Producción industrial de vitamina B12 por Pseudomonas denitrificas
Utilizando jarabe de maltosa y licor de macerado de maíz como el costo-efectivo
Sustratos de fermentación
Resumen La Pseudomonas denitrificans
aeróbica es ampliamente utilizado para la
vitamina B12 industrial y comercial
fermentación, debido a su mayor
productividad en comparación co los
microorganismos anaerobios productores de
vitamina B12. Este papel destinado a
desarrollar una fermentación rentable medio
para la producción industrial de vitamina B12
por P. denitrifican en fermentador de
120,000 l. Se encontró que la maltosa jarabe
(un jarabe de almidón de maíz de bajo costo
por medio de licor enzimático o ácido) y licor
de maceración de maíz (CSL, a subproducto
de la industria del almidón) fueron muy
aplicables a producción de vitamina B12 por
P. denitrificans. Bajo la medio de
fermentación óptimo realizado por superficie
de respuesta metodología, 198.27 ± 4.60
mg / l de vitamina B12 rendimiento se
obtuvo en 120,000 l de fermentador, que
estaba cerca
a la fermentación con sacarosa refinada
(198,80 mg / l) y obviamente fue más alto
que el obtenido bajo remolacha utilización de
melaza (181,75 mg / l). Por lo tanto, maltosa
jarabes y CSL fueron los sustratos eficientes y
económicos para la fermentación industrial
de vitamina B12 por P. denitrificans.
Palabras clave Pseudomonas denitrificans
Vitamina B12 Fermentacion industrial Jarabe
de maltosa Licor macerado de maíz
Introducción
La vitamina B12 se usa para describir los
compuestos complejos de la familia del
cobalto corrinoide, que es una de las más
atractivas y fascinantes moléculas en el
mundo de la ciencia y medicina [1]. Las
formas biológicas de la vitamina B12 incluyen
adenosilcobalamina y metilcobalamina
Como un importante factor de crecimiento
para microorganismos y animales, vitamina
B12 fue descubierto por primera vez como
"el factor de la anemia anti perniciosa" en
1926 [2]. En la actualidad, la vitamina B12 ha
sido ampliamente utilizada para el
tratamiento de la anemia perniciosa y
periférica neuritis [3], y se encontró que la
vitamina B12 era la cofactor esencial para la
metionina sintasa y (R) -metilmalonil-
CoA mutasa en animales y humanos [4].
Debido a que los procesos químicos de
síntesis de vitamina B12 son muy complicado
y costoso, la producción comercial de la
vitamina B12 es exclusivamente a través de
la fermentación biosintética procesos. Para la
producción microbiana de vitamina B12, hay
dos tipos diferentes, a saber, la fermentación
aeróbica y anaeróbica procesos. Al
implementar las estrategias de azar
mutagénesis e ingeniería genética, algunos
industriales microorganismos han sido
explotados con éxito para el producción
comercial de vitamina B12, como
Pseudomonas denitrificantes,
Propionibacterium freudenreichii,
Propionibacterium
shermanii y así sucesivamente [5, 6]. Como la
vitamina típica
Los anaerobios productores de B12, las cepas
de Propionibacterium son microaerofílicos y
sus bioprocesos deben ser controlados bajo
muy bajas concentraciones de oxígeno [7]. En
comparación con el procesos de
fermentación anaeróbica en
Propionibacterium, el aerobio P. denitrificans
mostró un crecimiento celular más rápido y
productividad eficiente de vitamina B12.
Nuestros estudios previos se han enfocado
detalladamente en procesos industriales de
fermentación de vitamina B12 por P.
denitrificans en un fermentador de 120,000 l,
en el cual una etapa múltiple estrategia de
control de oxígeno disuelto (OD) (20-48 h: 8-
10%; 49-106 h: 2-5%; 107-168 h: por debajo
del 2%) [8], un pH-stat estrategia de control
(7.0-7.2) [9], y una betaína continua
estrategia de alimentación (5.0-7.0 g / l de
betaína durante 50-140 h de fermentación)
[10] se establecieron sistemáticamente.
