha posibilitado la observación e identificación de los virus.

En este microscopio se produce una aceleración de los electrones al vacío hasta que su longitud

de onda es muy corta, una cienmilésima parte de la longitud de la luz blanca. Los rayos de esto

electrones a alta velocidad son enfocados en una muestra de célula y absorbidos o dispersados

por las partes de la célula para formar una imagen en una placa fotográfica sensible. Si se lleva

este procedimiento al límite es posible ver objetos tan pequeños como el diámetro de un átomo.

De hecho, puede aumentar los objetos hasta un millón de veces.

EN 1939: El primer microscopio diseñado por Ruska, fue lanzado al mercado por Siemens en

1939. Ello sirvió para que otros países se abocaran a esto y así aparecieron prototipos en los

Estados Unidos de América, Inglaterra, Francia, Canadá y Japón. En la microscopía la mejor

 23

resolución microscópica se obtiene usando la menor longitud de onda y un lente objetivo de la

mayor apertura numérica posible.

Tomado de: https://www.lifeder.com/linea-tiempo-microscopio/

 24

TIPOS DE MICROSCOPIOS QUE SURGIERON

En la microscopía en campo oscuro se utiliza el microscopio luminoso, empleando un

condensador cuya apertura numérica es mayor que la del objetivo así bloquea los rayos de luz

directos al igual que desvía la luz de un espejo al lado del condensador en un ángulo oblicuo. De

esta manera se crea un campo oscuro que contrasta contra los bordes destacados de los

microorganismos. Como los objetos luminosos contra fondo oscuro son percibidos por el ojo

más fácilmente, este tipo de iluminación para observación microscópica es útil para visualizar

flagelos bacterianos y bacterias espirilares mal definidas con la microscopía de campo claro y de

contraste de fase.

Utilidad: Este instrumento es utilísimo para el diagnóstico microbiológico de la bacteria

Treponema pallidum agente causal de la sífilis y de Leptospira interrogans causante de la

leptospirosis.

SE DIVIDE EN DOS

Los luminosos: son los que utilizan luz visible con el fin de hacer observable un espécimen.

Entre estos se encuentran el microscopio luminoso simple, compuesto por una sola lente de

aumento, de gran campo, que produce una imagen vertical, estas lentes son útiles para la

disección, para las mediciones y para el examen de reacciones de aglutinación, en microbiología

se usan en los contadores de colonias

 25

el luminoso compuesto: que consta de dos sistemas de lentes, el objetivo que forma una

diminuta imagen real invertida en el plano focal de otra lente y la lente ocular la cual magnifica

la imagen para que el observador pueda resolverla, pueden tener una o dos lentes oculares y se

denomina microscopio monocular o binocular respectivamente.

SE CONOCE QUE LA MICROSCOPÍA EN CAMPO ILUMINADO O CLARO es la más

usada para la observación de frotis coloreados, para examinar características morfológicas y la

movilidad de los organismos en preparaciones denominadas "gotas colgantes" o "en fresco".

El estereoscopio: otro tipo de microscopio compuesto, el estereoscópico es muy útil para

examinar las características de las colonias de bacterias, hongos, cultivos de tejidos y organismos

parásitos.

El microscopio de contraste de fases: matiza los tonos del gris claro al muy oscuro. Se

fundamenta en el hecho de que las ondas luminosas que pasan a través de objetos transparentes,

como las células, emergen en fases diferentes, depende de las propiedades de los materiales que

atraviesan. En 1934, Zernike desarrolló métodos ópticos para separar ondas luminosas incidentes

y difractadas, se amplifica así la diferencia de fase entre ellas. Un sistema óptico especial

convierte esta diferencia de fase en una diferencia de intensidad, de este modo, unas estructuras

aparecen más oscuras que otras, se utiliza para diferenciar las estructuras internas de células

vivas.
 26

Ventaja: tiene la ventaja de visualizar detalles en organismos vivos pues con el microscopio

ordinario lo usual es la observación de preparaciones de materiales muertos y tejidos.

