1.

Nombre Químico del Metabolito y/o Común

2. Tipo de Metabolito:
• Primario o Secundario
• Proceso Fermentativo u oxidación incompleta
• Proceso aeróbico o anaeróbico
3. Cepas productoras
4. Función/Uso/Enfermedad por Deficiencia
5. Métodos de Producción
• Cultivo liquido
• Cultivo en sustrato solido
• Enzimático
• Químico
6. Recuperación
7. Estrategia para la Sobreproducción
Vitaminas
• Generalidades
• Vitamina B12 (Cianocobalamina)
• Vitamina B2 (Riboflavina)
• Beta Caroteno como precursor de
vitamina A
Las vitaminas son definidas como micronutrientes o factores de
crecimiento requeridos en muy pequeñas cantidades pero esenciales
para el metabolismo de todos los organismos vivos.

Las vitaminas son químicamente muy heterogéneas y se han

clasificado en dos grandes grupos en función de su solubilidad:

VITAMINAS

Liposolubles Hidrosolubles
Vitamina A Vitaminas del
Vitamina D grupo B
Vitamina E Vitamina C
Vitamina K Biotina (H)
La Función Bioquímica de las vitaminas es actuar como
coenzimas.
Las coenzimas, son requeridas por algunas moléculas enzimáticas
para formar enzimas metabólicamente activas.

Las vitaminas (salvo algunas pocas, como  la vitamina D) no

pueden ser sintetizadas por los animales y el ser humano, es decir,
su pérdida no puede reemplazarla el propio metabolismo, por ello
deben ser obtenidas del exterior a través de la alimentación.
1 Nutricional y Fisiológica

2 Aditivo en Alimentos

3 Agentes Terapéuticos

4 Auxiliares Tecnológicos
EXTRACCION SINTESIS QUIMICA PROCESOS
PROCESOS
BIOLOGICOS
BIOLOGICOS
Vitamina
Vitamina E
(-tocoferol)
Vitamina k
(Filoquinona, menaquinona)
Vitamina C (Ac. ascórbico)
Biotina
Vitamina B2 (riboflavina)
Vitamina B12 (cianocobalamina)
- caroteno (pro vitamina A)
Enzima/microorganismo usado
Euglena gracilis
Bacillus subtilis
2,5 diceto-D-ac. gluconico
reductasa de Cynobacterium sp.
Serratia marscencens
Ashbya gossypii, Bacillus sp.
Propionibacterium shermanii,
Pseudomonas desnitrificans
Blakeslea trispora
Dunaniela salina
 1.Hoffmann La Roche
(Switzerland),
2.BASF (Germany),
3.ADM (USA),
4.Hubei Guangji (China)
5.Merck (Germany)
6.Takeda (Japan)

 El Mercado global para las vitaminas es de

aproximadamente 2.5 millones de Dlls y se
estima un incremento a 9.3 billones para el
2020.
• Historia
• Estructura
• Cepas de importancia Industrial
• Producción y recuperación
• Función

Polarised light micrograph of crystals of vitamin B12

Magnification: x50 at 35mm  

La deficiencia de vitamina B12 produce una enfermedad
conocida como anemia perniciosa.
En 1926, dos investigadores descubrieron que los extractos
de Hígado podían curar la anemia perniciosa.
En 1934 se les dio el premio Nobel en Medicina.
En 1958 se logró aislar y cristalizar la vitamina B12 a partir
de extractos de hígado.
Los requerimientos son de aproximadamente 1 g/ día
Se requiere para el funcionamiento de dos enzimas:
• metionina sintasa y metilmalonil-CoA mutasa.
1.En su estado puro es un compuesto amargo de color rojo
intenso y forma cristales alargados