Aunque a producción de vitamina B12 fue
altamente mejorada, todo el medio de
fermentación industrial anterior utilizó la
sacarosa refinada como la única fuente de
carbono, lo que resulta en alto costos
medios. Alternativamente, debido a la
melaza de remolacha (un subproducto de la
industria azucarera) que contiene una masa
de ingredientes (como sacarosa, glutamato y
betaína) favorable para la producción de
vitamina B12, un medio de fermentación de
bajo costo se estableció con melaza de
remolacha como sustrato principal, y el costo
de fermentación fue muy reducido [11].
Sin embargo, si no se somete a una
acidificación y calor pretratamiento, los
componentes indeseables en la melaza de
remolacha frecuentemente daría como
resultado un proceso de fermentación
inestable por el efecto inhibidor sobre el
crecimiento celular de P. denitrificans, como
colorantes, metales pesados y sustancias
desconocidas compuestos.
En base a este hecho, el presente trabajo
tuvo como objetivo optimizar y desarrollar
una fermentación alternativa o rentable
medio para la producción industrial de
vitamina B12 utilizando jarabe de maltosa,
licor de maceración de maíz (CSL) y betaína
como el sustratos principales.
materiales y métodos
Microorganismo y medios Pseudomonas
denitrificans, una cepa industrial donada por
Huarong Pharmacy Corporation
(Shijiazhuang, China), fue utilizado para la
producción de vitamina B12, que se mantuvo
en agar inclinado que contiene (g / l):
sacarosa, 30; peptona, 10; (NH4) 2SO4, 0.25;
(NH4) 2HPO4, 1.5; MnSO4 H2O, 0.1; ZnSO4
7H2O, 0.1; agar, 20. El pH inicial se ajustó a
7.2 con 1.0 M de NaOH antes de la
esterilización. El medio de la semilla estaba
compuesto de (g / l): sacarosa, 30; CSL, 10;
KH2PO4, 5; (NH4) 2SO4, 2.3; (NH4) 2HPO4,
0.7; MnSO4 H2O, 0.2; MgSO4, 1.5; ZnSO4
7H2O, 0.02; CoCl2 6H2O, 0,02; 5,6-
dimetilbenzimidazol (DMBI), 0,0045. El pH
fue ajustado a 7.0-7.2 con 1.0 M de NaOH
antes de la esterilización. El medio de
fermentación original fue el siguiente (g / l):
Jarabe de maltosa (una producción de
hidrólisis enzimática de almidón de maíz,
aproximadamente 30.5% (p / p) de azúcar
total concentración), 260; CSL, 40; betaína,
20; (NH4) 2SO4, 1; MgSO4, 1.5; KH2PO4,
0,75; ZnSO4 7H2O, 0.08; CoCl2- 6H2O, 0,14;
DMBI, 0.075. El pH se ajustó a 7.2-7.4 con 1.0
M de NaOH antes de esterilizar en autoclave.
Medios de alimentación (FM) para la
fermentación en lote alimentado en El
fermentador de 120,000 l fue el siguiente (g /
l): FM-a: maltosa jarabe, 800; FM-b: betaína,
39; CoCl2 6H2O, 0,3; DMBI, 0,3.
Diseño experimental y análisis estadístico
para la optimización del medio de
fermentación El medio de fermentación se
optimizó a través de la respuesta análisis de
superficie (RSM), en el que un factorial
central completo de 23
diseños compuestos (CCD) con nueve réplicas
en la central puntos se realizaron en primer
lugar utilizando el software estadístico DPS v
3.01, y luego el análisis estadístico de los
resultados fue realizado por el software
R2.13.1.
Fermentación en matraces agitados
El precultivo se llevó a cabo en un matraz
Erlenmeyer de 250 ml que contiene 40 ml de
medio de siembra inoculado con células de
inclinación fresca, y se cultiva a 30 C en una
coctelera rotativa
a 180 rpm durante 20 h. El cultivo de siembra
fue luego transferido a un matraz Erlenmeyer
de 250 ml que contiene 30 ml de
fermentación medio con 10% de inóculo, e
incubado a 32 C en un agitador rotatorio a
180 rpm durante 120 h.
