Cátedra de Microbiología
Unidad 2
MORFOLOGÍA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS BACTERIAS
Objetivos
-Describir las características biológicas de los microorganismos.
-Reconocer las distintas estructuras bacterianas.
-Conocer la morfología y composición química de los
microorganismos.
Introducción
Las bacterias, micoplasmas, rickettsias, clamidias y cianobacterias
(algas cianófilas) son células procariotas.
Conocer la morfología de cada una de ellas nos permite iniciar el
proceso de identificación, será nuestra primera observación de una
muestra, la Observación Directa, la que nos permite detectar los
microorganismos presentes y las acciones que iniciaremos para
arribar a un diagnóstico y posterior tratamiento.
Qué es una célula procariota?
Es una célula que entre otras características, presenta la región
nuclear como una red indefinida que se continúa con el citoplasma, no
poseen membrana nuclear (carioteca) carecen de mitocondrias
aparato de Golgi y se reproducen principalmente por fisión binaria.
Podemos observar las diferencias más notables en las siguientes
figuras (Figura 1 A y b) y tabla (Tabla1).
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Figura A. Bacteria Figura B. Célula superior
Figura 1: esquemas para observar las diferencias entre una célula
procariota y una célula eucariota
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Tabla 1. Diferencias entre células procariotas y eucariotas
Característica Procariota Eucariota
Nucleo Material nuclear Material genético rodeado de
disperso en membrana nuclear
citoplasma, no (carioteca)
poseen carioteca
Pared celular Péptidoglicano -No está presente en células
animales.
-Celulosa en células vegetales.
-Quitina en los hongos.
Ribosomas De 70S, de menor 80S
tamaño que en
células eucariotas
Cromosomas Uno sólo circular El ADN se organiza en varios
cromosomas lineales, según la
especie
Nucleolos No 1 o más
Retículo No Si
endoplasmático
Aparato de Golgi No Si
Mitocondrias No Si
Reproducción Por fisión binaria Por mitosis. En la formación de
gametos (células reproductoras)
se da reproducción por meiosis.
Enzimas y En repliegues de En mitocondrias, lisosomas
pigmentos la membrana o cloroplastos
citoplasmática
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LA CÉLULA BACTERIANA
Morfología bacteriana
Las bacterias morfológicamente son más simples que las células de
los organismos superiores.
Se presentan en tres tipos morfológicos básicos:
-cocos
Los cocos son células esféricas pero cuando están en parejas
presentan un lado aplanado o excavado, a veces tienen una forma
algo ovalada.
-bacilos
Los bacilos son bastoncillos de bordes paralelos y extremos rectos,
redondeados o ligeramente cóncavos.
-curvas (en espirales o espirilos)
Los espirilos presentan una sola curva, como una coma (vibrio), o un
número variable de ondulaciones suaves o apretadas (espirilos y
espiroquetas).
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No obstante existen bacterias que tienden a desviarse de las formas
básicas, por ejemplo:
-cocobacilo: como son las bacterias que pertenecen al género
Brucella)
-bacilos en forma de maza o de basto: como son las bacterias que
pertenecen al género Corynebacterium
-bacilos delgados con extremos fusiformes, como son las bacterias
que pertenecen al género Fusobacterium.
También las bacterias pueden presentar pleomorfismo, o cambios de
morfología. En ocasiones los integrantes de un mismo género
bacteriano, pueden presentar morfología cocoide, o bacilar o
filamentosa. Se observan algunos casos en micobacterias, y es usual
en micoplasmas.
Agrupaciones bacterianas
No solo nos importa reconocer la forma, sino que la agrupación es una
característica que deberemos considerar en la identificación.
La agrupación puede variar según se trate de una observación directa
(OD) o de una muestra de un cultivo ya en pureza. Los mejores datos
de agrupación se observan al hacer un preparado a partir de un caldo
de cultivo en pureza, conceptos que desarrollaremos a lo largo del
curso.
Dependiendo del plano en que se produce la división celular y a la
separación o no de la nueva célula formada, las bacterias constituyen
distintas agrupaciones (Figura 2)
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Imagen tomada del Tórtora y col.