2.Las formas naturales de la vitamina B12 son:

 metilcobalamina
 5-deoxiadenosilcobalamina
 hidroxicobalamina
 La vitamina B12 es una vitamina sintetizada exclusivamente por
microorganismos .
 El hígado es la principal fuente de vitamina B12 (1 ppm en hígado).
 Las necesidades de vitamina B12 son cubiertas por la ingestión de
alimentos (carne, productos lácteos y huevos, los vegetales no
proporcionan esta vitamina) o por la absorción de vitamina B12
producida por microorganismos intestinales.
 Su deficiencia produce anemia perniciosa, esta enfermedad se
presenta debido a un defecto en la absorción por la falta de una
glucoproteína que transporta la vitamina B12 al torrente sanguíneo.
con los característicos síntomas de mala producción de glóbulos rojos,
síntesis defectuosa de la mielina (vaina nerviosa) y pérdida del
epitelio (cubierta membranosa) del tracto intestinal.
La obtención por vía química es impráctica ya que se requieren 70
etapas de reacción.

Actualmente la producción de vitamina B12 se lleva a cabo

exclusivamente por vía microbiana.

La vitamina B12 fue primero obtenida comercialmente como un

subproducto de la producción de estreptomicina con Steptomyces sp
con rendimientos de 1 mg/l.

Merck inició la producción de vitamina B12 en 1952 utilizando

Pseudomonas desnitrificans la cual fue manipulada genéticamente para
incrementar los rendimientos .
Se requiere la participación de mas de 30 genes
para la biosíntesis de esta vitamina
Se han descrito dos rutas biosintéticas:
 Aeróbica (Pseudomonas desnitrificans)
 Anaeróbica (Propionibacterium shermanii, Bacillus
megaterium).
La mayoría de los procesos para producción de vitamina B12 usan
glucosa como fuente de carbono.

Los mayores rendimientos se han obtenido con

Propionibacterium freudenreichii (206mg/l)

Pseudomonas desnitrificans (300mg/l)

La principal estrategia para la sobreproducción de vitamina B12 ha sido

la mutación y selección.

En todos los casos se requiere la adición de cobalto y de 5,6-

dimetilbenzimidasol como precursores.
Propionibacterium freudenreichii y Propionibacterium
shermanii, son utilizados en procesos de dos etapas con adición
de cobalto.
Todas las cepas de Propionibacterium son microaerofilicas y
producen vitamina B12 en ambientes con bajas concentraciones
de oxigeno.
La ultima parte del proceso requiere oxígeno.
Fuente de Carbono: glucosa
Fuente de Nitrógeno: extracto de levadura.
Mantener el pH en 7 mediante la neutralización de Ac.
propiónico.
El Proceso Consiste en una fase anaerobia preliminar (3 días),
se produce 5’-deoxiadenosilcobinamida.
En una segunda fase aeróbica (3 días) se produce
5’deoxiadenosilcobalamina (coenzima B12).
Ambas etapas pueden ser operadas en cascada en un proceso
semicontinuo.
Pseudomonas desnitrificans es la especie más
productiva.
La producción se realiza en un proceso de una etapa,
con adición de cobalto 0.188 g/l y 5,6-
dimetilbenzimidasol.
Fuente de carbono: melazas
Fuente de nitrógeno: extracto de levadura.
3-4 días a 30°C pH 6-7
 Actualmente se cuenta con cepas resistentes a altas
concentraciones de cobalto y producen 100,000
veces mas B12 de la que requieren.
 Las cepas recombinantes pueden acumular 300mg/l
de vitamina B12
 La construcción se hizo amplificando 8 genes en el
operón cobF-cobM
 Se incrementó el numero de copias de los genes
utilizando multicopias de plásmidos.
 El valor de la vitamina B12 es de $8,000 dl/Kg
 Se producen anualmente 35 Toneladas
 El 70% son para la industria farmacéutica y el resto
va a la industria de alimentación
 Pseudomonas desnitrificans

Desarrollo de inoculo
(Medio sólido a base de melazas, extracto de levadura y
sales)
96 h, 28°C

Precultivo
(Matraz de 1 l con el mismo medio pero líquido)
72 h, 28°C, 250 r.p.m.

