UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

Curso: Laboratorio de Microbiología General

Docente: Maribel Huatuco Lozano

Laboratorio 6: “Preparación de medios de cultivo”

INTEGRANTES:

Cardoso Moreno, Alisson

Fernández Anchivilca Franklin Brani
Quiñones Rivera, Deysi Martha
Quiñones Valverde, Edgard Arturo
Villacorta Ramos, Sonia Karina

Sección: “C”

Lima, Perú
2019
pág. 1
 Índice

I. Introducción 3
II. Objetivos 4
III. Marco Teórico 4
2.1 Clasificación de los medios de cultivo 4
2.2.1 Según su origen: 4
2.2.2 Según su consistencia 5
2.2.3 Según su composición 5
IV. Materiales 10
V. Procedimiento 13
VI. Cuestionario 17
VII. Resultados y discusiones 20
VIII. Conclusiones 24
IX. Bibliografía 25

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 I. Introducción

Se entiende por medios de cultivos a los alimentos o nutrientes en el que crecen los

microorganismos, en este caso bacterias. Para conseguir un medio de cultivo óptimo es

necesario tener condiciones adecuadas de temperatura, grados de humedad, presión de

oxígeno, grados de acidez o alcalinidad. Debe tener como mínimo carbono, hidrógeno,

oxígeno y sales inorgánicas.

Los medios de cultivos se pueden clasificar de acuerdo a su consistencia en líquidos,

sólidos y semisólidos, y según su composición nutricional en enriquecidos, de

enriquecimiento, sintéticos, generales, entre otros. Los medios de cultivos, además deben

tener ciertos requisitos o condiciones para poder permitirle a los microorganismos su

desarrollo, de ahí que la constitución de estos deben tener los suficientes nutrientes y

sustratos que le brinden condiciones para realizar sus funciones metabólicas.

Las técnicas de cultivos bacterianos, nos permiten aislar un tipo de bacteria específico de

una fuente natural, incrementar su número de poblaciones o mantener en condiciones

estables el cultivo, así como cuantificar el número de bacterias que se encuentran en el

material de estudio.

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II. Objetivos

⮚ Identificar las clases de medios de cultivo.

⮚ Preparar medios de cultivo líquidos.

⮚ Identificar los medios de cultivo para los microorganismos.

III. Marco Teórico

Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo de

microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe

sembrar sobre el medio de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos van

a crecer y multiplicarse para dar colonias. Los microorganismos son los seres más

abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones extremas de pH, temperatura y tensión

de oxígeno, colonizando una amplia diversidad de nichos ecológicos. Entre los

requerimientos más importantes para su desarrollo están el carbono, el oxígeno, nitrógeno,

dióxido de carbono e hidrógeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del aporte extra

de factores de crecimiento específicos en forma de suero, sangre y extracto de levadura

entre otros. (Dominguez, 2018)

2.1 Clasificación de los medios de cultivo

2.2.1 Según su origen:

a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o

vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición química no se

conoce exactamente.

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b) SINTÉTICOS: son los medios que contienen una composición química definida

cualitativamente y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.

c) SEMISINTÉTICOS: son los sintéticos a los que se les añaden factores de crecimiento

bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura.

2.2.2 Según su consistencia

a) LÍQUIDOS: se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa.

b) SÓLIDOS: se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo) a razón de

15g/litro. El agar es una sustancia inerte polisacárido (hidrato de carbono) que se extrae de

las algas. Como esta sustancia no es digerida por las bacterias no constituye ningún

elemento nutritivo. Este conjunto convenientemente esterilizado puede ser vertido en placas

de Petri o en tubos de ensayo y presentan la posibilidad de aislar y diferenciar bacterias,

"procesos que antes no eran posibles en medio líquido". (Aponte Salgado, 2016)

c) SEMISÓLIDOS: contienen 7,5 g de agar /litro de caldo. Se utilizan para determinar la

motilidad de las especies en estudio. Actualmente se encuentran disponibles

comercialmente con el agregado de agar.

