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HOSPITAL

UNIVERSITARIO OBTENCION DE MUESTRAS PARA POE- 04


JAPONES HEMATOLOGIA

Pág. 1-2
POE -04 HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Obtención de sangre venosa o arterial para la realización de
las diferentes pruebas

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ.

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método manual con jeringas o con agujas y tubos Vacutainer

5.- FUNDAMENTO Obtener sangre venosa arterial o capilar mediante una


buena toma de muestra para la realización de diferentes
análisis.

5.1.- LINEALIDAD Desde 0.5 hasta 10 ml. de sangre total.

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre Anticoagulada con EDTA al 10% o Citrato de Na al


3.8%

5.3.- CANTIDAD De 0.5 a 10 ml de sangre venosa o arterial

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa arterial o capilar

5.5.- REACTIVOS Solución de EDTA al 10%


Citrato al 3.8%

5.6.- EQUIPO Jeringas de 1, 3, 5 o 10cc.

5.7.- TECNICA 1. Desinfectar la piel (Etanol al 70%)


2. Punción de la vena (con torniquete y jeringas o
soportes vacutainer.
3. Colocar la sangre en los tubos requeridos.
4. Invertir con suavidad y uniformidad varias veces

5.8.-PRECAUCION 1. Utilizar las proporciones correctas y cantidades


adecuadas.
2. Evitar la tensión para evitar hemólisis o alteraciones
fisiológicas.
3. Alimentos con alto contenido de grasa alteran los
resultados

CONTTROL DE CALIDAD

INTERFERENCIAS Plasma hemolizado o plasma lipémico

VALOR DE REFERENCIA Sangre total sin hemólisis

FORMULAROS Y Orden médica


REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General
Registro en Hematológica

1
Salida( formulario o reporte)

REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnostico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry
LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio
Registro Gral.
Área Preanalítica
Área de Hematologia

CONTROL DE CALIDAD Utilizar control de calidad verificar las jeringas, los tubos de
ensayo, vacutainer u otros , niveles de controles
hematológicos realizado 3 veces al por un mes
REDACTADO POR : REVISADO POR APROBADO POR :
DRA. LUCY ROBLES DE COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
HEMATOLOGIA

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HOSPITAL
UNIVERSITARIO HEMOGRAMA POE- 04
JAPONES

HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.3-4


REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Biometría hemática mediante la cual determinamos los
diferentes parámetros hematológicos para corroborar en el
diagnostico de los pacientes.

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ.

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Métodos cuantitativos que nos brindan los valores de los
diferentes parámetros hematológicos

5.- FUNDAMENTO Se basa en la determinación de hematocrito, hemoglobina,


recuento de eritrocitos, índices hematimétricos, recuento de
leucocitos, fórmula diferencial leucocitaria y recuento de
plaquetas. Estos datos nos orientan hacia la patología del
paciente: anemia, poliglobulia, infecciones agudas,
septicemias, púrpuras, leucemias, etc.

5.1.- LINEALIDAD

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre Anticoagulada con EDTA o heparinizada (venosa,


arterial o capilar.

5.3.- CANTIDAD De 0.5 a 3 ml de sangre venosa, arterial o capilar.

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa arterial o capilar

5.5.- REACTIVOS Solución de EDTA y reactivos que se implementan para los


recuentos globulares , plaquetas y recuento diferencial
leucocitario y determinación de hematocrito y hemoglobina

5.6.- EQUIPO Los utilizados en la determinación de los diferentes


parámetros hematológicos , descritos posteriormente en
forma especifica: ABX micros 60, ABX pentra 60

5.7.- TECNICA Descritas específicamente para cada parámetro


hematológico

5.8.-PRECAUCION Evitar ejercicios violentos


Pacientes en ayunas preferentemente
Evitar sangre con micro coágulos

CONTROL DE CALIDAD Control calidad interno usando control hematológico


diferentes niveles
INTERFERENCIAS Sangre hemolizada
Sangre con micro coágulos

VALOR DE REFERENCIA Valor de un hemogrma completo normal

FORMULAROS Y Orden medica

3
REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnostico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry
LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio
Registro Gral.
Área Pre analíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR : REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES DE COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
HEMATOLOGIA

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HOSPITAL RECUENTO DE ERITOCITOS POE- 04
UNIVERSITARIO
JAPONES
Pág. 5-6
REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE
HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Determinar la concentración de Eritrocitos por mm. 3 de
sangre

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método Hemocitométrico

5.- FUNDAMENTO El recuento de los eritrocitos presentes en una muestra de


sangre total

5.1.- LINEALIDAD Dilución de 1/200 de sangre homogénea con solución


fisiológica (solfís coloreada con azul de metileno)

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre Anticoagulada con EDTA

5.3.- CANTIDAD De 1 a3 ml. De sangre con EDTA

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa arterial o capilar

5.5.- REACTIVOS Solución de EDTA


Solución de HAYEN A

5.6.- EQUIPO Cámara de Newbawer.


Pipetas dilutóras
Microscopio
Tubos de ensayo

5.7.- TECNICA Dilución de la sangre 1/ 200 con liquido diluyente


Cargado de las cámara de Newbawer.
Recuento de los eritrocitos depositados en 5 cuadrados
secundarios del retículo central con el microscopio (Objetivo
40%)
Numero de hematíes = # de eritrocitos contados x 10000

5.8.-PRECAUCION 1. Llenar correctamente la cámara Newbawer.