Introducción a la Microbiología, 9°ED.
Figura 2. Agrupaciones Bacterianas
Agrupaciones de Cocos:
Podemos observar diferentes agrupaciones que corresponden al plano
de división de los microorganismos, información que está codificada
en su genoma y nos ayuda en su identificación.
-si el mismo ocurre en un solo plano observaremos diplococos (cocos
de a pares)
-si ocurre en un solo plano y las células permanecen unidas forman
cadenas, la agrupación resultante se denomina estreptococos (del
griego, streptos, torcidos).
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-si el plano de división ocurre en dos o más planos permaneciendo las
células unidas, dan lugar a agrupaciones irregulares (como racimos de
uvas) denominadas estafilococos (del griego staphyle, racimos de
uvas)
- si el plano de división ocurre en dos planos formando cada uno un
ángulo de 90º con el otro, forman las tétradas (4 elementos).
- si el plano de división ocurre en tres planos, forman agrupaciones
cúbicas de 8 elementos llamadas sarcinas (del latín, fardos).
Bacilos
Los mismos también presentan agrupaciones características cuya
observación nos orienta al diagnóstico
-en un solo plano unidos por sus extremos, los bacilos pueden
disponerse: de a pares o diplobacilos, en cadenas o
estreptobacilos (ej: Bacillus anthracis), en V y en forma paralela uno
al lado del otro dando origen a empalizadas.
Algunos bacilos pueden agruparse formando letras chinas como
ocurre en el género Mycobacterium, debido a que por características
de su pared quedan unidos por diferentes puntos determinando una
agrupación característica.
Figura 3 Tamaño relativo
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Las bacterias se consideran los microorganismos celulares más
pequeños con capacidad de autoduplicación, existiendo una gran
variación de tamaños.
En general el tamaño varía entre 0,1 m y hasta 250 m o más en
algunos espirilos de vida saprófita.
Los cocos pueden medir entre 0,2 m y 1m de diámetro.
Los bacilos presentan un diámetro promedio de 0,8 m (si bien los
hay más delgados o más gruesos) y una longitud que también es
variable entre 2 y 6 m.
Las espiroquetas presentan una longitud de 5 a 20 m, sin embargo
son muy delgadas, midiendo 0,1m a 0,2 m de diámetro siendo difícil
su visualización por microscopio óptico.
ESTRUCTURA DE LA CÉLULA BACTERIANA
Las bacterias internamente son más simples que las células animales,
no obstante, rodeando a la membrana citoplasmática, poseen una
estructura externa compleja, la pared celular rígida.
El microscopio electrónico ha permitido analizar la estructura de la
citología bacteriana, cuyo esquema se observa en la figura 4.
Figura 4 Esquema de las Célula Bacteriana
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La estructura de una célula bacteriana típica consta de: estructuras
citoplasmáticas, región nuclear, estructuras externas o envolturas
celulares.
Estructuras citoplasmáticas
Las células procariotas carecen de mitocondrias y cloroplastos
Las enzimas respiratorias de las bacterias se encuentran
localizadas en la membrana celular
Citoplasma
Es una solución acuosa de sales, azúcares, aminoácidos, vitaminas,
enzimas y una gran variedad de materiales solubles, incluyendo la
región nuclear
contiene alrededor del 80% de agua presente en la bacteria
contiene enzimas solubles y ácidos ribonucleicos (ARN) solubles
En el citoplasma encontramos:
Ribosomas
La partícula 70 S se separa en dos subunidades, una de ellas de gran
tamaño (50 S;) y otra pequeña (30 S). (S: unidades Sverdberg -
cociente de sedimentación).
Los ribosomas bacterianos son partículas de 70 S
Los ribosomas de las células eucariotas son partículas de 80 S
Importancia: los ribosomas bacterianos (70S) pueden ser el sitio
blanco de algunos antibióticos, por lo que esos antibióticos no afectan
a las células eucariotas.