2.2.3 Según su composición

A causa de los requerimientos químicos del mundo microbiano, a veces es necesario

agregar o eliminar componentes químicos del medio.

a) COMUNES O UNIVERSALES: su finalidad es el crecimiento de la mayor parte de los

microorganismos poco existentes. Es el medio más frecuentemente utilizado para mantener

colonias microbianas. Por ejemplo: agar común o caldo común.

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b) ENRIQUECIDOS: están compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al

cual se le puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos, por

ejemplo: sangre, suero, líquido ascítico, etc. Se utiliza para microorganismos que tienen

grandes exigencias nutricionales.

c) SELECTIVOS: son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando las

condiciones físicas del medio o añadiendo o suprimiendo componentes químicos

específicos con el fin de inhibir el crecimiento de especies químicas cuyo crecimiento no

interesa. Este tipo de medio sólo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e

inhibiendo el de otros. Se utiliza para seleccionar y aislar microorganismos a partir de

poblaciones mixtas. Por ejemplo Agar salado-manitol o Chapman (permite el crecimiento

de ciertos estafilococos).

Entre los factores selectivos que alteran las condiciones del medio tenemos:

⮚ Cambio de pH: por ejemplo agregando ácido acético para favorecer el crecimiento

de Lactobacillus (pH final: 5,4 que es hostil para la mayoría de las especies que

crecen entre 6,5 y 7,2). Los hongos crecen entre pH 4 y 6 y S. faecalis a pH 9,6.

⮚ Cambio de temperatura: la mayoría de las bacterias crece óptimamente entre 20º

C y 40º C. Los cultivos típicos de S. Faecalis requieren 60º C de temperatura y los

de Listeria son capaces de desarrollarse y crecer a 4º C.

⮚ Alteraciones osmóticas: se acrecientan las propiedades osmóticas un medio con el

agregado de cloruro de sodio. Estos medios intensifican la selección de bacterias

halófilas como Staphylococcus spp. (7,5%).

⮚ Ajuste en la tensión de oxígeno: es importante en la selección de aerobios y

anaerobios.

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 ⮚ Ajuste en la tensión de anhídrido carbónico: muchos patógenos importantes

pueden ser cultivados a menos que se eleve la tensión más allá de la atmosférica.

Entre los factores que inhiben el crecimiento de bacterias indeseables tenemos:

⮚ Antisépticos: sustancias antibacterianas inespecíficas que pueden actuar como

inhibidores. Por ejemplo: el medio de cultivo comercial S - S (Salmonella -

Shigella) que contiene verde brillante (inhibe las bacterias grampositivas) y sales

biliares (que inhiben un gran número de gramnegativas menos enterobacterias).

Otro ejemplo es el medio de Mc Conkey que contiene cristal violeta (inhibe las

grampositivas pero no las enterobacterias).

⮚ Antibióticos: sustancias antibacterianas específicas que impiden el crecimiento de

aquellos microorganismos que no nos interesa que crezcan en ese medio. Un

ejemplo es el medio de Thayer - Martin con VCN (vancomicina, colistina y

nistatina) que se utiliza para el aislamiento de gonococos. La penicilina en una

concentración de 5,50 unidades/ ml inhibe la mayoría de las grampositivas. Otro

ejemplo es el medio de Sabourand - cloranfenicol para el aislamiento de Cándida

albicans.

d) DIFERENCIALES: son medios de cultivos que nos permiten distinguir entre varios

géneros y especies de microorganismos. Por ejemplo si al medio se le ha añadido un

carbohidrato y un indicador y la bacteria que se cultiva es capaz de fermentar dicho

carbohidrato, se produce una acidificación del medio con el consiguiente viraje de color

del indicador por el cambio de pH. El citrato de Simmons es un medio cuya única

fuente de carbono es el citrato sódico, entonces en él solo crecerán las bacterias capaces

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de desarrollarse utilizando como única fuente de carbono ese componente. A menudo la

separación se basa en la diferencia de color de las colonias aisladas, como en el agar

con azul de metileno - eosina que permite diferenciar E. coli (colonias oscuras y de

brillo metálico) de Enterobacter aerogenes (colonias rosadas de centro azul sin brillo).

