BIOLOGÍA

GUÍA DE LABORATORIO No. 1

TEMA: ESTUDIO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO

INTRODUCCIÓN

La palabra microscopio proviene del griego micros (pequeños) y skopein

(mirar), el microscopio es un instrumento diseñado para hacer posible la observación
y el examen de muestras muy pequeñas (menores de una décima de milímetro), los
cuales a simple vista no podrían ser observados por el ojo humano. Muchos de los
avances en biología, medicina y química no se hubieran logrado si antes no se
hubiera inventado el microscopio. Los diferentes tipos de microscopios que existen
se clasifican en ópticos y electrónicos, los primeros utilizan luz visible y los segundos
haz de electrones para localizar las imágenes de las muestras.

El microscopio compuesto es un tipo de microscopio óptico, que consta de

dos partes principales: parte mecánica y parte óptica.

1. Parte Mecánica. Son las siguientes:

a) Pie o Base: parte inferior del microscopio, sostiene en si la totalidad del mismo.

b) Brazo ó Asa: especie de mango inclinado del cual salen tanto la platina como el
tubo del microscopio. El microscopio, se toma con las dos manos, una en el pie y
otra en el asa para transportarlo.

c) Revólver: lleva varios objetivos intercambiables y permite adaptar éstos al tubo

del microscopio. Mediante movimientos giratorios permite cambiar los objetivos, el
movimiento se hace siempre en el sentido de las manecillas del reloj.

d) Platina: plancha horizontal donde se coloca la muestra.

e) Pinzas: sujetan al portaobjetos.

f) Tornillo Macrométrico: hace movimientos rápidos del tubo y con éste se localiza
la imagen.

g) Tornillo Micrométrico: hace movimientos mínimos del tubo y es el que da la

nitidez a la imagen.

Algunos microscopios tienen además un carro que contiene las pinzas. El

carro posee un tornillo superior que permite al portaobjetos, sujeto por la pinza, se
mueva hacia adelante y atrás, y un tornillo inferior que permite los movimientos de
un lado a otro. Si el microscopio no tiene carro, los movimientos se realizan
colocando los dos dedos pulgares a la orilla de cada extremo del portaobjetos.
2. Parte Óptica. Son las siguientes:

a) Objetivos: lentes colocados en el revólver, pueden ser 2, 3 ó 4 lentes. Éstas

llevan marcados números como 4X, 10X, 40X, etc... que indican el aumento en
diámetro que dan dichas lentes. Estas lentes dan una imagen real, invertida y de
mayor tamaño que la muestra.

b) Ocular: lente en la parte superior del tubo, generalmente aumenta un diámetro de

10 veces y por eso lleva marcado 10X, aunque bien hay de 15X, etc… Esta lente da
una imagen virtual, aumentada de la imagen que se recibe del objetivo.

c) Tubo del Microscopio: Contiene un conjunto de prismas que conduce la luz

hasta el ocular. Lleva en la parte inferior el revólver con los objetivos, y en la superior
los oculares.

d) Iluminador o Lámpara: es la fuente de luz.

e) Diafragma: su función es regular la entrada de luz, ampliando o disminuyendo la

abertura por donde pasa la luz. Está unido al condensador, sistema de lentes que
permite concentrar los rayos de luz que provienen de la fuente e iluminar la
muestra.

Funciones del Microscopio.

1. Poder de Resolución: Se define como el poder de separar las imágenes de los

objetos que se encuentran muy próximos entre sí. El poder de resolución del ojo
humano es entre 0,1 a 0,2 mm (100 a 200 μm), lo que significa que sólo hasta esta
distancia puede ver dos objetos separados. Los mejores microscopios compuestos
tienen un poder de resolución de 0.2 μm, o sea es aproximadamente 1000 veces
mayor que el ojo. La resolución depende de la longitud de onda de la fuente
luminosa, el espesor del espécimen, la calidad de la fijación y la
intensidad de la coloración de la muestra.

2. Poder de Amplificación o Magnificación: Se define como el poder de amplificar

o aumentar las imágenes de los objetos que son vistos al microscopio. La ampliación
de las imágenes se determina multiplicando el lente objetivo por el lente ocular. Ej:
objetivo en 40X y ocular en 10X , la imagen sufre un aumento en diámetro de 400 X.

OBJETIVOS

1. Conocer del microscopio compuesto:

 Las partes que lo componen y el funcionamiento de cada una de ella.
 Su manejo, para realizar el enfoque de una muestra de interés.
 Sus funciones de resolución y amplificación.
2. Practicar el uso del portaobjetos y el cubreobjetos, para preparar "placas" con las
muestras que se observaran al microscopio.
MATERIALES

Microscopio compuesto, letra "e" (impresa), cabellos, agua, pañuelo o toalla de

mano.

Retirar de Bodega de Biología: 2 portaobjetos y 2 cubreobjetos.

PARTE PRÁCTICA

I. Identificación de las Partes del Microscopio:

Basándose en la introducción de esta guía y de la demostración del profesor(a)

identifique en las figuras las diferentes partes mecánicas y ópticas del microscopio
compuesto.

¿Cuál de las partes del microscopio mencionadas es la que se utiliza para localizar
las imágenes? ________________________________.
II. Manejo del Microscopio

A. Para uso del Microscopio

- Se transporta siempre con las dos manos, una por debajo de la base o pie y la otra
en el brazo o asa.

- Se coloca alejado del borde de la mesa y de los materiales que utilice.