Fermentación en fermentador de 120,000 l.
La fermentación en tres etapas se realizó en
un fermentador de 120,000 l, incluyendo dos
etapas de crecimiento de semilla y una etapa
de la producción de vitamina B12. La cultura
de la primera etapa fue llevado a cabo en un
fermentador de semillas de 150 l que
contiene 100 l medio estéril con inóculo de
ocho nuevos inclinados, que se implementó a
28 C durante 40 h con aireación velocidad a
0.5 v / v / min y una velocidad de agitación a
180 rpm. Entonces el cultivo de semilla
primario (80-90 l) se transfirió a un
Fermentador de semillas secundario de 9,000
l con 5,000 l de semilla medio. Se cultivó a 28
C con agitador de velocidad en 130 rpm y
tasa de aireación a 0.4 v / v / min durante 30
h. Entonces el segundo cultivo de siembra
(alrededor del 5% del volumen de trabajo
final) fue transferido al fermentador de
120,000 l que contenía 75,000 l de medio de
fermentación. Un lote alimentado
fermentación se realizó, que se controló en
32 C y terminado a los 180 h El fermentador
de 120,000 fue equipado con tres de 3
paletas Impulsores de hélices, una sonda de
temperatura, una sonda de pH (Mettler
Toledo) y una sonda de oxígeno disuelto (OD)
(Mettler Toledo). La tasa de absorción de
oxígeno (NUESTRO) y la tasa de evolución del
dióxido de carbono (CER) se recopiló en línea,
que fueron calculados por el análisis de la
entrada y gases de escape.
Métodos analíticos.
La concentración de vitamina B12 en el caldo
de fermentación fue determinado por HPLC.
Muestra de caldo (25 ml), a la cual 2,5 ml de
NaNO2 al 8% (p / v) y 2,5 ml de ácido acético
glacial se agregaron ácidos, se hirvieron
durante 30 min. La mezcla fue luego se filtró
y se añadieron 20 l de NaCN al 10% (p / v) a 1
ml de fase acuosa. La fase acuosa superior
resultante se inyectó en el sistema HP1100
HPLC (Agilent). Columna Hypersil APS-2 NH2
(4,6 mm 9 250 mm, 5 lm) fue empleado para
el análisis de HPLC con un índice de flujo de
1.7 ml / min, una longitud de onda de 360
nm y una columna temperatura de 30 C. La
fase móvil fue de 250 mmol de ácido
fosfórico / acetonitrilo, (30/70, v / v). La
biomasa celular se cuantificó con peso de
células secas (DCW) El tubo de centrífuga (50
ml) equipado con 30 ml del caldo de cultivo
se centrifugó a 5.000 rpm para 10 minutos.
Después de lavar dos veces con agua
destilada, la célula el precipitado se secó a un
peso constante a 105 ° C, y luego se convirtió
al DCW estandarizado (g / l). Las
concentraciones totales de azúcar de los
caldos de fermentación llevado a cabo en
matraces de sacudidas y fermentadores
industriales fueron determinadas por el
reactivo de ácido dinitrosalicílico (DNS)
método [12]. De acuerdo con el método
descrito por Niu et al. [13], un sistema HPLC
(Waters 2695) equipado con un Detección de
Dispersión Ligh Evaporativa Alltech 2000
(Alltech Associates, Deerfield, EE. UU.) Para
medir la concentraciones de maltosa y
glucosa en jarabes de almidón de maíz, y las
condiciones de HPLC fueron las siguientes:
Columna, Hypersil NH2 (4,6 mm 9 250 mm, 5
lm); fase móvil, acetonitrilo / agua = 70/30
(v / v); velocidad de flujo, 1,2 ml / min;
temperatura de columna, 30ºC; inyectar el
volumen 10 ll. El contenido de nitrógeno en
el caldo fue cuantificado por el método de
titulación de formaldehído [14].
Las categorías y concentraciones de
aminoácidos en
CLS se analizaron de acuerdo con el método
informado por Ebert [15].