2. Contar correctamente el numero de células en el
volumen referido
3. Evitar presencia de burbujas

CONTROL DE CALIDAD Control Calidad interno de hematologia

INTERFERENCIAS 1. Sangre hemolizada


2. Sangre con mucho anticoagulante

VALOR DE REFERENCIA Mujeres: 4200000-5400000


Hombres 4600000-640000
Niños 4200000-5200000
Lactantes 3800000-5200000
Recién nacidos 5000000-6000000

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FORMULAROS Y Orden médica
REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnostico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry

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Registro Gral.
Área Preanalíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR : REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES DE COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
HEMATOLOGIA

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HOSPITAL DETERMINACION DEL HEMATOCRITO POE -04
UNIVERSITARIO
JAPONES
Pág.7- 8
HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO  Medir el volumen globular eritrocitario y el volumen
plasmático en sangre venosa mediante su
separación por centrifugación.
 Determinar el valor del hematocrito

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Micro método por centrifugación

5.- FUNDAMENTO El valor del hematocrito es importante ya que aumenta o


disminuye con el numero de hematíes y la concentración de
hemoglobina que varían con la edad y sexo

5.1.- LINEALIDAD La cifra será un porcentaje de la fracción globular en relación


a la plasmática. Puede variar desde 3 hasta 80 o 90 %

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre total anticoagulada con EDTA o heparina (neonatos)

5.3.- CANTIDAD 1 a 3ml

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa arterial o capilar

5.5.- REACTIVOS EDTA


Heparina
Plastilina

5.6.- EQUIPO Microcentrífuga


Ábaco
Tubos capilares

5.7.- TECNICA Llenar el micro tubo por capilaridad Hasta las ¾ partes de
su capacidad.
Sellar en el extremo inferir con plastilina.
Centrifugar 5 min. A 10000 r.p.m.
Realizar la lectura en el ábaco coincidiendo el cero con el
comienzo de la columna hemática y el 100 con el nivel
superior del plasma.
La altura de la capa globular indica el hematocrito.

5.8.-PRECAUCION Asegúrese de mezclar bien la sangre.


Respetar el tiempo y las r.p.m indicados
Llenar adecuadamente el capilar
CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Sangre hemolizada.
Patologías como leucemias y otras
Anticoagulante en exceso

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VALOR DE REFERENCIA Mujeres: 37 a 45 %
Hombres 40 a 50%
Niño (5 años) 38 a 44%
Lactantes (3 meses) 35 a 40%
Recién nacidos 48 a 58 %

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Área Pre analíatica
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HEMATOLOGIA

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HOSPITAL DETERMINACION DE HEMOGLOBINA POE - 04
UNIVERSITARIO
JAPONES
Pág. 9-10
HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Cuantificar la concentración de hemoglobina de los
eritrocitos

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método calorimétrico de la cianometahemoglobina

5.- FUNDAMENTO La hemoglobina es el pigmento rojo que se encuentra en los


eritrocitos se compone de cadenas de proteínas y moléculas
que contienen hierro. Transportan oxigeno a las células de
los tejidos del organismo.
La sangre diluida con el liquido de DRABKIN , que destruye
los eritrocitos y convierte la hemoglobina en
cianometahemoglobina mediante un espectro fotómetro se
mide la absorbancia que es proporcional a la cantidad de
hemoglobina en sangre

5.1.- LINEALIDAD La reacción es sensible hasta valores de mas de 25 gr. /l

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre anticoagulada con EDTA

5.3.- CANTIDAD De 1 a 3 ml. de sangre venosa

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa con EDTA

5.5.- REACTIVOS Reactivo de Drabkin


EDTA al 10%

5.6.- EQUIPO Espectrofotómetro


Tubos de ensayo.
Pipetas automáticas de 20 ul. Y 5 ml.
Baño Maria.
Reloj

5.7.- TECNICA 1. Identificar los tubos

B S D
REACTIVO 5ml. 5ml. 5ml.
ESTANDAR 20ml
SANGRE ANTICOAGULADA 20ul.

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2. Mezclar por inversión
3. Reposar 5min. a T ambiente.
4. Leer a 540 NM. Calibrando con el blanco a 100 %
de transmitancía

5.8.-PRECAUCION 1. Medir volúmenes exactos con pipetas automáticas.


2. Dejar el tiempo requerido por el procedimiento.

CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Hemólisis.

VALOR DE REFERENCIA Mujeres: 11.5 a 15gr/dl


Hombres 13 a18gr/ dl
Niños (5 años) 11.5 a 14 gr./ dl
Lactantes (3 meses) 11.3 a 13 gr./ dl
Recién nacidos 13.6 a 19.6 gr./ dl
Ancianos 12 a14 gr. /dl.

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HEMATOLOGIA

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HOSPITAL DETERMINACION DE LOS INDICES POE-04
UNIVERSITARIO HEMATIMETRICOS.
JAPONES VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO.

POE-05 Pág. 10-11


HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Calcular el valor del volumen de los hematíe
2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes
departamentos del HUJ.
3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de Hematología
4.- DEFINICION Método cuantitativo
5.- FUNDAMENTO Se calcula a partir del calculo del hematocrito y el numero de
eritrocitos por mm3

5.1.- LINEALIDAD De acuerdo a la formula establecida o automáticamente en el


hemocontador.
5.2.- TIPO DE Sangre total anticoagulada
MUESTRA
5.3.- CANTIDAD 1 a 3 ml.

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa anticoagulada.

5.5.- REACTIVOS Los utilizados para recuento de eritrocitos y determinación de


hematocrito.
5.6.- EQUIPO Los utilizados para recuento de eritrocitos y determinación de
hematocrito.
5.7.- TECNICA
Hto% x 10
VCM = ---------------------------
No hematíes

5.8.-PRECAUCION Realizar los procedimientos adecuadamente.

CONTROL DE
CALIDAD
INTERFERENCIAS Sangre hemolizada

VALOR DE 88 a 92 fl.
REFERENCIA
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DISTRIBUCION Registro Gral.
Área Pre analíatica
Área de Hematologia
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DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
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DETRMINACION DE LOS INDICES
HOSPITAL HEMATIMETRICOS: POE-04
UNIVERSITARIO HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA
JAPONES
POE-05
HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág. 12-13
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Calcular el valor de la concentración de la hemoglobina de un
hematíe individual medio en picogramos (pg)

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de Hematología

4.- DEFINICION Método cuantitativo

5.- FUNDAMENTO La HCM es el contenido de hemoglobina en el promedio de


eritrocitos

5.1.- LINEALIDAD Dependen de la concentración de hemoglobina y el recuento de


eritrocitos

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa.

5.3.- CANTIDAD 1 a 3 ml.

5.4.- RECOLECCION Los utilizados para recuento de eritrocitos y determinación de


hemoglobina.

5.5.- REACTIVOS Los utilizados para recuento de eritrocitos y determinación de


hemoglobina.

5.6.- EQUIPO Método manual por formula o por contadores hematológicos


automáticos

5.7.- TECNICA
HB(g/l) x 10
HCM = ---------------------------
Nº hematíes ( en millones)

5.8.-PRECAUCION Realizar los procedimientos adecuadamente.

CONTROL DE CALIDAD

INTERFERENCIAS Sangre hemolizada

VALOR DE REFERENCIA 27 a 33 pg.