Cultivo
Bioreactor con el mismo medio de cultivo
90h, 29°C, 450 r.p.m., 1 VVM
 Se utilizan las células completas
 Se calienta el cultivo completo a 120°C por 30
minutos pH 8.5.
 Se da un tratamiento con tiocianato para convertir la
vitamina a una forma más estable, cianocobalamina.
 Filtración y precipitación selectiva con acido tánico,
(vitamina con 80% de pureza).
 Posteriormente se realizan etapas de purificación con
solventes (agua/butanol) , resinas de intercambio
iónico, y cristalización para obtener un producto con
calidad farmacéutica.
 Los animales y humanos requieren la vitamina
B12 para el funcionamiento de dos enzimas:
 Metilmalonyl-CoA mutasa, involucrada en el
metabolismo de propionil-CoA (-oxidacion)
 Metionina sintetasa, involucrada en la síntesis de
metionina
Es una coenzima que transfiere grupos metilo
Interviene en la síntesis de metionina
Interviene en la formación de glóbulos rojos.
Mantiene la vaina de mielina de las células nerviosas
Es necesaria en la degradación de de los Ac. Grasos
 Historia
 Estructura
 Cepas de importancia Industrial
 Producción y recuperación
 Función
 Historia y Generalidades:
La riboflavina pertenece al grupo de pigmentos amarillos
fluorescentes llamados flavinas.
En 1879 fue descubierto un pigmento amarillo verdoso en la
leche, a la que se le llamó flavina.
En 1933 se descubrió que se trataba de una vitamina
Su estructura fue confirmada por síntesis química en 1935.
Esta constituida por una unidad de ribosa y tres anillos de
flavina.
En su estado puro es un compuesto amargo de color naranja y
cristaliza en forma de agujas.
Estructura:

La riboflavina es un derivado de aloxacina:

6,7-dimetil-9-(D-1-ribitil)-isoaloxacina.
O

H3C N
NH

H3C
N N O

CH2

H C OH

H C OH

H C OH

H2 C OH
La riboflavina se halla
mayoritariamente combinada
formando parte de dos coenzimas,
el FAD (flavín adenín dinucleótido) y
el FMN (riboflavina fosfato o Flavin
mononucleótido), denominados
comúnmente coenzimas flavínicos,
y como tales interviene en los
procesos enzimáticos relacionados
con la respiración celular, en
reacciones de óxido-reducción de
los glúcidos (ciclo de Krebs) y
ácidos grasos (beta-oxidación),
descarboxilación oxidativa entre
otras.

Sus fuentes naturales son las

carnes, lácteos, cereales y
vegetales verdes.
Es sintetizada por plantas y microorganismos pero no por animales,
ni el hombre.
Los requerimientos diarios pueden ser suplementados por ingestión
de carne, huevos, leche y vegetales de hoja verde.
La deficiencia de riboflavina produce una enfermedad llamada
arriboflavinosis que es un tipo de dermatitis.
síntomas:
ulceraciones en la boca y labios agrietados, dificultosa curación de las
heridas, dermatitis, ojos inflamados, anemia y debilidad.
Existe una relación estadística entre prevalencia de cáncer de esófago
y deficiencia de riboflavina en la dieta.
Esta vitamina es resistente al calor pero sensible a la luz solar, se
puede perder hasta un 50% de su contenido.
 La ingestión diaria recomendada para un adulto es de 1.7 mg. 
Ashbya gossypii (20 g/l).
Bacillus pumillus y B. subtilis, modificados por ingeniería
genética.
Ashbya gossypii, produce 40,000 veces mas B2 de la que
requiere.
requiere
Los principales productores de vitamina B2 son: Hoffmann-La
Roche (Switzerland), BASF (Germany), ADM (USA), Takeda
(Japan)].
La producción industrial es de aproximadamente 4,600
toneladas por año.
La riboflavina se produce por tres métodos en forma
comercial:

1.- Síntesis química (20% de la producción mundial).

2.- Biotransformación de glucosa a D-ribosa por mutantes de

Bacillus pumilus y subsecuente conversión química de la ribosa
a riboflavina (30% de la producción mundial).