El microscopio de fluorescencia:

 se basa en el principio de remoción de la iluminación incidente por absorción selectiva,

transmisión de la luz absorbida por la muestra y remitida con diferente longitud de onda.

 Los compuestos capaces de absorber luz de una determinada longitud de onda y de emitir

luz de mayor longitud de onda, se denominan fluorocromos. Diferentes fluorocromos son

utilizados: la auramina, la naranja de acridina, de uso en la tinción directa de

microorganismos, se utilizan en la detección de microorganismos en hemocultivos y para

la observación de bacilos acidorresistentes en frotis y otros como el isotiocianato de

fluoresceína pueden ser conjugados a anticuerpos y se emplean en técnicas conocidas

como inmunofluorescencia las que pueden ser directa e indirecta.

Inmunoflorescencia directa: utilizada en los laboratorios para identificar, de manera

relativamente rápida, antígenos virales en células de especímenes clínicos y para el diagnóstico

de agentes microbianos como: Bordetella pertussis, Legionella pneumophila, Streptococcus

pyogenes.etc

MICROSCOPIO ELECTRÓNICO
 27

De Transmisión: posee un cañón de electrones y produce una corriente de electrones

monocromáticos que mediante un sistema de lentes y condensadores, choca con la muestra, al ser

transmitidos parte de ellos y una lente objetivo la convierte en imagen, que es proyectada sobre

una pantalla de fósforo, para que el usuario pueda verla

Imagen tomada: https://www.uaeh.edu.mx/scige/boletin/prepa3/n1/m9.html#:~:text=El

%20microscopio%20nos%20permite%20observar,componentes%20y%20aprender

%C3%A1s%20a%20utilizarlo.

El electrónico de barrido: un cañón emite un rayo de electrones de alta energía que viaja hacia

abajo, iluminando la muestra, a través de una serie de lentes magnéticas, condensadores y

antenas, diseñadas para dirigir los electrones a un punto, golpeando la muestra, los electrones

secundarios quedan sueltos, en la superficie de la muestra, un detector cuenta los electrones y

envía las señales al amplificador, la imagen final se forma con el número de electrones emitidos

desde cada punto de la muestra, en blanco y negro y con carácter tridimensional.

 28

Imagen tomada: https://www.uaeh.edu.mx/scige/boletin/prepa3/n1/m9.html#:~:text=El

%20microscopio%20nos%20permite%20observar,componentes%20y%20aprender

%C3%A1s%20a%20utilizarlo.

El primero en crearse de este tipo fue el de transmisión el cual tiene muchas características

en común con el microscopio luminoso, de campo claro.

 29

https://es.scribd.com/doc/52686189/CUADRO-COMPARATIVO-DE-MICROSCOPIOS
 30

MATERIALES UTILIZADOS

El material utilizado en esta práctica está enfocado al estudio del microscopio y sus componentes

por ende el material principal es el microscopio que es la herramienta principal dentro de un

laboratorio y sus clasificaciones como el estereoscopio, microscopio luminoso, el microscopio de

contraste de fases, el microscopio de fluorescencia, microscopio de inmunoflorescencia directa,

microscopio electrónico de transmisión, el electrónico de barrido

Otros recursos que se usaron en la práctica fueron:

Equipo de cómputo –computador – tableta - Celular

Acceso a internet. Simulador Amrita

RESULTADOS Y DISCUSIÓN (CUESTIONARIO)

- Parte I: Conceptos e Identificación de las partes de un microscopio compuesto

a. Consultar los siguientes términos: abertura numérica, poder de resolución, dispersión e

índice de refracción.

Abertura numérica: En óptica, la apertura numérica (AN) de un sistema óptico es un

número adimensional que caracteriza el rango de ángulos para los cuales el sistema acepta luz.