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Inclusiones granulares
Las bacterias almacenan materiales de reserva en forma de gránulos
citoplasmáticos insolubles que se depositan como polímeros neutrales
osmóticamente inertes. Estos gránulos son fuente de carbono para la
síntesis de proteínas y ácidos nucleicos.
-ácido poli--hidroxibutírico, polímeros de glucosa (almidón o
glucógeno)
-gránulos volutina o de Babes-Ernst,Otras, reservas de fosfato
inorgánico, llamados también gránulos metacromáticos, debido a
que se tiñen de color rojo con un colorante básico como el azul de
metileno.
Algunas bacterias presentan gránulos intracelulares de azufre
elemental.
Región nuclear
La región nuclear presenta las siguientes características:
carece de membrana nuclear que lo separe del resto del
citoplasma
una molécula de ADN de doble cadena circular, que se
encuentra naturalmente «superenrrollado»
no se observan histonas básicas, pero tiene asociadas otro tipo
de proteínas que permiten el superenrollamiento mencionado
cuando está desenrollado puede llegar a tener una longitud de
1mm (mil veces superior a la longitud de la propia bacteria).
el ADN puede extraerse de la célula como una sola molécula
continua, por lo que se considera un cromosoma único
El ADN se encuentra insertado a un punto de una invaginación
de la membrana celular denominado mesosoma, desempeñando
una función clave en la segregación de los cromosomas
homólogos en la duplicación celular.
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cuentan con un origen de replicación propio del cromosoma
(ORIc)
En resumen, las bacterias carecen de:
aparato mitótico
nucléolo
histonas
cromosomas típicos y
membrana nuclear de las células eucariotas
Plásmidos
Las bacterias pueden poseer moléculas de ADN extracromosómicos,
no esenciales para la viabilidad de las mismas y que no afectan la
clasificación taxonómica básica.
Los plásmidos:
son moléculas de ADN de doble cadena circular
se duplican autónomamente, independientemente del control
genético del cromosoma bacteriano, cuentan con un origen de
replicación propio (ORIp)
pueden ser autotransferibles en el caso de plásmidos
conjugativos
presentes en todo tipo de bacterias
una bacteria puede presentar varios plásmidos
tienen un papel clave en la adaptación y evolución bacteriana
tamaño puede variar, hay de 2600bp a 4,5Mb
Funciones
Síntesis de proteínas no esenciales para la bacteria que benefician la
supervivencia, generalmente codifican:
genes de virulencia, por ejemplo toxinas
resistencia a metales pesados y antibióticos
síntesis de antibióticos
Las bacterias receptoras de plásmidos adquieren la información que el
mismo contiene y ellas antes no poseían. Por ello adquieren
información adicional que generalmente le confiere ventajas
adaptativas.
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El material genético, tanto el cromosoma bacteriano como los
plásmidos que se encuentren en la bacteria, sufre constante
transformación mediante
Transposones (genes saltarines)
son elementos de ADN que pueden moverse a diferentes partes
del genoma bacteriano
son autotransferibles dentro de la bacteria, incluyendo saltos
entre cromosoma y plásmidos, pueden pasar a otras bacterias
a través de plásmidos o en fenómenos de transferencia
horizontal de genes que desarrollaremos en la Unidad 6.
no se autoreplican
El transposón al cambiar de posición puede arrastrar una secuencia
de ADN contigua y originar cambios fenotipicos en la bacteria.
Integrones
segmento de ADN integrado en el cromosoma bacteriano.
Contiene: una enzima integrasa, un promotor y un sitio de
integración para casetes de genes
no son autotransferibles, pueden pasar a otras bacterias a
través de plásmidos
tamaño: 800-3900 bp
ENVOLTURAS CELULARES - ESTRUCTURAS EXTERNAS
Las envolturas de las bacterias incluyen (desde fuera hacia adentro),
la cápsula y alguna sustancia extracelular adherida a la célula, la
pared celular y la membrana citoplasmática, que envuelve el
citoplasma.
Cápsula
La cápsula es un material mucoide firmemente adherido a la pared
celular.
