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MANUAL DE PRCTICAS
PRCTICA No 10
COMPETENCIAS.
1. Comprende la importancia de la determinacin de la protena C reactiva en procesos
inflamatorios.
2. Comprender el concepto de serologa y aplicarlo correctamente.
3. Valorar el papel de las pruebas inmunocromatogrficas rpidas en el diagnstico de
enfermedades bacterianas.
II.
INTRODUCCION:
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III.
MATERIAL Y METODOS:
3.1. Materiales:
Reactivos.
MUESTRAS
Suero fresco. Estable 8 das a 2-8C o 3 meses a -20C.
Las muestras con restos de fibrina deben ser centrifugadas antes de la prueba.
No utilizar muestras altamente hemolizadas o lipmicas.
3.2. Procedimiento:
DETERMINACIN DE PROTENA C REACTIVA
Mtodo cualitativo
1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La sensibilidad del
ensayo disminuye a temperaturas bajas.
2. Depositar 50 L de la muestra (Nota 1) a ensayar y una gota de cada uno de los
controles Positivo y Negativo, sobre crculos distintos de un porta.
3. Homogeneizar suavemente el reactivo de PCR- ltex antes de usar. Depositar una
gota (50 L) junto a cada una de las gotas anteriores.
4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie
interior del crculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.
5. Situar el portaobjeto sobre un agitador rotatorio a 80 100 r.p.m. y agitar durante 2
minutos. El exceso de tiempo puede originar la aparicin de falsos positivos.
Mtodo semicuantitativo
1. Realizar diluciones dobles de la muestra en solucin salina 9 g/L.
2. Proceder para cada dilucin, como en la prueba cualitativa.
4. RESULTADOS
LECTURA E INTERPRETACION
Examinar macroscpicamente la presencia o ausencia de aglutinacin inmediatamente
despus de retirar el portaobjeto del agitador. La presencia de aglutinacin indica una
concentracin de PCR igual o superior a 6 mg/L (Nota 2 y 3).
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