FORMULAROS Y Orden médica


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12
Diagnostico y tratamiento clínico por el laboratorio John Bernard
Henry

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Registro Gral.
Área Pre analíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
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13
DETRMINACION DE LOS INDICES
HOSPITAL HEMATIMETRICOS: POE-04
UNIVERSITARIO CONCENTRACION DE HEMOGLOBINA
JAPONES CORPUSCULAR MEDIA (CHCM)

POE-05
HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.14-15
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Determinar la concentración media de hemoglobina en 100ml.
de eritrocitos concentrados en % .
2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes
departamentos del HUJ
3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de Hematología

4.- DEFINICION Método cuantitativo


5.- FUNDAMENTO La CHCM ES LA CONCENTRACION MEDIA DE HB en un
volumen determinado de concentrado de eritrocitos

5.1.- LINEALIDAD Dependen de la concentración de hemoglobina y la


determinación de hematocrito
5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa.
5.3.- CANTIDAD 1 a 3 ml.
5.4.- RECOLECCION Los utilizados para recuento de hemoglobina y determinación
del hematocrito.
5.5.- REACTIVOS Los utilizados para recuento de hemoglobina y determinación
del hematocrito.

5.6.- EQUIPO Método manual por formula o por contadores hematológicos


automáticos.
5.7.- TECNICA HB(g/l) x 100
CHCM = ---------------------------
Hematocrito (%)

5.8.-PRECAUCION Realizar los procedimientos adecuadamente.

CONTROL DE CALIDAD

INTERFERENCIAS Sangre hemolizada


VALOR DE REFERENCIA 32 a36 gr. /l.
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Registro General
Registro en Hematológica
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REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnostico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry
LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio
Registro Gral.
Área Preanalíatica
Área de Hematologia
REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :
DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
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HOSPITAL RECUENTO DE LEUCOCITOS POE -04
UNIVERSITARIO
JAPONES
POE- 05
HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.16-17
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Cuantificar el número de eritrocitos por mm3

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de Hematología

4.- DEFINICION Método cuantitativo

5.- FUNDAMENTO Los leucocitos en un liquido de dilución se cuentan en una


cámara de Newbawer por medio del microscopio y se calcula
el número por mm3

5.1.- LINEALIDAD Dependen del numero de leucocitos por mm3 y las diferentes
patologías

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre total anticoagulada

5.3.- CANTIDAD 1 a 3 ml.

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa anticoagulada.

5.5.- REACTIVOS Solución de turf

5.6.- EQUIPO Tubos de hemólisis


Microscópio
Câmara de Newbawer.
Pipetas automáticade20 y 500ul.
Cubreobjetos

5.7.- TECNICA Diluir la sangre 1:20 con liquido de turf.


Cargar la cámara de Newbawer.
Contar los leucocitos en los 4 retículos exteriores

N x 20 x10
Núm0ero de leucócitos= --------------------------- = N x 50
4

5.8.-PRECAUCION Compresión exagerada y prolongada

CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Pacientes con cianosis
(sangre hemolizada)

VALOR DE REFERENCIA Hombres y mujeres 4000 a 10000 /mm3


Niños de 4 a 12 años 4000ª 10000/mm3
Niños de 1 a 3 años 4000 a 11000 /mm3
Niños de 3 meses a 1 año 4000 a 15000 mm/3
Recién nacidos 9000 a 21000 mm/3

FORMULAROS Y Orden médica


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15
Registro General
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnostico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry

LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio


Registro Gral.
Área Pre analítica
Área de Hematologia

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

16
HOSPITAL FORMULA DIFERENCIAL LEUCOCITARIA POE- 04
UNIVERSITARIO
JAPONES
POE -05
HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.18-19
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Realizar el recuento diferencial de los leucocitos presentes en la
sangre periférica.
Se clasifican en 2 grandes grupos :
Polinucleares (Neutrofilos. eosinófilos y basófilos).
Mono nucleares (linfocitos y monocitos)
Sus características morfológicas son diferentes

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ.

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de Hematología

4.- DEFINICION Método: formula diferencial leucocitaria de Schilling

5.- FUNDAMENTO Es un procedimiento diagnóstico de gran valor que informa del


estado de la sangre o la presencia e células inmaduras (blastos,
mielocitos, células plasmáticas, linfocitos reactivos, eritroblastos
y otros. Mediante la tinción del frotis sanguíneo y mediante la
observación microscópica se realiza la clasificación de 100 o
200 células por cada recuento diferencial

5.1.- LINEALIDAD Realizar una buena clasificación microscópica e las células

5.2.- TIPO DE Sangre total


MUESTRA
5.3.- CANTIDAD De 0.5 a 3 ml de sangre total

5.4.- RECOLECCION Sangre total

5.5.- REACTIVOS Reactivos para la tinción panóptica rápida

5.6.- EQUIPO Jeringas de 1, 3, 5 o 10cc.


Cubetas para los líquidos de tinción
Microscopio

5.7.- TECNICA Realizar el frotis sanguíneo.


Fijar y teñir con los reactivos durante 7 seg. cada uno
Secar y realizar la fórmula leucucitaria mediante observación
microscópica.

5.8.-PRECAUCION Realizar el frotis sanguíneo adecuado.


Respetar los tiempos de tinción.
Realizar una buena diferenciación de células al microscopio

CONTROL DE
CALIDAD
NTERFERENCIAS Sangre hemolizada.
Exceso de anticoagulante (heparina)

VALOR DE Basófilos 0-1%.


REFERENCIA Eosinófilos 2- 4%
mielocitos 0%

17
Metamielocitos 0 - 1%
Cayados (bandas ) 2- 5%
Segmentados 51-67%
Linfocitos 4-8%

Existen variaciones con la edad.

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Registro General
Registro en Hematológica
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REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John Bernard
Henry

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DISTRIBUCION Registro Gral.
Área Preanalíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

18
HOSPITAL RECUENTO DE PLAQUETAS POE- 04
UNIVERSITARIO
JAPONES
POE -05
HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.20-21
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Determinar la cantidad de plaquetas en el organismo
expresadas en numero /mm3

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ
3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de Hematología

4.- DEFINICION Método cuantitativo de Rees- Ecker

5.- FUNDAMENTO Al mezclar una muestra sanguínea anticoagulada con el


diluente se produce la lisis de los eritrocitos permitiendo su
conteo en cámara al microscopio

5.1.- LINEALIDAD Perceptibles en la dilución adecuada

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre anticoagulada con EDTA.