Recíprocamente, también está relacionado con el ángulo de salida del sistema.

La apertura numérica brinda una indicación de la capacidad de colección de luz y poder de

resolución (a una distancia fija) de un objetivo.

 31

Poder de resolución: El poder de resolución es la distancia mínima a la que se pueden

discriminar dos puntos. Este límite viene determinado por la longitud de onda de la fuente de

iluminación, en este caso la luz visible

Grado de dispersión: El grado de dispersión (desenfoque) del punto de objeto es una medida de

calidad de un sistema de imagen. En sistemas de imagen incoherentes como los microscopios de

fluorescencia, los telescopios o los microscopios ópticos, los procesos de formación de la imagen

son lineales en poder y son descritos por teorías de sistemas lineales.

Índice de refracción: Se denomina índice de refracción a la relación entre la velocidad de la luz

en el vacío respecto a otro medio o material y se simboliza con la letra 'n'. El índice de

refracción de un material es una medida para saber cuánto se reduce la velocidad de la luz al

atravesarlo.

b. Visualizar los siguientes videos:

https://www.youtube.com/watch?v=brNPKVlX9cA

https://www.youtube.com/watch?v=ujUf7_yxUbM

- Parte II: Instrucciones para enfocar en un Microscopio compuesto

Animación Microscopía de Luz: acceder al siguiente link:

https://www.youtube.com/watch?v=ePoGUV7EFTU&feature=youtu.be

Responder las siguientes preguntas:

a. En la figura 1, identificar las partes principales del microscopio compuesto.

 32

Ocular
Cabezal

brazo
Revolver

Objetivo
Macrométrico
Platina
condensador
Micrométrico

Foco

Base

Figura 1. Microscopio compuesto

b. Cuáles son los pasos para enfocar una muestra.

Para enfocar debemos:

1. Poner la muestra en la pletina.

2. Ajustar la distancia interpupilar (separación entre ambos oculares); ver fotografía 1.

3. Seleccionar el objetivo de mínimo aumento,

4. Con el tornillo macrométrico (fotografía 2) ajustamos la altura de la pletina hasta que la

muestra esté enfocada.

 33

5. Usamos el tornillo micrométrico para un ajuste fino. A partir de ahora, cuando cambiemos de

objetivo, casi siempre con un ajuste micrométrico será suficiente.

c. Cuáles son los cuidados y recomendaciones para el buen uso del microscopio.

Consejos para utilizar el microscopio correctamente

CUIDADOS DEL MICROSCOPIO

1. Procure dejar su microscopio en un mismo sitio. En general, debe evitarse en lo más posible el

transporte diario o constante de cualquier aparato.

2. Cuando no esté en uso, mantenga el microscopio cubierto y protegido del polvo.

3. No toque el instrumento con manos sucias o grasosas.

4. Economice la vida de la lámpara, asegurándose de ejecutar la iluminación correcta tal como

se le ha enseñado. Si el diafragma del condensador está cerrado, ya podrá darle toda la intensidad

a la lámpara, gastándola innecesariamente, que no logrará mejor iluminación. Si no hace

contraste, tampoco verá nada.

5. No permita que líquidos, ácidos o aceites ensucien el microscopio.

6. Nunca utilice lentes de mayor aumento sin cubrir la preparación con un cubre objetos.

7. Nunca deje el objetivo de inmersión lleno de aceite. Use papel de lente, con movimientos

suaves y circulares para limpiarlo luego de usarlo.

8. Si falta uno o varios objetivos, tape inmediatamente el agujero con un tapón de rosca especial

para ello o con esparadrapo si no hay otra cosa.

 34

9. Muchos recomiendan xilol para limpiar las lentes mal cuidadas, con aceite o sucio resecado

sobre ellas. Es preferible, sin embargo, usar un poco de éter en vez de xilol para evitar despegar

las lentes ya que el xilol es disolvente de pegamento. Utilice un aplicador con algodón en la

punta humedecido en éter. Páselo por las lentes grasosas y limpie inmediatamente con papel de

lentes limpio.

