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Laboratorio Clinico Del Centro Nacional De Código:

POE –H-001
Salud Renal
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Procedimiento Operativo Estandarizado 0.0
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1 - SITUACIÓN DE REVISIÓN:

Versión Fecha Alteración


1.0 2 de septiembre de 2013 0.0

2 - OBJETIVO:
Establecer procedimientos para la realización de la prueba de Hemograma 5 estirpes.

3 - CAMPO DE APLICACIÓN:
3.1 Médico Patólogo Encargado del Laboratorio
3.2 Tecnólogo Responsable del Sector
3.3. Coordinador Técnico
3.4 Responsable de la Garantía de la Calidad
3.5 Tecnólogos Médicos y Laboratorista Clínico de apoyo en el Área.

4 - PRINCIPIO DE LA PRUEBA:
El analizador hematológico automatizado Sysmex XT -4000i, utiliza diferentes tecnologías para
determinar los parámetros los cuales son:

Corriente eléctrica/enfoque hidrodinámico Hematíes y plaquetas


Método colorimétrico de Hemoglobina (SLS) Hemoglobina
Altura de Pulso acumulado Hematocrito
Citometria de flujo Leucocitos (WBC)/BASO
Citometria de flujo fluorescente Neutrófilos, linfócitos, monócitos,
eosinofilos, reticulocitos/plaquetas ópticas.

5 - APLICACIÓN CLÍNICA:
El hemograma es un conjunto de exámenes que evalúan los diferentes elementos celulares de
la sangre, como son los glóbulos rojos, los leucocitos y las plaquetas. Es uno de los primeros
exámenes de laboratorio para la valoración diagnóstica de un paciente, y que orienta en el
hallazgo y seguimiento de enfermedades hematológicas y no hematológicas (infección e
inflamación, etc.). En el Centro Nacional de Salud Renal los test de hemoglobina, y hematocrito
son los de mayor uso dentro de los parámetro analizados. La anemia es un síndrome que se
caracteriza por una disminución de la concentración de hemoglobina por debajo de lo normal,
del recuento de eritrocitos o del hematocrito, constituye una alteración muy corriente y una
frecuente complicación de otras enfermedades como es en el caso de ERC y su severidad está

Nombre: Nombre:
Lic. Bertha Pérez Truyenque Dra. Soledad Palomino Palomino
Aprobado
Cargo: Tecnólogo Médico Cargo: Jefe del Laboratorio Clinico
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Fecha: Liberado Fecha:
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en relación inversa con el grado de función renal, en pacientes tratados con agentes
estimuladores de eritropoyetina se debe realizar la monitorización de la Hb.

6 - MUESTRA:
6.1. Muestra de sangre con EDTA tripotàsico
6.2. No se requiere ayuno
6.3. La sangre total puede ser almacenada en la heladera de 2 a 8ªc hasta por 24 horas
6.4. Volumen de muestra modo automático cerrado 150ul
6.5. Volumen de muestra modo manual cerrado 150ul
6.6. Volumen de muestra modo manual abierto 85ul

7 - CALIDADES, CONTROLES, REACTIVOS Y OTROS INSUMOS:


7.1. Reactivos suministrados por el fabricante del kit.
7.1.1. CELLPACK (diluyente RBC/PLT y HGB)
7.1.2. STROMATOLYSER -4DL (reactivo lisante para el diferencial)
7.1.3. STROMATOLYSER -4DS (colorante para el diferencial)
7.1.4. STROMATOLYSER –FB (diluyente y lisante para basòfilos)
7.1.5. SULFOLYSER (lisante para hemoglobina)
7.1.6. DILUYENTE RET SEARCH II (diluye la muestra)
7.1.7. COLORANTE RET SEARCH II (tiñe reticulocitos y plaquetas para análisis)
7.1.8. CELLCLEAN.
7.2. Controles e-CHECK de Sysmex
7.2.1. e-CHECK (XE) nivel bajo
7.2.2. e-CHECK (XE) nivel normal
7.2.3. e-CHECK (XE) nivel alto
7.3. Reactivos no suministrados por el fabricante del Kit.
7.3.1. Muestras de sangre total preservada para control externo RIQAS

8 - EQUIPOS:
Analizador hematológico automatizado Sysmex XT-4000i

9 - PROCEDIMIENTO DETALLADO:
9.1.1 Recepción de la muestra del área preanalitica
9.1.2 Verificación de la identificación de la muestra con la solicitud del usuario
9.1.3 Verificar calidad de la muestra para procesamiento hematológico.
9.1.4 Comprobar que el equipo tenga los reactivos necesarios.
9.1.5 Verificar que el control de calidad se encuentre dentro de los parámetros establecidos

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9.1.6 Identificar al paciente en el sistema de gestión hospitalaria del CNSR ò de Clínicas


contratadas según corresponda.