5.3.- CANTIDAD 0.5 a 3ml

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa arterial

5.5.- REACTIVOS EDTA


Solución de oxalato amonico al 1 %
O azul de crezil brillante al 1% con 3ml de formol al 40 %

5.6.- EQUIPO Cámara de Newbawer


Cubrecámara
Micropipeta automática de 20 ul
Tubos de ensayo de 75mm
Microscópio

5.7.- TECNICA Diluir en TE 20ul. de sangre en el diluyente


Mezclar 5 minutos ( mejor en agitador mecánico )
Dejar en reposo 15 min.
Cargar la cámara previa homogenización
Dejar en reposo en cámara húmeda (15 a 20 min.)
Observar al microscopio con objetivo 40X
Contar las plaquetas en el retículo central
Multiplicar el numero d plaquetas por 2000

5.8.-PRECAUCION Utilizar las proporciones adecuadas de anticoagulante


Pequeños coágulos o burbujas invalidan el procedimiento

CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Sangre hemolizada

VALOR DE REFERENCIA 150000 a 400000 plaquetas /mm3

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Registro General
Registro en Hematológica

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Salida( formulario o reporte)

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Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John Bernard
Henry

LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio


Registro Gral.
Área Pre analíatica
Área de Hematologia

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DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
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20
HOSPITAL
UNIVERSITARIO COAGULOGRAMA: POE - 04
JAPONES TIEMPO DE SANGRIA (TS)
POE-05
HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.22-23
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Medir el tiempo que transcurre hasta que se detiene el
sangrado de una pequeña incisión en el lóbulo de la oreja

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método cuantitativo de Dude

5.- FUNDAMENTO Al realizar la incisión en el lóbulo de la oreja la sangre deberá


fluir libremente, con el cronómetro se deberá anotar el tiempo
transcurrido hasta la detención de sangrado y formación del
trombo plaquetario

5.1.- LINEALIDAD Visible microscópicamente

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre total

5.3.- CANTIDAD La necesaria

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa

5.5.- REACTIVOS Alcohol de 70 º o éter

5.6.- EQUIPO Lanceta estéril


Papel filtro
Cronómetro

5.7.- TECNICA Limpie con suavidad el lóbulo de la oreja o pulpejo del dedo
con algodón embebido en alcohol o éter
Dejar secar
Hacer una incisión con una profundidad de 1 a 3 mm. Y
funcionar el cronometro
Después de 30 seg. Recoger la primera gota de sangre
Esperar 30seg y recoger la segunda gota y así
sucesivamente hasta que deje de fluir.
Detenga el cronometro y anote el tiempo transcurrido

5.8.-PRECAUCION Evitar incisión muy profunda o demasiado leve

CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Coagulopatias
Trombocitopenias

VALOR DE REFERENCIA De 1 a 3 min.

FORMULAROS Y Orden médica


REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General

21
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry

LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio


Registro Gral.
Área Preanalíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

22
HOSPITAL COAGULOGRAMA POE – 04
UNIVERSITARIO TIEMPO DE COAGULACION (TC)
JAPONES
POE -05
HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.24-25
REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Determinar el tiempo que requiere la sangre venosa en
coagular , en ausencia de factores titulares para detectar
deficiencias graves de los factores de coagulación

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método de Lee White

5.- FUNDAMENTO El TC es la prueba de la diátesis hemorrágica plasmopática


o coagulopática.
Indica el estado de los factores plasmáticos que intervienen
en el mecanismo de la coagulación o que la dificultan
.detecta la diátesis pronunciada.

5.1.- LINEALIDAD La reacción es sensible visualmente en forma microscópica.

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre total venosa sin anticoagulante.

5.3.- CANTIDAD 2 a 3 ml. de sangre venosa

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa

5.5.- REACTIVOS No de requiere

5.6.- EQUIPO 3 TE limpios y secos, de 75 x 10mm marcados en nivel de 1


mm.
Un cronómetro.
Un baño Maria a 37º C
Jeringa , algodón y alcohol

5.7.- TECNICA Extraer 2ml. de sangre venosa y funcionar el cronómetro


desde que fluye la sangre por la jeringa-
Llene los tubos con 1 ml. de sangre cada uno.
Coloque en el BM 37º C.
Después de 3 min. observe el primer tubo, inclinándolo hasta
un plano de 45º y observar si la sangre se a coagulado.
Si no ha coagulado examínelo cada 30 seg. hasta que
coagule.
Examine el 2º tubo y ver si coagulo, detenga el cronometro y
anote el tiempo transcurrido.

5.8.-PRECAUCION Cronometrar el tiempo desde que la sangre fluye por la


jeringa.
Observar los 37º en BM.
Registrar el tiempo final cronometrado estrictamente.

CONTROL DE CALIDAD

23
INTERFERENCIAS Ictericias.
Diátesis hemorrágicas.
Hemofilia.
Avitaminosis k.
Picadura de víbora.
Enfermedades infecciosas, septicemias sepsis, etc.
Coagulación intravascular diseminada etc.

VALOR DE REFERENCIA De 6 a 10 min.

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Registro General
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Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John
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SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

24
COAGULOGRAMA:
HOSPITAL TIEMPO DE PROTROMBINA (TP) POE – 04
UNIVERSITARIO
JAPONES

HEMATOLOGIA REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.26-27


REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Determinar la actividad protrombinica del plasma apreciando
el estado de la vía extrínseca de la coagulación, explorando
la activación de la protrombina o factor II de la coagulación

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método de Quick (cuantitativo)

5.- FUNDAMENTO El TP es un tiempo de coagulación donde se ha hecho


incoagulable la sangre con citrato. El plasma así separado
se reclasifica y se le añade un exceso de tromboplastina
histica , la coagulación depende de los activadores del
sistema extrínseco : protrombina , factores V ,X ,VII y del
fibrinógeno

5.1.- LINEALIDAD La reacción es sensible y visible microscópicamente

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa anticoagulada con citrato de sodio al 3,6 %

5.3.- CANTIDAD Relación de 1/9 entre anticoagulante y sangre.

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa

5.5.- REACTIVOS Citrato sódico al 3.8%.


Tromboplastina – (C plus ,Dada)

5.6.- EQUIPO BM a 37º C.