Estos dos microorganismos en agar nutritivo producen colonias de color gris blancuzco.

Suelen ser a la vez selectivos, por lo tanto solo crecerán determinadas bacterias (pueden

ser dos o más tipos) que al actuar sobre alguno de los componentes específicos del

medio, demuestran algunas de sus propiedades o características y nos permite

diferenciar entre ambos tipos. (Guerrero, 2017)

e) DE ENRIQUECIMIENTO: son medios líquidos que contienen un agente que

inhibe las especies no deseadas pero que favorece el crecimiento irrestricto del agente

infeccioso. El medio de Muller - Kauffman, permite el crecimiento de Salmonella

inhibiendo a su vez el de numerosos coliformes. Esto es de gran importancia ya que en

ciertas muestras, por ejemplo fecales, el agente infeccioso (Salmonella) es frágil y

puede ser superado en número por agente bacterianos indígenas como E. coli; por lo

tanto antes de realizar las pruebas de laboratorio es necesario aumentar su número con

respecto a ésta en un caldo de enriquecimiento. Ejemplo de este tipo son los caldos de

tetrationato y selenito. El agua de peptona alcalina se utiliza para Vibrio cholerae. El

enriquecimiento es una técnica que utiliza un medio selectivo líquido para permitir el

desarrollo de un microorganismo a partir de una muestra que contiene una gran

variedad de microorganismos. Así, aquellos microorganismos para los que el ambiente

sea más favorable crecerán más que los otros y finalmente serán predominantes. (Prada

Gomez, 2018)

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f) DE TRANSPORTE: son utilizados para asegurar la viabilidad de la bacteria sin

multiplicación significativa de los microorganismos desde el momento de su extracción

hasta su posterior estudio. Se utilizan generalmente cuando las muestras deben ser

enviadas de un laboratorio a otro. Se recomienda un límite de dos horas desde la

recolección de las muestras y su estudio en el laboratorio, pero este límite de tiempo es

superado (frecuentemente cuando se trata de muestras tomadas en un consultorio). Esta

demora hace necesario el uso de medios de transporte adecuados. Los medios de

transporte más frecuentemente utilizados son los de Stuart, Amies y Carey - Blair.

Existe una unidad descartable de cultivo de transporte llamada Culterette que consiste

en un tapón estéril de poliestireno y una ampolla en la parte inferior que se rompe

cuando se ejerce presión liberando el medio de transporte de Stuart alrededor del

extremo del tapón impregnado en la muestra. Hasta hace algunos años los componentes

orgánicos mencionados debían ser obtenidos por el microbiólogo y el medio de cultivo

se preparaba en el laboratorio. Actualmente se dispone comercialmente de la mayor

parte de los medios e incluso de sus componentes adicionales. Un gran número de

medios de cultivo usados en el laboratorio de microbiología son mixtos, es decir que

tienen como finalidad la de varios grupos de los mencionados, por ejemplo, el agar S- S

es selectivo (pues tiene un inhibidor: el verde brillante) y es a la vez un medio

diferencial (lleva lactosa y un indicador) que permite diferenciar las bacterias

fermentadoras o no de dicho polisacárido. El medio de Thayer y Martin para Neisseria

es un medio enriquecido (contiene plasma) y es selectivo (tiene 3 antibióticos

inhibidores de la flora bacteriana y fúngica: colistina, vancomicina y nistatina).

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IV. Materiales

4.1 Materiales:

Material Cantidad Imagen

Botellas de vidrio con 1 (por grupo)

boca ancha

Pabilo 1

Autoclave 1

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Pipeta con agua destilada 1

Balanza Analítica 1

Luna de reloj 1

Varilla de vidrio 1

Peptonised Milk 1

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 Agar Mac Conkey 1

Agar Manitol salado 1

Agar Citrato 1

Agar Úrea 1

V. Procedimiento

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1. Procurar tener puesto todos los implementos de seguridad necesarios para evitar

la contaminación del medio o de la persona.