Resultados y discusión
Efectos del jarabe de glucosa y el jarabe de
maltosa en la fermentación de P.
denitrificans La fuente de carbono es uno de
los principales componentes nutricionales
involucrado en un medio de fermentación,
pero el habitual refinado azúcares (por
ejemplo, glucosa, sacarosa y maltosa) son
antieconómicos a una fermentación
industrial. Comparado con los azúcares
refinados, una gama de jarabes de bajo costo
(como jarabe de glucosa y jarabe de maltosa)
se puede producir a partir de almidón de
maíz por medios de hidrólisis enzimática o
ácida [16]. Para investigar si los almíbares de
almidón de maíz podrían reemplazar la
sacarosa refinada por producción de
vitamina B12, la fermentación de P.
denitrificans procesos con jarabe de glucosa
y jarabe de maltosa como el carbono las
fuentes fueron, respectivamente, llevadas a
cabo en matraces de agitación, y la Fig. 1
mostró la cinética del crecimiento celular, el
azúcar total consumo, pH y biosíntesis de
vitamina B12.
Como se muestra en la Fig. 1a, en
comparación con el jarabe de glucosa como
la fuente de carbono, el crecimiento celular
bajo jarabe de maltosa era significativamente
mayor durante todo el proceso de
fermentación. En consonancia con la mayor
tasa de consumo de azúcar total (Fig. 1b), se
observó que los valores de pH bajo jarabe de
glucosa eran obviamente inferiores a la
fermentación con jarabe de maltosa como
fuente de carbono, como se muestra en la
Fig. 1c. Durante todos los procesos de
fermentación, el pH bajo jarabe de maltosa
podría mantener a una rango estable
(aproximadamente 6.50), mientras que el jarabe
de glucosa causaría que el pH del caldo
disminuyera bruscamente a 5.40-5.50 en 96-120
h de fermentación. Como resultado, la vitamina
obtenida La producción de B12 bajo jarabe de
maltosa fue significativamente más alto que el
que usa jarabe de glucosa, que finalmente
logrado a 66.74 ± 2.56 g / ly 51.32 ± 0.81 mg / l,
respectivamente, como se muestra en la Fig. 1d.
Los resultados anteriores revelaron que el jarabe
de maltosa podría ser actuó como una fuente
alternativa de carbono aplicable para la vitamina
Producción de B12 por P. denitrificans, lo que
sería notablemente reducir el costo de la fuente
de carbono.
El análisis de composiciones de aminoácidos en
CSL Además de la fuente de carbono, la fuente
de nitrógeno también juega un papel importante
en la fermentación microbiana, y un costo-
efectivo fuente de nitrógeno orgánico se
convierte en el preferido ingrediente mediano
para sustituir el nitrógeno complejo fuentes
(como el extracto de levadura y la peptona).
CSL, un subproducto de la industria del
almidón, se usa ampliamente en microbios
fermentación, debido a que contiene un
complemento rico de nutrientes importantes
como aminoácidos, vitaminas, biotinas y
oligoelementos [17, 18]. Para explorar si CSL es
aplicable a la vitamina B12 producción por P.
denitrificans, las composiciones de aminoácidos
en CSL (Hebei Zhongying Starch Co., Ltd.,
China) fueron analizado. Como se muestra en la
Fig. 2, el CSL incluyó dieciocho diferentes tipos
de aminoácidos, y la concentración total de
estos aminoácidos fueron hasta 23.093 mg por
100 mg de CSL, que demostró que el CSL sería
un apropiado fuente de nitrógeno orgánico para
la fermentación microbiana. Durante el proceso
biosintético de vitamina B12, su tetrapirrol La
estructura parte del esqueleto C-5 del glutamato
[19]. Nuestra investigaciones anteriores también
habían ilustrado claramente que un enriquecido
glutamato en medio de fermentación estaría a
favor de la célula crecimiento y producción de
vitamina B12 por P. denitrificans [11]. En
consecuencia, con respecto al nitrógeno
orgánico preferencial fuente de la fermentación
de la vitamina B12, el glutamato incrustado la
concentración es uno de los factores
fundamentales que vale la pena considerar. Eso
fue notable que el glutamato fue la segunda
mayoría componente (solo inferior a la prolina)
contenido en el CSL, qué concentración podría
alcanzar 3.539 ± 0.163 mg / 100 mg CSL, como
se muestra en la Fig. 2. Por lo tanto, las
composiciones de aminoácidos en el CSL
implicaba que el CSL potencialmente sería una
fuente de nitrógeno orgánico eficiente y de bajo
costo para la vitamina Fermentación B12 por P.