Coagulómetro CAOG-A-MATE XM u otro coagulómetro.

5.7.- TECNICA Colocar 100 ul de plasma a 37º durante 2 min.


Poner 200 ul del reactivo encender el cronometro.
Observar la coagulación.
Apagar el cronómetro y observar el tiempo

5.8.-PRECAUCION Observar estrictamente la relación sangre-anticoagulante


(1/9).
La agitación del tubo debe ser suave
CONTRL DE CALIDAD

INTERFERENCIAS Toma de muestra traumática.


Sangre hemoizada.
Plasma muy lipémico

VALOR DE REFERENCIA Entre 11 y 13 seg.


Testigo 12 seg. = actividad 100%
INR= 1

25
FORMULAROS Y Orden médica
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Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John
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Área Preanalíatica
Área de Hematologia

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DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

26
COAGULOGRAMA:
HOSPITAL TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL POE - 04
UNIVERSITARIO ACTIVADA (TTPA)
JAPONES

REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.28-29


HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
20 -12-07 20-01-08
1.- OBJETIVO Es la medida del tiempo que tarda en coagular un plasma
descalcificado colocándolo a 37º C y en presencia e un
exceso de cefalina de cerebro un activador y cloruro de
calcio

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método cuantitativo

5.- FUNDAMENTO El TTPA es una prueba sensible a las deficiencias de


agentes procoagulantes del plasma o inhibidores de la
coagulación.
Detecta anormalidades en la vía intrínseca de la coagulación
ósea los factores para la formación del activador intrínseco
de la protrombina ósea los factores: XII, XI, IX y XIII.
También detecta deficiencias severas de los factores VII y
XIII y problemas vasculares.
Identificación rápida de hemofílicos en potencia

5.1.- LINEALIDAD Prueba sensible visible microscópicamente

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa anticoagulada con citrato de sodio al 3,6 %

5.3.- CANTIDAD Relación de 1/9 entre anticoagulante y sangre.

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa

5.5.- REACTIVOS Reactivo de trombina cloruro de calcio

5.6.- EQUIPO Tubos de hemólisis.


Pipetas automáticas de 100ul.
Punteras BM 37ºC
Cronómetro
Coagulómetro

5.7.- TECNICA Colocar 100ul. de plasma en el tubo.


Atemperar durante 2min.
Agregar 100ul. del activador de TTPA
Atemperar 5min. .
Agregar 100 ul. del cloruro de calcio.
Utilizar cronometro y espera el resultado.

5.8.-PRECAUCION Observar estrictamente la relación sangre-anticoagulante


(1/9).
La agitación del tubo debe ser suave

27
CONTROL DE CALIDAD

INTERFERENCIAS Toma de muestra traumática.


Sangre hemoizada.
Plasma muy lipémico

VALOR DE REFERENCIA 25 a 35 seg.

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SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

28
HOSPITAL TIEMPO DE TROMBINA POE- 04
UNIVERSITARIO
JAPONES

POE -05 REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.30-31


HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Se basa en el pasaje de fibrinógeno a fibrina por acción de
la trombina

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método cuantitativo

5.- FUNDAMENTO La adición de baja concentración de fibrina al plasma da a


lugar a la coagulación del fibrinógeno que dependerá de la
concentración y calida de este y de la presencia de
inhibidotes de la formación de fibrina. Es muy sensible frente
a anormalidades congénitas en la estructura molecular del
fibrinógeno, presencia o ausencia de calcio detección de
inhibidotes antitrombina , productos de degradación
fibrinógeno-fibrina y en la administración terapéutica de
heparina

5.1.- LINEALIDAD La reacción s sensible y visible microscópicamente

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa anticoagulada con citrato de sodio al 3,6 %

5.3.- CANTIDAD Relación de 1/9 entre anticoagulante y sangre.

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa

5.5.- REACTIVOS Solución de trombina.


Plasma normal para testigo

5.6.- EQUIPO Tubos de hemólisis.


Pipetas automáticas de 100ul.
Punteras BM 37ºC
Cronómetro
Coagulómetro

5.7.- TECNICA Incubar por 3 min. a 37º C 100ul. de plasma normal.


Incubar por 3 min. 100ul. de plasma del paciente.
Agregar a cada tubo 100ul. de sol. De trombina .
Medir el tiempo de coagulación en el cronometro.
Se puede utilizar el coagulómetro

5.8.-PRECAUCION Utilizar siempre pipeta automática.


Mantener estrictamente los 37º C.

CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Plasma hemolizado.
Un tiempo de más de 5 seg. con respecto al plasma control
indica una anomalía.
Muy sensible a la presencia de heparina
Enfermedades hepáticas

29
Por presencia de productos de degradación del fibrinógeno
(PDF)

VALOR DE REFERENCIA 12 a 18 seg.

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SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

30
HOSPITAL DETERMINACION DE FIBRINOGENO POE- 04
UNIVERSITARIO
JAPONES

POE -05 REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.32-33


HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Cuantificar la concentración de fibrinógeno en el plasma

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método cuantitativo de coagulación de Clauss

5.- FUNDAMENTO El logaritmo del tiempo de coagulación es inversamente


proporcional al logaritmo del nivel de fibrinógeno cuando se
añade una elevada concentración de trombina al plasma
citratado, diluido en solución tamponada.

5.1.- LINEALIDAD La reacción es sensible y visible microscópicamente

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa anticoagulada con citrato de sodio al 3,6 %

5.3.- CANTIDAD Relación de 1/9 entre anticoagulante y sangre.

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa

5.5.- REACTIVOS Trombina concentrada


Tampon veronal sódico de PH 7,35 que contiene un inhibidor
de la fibrinolisis
Plasma citratado control

5.6.- EQUIPO Tubos de hemólisis.


Pipetas automáticas de 100ul.
Punteras BM 37ºC
Cronómetro
Coagulómetro

5.7.- TECNICA Diluir el plasma control con tampón veronal a 1/10


Diluir el plasma problema con tampón veronal de 1/10
Incubar 200ul. de ambos plasmas diluidos a 37a.C. por 10
min.
Añadir a cada uno 100 ul. de trombina concentrada a T
ambiente
Medir con el cronometro el tiempo de coagulación
Llevar el tiempo al la curva de calibración (previamente
establecida ) para su lectura en mg/dl

5.8.-PRECAUCION Utilizar siempre pipeta automática.


Mantener estrictamente los 37º C.

CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Plasma hemolizado.
Concentraciones muy bajas de fibrinógeno requerirán menor
dilución (1/5)
VALOR DE REFERENCIA 200 a400mg/dl

31
FORMULAROS Y Orden médica
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SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

32
HOSPITAL RECUENTO DE RETICULOCITOS POE- 04
UNIVERSITARIO
JAPONES

POE-05 REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.34-35


HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Cuantificar los reticulocitos que son hematíes con restos de
ARN (acido ribonucleico ) en una muestra de sangre total

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método del azul de crezil brillante

5.- FUNDAMENTO Los restos de ARN presentes en los hematíes jóvenes


(reticulocitos) precipitan en presencia de colorantes “vitales”
como el azul de crezil brillante(ACB) o el azul de metileno
nuevo (AMN ) , dando lugar a imágenes filamentosas visibles
por el microscopio óptico .
Es muy útil para evaluar la producción de eritrocitos

5.1.- LINEALIDAD Reacción sensible y visible al microscopio (lente de


inmersión)

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa con EDTA

5.3.- CANTIDAD 0.5 a3 ml. de sangre venosa

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa con EDTA

5.5.- REACTIVOS EDTA


Azul de crezil brillante
5.6.- EQUIPO Tubos de hemólisis
Porta objetos
Micropipeta y punteras

Baño Maria a 37.C.


Microscopio

5.7.- TECNICA Colocar 50 ul. de sangre del paciente con EDTA en un tubo
de hemólisis.
Agregar 50ul. de solución de azul de crezil brillante.
Mezclar bien e incubar por 15 min. a 37a.C.
Se prepara el frotis en duplicado.
Examinar con objetivo de inmersión
Se observan 10 campos microscópicos con 100 hematíes
cada uno.
Se realiza el recuento en 1000 hematíes.

Nº contado X 100
Reticulocitos% = ---------------------------------------
1000
Nº de reticulocitos X Nºde hematíes paciente
Valor absoluto = -----------------------------------------
100

33
5.8.-PRECAUCION Realizar la lectura donde los eritrocitos están uniformemente
distribuidos.
Correlacionar con el grado de policromatofilia.
No confundir los precipitados de ARN con cuerpos de Heinz,
siderocitos o precipitados del propio colorante o por
inclusiones intraeritrocitarias.

CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Sangre hemolizada
Emplear una relación sangre colorante insuficiente
Realizar el recuento sobre un numero reducido de hematíes
Realizar el recuento en áreas mal distribuidas o frotis
irregulares

VALOR DE REFERENCIA Hombre adulto 0.5 a 1.6 %


Mujer adulta 0.5 a 1.4 %
Recién nacido hasta 14 días 2.5 a 6.5 %
Niños hasta los 10 años 1.5 a 2.5 %

FORMULAROS Y Orden médica


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SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

HOSPITAL RECUENTO DE EOSINOFILOS POE- 04


UNIVERSITARIO

34
JAPONES

POE-05 REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.36-37


HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Cuantificar el numero de eosinófilos en cámara para obtener
el numero por mm3 de sangre del paciente

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método Hinckelmann(cuantitativo)

5.- FUNDAMENTO El recuento clásico en medio húmedo se realiza en cámara


con un líquido diluyente (eosina) que tiñe los gránulos de los
eosinófilos de modo brillante y provoca la lisis de eritrocitos.

5.1.- LINEALIDAD La reacción es sensible y visible al microscopio

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa con EDTA

5.3.- CANTIDAD 0.5 a 3 ml. e sangre venosa

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa con EDTA

5.5.- REACTIVOS Eosina liofilizada ,


Acetona
Agua destilada
Anticoagulante : EDTA

5.6.- EQUIPO Cámara de Newbawer


Tubos de hemólisis
Microscopio

5.7.- TECNICA Realizar dilución 1: 20 de la muestra con el reactivo


preparado
Homogeneizar y cargar la cámara d Newbawer
Realizar el conteo al microscopio
Contar en los cuatro cuadrantes externos de la cámara

Recuento de eosinófilos por mm3 = Nº contado x


50(factor )
5.8.-PRECAUCION Observar la dilución exacta
Evitar cargar la cámara con burbujas
Evitar el estrés en el paciente

CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Sangre hemolizada
Evitar practicar ejercicios fuertes anteriores a la toma de
muestra
Evitar la toma de muestra durante la menstruación
Observar cuando el paciente recibe de por vida hormona
ACTH

VALOR DE REFERENCIA De 60 a 300 eosinófilos por mm3

FORMULAROS Y Orden médica

35
REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry

LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio


Registro Gral.
Área Preanalíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

HOSPITAL STROUT O MICROMETODO PARA CHAGAS POE - 04


UNIVERSITARIO AGUDO
JAPONES

36
REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.38-39
HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Permitir el diagnostico parasicológico de la enfermedad de
chagas en la fase aguda

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método cualitativo de visualización.

5.- FUNDAMENTO Esta técnica permite la visualización microscópica de los


tripanosomas Cruzzi vivos en la sangre periférica en las
primeras semanas de la infestación

5.1.- LINEALIDAD Visualización microscópica

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa anticoagulada o sangre de cordón umbilical


Heparinizada.

5.3.- CANTIDAD 0.5 a 3ml de sangre

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa anticoagulada o sangre de cordón umbilical


Heparinizada.

5.5.- REACTIVOS EDTA o Heparina

5.6.- EQUIPO Capilares


Portaobjetos
Plastilina
Microcentrífuga
Microscopio

5.7.- TECNICA Llenar tubos capilares 2/3partes de su capacidad


Sellar con plastilina
Centrifugar a 12000rpm. Durante 5 min.
Mantener los capilares verticalmente hasta la lectura
Observar los capilares sobre un porta objeto
Observar al microscopio en la interfase glóbulos blancos/
plasma con una gota de aceite de inmersión
Es positivo si encuentra formas móviles o trofozoitos de
tripanosoma Cruzzi

5.8.-PRECAUCION Realizar la lectura inmediatamente o hasta 15 min.