3.- Producción Microbiana, directa (50% de la producción

mundial).
La producción vía microbiana se lleva a cabo con Ashbya gossypii,
con rendimientos arriba de 20g/l.
Utiliza fuentes de carbono como: glucosa, líquido de remojo de
maíz, sacarosa, maltosa y aceite de soya.
Como fuente de Nitrógeno se utiliza peptona
Se utiliza un inoculo de (0.75 – 2%) por 24 a 48 h.
El proceso toma 7 días con una aireación de 0.3 VVM a 28°C.
Para el control de espuma, se utiliza antiespumantes como silicones
y aceite de soya.
La riboflavina está presente tanto en el micelio como en el
sobrenadante.
 Recientemente Nippon Roche, Japón ha
desarrollado y comercializado la producción de
riboflavina con una cepa recombinante.
 Utiliza una cepa recombinante de Bacillus subtilis
que produce riboflavina a partir de glucosa en un
proceso alimentado.
 La cepa recombinante contiene múltiples copias del
operon de riboflavina modificado e integrado en
dos sitios diferentes del cromosoma de B. subtilis.
 El operon rib modificado se expresa
constitutivamente.
 Para liberar la vitamina se da una aplicación de
calor (1 hora, 120 °C), en condiciones acidas, se
descarta el micelio y posteriormente se purifica
la riboflavina.
 Para la purificación el producto se neutraliza
primero con hidróxido de sodio, se cristaliza
nuevamente con acido clorhídrico y
posteriormente se limpia con solventes y agua.
 Posteriormente se realizan etapas de purificación
con resinas de intercambio iónico, y
cristalización para obtener un producto con 95 a
98% de pureza.
Es constituyente de dos coenzimas la FMN y FAD, ambas son
grupos prostéticos de deshidrogenasas aeróbicas y actúan como
receptores de H.

Interviene en :
•Cadena Respiratoria
•Ciclo de Krebs
•-oxidación
•Descarboxilación oxidativa
•Formación de Ac. Úrico
•Glutatión reductasa
 Historia
 Estructura
 Cepas de importancia Industrial
 Producción y recuperación
 Función
 La vitamina A se descubrió en 1915, y fue denominada como
factor liposoluble atribuyéndole propiedades para estimular el
crecimiento.
 En 1920 se le denominó como vitamina A.
 Más adelante se estableció que muchos productos vegetales
mostraban las mismas propiedades nutricionales de la vitamina
A y se encontró que contenían pigmentos amarillos denominados
carotenos y que el cuerpo humano puede convertir en vitamina
A.
 En 1937 se aisló por primera vez la vitamina A en su forma
cristalina
 En 1947 se sintetizó la vitamina A en forma pura cristalina
 El ß­caroteno fue por primera vez sintetizado en 1950.
 La vitamina A en la naturaleza se encuentra en tres estados diferentes de
oxidación: como retinol la podemos obtener de fuentes como leche y
huevos, como retinal y como acido retinoico.
 Como pro vitamina A (-caroteno) de plantas como espinacas, zanahorias
etc.
 Aproximadamente el 80 y 90 % del Retinol se absorbe
 Los beta carotenos se absorben entre un 30 a 40 %.
 La mayor parte de la vitamina A, casi el 90% se almacena en el hígado,
siendo el resto depositado en los pulmones, riñones y grasa corporal.
 La deficiencia de Vitamina A produce ceguera nocturna o Xeroftalmia ,
además de cambios en la piel y en las mucosas.
 Los requerimientos diarios son de aproximadamente entre 800 a 1000 g
en adultos.  
 La vitamina A es esencial para la biosíntesis normal de mucopolisacáridos y mucopolipeptidos , es necesaria para
un crecimiento normal, una adecuada respuesta inmune, para la reproducción, para el desarrollo fetal y es
fundamental para que se lleve a cabo correctamente el ciclo visual.
 Cuando la vitamina A es ingerida en grandes dosis durante largos periodos de tiempo puede ser toxica.
 Toxicidad aguda: resultado de una dosis muy elevada o varias dosis en un periodo corto. Síntomas vértigo vomito, dolor
de cabeza, visión borrosa.
 Toxicidad crónica: somnolencia, inapetencia, inactividad física, anormalidades óseas.
 Toxicidad teratogenica: influye en células embrionarias atraviesa la placenta y se almacena en el hígado fetal.