- Si los lentes se encuentran sucios no lo limpie con el pañuelo o los dedos. Nota:
las lentes deben limpiarse únicamente con un papel especial llamado papel de seda.

Las muestras que se preparan en los portaobjetos, deben hacerlo sobre la mesa de
trabajo y nunca sobre la platina del microscopio.

B. Para preparar las placas:

1. Placa de letra e: Ponga la letra "e" (en posición como se lee), al centro del
portaobjetos, agregue una gota de agua y colóquele encima el cubreobjetos.

2. Placa de cabellos: Ponga en el centro del portaobjetos dos hebras de cabello de

distinto color, cruzados formando una X, agregue una gota de agua y colóquele
encima el cubreobjetos.

C. Para colocar las placas o muestras:

1. Ponga la placa de letra "e" sobre la platina ubicando la muestra (letra e) en

dirección a la abertura de la platina, cuide siempre que la platina se mantenga seca.

2. Sujete la placa por el portaobjetos con ambas pinzas.

D. Para localizar las imágenes:

1. Asegúrese que el microscopio esté en posición de descanso, el cual es:

a) Con el objetivo de menor aumento (4X ó 10X) en posición de enfoque. Si tiene

que mover los objetivos recuerde hacerlo en dirección de las manecillas del reloj.

b) Que el tubo del microscopio esté completamente hacia abajo, si no está así,
bájelo accionando el tornillo macrométrico hasta que el objetivo llegue al tope.

2. Encienda la luz, ésta sólo debe estar encendida al momento de observar la

muestra y debe permanecer apagado mientras el microscopio no este en uso.

3. Mire a través del lente ocular, observará un círculo iluminado que se denomina
campo de observación. Suba el tubo del microscopio moviendo despacio el tornillo
macrométrico hasta que usted vea la imagen en el campo de observación (a veces
la imagen se logra ver sin subir el tubo).

4. Si la imagen se ve turbia, mueva el tornillo micrométrico hasta que obtenga una

imagen clara y nítida.

Si la imagen está muy oscura o muy clara rectifique la cantidad de luz con el
diafragma.

5. Después de observar claramente la letra e, coloque sus dos pulgares en cada

extremo del portaobjetos y observando a través del ocular muévalo a cualquier
dirección.

6. Compare como se ve la letra a través del microscopio y a simple vista en cuanto:

¿Cuál poder del microscopio permite ver la letra grande?

____________________________

¿Cuál es el aumento total de la letra vista al microscopio? ______________

¿Cuál poder del microscopio permite distinguir una impresión discontinua de la letra,
respecto a la impresión continua que se ve a simple vista: _________________

¿Qué diferencia hay entre la imagen que se observa con el lente ocular y la que se
observa con el lente objetivo?

E. Para enfocar con objetivos de mayor aumento:

Aunque a usted le pidan en una práctica observar una muestra con él objetivo de
40X u otro mayor, " se deberá primero localizar la imagen con el objetivo de
menor aumento, para pasarlo después al de mayor aumento" para calcular el
aumento total de la imagen observada se multiplica el valor del lente ocular por el
valor del lente objetivo.
Procedimiento para enfocar una imagen con objetivos de mayor aumento:

1. Asegúrese que la muestra esté en el propio centro del campo de observación.

2. Cambie el objetivo a 40X ó 45X girando siempre en el sentido de las manecillas

del reloj.

3. Al observar por el ocular vera que se ha perdido la imagen. Para volver a obtener

la imagen, mueva sólo el micrométrico hasta que vuelva aparecer la imagen, "nunca
toque el macrométrico" porque perderá el enfoque de la imagen y tendrá que
volver a empezar de nuevo.
4. Rectifique con el diafragma la cantidad de luz, ya que a mayor aumento la
iluminación es menos brillante, por lo que se tiene que abrir el diafragma para
aumentar la luz.

Al observar la letra en mayor aumento usted ya no observará la letra entera, sino

sólo una parte de ella, esto se debe a que mayor aumento menor es el campo de
observación. Determine de cuánto es ahora el aumento total de la letra:_________

F. Para cambiar las placas:

1. Gire el revolver hasta el objetivo de menor aumento y retire la placa con la letra
"e". Luego coloque la placa con los cabellos, buscando que el cruce de los cabellos
este ubicado en dirección a la abertura de la platina. Observe los cabellos a 40X o
45X. Nota: Si se pierde la imagen vuelva de nuevo a hacer el enfoque.

2. Ahora compruebe que el poder de resolución del microscopio resuelve a 2

profundidades, para ello observando a través del microscopio mueva el
micrométrico y verá que si está más claro uno de los cabellos el otro se ve turbio y
viceversa. Esto significa que la profundidad enfocada es en la que está el cabello
que se ve claro.

G. Para guardar el Microscopio:

1. Apague el microscopio.

2. Deje el microscopio en posición de descanso; ó sea el tubo del microscopio

totalmente bajo y el objetivo de menor aumento en posición de enfoque.

3. Desconecte y enrolle el cordón sobre la base del microscopio.

4. Lave y limpie cuidadosamente el portaobjetos y cubreobjetos y séquelos con un

pañuelo limpio.

NOTA: Antes de abandonar el Laboratorio asegúrese que su mesa de trabajo quede

completamente limpia.

BIBLIOGRAFÍA
Arraiza, N.; Viguria, P.M.; Navarro, J. y Ainciburu, A. s.f. MANUAL DE
MICROSCOPIA; historia, descripción y uso del microscopio óptico. Auxilab, S.L.55 p.