Observar la posición vertical del capilar antes de la lectura
CONTROL DE CALIDAD

INTERFERENCIAS Sangre hemolizada


Observación tardía sin resultado positivo

VALOR DE REFERENCIA Resultados negativos

FORMULAROS Y Orden médica


REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

37
REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.
Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry

LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio


Registro Gral.
Área Pre analíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

HOSPITAL INVESTIGACION DE PLASMODIUM POR POE - 04

38
UNIVERSITARIO MICRO METODO
JAPONES

POE -05 REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.40-41


HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Permitir la observación microscópica de los tripanosomas
por concentración por centrifugación en el micro hematocrito

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método cualitativo por centrifugación y concentración

5.- FUNDAMENTO Permite la visualización de el plasmodium sp vivos en la


sangre de pacientes parasitados con paludismo

5.1.- LINEALIDAD Visualización microscópica

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa con EDTA o heparinizada

5.3.- CANTIDAD 0.5 a 3 ml. de sangre

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa o capilar anticoagulada

5.5.- REACTIVOS EDTA o heparina

5.6.- EQUIPO Capilares


Portaobjetos
Plastilina
Microcentrífuga
Microscopio

5.7.- TECNICA Llenar tubos capilares 2/3partes de su capacidad


Sellar con plastilina
Centrifugar a 12000rpm. Durante 5 min.
Mantener los capilares verticalmente hasta la lectura
Observar los capilares sobre un porta objeto
Observar al microscopio en la interfase eritrocitos / plasma
con una gota de aceite de inmersión
Es positivo si encuentra formas móviles o trofozoitos
intracelulares de plasmodium sp
La confirmación se la realiza en un extendido de sangre
teñido por el método panóptico identificando la especie
5.8.-PRECAUCION Realizar la lectura inmediatamente o hasta 15 min.
Observar la posición vertical del capilar antes de la lectura

CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Sangre hemolizada
Observación tardía sin resultado positivo

VALOR DE REFERENCIA Resultados negativos

FORMULAROS Y Orden médica


REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

39
REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.
Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry

LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio


Registro Gral.
Área Pre analíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

HOSPITAL INVESTIGACION DE PLASMODIM = GOTA POE - 04

40
UNIVERSITARIO GRUESA
JAPONES

REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.42-43


HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Permitir la detección del plasmodium en sangre en la
enfermedad del paludismo

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método cualitativo de la gota gruesa

5.- FUNDAMENTO Permitir la visualización microscópica del plasmodium sp en


una muestra de sangre fijada y teñida

5.1.- LINEALIDAD Visualización microscópica del plasmodium

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa con EDTA o heparinizada

5.3.- CANTIDAD 0.5 a 3ml. de sangre anticoagulada

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa con EDTA o heparinizada

5.5.- REACTIVOS EDTA o heparina


Reactivos para tinción panóptica

5.6.- EQUIPO Pota objetos lápiz graso

5.7.- TECNICA Colocar una gota de sangre en la parte central del porta
objetos
Extender la sangre formando una gota gruesa uniforme con
la esquina de un pota objeto limpio
Marque los extremos de la gota con el lápiz graso
Secar al aire libre
Desfibrinar con agua
Teñir al gota gruesa por el método panóptico
Observar al microscopio las formas parasitarias del
plasmodium sp en caso positivo

5.8.-PRECAUCION Realizar las gotas de espesor uniformes


Evitar gotas demasiado gruesas que no tomaran la tinción

CONTROL DE CALIDAD

INTERFERENCIAS Muestras hemolizadas


Desfibrinación ineficiente

VALOR DE REFERENCIA Resultados negativos

FORMULAROS Y Orden médica


REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.

41
Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry

LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio


Registro Gral.
Área Pre analíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

DETERMINACION DE CELULAS L.E.


HOSPITAL POE - 04

42
UNIVERSITARIO
JAPONES

POE-05 REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.44-45


HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO Pezquiza de las células L.E: o células de Hargraves en
pacientes con Lupus Eritepatoso Diseminado algunos casos
de artritis reumatoides .algunas colagenosis y raramente en
otras patologías.

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método semicuantitativo.Tecnica de Zinder y Hargraves

5.- FUNDAMENTO Las células L.E. son PMN que han fagocitado material
nuclear previamente alterado y procedente de la destrucción
del núcleo d otros leucocitos por el llamado factor L.E. o
factor nuclear FN, que es una IGG anti DNA que se fija a la
superficie del núcleo y altera la cromatina. La nucleoproteína
modificada por la presencia del Ac, es fagocitada por los
neutrofilos y a veces por los monolitos fagotitos con el
material nuclear ingerido llamado célula L.E.

5.1.- LINEALIDAD Técnica de gran especificidad.

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre total sin anticoagulante.

5.3.- CANTIDAD 8 a 10 ml.

5.4.- RECOLECCION 8 a 10 ml. de sangre venosa

5.5.- REACTIVOS Gasa


Equipo para tinsión

5.6.- EQUIPO Tubos de ensayo


Tubos capilares
Embudo
Varilla de vidrio
Portaobjetos
microscopio

5.7.- TECNICA Extraer 10 ml. de sangre e incubar 2 horas a 37 ºC


Centrifugar 10 min. a 3.500 rpm.
Eliminar el suero y depositar el coagulo en el embudo sobre
la gasa
Aplastar el coagulo y recoger el producto en TE
Centrifugar el `producto hemolisado de la destrucción del
coagulo 15 min. a 3500 rpm.
Eliminar el sobrenadante y realizar dos frotis con el
depósitos de células ( Buffy Coat )
Teñir con Giensa, Wright o panóptico rápido
Pesquisar las células LE. E informar como negativo o
positivo de (+). (++), (+++), o (++++)

43
5.8.-PRECAUCION Observar al tiempo de incubación
Realizar adecuadamente la destrucción del coágulo

CONTROL DE CALIDAD

INTERFERENCIAS Sangre hemolizada

VALOR DE REFERENCIA Valores negativos

FORMULAROS Y Orden médica


REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry

LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio


Registro Gral.
Área Pre analíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

44
VELOCIDAD DE SEDIMENTACION
HOSPITAL GLOBULAR (VSG) O POE -04
UNIVERSITARIO ERITROSEDIMENTACION
JAPONES

REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág.46-47


HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09

1.- OBJETIVO Consisten medir la velocidad de sedimentación de los


glóbulos rojos en sangre total anticoagulada en un
determinado tiempo y verificando la distancia en mm.
Recorrida por los eritrocitos

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de Hematología

4.- DEFINICION Método de Wintrove cuantitativo

5.- FUNDAMENTO Los eritrocitos sedimentan por ser mas pesados que el
plasma y por la propiedad de agregación formando rouleaux
(alteración del potencial zeta).
Hay factores que alteran la VSG :
1 factores intrínsecos o sanguíneos
 Concentración de fibrinógenos , alfa , beta y
gammaglobulina del plasma
 Viscosidad del plasma
 Concentración e colesterol y de iones hidrógrogeno
 Concentración tamaño y forma de eritrocitos, etc.
2 Factores extrínsecos
 Anticoagulantes
 Éxtasis venosa
 Alimentación en digestión
 Temperatura (22 a 27 º)
 Inclinación de la pipeta, etc.