2. Pesar 0.6 para el medio de cultivo del agua peptonada en una luna de reloj

evitando la inhalación o cualquier otra acción que pueda afectar este proceso.

Balanza electrónica

3. Teniendo los ingredientes ya pesados y separados se añade agua destilada hasta

obtener la medida deseada de 120 ml. Una vez medido se transfiere toda la

muestra a una botella previamente esterilizada.

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 Preparación del medio.

4. Transferir 12 ml de caldo ya frio a cada uno de los tubos utilizando la pipeta,

teniendo en cuenta de estar cerca al mechero.

Vertimiento de medio a tubos

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 5. Esperar un tiempo hasta que los tubos enfríen y taparlos con papel aluminio,

rotular cada uno evitando confusiones y poniéndolos en un recipiente también

envuelto con papel aluminio.

Enfriado de tubos de ensayo.

6. Ponerlo dentro de una bolsa y llevarlo al refrigerar a una temperatura de 4 °C

por 7 días y anotar los resultados obtenidos.

Agrupamiento de tubos para refrigerado.

EXPERIENCIA 1:
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 Medio de cultivo enriquecido.
¿En qué casos se utiliza?
Se utilizan comúnmente para la cosecha de diferentes tipos de

microbios que están presentes en la muestra. En general el uso de los

medios de enriquecimiento se utiliza para determinar ausencias de un

microorganismo determinado, o detectar si tengo alguno pero está en

muy baja proporción.

EXPERIENCIA 2:
Medios de cultivo selectivo.

¿En qué caso se utiliza?

Un medio selectivo es un medio de cultivo en el que sólo puede crecer un tipo

de microorganismo (hongos, bacterias entéricas, protozoos...).

Un ejemplo de medio selectivo sería usar un medio rico en un antibiótico.

EXPERIENCIA 3:
Medio de cultivo de enriquecimiento.

- Caldo nutritivo:

¿En qué caso se utiliza?

Es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy

útil porque permanece sólido incluso a relativamente altas temperaturas. Además, el

crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor

las colonias pequeñas.

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 - Caldo peptonado:

¿En qué caso se utiliza?

Utilizado como diluyente y para el enriquecimiento bacteriano, a partir de alimentos y otros

materiales de importancia sanitaria

VI. Cuestionario

1. ¿Cuáles pueden ser los defectos en la preparación y manipulación de los medios de

cultivo?

❖ Crecimiento de microorganismos no deseados en la muestra.

❖ La mala esterilización cambia los resultados esperados.

❖ Mala calidad del medio o el agua, causa cambios en las muestras.

❖ El pH medido incorrectamente.

❖ El agar mal disuelto o incompleta mezcla de los ingredientes.

2. ¿Cuáles son los métodos de conservación de los medios de cultivos?

En general los medios preparados se guardan:

✔ En la heladera no más de tres meses.

✔ A temperatura ambiente no más de un mes en condiciones que impidan su

composición sea modificada.

Los métodos utilizados para la conservación: Resiembra periódica, Liofilización,

Ultracongelación con nitrógeno.

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3. ¿Para qué, cómo se interpreta y de qué está compuesto los medios de Hugh y
Leiftson?

❖ Medio de Hugh / Leiftson: Creado para evidenciar la importancia del significado

taxonómico del metabolismo oxidativo-fermentativo de los hidratos de carbono por

las bacterias Gram negativas.

Está compuesta por tripteína, cloruro de sodio, fosfato dipotásico, azul de bromotimol,

agar, con un pH final a 7,1.

Características: medio de cultivo deshidratado de color blanco verdoso, homogéneo libre,

deslizamiento del medio del cultivo preparado color verde azulado.