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Composición química
La mayoría de las cápsulas están formadas por polisacáridos
relativamente simples poco inmunógenos
-la cápsula de Bacillus anthracis, importante excepción, está
compuesta por ácido poli-D—glutámico (proteica) que se
corresponde a un antígeno inmunógeno
La síntesis está codificada genéticamente. Si el gen para su formación
está ausente, la bacteria no la sintetiza.
La presencia de cápsula depende de condiciones ambientales y de
cultivo adecuadas para la síntesis. Si no se cumplen esas exigencias,
aunque exista el gen codificador para cápsula, la bacteria no podrá
expresarla.
La cápsula se relaciona con el tipo de colonia que las bacterias forman
al crecer sobre un medio nutritivo sólido,
bacterias capsuladas, forman colonias lisas (S).
bacterias que han perdido la capacidad de formar cápsulas,
forman colonias rugosas (R).
Importancia de la cápsula
a) virulencia de la bacteria, contribuye a la invasión de las
bacterias patógenas debido a que interfiere con la acción
fagocitaria de los linfocitos
b) antigénica, pues cuando se inocula en un animal susceptible,
son capaces de inducir la formación de anticuerpos
específicos
c) evita el ataque de bacteriófagos
d) permite la adhesión de las bacterias a las células animales del
hospedador que está por infectar
e) evasión del sistema inmune, ya que esconde los compuestos
más fácilmente reconocidos como cuerpo extraño
En algunos casos la presencia de cápsula solo se observa en la
muestra clínica, y por ello la OD es el momento en que podemos
observarla. Luego de ello debemos simular las condiciones en vivo
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para que la exprese. En otros géneros bacterianos la cápsula siempre
se expresa.
Slime o polisacárido extracelular
Algunas bacterias no producen una cápsula verdadera sino un
polisacárido extracelular (hidratos de carbono complejos secretados
por los propios microorganismos), que está laxamente adherido a la
pared celular. El mismo puede ser removido con lavados de la masa
bacteriana, a diferencia de lo que ocurre en la cápsula.
Según la composición química del medio de cultivo, condicionan su
producción y secreción. Por ello se considera que su producción
depende de la expresión de genes inducibles y no constitutivos.
El slime es capaz de incluir a una comunidad de millones de
microorganismos formando biofilm, aun cuando el mismo esté
constituido por más de un género bacteriano.
Biofilm
El biofilm es una estructura constituida por células bacterianas
productoras de slime, fuertemente adheridas entre sí y a un sustrato.
Importancia
Los microorganismos infecciosos capaces de crecer incluidos en
biofilms constituyen focos de resistencia bacteriana a los
tratamientos antibióticos y al sistema inmunológico.
MEMBRANA CELULAR
Es una membrana unitaria típica de fosfolípidos y proteínas. Las
membranas de los procariotas se diferencias de las membranas de los
eucariotas por la ausencia de esteroles.
La única excepción son los micoplasmas, quienes veremos que
carecen de pared celular y los cuales incorporan en sus membranas
esteroles al crecer lo cual les otorga mayor rigidez a sus membranas,
por lo que debemos incluirlos para su cultivo.
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El contenido de proteínas de las membranas varía entre un 60 y 70%
(20% de las proteínas totales de la bacteria), presentando también de
un 20 a un 30% de lípidos e hidratos de carbono en pequeñas
cantidades. Las proteínas parecen ser de orden catalítico o transporte,
pero no estructurales. Observamos uno esquema en la figura 5.
carbohidratos
Proteínas
Membrana celular
Canal proteico Bicapa lipídica
Figura 5. Membrana celular
Funciones
Constituye el límite osmótico de la célula.
Tiene permeabilidad selectiva, es la principal barrera para el paso
de moléculas dentro y fuera de la célula.
Es el asiento del transporte activo y de los sistemas permeasa
sustrato específico.
En la MC se han identificado proteínas con funciones de transporte o
catalíticas y probablemente, también estructural.