CONSEJOS Y RECOMENDACIONES QUE PUEDES TENER EN CUENTA PARA

EVITAR DAÑAR TU MICROSCOPIO Y MANTENERLO EN BUEN ESTADO.

 Cuando vayas a utilizar el microscopio, asegúrate de que es encuentra en una superficie

estable y de que no hay posibilidad de que caiga o se deslice involuntariamente.

 Si tienes que desplazar el microscopio a otro sitio utiliza siempre tus dos manos. Agarra

el microscopio por su brazo y coloca tu otra mano debajo de su base para mantenerlo en

su posición normal.

 Asegúrate de cubrir siempre tus muestras con un cubreobjetos. Esto es necesario para una

buena preparación y también puede evitar que el objetivo y la muestra entren en contacto

si por error los acercas demasiado al ajustar el tornillo macrométrico.

 Nunca toques las lentes o partes ópticas de tu microscopio con los dedos. Tampoco

intentes limpiarlas soplando con la boca ya que puedes ensuciarlas con saliva. Si

necesitas limpiar tu microscopio sigue los consejos descritos 

 Cuando no estés utilizando el microscopio cúbrelo siempre con una funda. Esto evitará

que se acumule polvo en sus elementos ópticos y, en consecuencia, alargará su vida útil.

d. Realizar tabla comparativa entre microscopio compuesto y microscopio electrónico.

 35

Parte III: Instrucciones para enfocar en un Microscopio compuesto

Simulador @Amrita: Ejercicio práctico virtual para aprender a enfocar y visualizar las

diferencias de tamaño de enfoque: 10x, 40x (objetivos secos), 100x (objetivo de inmersión, el

cual se utiliza con aceite de inmersión). Seguir los siguientes pasos:

 36

1. Acceder al siguiente link: http://cbi-au.vlabs.ac.in/cell-biology-

1/Light_Microscope/experiment.html

2. En la pestaña de variables, seleccionar vista (hay dos opciones):

a. Supervisar: permite visualizar la imagen de la muestra en la pantalla que tiene articulada el

microscopio. (Figura 2).

Figura 2. Visualización imagen en pantalla

b. Binocular: permite visualizar la muestra de forma microscópica directamente desde el

microscopio. (Figura 3).

Figura 3. Visualización imagen directa a través del microscopio

3. Para el enfoque de la muestra en la pestaña de variables seleccionar binocular, seleccionar

lente (objetivo) 10x, luego 40x y 100x; este procedimiento previo a la selección del tipo de

muestra: célula epidérmica de cebolla y formas de microorganismos bacterianos. Para este

ejercicio de simulación debe maniobrar el sistema de encendido y apagado (system on/off), luz

on/off, intensidad de la luz (light intensity), giro a la derecha o izquierda (left and right turning) y

el zoom in/off.

a. Dibujar lo observado de célula epidérmica de cebolla en 10x, 40x y 100x.

 37

10x 40x 100x

b. Elegir una de las formas bacterianas y dibujar lo observado en 10x, 40x y 100x.
 38

10x 40x 100x

- Parte IV: Identificación de las técnicas y sustancias para el montaje de muestras

Las muestras para estudio se colocan sobre una lámina de vidrio llamada portaobjetos y en

preparaciones húmedas se requiere otra lámina de menor tamaño denominada

cubreobjetos, su función es proteger la muestra y también las lentes frontales de los

objetivos. Tanto la lámina portaobjetos como los cubreobjetos son transparentes.

a. Consultar las técnicas y sustancias para el montaje de muestras o preparaciones.