denitrificans. Optimización del medio de
fermentación con maltosa jarabe y CSL como
los sustratos principales Excepto que las fuentes
de carbono y nitrógeno son esenciales para
fermentación microbiana, la adición exógena de
precursores y promotores de producción pueden
regular fuertemente y facilitar la biosíntesis de
los metabolitos objetivo. Durante vía
biosintética de la vitamina B12 en P.
denitrificans, allí son ocho reacciones de
metilación catalizadas por seis diferentes
metiltransferasas y betaína (N, N, N-
trimetilglicina) es ampliamente elegido como el
típico donante de grupos metilo para producción
de vitamina B12 [20-22], debido a tres metil
grupos involucrados en sus moléculas. En base
a este hecho, los tres componentes medianos
(jarabe de maltosa, CSL y betaína) se
optimizaron aún más para la fermentación de
vitamina B12 usando superficie de respuesta
metodología (RSM), un experimento efectivo y
exitoso procedimiento de diseño [23, 24]. Los
niveles y real valores de los tres factores
variables anteriores y experimental los
resultados (rendimiento de vitamina B12) se
presentaron en la Tabla 1, y el análisis de
regresión correspondiente realizado por el
software R2.13.1 se resumió en la Tabla 2.
F

Fig. 1 Efectos del jarabe de glucosa y el jarabe de maltosa en el crecimiento celular (a), pH (b) y producción de vitamina B12 (c)
durante el shakeflask de P. denitrificans cultivo. Los valores representan los promedios de tres mediciones y las barras de error
indican la desviación estándar
Fig. 2 Concentraciones de aminoácidos contenidas en licor
de maceración de maíz. Los valores representan los
promedios de tres medidas y barras de error indicar
desviación estándar

De los resultados del análisis estadístico que se

muestra en la Tabla 2, se observó que los
términos significativos (a = 0.05) fueron como
sigue: X1, X2, X3, X1 2, X2 2, X3 2 y X1 9 X3.
El seguimiento modelo de segundo orden para
predecir la vitamina B12 rendimiento (Y) se
estableció:
Y(mg/L)= -39. 500+ 2.084X1 + 5: 070X2 +
7.241X3
0: 003723X2 1 0: 01722X2 2 0: 05079X2 3 0:
004338X1 X2 0: 1003X1 X3
Este modelo de regresión para la producción de
vitamina B12 fue altamente significativo (P \
0.0001) con un valor satisfactorio de coeficiente
de determinación (R2 = 0.9567), que indicó que
el modelo de segundo orden era adecuado para Tabla 1 Diseño experimental y resultados del
los resultados obtenido en experimentos. La compuesto central diseño
Figura 3 mostró el resultado superficie de
respuesta con respecto a los efectos del jarabe
de maltosa, CSL y betaína en la producción de
vitamina B12, y la la superficie de respuesta
tenía un punto máximo. Se encontró que la
interacción entre el jarabe de maltosa y la
betaína era significativo, lo que reveló que las
concentraciones de jarabe de maltosa y betaína
en medio de fermentación ser crucial para la
producción de vitamina B12. Basado en las
ecuaciones derivadas por diferenciación de
modelo de segundo orden, los valores óptimos
del modelo podrían se obtendrá de la siguiente
manera: X1 = 251.29 g / l, X2 = 49.07 g / l,
X3 = 22.83 g / l. Bajo el medio de fermentación
óptimo, el máximo teórico de rendimiento de
vitamina B12 fue 71,42 mg / l. Cinco
experimentos replicados se realizaron
adicionalmente para validar el modelo de
segundo orden en el nivel óptimo punto de
jarabe de maltosa, CSL y betaína, y el obtenido
la producción de vitamina B12 fue de 72.55 ±
1.08 mg / l (71.15, 71.88, 72.63, 73.14 y 74.94
mg / l, respectivamente), que representan tres
mediciones y barras de error indicar desviación
estándar

Fig. 3 Presentación tridimensional de la superficie de

respuesta para las concentraciones de jarabe de
maltosa, betaína y licor de macerado de maíz en la
vitamina Rendimiento de B12
