DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Paula Delgado Díaz, Humberto Guzmán Rodríguez.

Ingeniería Biomédica. Facultad de Ingeniería. Universidad Autónoma de Bucaramanga.

Determinación de azúcares
reductores en orina
Conversiones realizadas antes de
la practica
1∗10−3 𝑚𝑙 Datos obtenidos en la práctica:
10µ𝑙 = 0,01 ml
1µ𝑙
Concentración de glucosa = 1 % -
1000 mg /dl
Datos obtenidos en la práctica:

PREGUNTAS
ABSORBANCIA 1. Cuál es la finalidad de la
Patrón 1,776 glucolisis, en que células se
Muestra 1,734 realiza?
Blanco 0,078
La glucolisis es la principal vía
Es necesario restar la absorbancia del para el metabolismo de la
blanco ya que este contiene reactivo glucosa.
de glucosa, y la absorbancia de este Puede funcionar de manera
puede generar un error en el resultado aerobia o anaerobia según la
final de la muestra. cantidad de oxígeno. Este
proceso de degradación de
ABSORBANCIA glucosa ocurre en el citosol de
Patrón 1,698 células procariotas y
Muestra 1,656
eucariotas.

Cálculos: 2. Que diferencia existe entre la

glucolisis aeróbica y
100𝑚𝑔/𝑑𝑙 ∗ 𝐴𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝐶𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = anaeróbica, desde el punto de
𝐴𝑝𝑎𝑡𝑟𝑜𝑛 vista energético y metabólico.