MATERIAL NECESARIO PARA PREPARAR LA MUESTRA

 39

El primer paso antes de empezar a preparar una muestra es asegurarnos de que disponemos de

todo el material que necesitaremos. Esto incluye siempre. Dependiendo del tipo de muestra,

también necesitaremos unas pinzas para su manipulación. En la mayoría de los casos

necesitaremos también una pipeta para hidratar la muestra y probablemente un tinte y papel

absorbente.

PASOS PARA PREPARAR UNA MUESTRA

Existen dos formas básicas de preparar una muestra para el microscopio: la preparación en fresco

o húmeda y la preparación en seco.

PREPARACIÓN EN FRESCO

La preparación en fresco es ideal para la observación de microorganismos o de tejidos biológicos

que requieren ser hidratados.

1) Si la muestra es líquida colocamos unas gotas de la muestra en el centro del portaobjetos con

la ayuda de una pipeta.

2) Si la muestra es sólida colocamos primero unas gotas de agua destilada o de solución salina

sobre el portaobjetos y a continuación un fragmento de la muestra con la ayuda de unas pinzas.

3)Sujetando el cubreobjetos por dos de sus lados, apoyamos otro de sus lados sobre el

portaobjetos de modo que forme un ángulo de aproximadamente 45 grados.

4) A continuación podemos soltar con cuidado el cubreobjetos de modo que quede colocado

sobre el líquido que hemos depositado anteriormente. (Mediante este procedimiento se evita la
 40

formación de burbujas dentro de la muestra. En caso de que hayan aparecido burbujas entre el

portaobjetos y el cubreobjetos será necesario repetir el procedimiento anterior.)

5) En caso de que haya un exceso de líquido alrededor del cubreobjetos podemos eliminarlo

mediante papel absorbente.

Las preparaciones en fresco mantienen la hidratación durante un periodo de

aproximadamente 30 minutos.

Si se requiere mantener la muestra hidratada durante un espacio de tiempo más largo pueden

sellarse los bordes del cubreobjetos con vaselina. En este caso se evita la evaporación del líquido

durante unas horas o incluso unos días.

PREPARACIÓN EN SECO

La preparación en seco es ideal para muestras que no necesitan hidratación. Esto incluye, por

ejemplo, un cabello, granos de polen, esporas, muestras de plantas, insectos, etc.

1)Si la muestra es totalmente opaca el primer paso consistirá en cortar primero una sección muy

fina de la muestra. Esto permitirá observarla en el microscopio mediante luz transmitida.

2) Colocamos la sección que hemos cortado en el centro del portaobjetos con la ayuda de unas

pinzas. Si la muestra tiene un cierto volumen es recomendable utilizar un portaobjetos con una

cavidad cóncava.

3) Para mantener la muestra fija en su sitio la cubrimos con un cubreobjetos. Esto evita también

que el objetivo llegue a tocar la muestra en caso de cometer algún error durante la manipulación

del microscopio.
 41

La ventaja de las muestras en seco es que no tienen problemas de deshidratación y pueden

mantenerse preparadas para una observación posterior.

PREPARACIÓN CON TINCIÓN

Existen distintas técnicas para aplicar una tinción que se adecuan a los distintos tipos de

muestras.

Si hemos preparado una muestra en fresco, podemos aplicar un tinte siguiendo los siguientes

pasos:

1) Depositamos unas gotas del tinte sobre uno de los bordes del cubreobjetos.

2) Colocamos papel absorbente al lado opuesto del cubreobjetos para forzar el movimiento del

tinte a través de la muestra.

3) Una vez la muestra ha absorbido el tinte retiramos el papel absorbente.

Los tintes permiten aumentar el contraste y facilitar la observación de algunos detalles concretos

de la muestra. Existen tintes de distintos colores y características adecuados para distintos tipos

de muestras.

Muestras preparadas

El principal objetivo de preparar una muestra es proteger al espécimen de una posible

degradación y pérdida de propiedades durante el tiempo que dura la observación.