 El -caroteno es un precursor de la vitamina A.
 Existen más de 50 carotenoides que pueden ser convertidos en
vitamina A
 De todos ellos, los beta-carotenos son los que contribuyen casi
en su totalidad como pro-vitamina A en los alimentos.
 Los carotenoides se han encontrado en muchos tejidos animales
y vegetales, pero se sintetiza exclusivamente en plantas y
microorganismos.
 Es convertido a vitamina A en la mucosa intestinal y es
almacenada en el hígado en forma de un éster de palmitato.
 La demanda de -caroteno es de aproximadamente 100
toneladas por año.
 Principalmente se usa como colorante en alimentos (margarina,
queso, huevos), como aditivo en alimentos balanceados para
pollos y en cosméticos.
Estructura:

Los carotenos son derivados

de isopreno altamente
insaturados.

CH3 CH3 CH3 CH3 CH3

CH3 CH3
B-caroteno
CH3 CH3

Retinol (Vitamina A)
La producción de -caroteno por vía microbiana se
realiza con Blakeslea trispora
Producción por vía microbiana con B. trispora:
Se lleva a cabo en proceso sumergido
usando un cultivo mixto de cepas + y -.

B. trispora B. trispora
Zygosporas (+) zygosporas(-)

Precultivo Almidón Precultivo

LRM
48h 26°C

Cultivo mixto
Almidón
Harina de soya
Aceite de algodón
Antioxidantes
185h 26°C 1.3 VVM
Dunanilla salina
PRINCIPALES PRODUCTORES DE -CAROTENO
Síntesis química
Rovimix®
Biotecnológica
Dunaliella salina: Betatene®

Biotecnológica
B. trispora

Biotecnológica
B. trispora: Caropure®

Biotecnológica
B. trispora: Vitatene ®
El ß-Caroteno se queda en el micelio y
puede usarse así directamente
secándolo como aditivo en alimentos
para animales o se purifica
removiéndolo del micelio con
metanol.
Extracción liquido-liquido , bajando
la polaridad de los solventes. En
atmosfera de Nitrógeno.
La vitamina A está involucrada en procesos tales como:
• Visión (nocturna, diurna y colores)
• Integridad de células epiteliales frente a infecciones
• Respuesta inmunológica
• Hematopoyesis (formación de células sanguíneas)
• Crecimiento esquelético
• Fertilidad (masculina y femenina)
• Embriogénesis
 La deficiencia de vitamina A es una de las principales
causas de ceguera y muerte prematura en los niños que
viven en sociedades que basan su alimentación en el arroz,
como muchos países asiáticos y africanos (ver figura 1)
Es una variedad de arroz Oryza sativa producido por
ingeniería genética para biosintetizar -caroteno.
Fue creado para utilizarse en áreas que tienen grandes
deficiencias de vitamina A.
En el 2005 se obtuvo una nueva variedad de arroz Golden 2
que produce 23 veces mas beta caroteno que la variedad
original de arroz golden.
El proyecto del arroz dorado intenta que agricultores de países
subdesarrollados puedan obtener las semillas sin costo, y cultivar la
nueva variedad de arroz sin cambiar sus costumbres y metodologías
agrícolas

Figura 6. Cultivo de arroz. Las fotos muestran cómo los agricultores de

países asiáticos cultivan arroz. Tomado de www.goldenrice.org
La vitamina A está presente tanto en el citoplasma de los bastones como en el
epitelio pigmentario de la retina; en condiciones normales siempre se encuentra
disponible para formar nuevo retinal cuando se necesita. Cuando la cantidad
de retinal en la retina resulta excesiva, el sobrante se convierte de nuevo en
vitamina A, con lo que disminuye la cantidad de pigmento fotosensible de la retina.
Esta interconversión entre el retinal y la vitamina A contribuye de modo especial a la
adaptación a largo plazo de la retina a las diferentes intensidades de luz.