4. ¿Cuáles son las condiciones físicas que se deben tener en cuenta para la preparación
de medios de cultivo con la finalidad del crecimiento de microorganismos?

Las condiciones físicas importantes serían:

✔ Temperatura: Los gérmenes crecen mejor a temperatura próximos al 27℃.

✔ Humedad: La mayoría de microorganismos crecen en un pH aproximado neutro.

✔ Nutrientes: Los gérmenes para multiplicarse, requieren nutrientes de los alimentos y

por ellos es más fácil el crecimiento microbiano.

5. ¿Para qué, cómo se interpreta y de qué está compuesto los medios de Falkow y de
Davis?

El medio se Falkow: Medio para determinar la capacidad de descarboxilación en las

enterobacterias, su nombre completo de este medio es: Caldo Base Descarboxilasa según

Falkow, es de consistencia líquida, tipo de medio diferencial. Está compuesto por peptona,

extracto de levadura, dextrosa, púrpura de bromocresol con aditivos L-Aminoácidos.

pág. 18
6. Explique 05 medios de cultivo utilizados para el aislamiento y crecimiento de
microorganismos benéficos, fundamento e interpretación.

❖ AGAR SANGRE KANAMICINA-VANCOMICINA: Conocido como medio

KV, es útil aislamiento selectivo de especies de anaeróbicos (bacteroides,

Prevotella, Fusobacterium Verlonella) en muestras clínicas que contienen bacterias

aeróbicas y anaeróbicas mezcladas.

❖ AGAR MAC CONKEY: Medio selectivo y diferencial utilizado para la

recuperación de enterobacterias y bacilus Gram negativas entéricos y relacionados

contiene sales biliares y cristal violeta que inhiben el desarrollo de bacterias gram

positivas y de algunas gram negativas exigentes.

❖ AGAR SANGRE: Medio muy rico que permite el crecimiento de todos los

microorganismos con importancia clínica, excepto el de los más exigentes.

❖ AGAR TRIPTONA-SOJA (TSA): Medio rico de uso general para el crecimiento

de una amplia variedad de microorganismos. Se produce por digestión enzimática

de la soya y de la caseína, en este medio pueden crecer algunos microorganismos

exigentes: Brucella, Listeria.

❖ AGAR SULFITO DE BISMUTO: Medio para el aislamiento de Salmonella

Typhi, el sulfito ferroso actúa como indicador en la producción de sulfhídrico.

7. ¿Cómo debe realizarse el almacenamiento de los reactivos y medios de cultivo?

Debe determinarse y verificarse el periodo de validez de los medios preparados en las

condiciones de conservación especificados.

En general los medios preparados se guardan:

✔ En heladera los medios preparados se guardan no más de tres meses de duración.

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 ✔ A temperatura ambiente no más de un mes en condiciones que impidan que su

composición sea modificada, y tratar de observar cambio de color, evaporación, la

deshidratación o el crecimiento microbiano.

VII. Resultados y discusiones

7.1 Resultados

- Se obtuvo un medio de cultivo en buenas condiciones.

- Después de una semana dentro de la estufa para que crecieran los cultivos,

descubrimos que a pesar de que unas partes de la siembra, contenían discos con

pequeñas cantidades de antibiótico.

-  Los diversos modos de cultivo fueron necesarios para hacer comparaciones entre

ellos.

- Después de aplicar y utilizar el medio de cultivo es preciso decir que la consistencia

de nuestra solución era mucho más gelatinosa luego que se le dejara entibiar a

temperatura ambiente.

MEDIOS DE CULTIVO FUNDAMENTO INTERPRETACIÓN

En el medio de cultivo, las
peptonas, aportan los nutrientes ne-
cesarios para el desarrollo
bacteriano, la lactosa es el hidrato
de carbono fermentable, y la
mezcla de sales biliares y el cristal
violeta son los agentes selectivos
que inhiben el desarrollo de gran
Agar Mac Conkey parte de la flora Gram positiva. El
agar es el agente solidificante.
Microorganismos
fermentadores de lactosa:
colonias rosadas- rojizas.
Puede observarse halo de
precipitación biliar.
Microorganismos no
fermentadores de lactosa:
colonias del color del medio,
incoloras.