 42

En algunos casos la muestra requiere un cierto nivel de hidratación y puede mantenerse en las

condiciones adecuadas durante solo unos minutos. En el caso de las muestras en seco, la

preparación puede mantenerse en su estado durante años y es posible realizar de nuevo una

observación posterior si es necesario.

b. ¿En la actualidad qué tipos de microscopios son los más utilizados en el área de ciencias

biológicas?

Los más usados en la actualidad son:

 1) Microscopio óptico.

 2)microscopio estereoscópico

 3) Microscopio electrónico.

 4) Microscopio de luz ultravioleta.

 5) Microscopio de luz polarizada.

 6) Microscopio de fluorescencia.

c. Visualizar el siguiente vídeo sobre cómo se preparan las muestras biológicas para

investigación: https://www.youtube.com/watch?v=g80cUh-J5UM. Una vez visto el video

definir biopreservación y cuáles son los pasos y cuidados que deben tenerse.

Biopreservación: son elementos que mantienen las características de cuando se extrajo de su

sistema y se denomina biopreservación, el objetivo que tiene es fijar la formologia o inhibir la

degradación celular y molecular, de la respuesta génica y proteica a la hipoxia.

 43

PASOS

1) saber el tipo de muestra

La preservación depende del tipo de muestra y el objetivo el cual está destinada la muestra,

encontramos:

Liofilización: extracción del agua de la muestra

Fijación química: se utilizan industrias químicas

Fijación de frio: para esta biopreservación puede ser:

- refrigerado (4°c),

-congelado (-20°)

-ultracongelado ( inferior a -70°c) y la diferencia va encontrarse en la temperatura

2) una vez extraída la muestra debe pasar por un proceso de ultra congelación

La ultra congelación: miniza el cambio genético y proteico, además de su contaminación,

permite la formación de cristales pequeño tamaño minimizando el daño tisular y celular, se

recomienda este tipo porque congelar implica grandes cristales y daño tisular y celular.

En un laboratorio se puede hacer de dos formas:

Una con el hielo seco: se le adiciona etanol, se congela la muestra con la adición de hielo seco

Y la otra con nitrógeno líquido: que al llegar a -196°c se congela la muestra debido al vapor

de este y luego se introduce la muestra en el nitrógeno líquido

 44

3) Luego se pone en viales de polipropileno con rosca interna y externa

4) Una vez teniendo las muestras congeladas se deben almacenar en congeladores o en

arcones en donde se ven los racks donde guardaríamos las muestras catalogadas o sino sumergir

las muestras en tanques de nitrógeno líquido directamente y estos tanques se guardan en cámaras

frías, es algo costoso

Recomendación : Para realizar este proceso de ultra congelación requerimos de guantes que

aguanten a bajas temperaturas,mascara protectora y unas pinzas y en el nitrógeno líquido se

necesitan dispositivos que aguantes -196°c denominados tanques de nitrógeno

CONCLUSIONES

 El desarrollo y evolución del microscopio constituye un valioso recurso usado por los

profesionales para demostrar científicamente hipótesis y obtener descubrientos para el

desarrollo en el campo científico, medicinal, microbiológico y celular, abriendo las

puertas para entender con mejor perfección el mundo microscópico

 Es justo reconocer el papel de los investigadores de aquellas épocas los cuales, a pesar de

que los instrumentos ópticos no eran lo suficientemente poderosos como para reconocer

la naturaleza íntima de la célula, lograban llegar con muchas dificultades a deducciones, a

conclusiones atinadas
 45

 La invención del microscopio fue creada por la continua investigación y mejoras en cada

época, aunque oficialmente se le conoce el padre de la microbiología a Anthony Van

Leeuwenhoek, fueron muchos más autores que colaboraron con el desarrollo del

microscopio

 Los pasos para conseguir la preservación de la muestra en un laboratorio están ligados a

tener la vestimenta y materiales necesarios a laborar, saber la razón de ser de la muestra,

pasar por un proceso de ultra congelación, envaso y mantenimiento de este.