De la Fig. 4, la velocidad de agitación y el flujo
de aire eran controlado a 78 rpm y 850-1100 m3
/ h, respectivamente. Bajo este tipo de estrategia
de suministro de oxígeno, el DO era disminuyó
bruscamente a menos del 2% a las 30 h, y luego
se mantuvo en este nivel hasta el final de la
fermentación. Acompañado con el aumento de
la respiración microbiana fuerza, el NUESTRO
y el CER presentaron una tendencia creciente
durante 0-30 h. Debido a la concentración de
OD entrando en un nivel límite, el NUESTRO y
CER los valores casi permanecieron en un nivel
constante. Nuestro previo
La investigación demostró que una
concentración límite de OD era favorable para
la biosíntesis de vitamina B12, especialmente en
etapas posteriores de fermentación [8]. Por lo
tanto, un control de dos etapas
Fig. 4 Perfiles de línea parámetros de fermentación
(Velocidad de agitación, flujo de aire, pH; Oxígeno
disuelto, DO; Oxígeno tasa de aceptación, NUESTRO;
Carbón tasa de evolución de dióxido, CER) con jarabe
de maltosa y maíz licor empinado como principal
sustratos para P. denitrificans cultivo en 120,000 l
fermentador
estrategia sobre el flujo de aire se implementó
durante la industria procesos de fermentación de
vitamina B12. Sin embargo, una vez que el aire
el flujo se redujo de aproximadamente 1.100-
850 m3 / h en 104 h, la concentración límite de
OD daría como resultado una disminución
inmediata de NUESTRO y CER, y este tipo de
fenómeno era idéntico a la fermentación de
vitamina B12 proceso implementado por Wang
et al. [25]. Sin ningún ácido o álcali agregado
exógenamente al caldo de fermentación, en los
valores de pH podrían mantenerse de manera
estable en 7.0-7.30 durante el total procesos de
fermentación, que fue el más beneficioso rango
para el crecimiento celular y la biosíntesis de
vitamina B12 por
P.denitrificans [9]. La Figura 5a muestra la
cinética del azúcar total y amino nitrógeno
durante los procesos de fermentación en
120,000 l fermentador. Bajo la utilización de la
fermentación óptima medio, las concentraciones
iniciales de azúcar total y el nitrógeno amino en
caldo podría alcanzar a 76.4 ± 2.6 g / l y 1050 ±
30 mg / l, respectivamente. Junto con la
fermentación proceso, la tasa de consumo de
azúcar presentó una tendencia acelerada, lo que
resulta en la concentración total de azúcar
disminuyendo rápidamente a 34.8 ± 0.9 g / l a
las 42 h. En esto momento, el jarabe de maltosa
(FM-a) se alimentó continuamente a el caldo de
fermentación, para mantener el azúcar total
entre 30-35 g / l. Sin embargo, la concentración
de nitrógeno amino presentó una cinética obvia
de tres etapas: una disminución rápida antes de
las 48 h, un estado estable (alrededor de 400 mg
/ l) durante
48-144 h, y un aumento drástico debido a la
autolisis celular después de 144 h. La Figura 5b
resumió los cursos de tiempo de biomasa
crecimiento y producción de vitamina B12 bajo
la fermentación óptima medio. De acuerdo con
la cinética de DO, NUESTRO CER y azúcar
total, una rápida tendencia alcista de
crecimiento celular se observó durante 0-60 h,
lo que reveló que el jarabe de maltosa y CSL
como los principales substratos medianos fueron
muy propicios para el crecimiento celular de P.
denitrificans. Simultáneamente, también se
presenta el rendimiento de vitamina B12 un
rápido aumento bajo la utilización de esta
fermentación medio. Como resultado, la
máxima vitamina B12 estuvo a la altura 198.27
± 4.60 mg / l al final de la fermentación (180 h),
que estaba cerca de la producción industrial de
vitamina B12 bajo el uso de la sacarosa refinada
(198,80 mg / l de vitamina final B12
rendimiento) [8], y fue obviamente mayor que
eso obtenido con melaza de remolacha como
principal fermentación medio (181,75 mg / l de
rendimiento final de vitamina B12) [11].