La glucolisis aeróbica es el
𝑚𝑔
100 ∗ 1,656 proceso que se realiza en
𝐶𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 𝑑𝑙
1,698 presencia de oxígeno y
requiere de ATP, el producto de
𝐶𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 97,526 𝑚𝑔/𝑑𝑙 este proceso es el piruvato, se
convierte en Acetil-coA e
introduce al ciclo de Krebs del
cual los NADH y FAD
 resultantes van a la cadena
transportadora de electrones y
fosforilacion oxidativa,
produciendo aproximadamente
38 ATP.
La vía anaeróbica no requiere
de oxígeno, y convierte el
Piruvato en Lactato para
reutilizar los NADH.
3. ¿En qué consiste la
glucogénesis, glucogenólisis y
gluconeogénesis (ciclos de
Cori)? ¿En qué tejidos se lleva
a cabo? ¿Cumplen la misma
función en todos los tejidos?
Glucogenólisis: Es la vía por
la cual se degrada glucógeno
para la obtención de glucosa
cuando sus niveles son bajos,
se lleva a cabo en el musculo y
en el hígado debido a la gran
importancia del glucógeno
como reserva en estos tejidos.
Gluconeogénesis: Síntesis de
glucosa a partir de sustratos
que no son carbohidratos, se
da en el hígado en un 90% y en
el riñón 10%. Ayuda a
mantener el nivel de glucosa
necesario en la sangre para
que el cerebro y músculos
puedan extraer la suficiente
glucosa para atender sus
demandas energéticas.
Ciclo de cori: consiste en la
reutilización del lactato y se
produce en el musculo cuando
este tiene una alta demanda de
energía En músculo ocurre la
transaminación de piruvato
para producir alanina, que viaja
al hígado por el torrente
sanguíneo, en el hígado ocurre
la transaminación de alanina a
piruvato que pasa a
gluconeogénesis y finalmente
la Glucosa producida se libera
al torrente sanguíneo
4. ¿Cuáles son los principales
sustratos para llevar a cabo la
gluconeogénesis?
Los principales sustratos son:
Alanina
Lactato
Glicerol 3- fosfato
5. Que efecto tiene la adrenalina,
el glucagón y la insulina sobre
la glucolisis, gluconeogénesis,
glucogenólisis y glucogénesis
La insulina es una hormona
polipeptídica producida y
secretada por las células beta
de los islotes de Langerhans
del páncreas, esta hormona
interviene en el
aprovechamiento metabólico
de los nutrientes, se encarga de
activar procesos de glucolisis y
glucogénesis, a su vez actúa
como inhibidor de los procesos
de glucogenólisis y
glucogénesis.
El glucagón es una hormona
cuya función es estimular la
producción de glucosa en el
hígado, se encargada de
activar los procesos de
glucogenólisis y glucogénesis,
e inhibe la glucolisis y la
gluconeogénesis.
La adrenalina se encarga de
acelerar el flujo de entrada en la
sangre por estimulación de la
formación de glucosa a partir
del glucógeno.
6. ¿Por qué́ el hígado es capaz
de aportar glucosa al plasma
mientras que muchos otros
tejidos no lo pueden hacer?
Esto se debe a la presencia de
la enzima Glucosa 6- fosfatasa
en el hígado.
7. Revisa las enzimas claves
involucradas en la regulación
de cada una de las rutas
metabolicas de los
carbohidratos, haciendo
énfasis en las moléculas que
funcionan como moduladores
(efectores o reguladoras) y
conectoras.
Glucolisis
Hexoquinasa (HK): La
hexoquinasa es la primera
enzima en glucolisis, y 9. Con base en los resultados
convierte la glucosa en
glucosa-6-fosfato. Actúa en
reacciones irreversibles; por lo
tanto, esta enzimas actúa como
regulador o catalizador.
Piruvato quinasa: Es una
enzima que actúa en la
glucolisis, catalizando la
transferencia de un grupo
fosfato del fosfoenolpiruvato a
ADP, produciendo una
molécula de piruvato y ATP.
Vía de las pentosas
Glucosa 6 -Fosfato
deshidrogenasa : Esta enzima
reduce NADP+ .
Gluconeogénesis
Piruvato carboxilasa (PC):
cataliza la conversión de
piruvato en oxaloacetato
Fosfoenolpiruvato
carboxiquinasa (PEPCK)
8. Haga un esquema donde
puedas plasmar la forma como
las diferentes rutas metabolicas
de los carbohidratos y el ciclo
de Krebs se integran, como se
regulan y cuál es el destino de
sus productos, registrando las
enzimas claves. Es importante
que revises la regulación y las
conexiones entre ellas.
Anexo 1. Vías metabolicas
obtenidos en la práctica del
laboratorio, explique cuales
rutas estarían implicadas para
explicar estos y si están o no
dentro de los rangos normales.
En el primer análisis se infiere
que el paciente esta en ayuno,
 por lo cual están implicados
procesos de gluconeogénesis y
glucogenólisis.
Para el segundo análisis, como
el paciente es hiperglucémico
están implicados procesos de
glucogenogenesis.
Análisis de resultados del
laboratorio.
Determinación de glucosa en el
laboratorio.
De acuerdo con los valores de
referencia de glucosa en sangre, se
determina que la persona a la cual se
le realizó el examen es
Normoglucémica, ya que su resultado
estaba entre un rango de 70-100
mg/dl. Es importante aclarar que se
asumió que el paciente estaba en
ayunas. Es decir, si el paciente
consumía carbohidratos y se tomaba
una nueva muestra sus valores se
elevarían a rangos inferiores a
140mg/dl.
De lo anterior, se puede inferir que
antes de que el paciente consumiera
algún carbohidrato su cuerpo estaba
realizando procesos de génesis de
glucosa y lisis de glucógeno. Por
ejemplo, al estar en ayuno se empieza
un proceso gluconeogénesis en
hígado, sin embargo, si el paciente
pasa a un estado de inanición los
riñones y el intestino delgado también
podrían realizar este proceso (en
menor porcentaje que el hígado);
estos procesos son activados por
Glucagón. Así mismo, se empieza una
glucogenólisis en el hígado y musculo,
para degradar las cadenas de
glucógeno en monómeros de glucosa,
esto es más eficiente en el hígado ya
que cuenta con la enzima glucosa 6-
fosfatasa. Estos procesos son
activados por la hormona Glucagón
(Hígado) y Epinefrina (Músculo).
Determinación de azúcares
reductores en orina
El método de Benedict permite
determinar la presencia de glucosa en
un medio alcalino (orina). Este método
es efectivo ya que el ion cúprico es
capaz de reducirse por efecto del
grupo aldehído del azúcar a su forma
de Cu+. Para este laboratorio la
persona presentó un elevado
porcentaje de azúcar en orina, por lo
cual se genera un precipitado de un
color amarillo verdoso, que según la
tabla de referencia es de 1000mg/dl de
glucosa.
De lo anterior, se infiere que la
persona está en hiperglucemia; por lo
cual se puede decir que el organismo
no cuenta con la suficiente cantidad de
insulina o la secreción de insulina es
escasa. Como resultado el cuerpo no
activa la glucolisis, y tampoco los
demás procesos de génesis (excepto
glucogenogenesis y cetogénesis ya
que están activos).
Finalmente, como la persona tiene un
elevado nivel de azúcar en sangre,
debe cuidar su dieta de azúcar; ya que
la glucosa puede dañar
irreversiblemente el endotelio vascular
por diferentes mecanismos: 1. Un
(Stryer, 1995)
incremento en la concentración de
glucosa intracelular seguida de un
flujo aumentado hacia el interior de la
célula, que implica cambios
cuantitativos y cualitativos a nivel de
membrana. 2. Un aumento en el
proceso de glico-silación no
enzimática (GNE) y 3. Un incremento
del estrés oxidativo (EO) causado por
la glucoxidación y la autooxidación de
la glucosa.

Conclusiones
1. Mediante el método de Benedict se
comprobó que la glucosa es un azúcar
reductor porque produce un
precipitado de oxido cuproso de color
amarrillo verdoso.
2. Según el estado de ayuno de una
persona, el organismo implementara
diferentes vías metabolicas, que serán
activas o inhibidas por hormonas; que
en este caso eran la insulina, el
glucagón y la epinefrina.
3. En La determinación de
concentración de glucosa en sangre
por espectrofotometría y por método
de Benedict se dan reacciones oxido-
reducción.

Bibliografía
Stryer, L. (1995). Bioquimica Cuarta Edición.
Nueva York: W-H Freeman and
Company.