5.1.- LINEALIDAD Prueba con mucha sensibilidad y especificidad

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre venosa con EDTA

5.3.- CANTIDAD 3 ml. de sangre anticoagulada

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa con EDTA

5.5.- REACTIVOS EDTA

5.6.- EQUIPO Pipetas de eritrocedimentación


Soporte para dichas pipetas cronómetros

5.7.- TECNICA 1. Llenar la pipeta de VSG hasta la 100


2. Colocar en el soporte
3. Iniciar el tiempo en el cronómetro
4. Detener el cronómetro en 1 hora
5. Medir la columna plasmática en mm/h
* Nota: Podrá utilizar pipetas de Westerngreen cargando
hasta 100.
* La micro VSG según Barrett (1980) se realizara en tubo
capilar especialmente para neonatos y pediatría

45
VSG 1ra h + VSG 2da h
__________
2
Índice de KATZ = ___________________________
2

5.8.-PRECAUCION La muestra de sangre debe ser tomada en ayunas.


Realizar la prueba en lapso de 2horas no más.
Mantener la posición vertical de la pipeta ( evitar inclinación )
Evitar burbujas

CONTROL DE CALIDAD
INTERFERENCIAS Sangre hemolizada
Mujer en periodo menstrual

VALOR DE REFERENCIA Hombres -------2 a 9 ml en 1 hora


Mujeres ---------3 a 20 ml en 1 hora
Niños ------------1 a 13 ml en 1 hora

FORMULAROS Y Orden médica


REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry

LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio


Registro Gral.
Área Pre analíatica
Área de Hematologia

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :


DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
----------------------- ------------------------------ ------------------------------

46
DETERNMINACION DE GRUPO SANGUINEO
HOSPITAL “ABO Y FACTOR RH” POE -04
UNIVERSITARIO
JAPONES

POE-05 REVISION. 01 FECHA DE FECHA DE Pág. 48-49


HEMATOLOGIA REVISION APLICACIÓN
25-11-08 25-01-09
1.- OBJETIVO La tipificación de grupo sanguíneo ABO y Factor RH en los
pacientes es importante para recibir y donar sangre para
evitar reacciones hemolíticas transfucionales y en el
embarazo para evitar la eritroblastosis fetal.

2.- ALCANCE Pacientes ambulatorios e internados de los diferentes


departamentos del HUJ

3.- RESPONSABLES Bioquímicas y técnicos del área de la sección de


Hematología

4.- DEFINICION Método cuantitativo

5.- FUNDAMENTO La identificación e los antígenos eritrocitarios de l sistema


ABO responsables del grupo A, B, O existentes en los pares
de cromosomas autonómicos y según combinaciones de los
antígenos A, B, O los hematíes serán clasificados en los
grupos ( fenotipos )A, B , AB, o O .En el suero de cada uno
de los grupos existen anticuerpos naturales Anti-A ( Grupo B
); Anti –B (Grupo A) ; Anti-A y Anti-B (Grupo 0); Los del
grupo AB no poseen anticuerpos antia y anti B.
Los antígenos eritrocitarios del sistema Rh - Hr, D, C, E, y e
y sus alelos d, c, e son determinados genéticamente. Los
sueros específicos son anti D, anti C, Anti E, anti-c, anti-e no
existiendo suero anti –d.
La separación de los individuos en Rh positivo o Rh
negativo se basa en la presencia o no en los hematíes del
antígeno D (Rh)

5.1.- LINEALIDAD Sin restricciones

5.2.- TIPO DE MUESTRA Sangre total con EDTA o heparinizada o sangre de cordón
umbilical o sangre capilar

5.3.- CANTIDAD 05 a 1 ml.

5.4.- RECOLECCION Sangre venosa, sangre arterial , capilar o de cordón umbilical

5.5.- REACTIVOS Anti sueros A , B , D


EDTA o heparina
5.6.- EQUIPO Láminas de vidrio o porta objetos
Varillas
Cronómetro

5.7.- TECNICA 1. colocar 3 gotas de sangre ( una en cada extremo y


una al centro )
2. Adicionar a cada una 1 gota de cada antisuero ( a
la Izquierda el anti suero A , al centro el antisuero
B y a la derecha el anti suero D )
3. Mezclar con la varilla y rotar suavemente 2 a 3
min.

47
4. La visualización de aglutinación indica una
reacción positiva :
Aglutinación con el anti suero A = grupo sanguíneo A
Aglutinación con el anti suero B = grupo sanguíneo B
Aglutinación con el anti suero A y B = grupo sanguíneo
AB
Ausencia de aglutinación de A y B = grupo sanguíneo
O
Para el factor Rh :
Aglutinación = Rh positivo
No aglutinación= Rh negativo
Reacciones dudosas se deberán realizar con el lavado
de los hematíes con sol. fis. (3 veces) y realizando
nuevamente la técnica

5.8.-PRECAUCION La T debe ser menor a 37º C


El tiempo de observación no debe pasar de 2 a 3 min.

CONTROL DE CALIDAD

INTERFERENCIAS Sangre hemolizada


Poca potencia y avidez en la aglutinación
Reacciones dudosas

VALOR DE REFERENCIA Grupos: A, B , AB, y O


Factor Rh : Positivo o Negativo

FORMULAROS Y Orden médica


REGISTROS Recibo de pago y barra o exoneración
Registro General
Registro en Hematológica
Salida( formulario o reporte)

REFERENCIAS Manual de técnicas básicas de la OPS.


Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio John
Bernard Henry

LISTA DE DISTRIBUCION Jefatura de Laboratorio


Registro Gral.
Área Pre analíatica
Área de Hematologia
REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR :
DRA. LUCY ROBLES COMITÉ DE REVISION COMITÉ DE REVISION
SECCION DE
HEMATOLOGIA
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