9.1.7 Generación de etiquetas con código de barras y selección de la prueba que corresponda
9.1.8 Pegar el código de barras al tubo correspondiente.
9.1.9 Introducir el tubo en el rack del equipo
9.1.10 Presionar tecla Start, corroborando que equipo funcione adecuadamente.
9.1.11 Verificar que resultados se encuentre en el sistema de gestión hospitalaria
9.1.12 Validación técnica del resultado de la prueba

10 - CÁLCULOS:
➢ HEMATIES Y PLAQUETAS: Cuando una célula pasa a través de la apertura de la cámara
cónica origina un pulso celular, un histograma es la representación gráfica de esta
medición. Para determinar cuales impulsos representan hematíes y cuales plaquetas, se
utilizan discriminadores flotantes (variables) .Se analizan histogramas de hematíes y
plaquetas en los siguientes rangos.
o Hematíes: Aproximadamente 25 – 250 fl
o Plaquetas: Aproximadamente 2 - 30 fl
➢ HEMATOCRITO: Se calcula el hematocrito por medio del método de detección de altura
de pulso. El hematocrito expresado como porcentaje, se determina comparando el
volumen total o acumulado de hematíes con el volumen de sangre total en la dilución.
➢ HEMOGLOBINA: La hemoglobina reacciona con SLS y es convertida a SLS-HGB. La
concentración de hemoglobina SLS es medida como absorbancia de luz y es calculada por
comparación con la absorbancia del diluyente, medida antes de que la muestra fuera
añadida.
➢ LEUCOCITOS Y DIFERENCIAL: La luz dispersada frontal, proporciona información sobre
el tamaño de las células sanguíneas y la luz dispersada lateral, proporciona información
sobre el interior de las células (ejm. el tamaño del núcleo)
➢ LEUCOCITOS/BASOFILOS: Son discriminados uno de los otros por volumen celular
(dispersión frontal) y estructura interna (dispersión lateral)
➢ DIFERENCIAL: Los linfocitos, monocitos, neutrofilos y eosinofilos son discriminados uno
de los otros en base a la cantidad de ácido nucleico que contienen.
➢ RETICULOCITOS Y PLAQUETAS OPTICAS: La intensidad tanto de la luz dispersa frontal
como de la luz fluorescente lateral de cada célula, son indicadores del tamaño celular
relativo y del contenido de ARN respectivamente.

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11 - CONTROL DE CALIDAD:
11.1. La validez del resultado de la prueba es comprobada por la utilización de control
hematológico e-check sysmex, nivel bajo, normal y alto. que son suministrados por el
fabricante y por la evaluación de estos datos en el programa de INSIGHT.
11.2. Mensualmente, se realiza el control externo de RIQAS, cuyos resultados son evaluados
por el programa y comparados con los resultados reportados por los demás laboratorios
participantes.

12 - VALORES DE REFERENCIA:
Conteo de Glóbulo Rojos : (*)  
Hombres 4.7 a 6.1 millones de
Células/mcL
Mujeres 4.2 a 5.4 millones de
Células/mcL
Conteo de Glóbulo Blancos: 4500 a 10000 Células/mcL
Hematocrito (*)  
Hombres 40.7 a 50.3 %
Mujeres 36.1 a 44.3 %
Hemoglobina (*)  
Hombres 13.8 a 17.2 gr/dl
Mujeres 12.1 a 15.1 gr/dl
V.C.M 80 a 95 fL
H.C.M 27 a 31 pg
C.H.C.M 32 a 36 g/dl

(*) Varía con la Altitud.

❖ El valor alterado de los leucocitos informa sobre posibles inflamaciones o infecciones.

FORMULA LEUCOCITARIA Valor


Neutrófilos segmentados 45 a 75%
Eosinofilos 0 a 3%
Basofilos 0 a 2%
Monocitos 5 a 10%

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Linfocitos 15 a 45%

13 - LINEARIDAD Y LÍMITES DE DETECCIÓN:


La linealidad del analizador XT-4000i es:

Globulos Blancos (WBC) 0 – 440 x 10 3/ul


Globulos Rojos (RBC) 0 - 8.00 x 10 6/ul
Hemoglobina (HGB) 0 - 25.0 x g/dl
Hematocrito (HCT) 0 – 60 %
Plaquetas (PLT) 0 - 5.00 x 10 6/ul
Reticulocitos (RET) 0 - 23.0 %

14 – REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
A. Guía preparatoria para entrenamiento del XT-4000 Documento No, revisión 02. Sysmex
América y el caribe, febrero 2010
B.John Bernard Henry, M: D.El Laboratorio en el diagnóstico clínico, edición original
.Philadelphia, Pensylvania, USA.

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