El medio de cultivo combina las Microorganismos

fórmulas de Holt-Harris y Teague fermentadores de lactosa y / o
con la de Levine, para obtener un sacarosa: colonias de color negro
mejor rendimiento en el aisla-

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 miento selectivo de enterobacterias
y otras especies de bacilos Gram
negativos.
Es nutritivo por la presencia de
Agar EMB peptona que favorece el desarrollo
microbiano.
En el medio de cultivo la
pluripeptona y el extracto de carne
apor- tan los nutrientes para el
desarrollo microbiano.
Las sales biliares y el verde
brillante inhiben el desarrollo de
una amplia variedad de bacterias
Gram positivas, de la mayoría de
Agar Salmonera los coliformes y el desarrollo
invasor del Proteus spp.
En el medio de cultivo, el
extracto de carne, la peptona
de carne y la tripteína,
constituyen la fuente de
carbono, nitrógeno, vitaminas
y minerales que promueven el
desarrollo microbiano. El
Agar Manitol Salado manitol es el hidrato de
carbono fermentable.
Medio no selectivo, contiene
pluripeptona (una mezcla de
partes iguales de peptona de carne
y de caseína) y extracto de carne
que constituyen la fuente de
carbono y nitrógeno necesarias
Agar nutritivo para el adecuado desarrollo
bacteriano.
Medio altamente nutritivo, en el cual
la peptona de caseína y el extracto de
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azulado o amarronado. Pueden
tener centro oscuro y brillo
metálico.
Microorganismos no
fermentadores de lactosa y
sacarosa:
Colonias del color del medio,
incoloras.
Microorganismos no
fermentadores de lactosa: colonias
del color del medio, incoloras.
Microorganismos productores de
sH2
Microorganismos fermentadores de
manitol: colonias de color amarillo
rodeadas o no de un halo amarillo.
Microorganismos no fermentadores
de manitol: colonias del color del
medio, rojas rodeadas o no de halo
rojizo-púrpura
Examinar los tubos para evaluar
el crecimiento por turbiedad.
Cuan- do sea necesario,
subcultivar en medios sólidos
apropiados y reali- zar la
identificación bioquímica.
Observar las características de las
 carne constituyen la fuente de
carbono y nitrógeno, el extracto de
levadura aporta vitaminas del
complejo B, la glicina y el piruvato
estimulan el crecimiento de los
estafilococos. El agar es el agente
solidificante.
Agar Bair Parker
La infusión de músculo de corazón
y la peptona, otorgan al medio un
alto valor nutritivo, que permite el
crecimiento de una gran variedad
de microorganismos, aún de
aquellos nutricionalmente exi-
gentes. El cloruro de sodio
mantiene el balance osmótico y el
agar es el agente solidificante.
Agar Sangre
En el medio de cultivo, el extracto
de carne y la pluripeptona, apor-
Agar TSI tan los nutrientes adecuados para
el desarrollo bacteriano.
La lactosa, sacarosa y glucosa
son los hidratos de carbono 2- Superficie ácida/Profundidad ácida
fer- mentables. El tiosulfato de 3- Superficie alcalina/Profundidad
sodio es el sustrato necesario
para la producción de ácido
sulfhídrico
En el medio de cultivo, el
fosfato monoamónico es la
única fuente de nitrógeno y el
citrato de sodio es la única
fuente de carbono. Ambos
componentes son necesarios
para el desarrollo bacteria-
no. Las sales de fosfato
forman un sistema buffer, el
pág. 22
colonias.
Bacterias que reducen el telurito de
potasio: colonias de color grisáceo-
negro.
Bacterias que no reducen el telurito
de potasio: colonias del color del
medio, transparentes.
Bacterias con actividad lecitinásica:
halo claro en el medio de cultivo
alrededor de la colonia. Puede
existir también un halo opaco
alrededor de la colonia con un halo
claro externo.
Observar las características de las
colonias.
Para el medio de cultivo
conteniendo sangre, observar las
reacciones de hemólisis:
Alrededor de la colonia en estudio
Hemólisis alfa: lisis parcial de los
glóbulos rojos. Se observa un halo
de color verdoso alrededor de la
colonia en estudio.
Hemólisis alfa: lisis parcial de los
glóbulos rojos. Se observa un halo
de color verdoso.
1- Superficie
alcalina/profundidad ácida (pico
rojo/fondo amarillo): el
microorganismo solamente
fermenta la glucosa.
alcalina (pico rojo/fondo rojo): el
microorganismo es no
fermentador de azúcares.
- positivo: crecimiento bacteriano
con un intenso color azul en el
pico de flauta.
- negativo: ausencia de
crecimiento y permanencia del
color verde del medio de cultivo.
 Agar citrato magnesio es cofactor
enzimático.

