DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Paula Delgado Díaz, Humberto Guzmán Rodríguez.

Ingeniería Biomédica. Facultad de Ingeniería. Universidad Autónoma de Bucaramanga.

Conversiones realizadas antes de Determinación de azúcares

la practica reductores en orina

1∗103 ml
10 µl = 0,01 ml
1 µl
Datos obtenidos en la práctica:
Concentración de glucosa = 1 % -
Datos obtenidos en la práctica: 1000 mg /dl

ABSORBANCIA PREGUNTAS
Patrón 1,776
1. Cuál es la finalidad de la
Muestra 1,734
glucolisis, en que células se
Blanco 0,078
realiza?

Es necesario restar la absorbancia La glucolisis es la principal vía

del blanco ya que este contiene para el metabolismo de la
reactivo de glucosa, y la absorbancia glucosa.
de este puede generar un error en el Puede funcionar de manera
resultado final de la muestra. aerobia o anaerobia según la
cantidad de oxígeno. Este
ABSORBANCIA
proceso de degradación de
Patrón 1,698
glucosa ocurre en el citosol de
Muestra 1,656
células procariotas y
eucariotas.
Cálculos:
2. Que diferencia existe entre la
100 mg/dl∗Amuestra
Cmuestra= glucolisis aeróbica y
Apatron
anaeróbica, desde el punto de
vista energético y metabólico.
mg
100 ∗1,656 La glucolisis aeróbica es el
dl
Cmuestra= proceso que se realiza en
1,698
presencia de oxígeno y
Cmuestra=97,526 mg/dl requiere de ATP, el producto
de este proceso es el piruvato,
se convierte en Acetil-coA e
 introduce al ciclo de Krebs del
cual los NADH y FAD
resultantes van a la cadena
transportadora de electrones y
fosforilacion oxidativa,
produciendo aproximadamente
38 ATP.
La vía anaeróbica no requiere
de oxígeno, y convierte el
Piruvato en Lactato para
reutilizar los NADH.
3. ¿En qué consiste la
glucogénesis, glucogenólisis y
gluconeogénesis (ciclos de
Cori)? ¿En qué tejidos se lleva
a cabo? ¿Cumplen la misma
función en todos los tejidos?
Glucogenólisis: Es la vía por
la cual se degrada glucógeno
para la obtención de glucosa
cuando sus niveles son bajos,
se lleva a cabo en el musculo y
en el hígado debido a la gran
importancia del glucógeno
como reserva en estos tejidos.
Gluconeogénesis: Síntesis de
glucosa a partir de sustratos
que no son carbohidratos, se
da en el hígado en un 90% y
en el riñón 10%. Ayuda a
mantener el nivel de glucosa
necesario en la sangre para
que el cerebro y músculos
puedan extraer la suficiente
glucosa para atender sus
demandas energéticas.
Ciclo de cori: consiste en la
reutilización del lactato y se
produce en el musculo cuando
este tiene una alta demanda
de energía En músculo
ocurre la transaminación de
piruvato para producir alanina,
que viaja al hígado por el
torrente sanguíneo, en el
hígado ocurre la
transaminación de alanina a
piruvato que pasa a
gluconeogénesis y finalmente
la Glucosa producida se libera
al torrente sanguíneo
4. ¿Cuáles son los principales
sustratos para llevar a cabo la
gluconeogénesis?
Los principales sustratos son:
Alanina
Lactato
Glicerol 3- fosfato
5. Que efecto tiene la adrenalina,
el glucagón y la insulina sobre
la glucolisis, gluconeogénesis,
glucogenólisis y glucogénesis
La insulina es una hormona
polipeptídica producida y
secretada por las células beta
de los islotes de Langerhans
del páncreas, esta hormona
interviene en el
aprovechamiento metabólico
de los nutrientes, se encarga
de activar procesos de
glucolisis y glucogénesis, a su
vez actúa como inhibidor de
los procesos de glucogenólisis
y glucogénesis.
El glucagón es una hormona
cuya función es estimular la
producción de glucosa en el
hígado, se encargada de
activar los procesos de
glucogenólisis y glucogénesis,
e inhibe la glucolisis y la
gluconeogénesis.
La adrenalina se encarga
acelerar el flujo de entrada
la sangre por estimulación
la formación de glucosa
partir del glucógeno.
6. ¿Por qué́ el hígado es capaz
de aportar glucosa al plasma
mientras que muchos otros
tejidos no lo pueden hacer?
Esto se debe a la presencia
de la enzima Glucosa 6-
fosfatasa en el hígado.
7. Revisa las enzimas claves
involucradas en la regulación
de cada una de las rutas
metabolicas de los
carbohidratos, haciendo
énfasis en las moléculas que
funcionan como moduladores
(efectores o reguladoras) y
conectoras.
Glucolisis
Hexoquinasa (HK): La
hexoquinasa es la primera
enzima en glucolisis,
convierte la glucosa en
glucosa-6-fosfato. Actúa en
reacciones irreversibles; por lo
tanto, esta enzimas actúa
como regulador o catalizador.
Piruvato quinasa: Es una
enzima que actúa en la