 Los operarios de un laboratorio deben conocer las funciones, uso y partes de un

microscopio para visualizar con mayor precisión una muestra

 En el microscopio, depende la potencia que tenga, me permite visualizar la muestra en

dimensiones 10x, 40x, 100x y hasta más según el tipo de microscopio a usar.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

 Prieto, P. B. (2021c, marzo 10). Las 14 partes de un microscopio (y sus funciones).

medicoplus. https://medicoplus.com/ciencia/partes-microscopio

 Editorial. (2013, 18 marzo). Microscopio. Importancia una guía de ayuda.

https://www.importancia.org/microscopio.php

 Bolívar, G. (2020, 31 julio). Línea del tiempo del microscopio: evolución desde los

lentes. Lifeder. https://www.lifeder.com/linea-tiempo-microscopio/

 Hidalgo, U. A. D. E. (s. f.). El Microscopio: Equipo fundamental en el Laboratorio de

Biología. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo.

 46

https://www.uaeh.edu.mx/scige/boletin/prepa3/n1/m9.html#:%7E:text=El

%20microscopio%20nos%20permite%20observar,componentes%20y%20aprender

%C3%A1s%20a%20utilizarlo.

 Matos, E. (2011, 10 abril). CUADRO COMPARATIVO DE MICROSCOPIOS. Scribd.

https://es.scribd.com/doc/52686189/CUADRO-COMPARATIVO-DE-MICROSCOPIOS

 colaboradores de Wikipedia. (2020a, febrero 5). Apertura numérica. Wikipedia, la

enciclopedia libre. https://es.wikipedia.org/wiki/Apertura_num%C3%A9rica

 Apertura Numerica. (s. f.). MICROSCOPYU.

http://www.tecnicaenlaboratorios.com/Nikon/Info_apertura_numerica.htm

 Megías, M. P. M. (2020, 24 enero). Técnicas Hitológicas. 6. Observación. Microscopio

óptico. Atlas de Histología Vegetal y Animal. Atlas de histología vegetal y animal.

https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/6-optico.php

 colaboradores de Wikipedia. (2020g, noviembre 20). Función de dispersión de punto.

Wikipedia, la enciclopedia libre. https://es.wikipedia.org/wiki/Funci

%C3%B3n_de_dispersi%C3%B3n_de_punto#:%7E:text=El%20grado%20de

%20dispersi%C3%B3n%20(desenfoque,de%20un%20sistema%20de

%20imagen.&text=La%20imagen%20de%20un%20objeto,linear%20en%20el%20campo

%20complejo.

 Estil Creatiu. (2018, 3 enero). Índice de refracción. Òptica Bogas.

https://opticabogas.com/indice-de-refraccion/

 Ollero Gómez, J. (2021, 15 mayo). ¿Cómo enfocar una muestra? laboatlas

Microfotografia. https://laboatlas.com/como-enfocar-una-muestra/
 47

 MANUAL DE PARASITOLOGÍA. (1987). Cuidados del microscopio. Ash L and Orihel

T. Parasites:

http://www.bvs.hn/Honduras/Parasitologia/ManualParasitologia/flash/files/res/downloads

/page_0037.pdf

 Fernandez, J. U. L. I. E. T. A. (s. f.). cuadro comparativo de microscopio optico y

electronico - Búsqueda de Google | Bio. Pinterest.

https://co.pinterest.com/pin/694046992558360248/

 Preparación de muestras para microscopio óptico. (2021, 1 enero). Mundo Microscopio.

https://www.mundomicroscopio.com/preparacion-de-muestras/

 PCE instruments. Tipos de microscopios. PCE. https://www.pce-

instruments.com/f/espanol/media/microscopio-info-tipo-construccion.pdf

 Lera, S. R. M. (2015, agosto). Historia del microscopio y su repercusión en la

Microbiología. scielo. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1727-

81202015000200010