En el medio de cultivo, la Metabolismo de lactosa y actividad

peptona aporta los nutrientes
necesarios para el desarrollo
bacteriano, además, es la
fuente de triptofano, y por su
contenido en cistina y cisteína
es la fuente de azufre, ne-
Agar urea cesaria para la producción de
ácido sulfhídrico.
ureásica:
Se evidencia por el color observado
en el medio de cultivo:
- Fermentación de lactosa
negativo, ureasa negativo: verde
ama- rillento
- Fermentación de lactosa
positivo, ureasa negativo:
amarillo, na- ranja, rosado, rojo.

- Fermentación de lactosa
negativo, ureasa positivo: azul
violáceo, azul verdoso.

7.2 Discusiones
Para poder identificar los microorganismos es necesario observar su crecimiento en

sustancias alimenticias artificiales. La mayoría de las bacterias patógenas requieren

nutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano.

Por ello, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de peptona a la que se añaden

otros ingredientes. Estos materiales sirven al medio de cultivo como fuente de carbono,

nitrógeno, fósforo y azufre. Con el extracto de carne y otros materiales se puede preparar

un caldo nutritivo utilizado para el mantenimiento de cultivos de bacterias (Pinto & Martín,

2012).

pág. 23
El uso de agar peptonado para preparar medios de cultivo como caldo nutritivo es muy

importante para poder observar el crecimiento de microorganismos, estamos de acuerdo

con el autor.

VIII. Conclusiones

❖ Mediante el desarrollo de esta práctica definimos, estudiamos y aplicamos los

procedimientos que se deben realizara para la elaboración de un medio de cultivo,

es claro que esto es referido para con la unidad que estamos estudiando,

microbiología, por otro lado conocimos y utilizamos algunos antibióticos naturales

que existen, por lo tanto creemos firmemente que la práctica fue muy amena y

fructífera para con los objetivos trazados al inicio de la misma.

❖ Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el

desarrollo de microorganismos.

IX. Bibliografía
Aponte Salgado, E. T. (2016). Universidad Agraria La Molina. Obtenido de Análisis microbiológico
de medios de cultivo: https://sites.google.com/a/goumh.umh.es/practicas-de-
microbiologia/indice/preparacion-de-medios-de-cultivo

pág. 24
Dominguez, A. H. (2018). Universidad Nacional de Trujillo. Obtenido de Manual de preparación de
cultivos: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0253-
570X2012000200015

Guerrero, J. Á. (2017). Universidad Nacional de Piura. Obtenido de Análisis de medios de cultivos:

https://www.studocu.com/en/document/universidad-nacional-del-
comahue/microbiologia-y-parasitologia/summaries/4-preparacion-de-medios-de-
cultivo/2869487/view

Prada Gomez, B. J. (2018). Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo. Obtenido de

https://www.britanialab.com/productos/filtrar/2/medios_de_cultivo_deshidratados

pág. 25