glucolisis, catalizando la
transferencia de un grupo
fosfato del fosfoenolpiruvato a
ADP, produciendo una
molécula de piruvato y ATP.
de
en Vía de las pentosas
de
a Glucosa 6 -Fosfato
deshidrogenasa : Esta enzima
reduce NADP+ .
Gluconeogénesis
Piruvato carboxilasa (PC):
cataliza la conversión de
piruvato en oxaloacetato
Fosfoenolpiruvato
carboxiquinasa (PEPCK)
8. Haga un esquema donde
puedas plasmar la forma como
las diferentes rutas
metabolicas de los
carbohidratos y el ciclo de
Krebs se integran, como se
regulan y cuál es el destino de
sus productos, registrando las
enzimas claves. Es importante
que revises la regulación y las
conexiones entre ellas.
Anexo 1. Vías metabolicas
y
9. Con base en los resultados
obtenidos en la práctica del
laboratorio, explique cuales
rutas estarían implicadas para
 explicar estos y si están o no
dentro de los rangos normales.
En el primer análisis se infiere
que el paciente esta en ayuno,
por lo cual están implicados
procesos de gluconeogénesis
y glucogenólisis.
Para el segundo análisis, como
el paciente es hiperglucémico
están implicados procesos de
glucogenogenesis.
Análisis de resultados del
laboratorio.
Determinación de glucosa en el
laboratorio.
De acuerdo con los valores de
referencia de glucosa en sangre, se
determina que la persona a la cual se
le realizó el examen es
Normoglucémica, ya que su resultado
estaba entre un rango de 70-100
mg/dl. Es importante aclarar que se
asumió que el paciente estaba en
ayunas. Es decir, si el paciente
consumía carbohidratos y se tomaba
una nueva muestra sus valores se
elevarían a rangos inferiores a
140mg/dl.
De lo anterior, se puede inferir que
antes de que el paciente consumiera
algún carbohidrato su cuerpo estaba
realizando procesos de génesis de
glucosa y lisis de glucógeno. Por
ejemplo, al estar en ayuno se
empieza un proceso gluconeogénesis
en hígado, sin embargo, si el paciente
pasa a un estado de inanición los
riñones y el intestino delgado también
podrían realizar este proceso (en
menor porcentaje que el hígado);
estos procesos son activados por
Glucagón. Así mismo, se empieza
una glucogenólisis en el hígado y
musculo, para degradar las cadenas
de glucógeno en monómeros de
glucosa, esto es más eficiente en el
hígado ya que cuenta con la enzima
glucosa 6-fosfatasa. Estos procesos
son activados por la hormona
Glucagón (Hígado) y Epinefrina
(Músculo).
Determinación de azúcares
reductores en orina
El método de Benedict permite
determinar la presencia de glucosa
en un medio alcalino (orina). Este
método es efectivo ya que el ion
cúprico es capaz de reducirse por
efecto del grupo aldehído del azúcar
a su forma de Cu+. Para este
laboratorio la persona presentó un
elevado porcentaje de azúcar en
orina, por lo cual se genera un
precipitado de un color amarillo
verdoso, que según la tabla de
referencia es de 1000mg/dl de
glucosa.
De lo anterior, se infiere que la
persona está en hiperglucemia; por lo
cual se puede decir que el organismo
no cuenta con la suficiente cantidad
de insulina o la secreción de insulina
es escasa. Como resultado el cuerpo
no activa la glucolisis, y tampoco los
demás procesos de génesis (excepto Bibliografía
glucogenogenesis y cetogénesis ya
que están activos).
Finalmente, como la persona tiene un
elevado nivel de azúcar en sangre,
debe cuidar su dieta de azúcar; ya
que la glucosa puede dañar
irreversiblemente el endotelio
vascular por diferentes mecanismos:
1. Un incremento en la concentración
de glucosa intracelular seguida de un
flujo aumentado hacia el interior de la
célula, que implica cambios
cuantitativos y cualitativos a nivel de
membrana. 2. Un aumento en el
proceso de glico-silación no
enzimática (GNE) y 3. Un incremento
del estrés oxidativo (EO) causado por
la glucoxidación y la autooxidación de
la glucosa.

Conclusiones
1. Mediante el método de Benedict
se comprobó que la glucosa es un
azúcar reductor porque produce un
precipitado de oxido cuproso de color
amarrillo verdoso.
2. Según el estado de ayuno de una
persona, el organismo implementara
diferentes vías metabolicas, que
serán activas o inhibidas por
hormonas; que en este caso eran la
insulina, el glucagón y la epinefrina.
3. En La determinación de
concentración de glucosa en sangre
por espectrofotometría y por método
de Benedict se dan reacciones oxido-
reducción.
Stryer, L. (1995). Bioquimica Cuarta Edición. Nueva York: W-H Freeman and Company.

[CITATION Str95 \l 2058 ]