Muchos microorganismos tienen la capacidad
de biosintetizar vitamina B12, como P.
denitrificans, Salmonella typhimurium,
Propionibacterium freudenreichii,
Propionibacterium shermanii, Bacillus
megaterium, Rhodopseudomonas protamicus,
Rhizobium cobalaminogenum y Streptomyces
olivaceus [6]. Entre estos microorganismos, P.
denitrificans es la vitamina B12 más eficiente
produciendo tensión, y es concebible que su
productividad puede alcanzar 300 mg / l [1].
Aunque una mejora significativa de la
producción de vitamina B12 se había logrado
mediante medios de mutagénesis aleatoria,
ingeniería genética y ingeniería metabólica de P.
denitrificans, un problema digno de atención fue
cómo diseñar un óptimo costo-efectivo medio
de fermentación para vitamina B12 industrial
producción, porque el costo medio
generalmente ocupado casi el 50% de la
mayoría de los productos de fermentación [26].
Era bien sabido que la melaza de remolacha fue
la más utilizada fuente de carbono para la
fermentación industrial de vitamina B12 por P.
denitrificantes. Sin embargo, los componentes
indeseables en la remolacha la melaza causaría
una vitamina B12 inestable
Fig. 5 Curso de tiempo del total azúcar (a), nitrógeno
amino (a), crecimiento celular (b) y vitamina B12
producción (b) con maltosa jarabe y licor de maíz
como los sustratos principales para P. cultivo
denitrificans en una Fermentador de 120,000 l Valores
representan los promedios de tres medidas y barras
de error indicar desviación estándar
proceso de fermentación Como azúcar refinada,
la sacarosa podría evitar esta situación, pero su
alto precio haría industrial la fermentación de
vitamina B12 se vuelve antieconómica. Por lo
tanto, era valioso desarrollar un costo-
efectividad alternativa medio de fermentación
para la vitamina industrial Producción B12.
El presente trabajo fue un primer informe sobre
la utilización de jarabe de maltosa y CSL para la
producción industrial de vitamina B12. En el
cálculo del azúcar puro, el precio de la maltosa
el jarabe fue aproximadamente el 53% de
sacarosa, pero el 136% de melaza de remolacha
Sin embargo, un extra de aproximadamente 20 g
/ l de sacarosa se debe agregar al medio de
fermentación cuando se usa melaza de
remolacha para la fermentación de vitamina
B12 [11]. Similar a la sacarosa refinada, el
jarabe de maltosa también podría ser eficaz
evitar un proceso de fermentación de vitamina
B12 inestable causado por los componentes
indeseables en la melaza de remolacha. Por lo
tanto, en comparación con la melaza de
remolacha, se muestra el jarabe de maltosa una
ventaja más competitiva para la producción de
vitamina B12. En una palabra, el medio de
fermentación desarrollado con maltosa jarabe y
CSL como los sustratos principales fueron
eficientes y producción de vitamina B12
económica a industrial por P.
denitrificantes en fermentadores de 120,000 l.
Conclusiones
Basado en la investigación de los efectos del
jarabe de maltosa en P. proceso de fermentación
denitrificans, junto con el análisis las
composiciones de aminoácidos en el CSL, este
documento con éxito estableció un medio de
fermentación rentable para la producción
industrial de vitamina B12 por P. denitrificans
en un fermentador de 120,000 l, con jarabe de
maltosa y maíz escarpado licor como los
sustratos principales. Como resultado, el
industrial el rendimiento de vitamina B12
podría alcanzarse a 198.27 ± 4.60 mg / l.
BIBLIOGRAFIA
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