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Algunas funciones
Participa en la síntesis de la pared celular (enzimas que actúan
en las fases de biosíntesis)
Es asiento de citocromos y otras proteínas que intervienen en
los procesos de transporte de electrones
Mesosomas
La membrana plasmática, principalmente en Gram positivas, presenta
invaginaciones (una o más), de gran tamaño y forma irregular. Estas
invaginaciones pueden ser de tipo laminar o vesicular.
Mesosomas laminares (de tabique): forman paredes transversas
durante la división celular, el cromosoma bacteriano está fijado al
mesosoma tabicado.
Mesosomas vesiculares (laterales): interviene en la función de
secreción.
PARED CELULAR
Dada la complejidad de la Pared celular bacteriana lo hemos dejado
para último momento, recordemos que está por fuera de la membrana
celular.
Para explicar la estructura y composición de la pared celular (PC) hay
que mencionar que las bacterias se dividen en dos grandes grupos
taxonómicos, según la capacidad o no de retener el cristal violeta. Esta
clasificación está basada en la coloración de Gram (desarrollada en la
Unidad 3). Dicha coloración permite identificar a bacterias que retienen
el cristal violeta como Gram positivas, y las que no lo retienen como
Gram negativas. Hoy conocemos las diversas características de la
pared que explican los distintos resultados que observamos con la
coloración.
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Como mencionamos, la PC se encuentra externamente y rodeando a
la membrana plasmática.
Funciones
1. Confiere rigidez a la bacteria
2. Responsable de la forma de la bacteria
3. Barrera frente a ciertos agentes tóxicos
La PC de las bacterias difiere químicamente con la PC presente en las
células eucariotas, pues carece de:
- celulosa presente en la PC de los vegetales y
- quitina presente en la PC de los hongos
Composición química
La PC bacteriana está compuesta por: mureína (del latín,
murus=pared), también denominado peptidoglicano, mucopéptido o
glicopéptido.
Esta macromolécula es un heteropolímero formado por cadenas en las
que alternan solo 2 moléculas:
-N-acetilglucosamina (NAG)
-ácido N-acetil murámico (NAM)
La cadena se encuentra unida por enlaces glucosídicos 1,4. Este
enlace es sensible a la acción de la lisozima.
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El NAM tiene en su composición una cadena peptídica corta, que
permitirá establecer uniones peptídicas entre NAM de cadenas
adyacentes.
La estructura básica se puede dividir en 3 partes:
1.-una columna vertebral de residuos alternos de NAG y NAM, unidos
por enlaces glucosídicos 1,4.
2.-Un conjunto de cadenas laterales tetrapeptídicas fijadas solo al
ácido N-acetilmurámico.
3.-Conjunto de puentes o enlaces peptídicos transversos que unen las
cadenas laterales tetrapeptídicas.
N-acetilmurámico
N-acetilglucosamina
tetrapeptidos
Peptidoglicano
pentaglicina
aa
Figura 6 Esquema del peptidoglicano
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El tetrapéptido del NAM presenta residuos alternos D y L. Estos se
unen transversalmente al grupo carboxilo terminal de un tetrapéptido
(posición 4) con un grupo amino NH2 o libre en uno de los
tetrapéptidos vecinos.
-En la mayoría de las bacterias gramnegativas, los aminoácidos que
se encuentran son: L-alanina, el ácido D-glutámico, el ácido m-
diaminopimélico
-En la mayoría de las grampositivas: L-lisina y D-alanina.
La L-lisina y el m-diaminopimélico pueden formar uniones peptídicas
con los grupos aminos, uniendo entre sí dos cadenas de
heteropolímero.
Esta estructura es única en las bacterias.
El peptidoglicano o columna vertebral, es similar tanto en las
paredes de las grampositivas como de las gramnegativas, lo que
difiere en cada una son las cadenas laterales tetrapeptídicas, los
puentes peptídicos que las unen y el espesor total del peptidoglicano.
Los cortes finos al microscopio electrónico, demuestran que la pared
de las bacterias grampositivas es más gruesa (200-800Å) que la PC
de las células gramnegativas (20 a 30Å). (Figura 7)
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Bacteria Bacteria
Gram negativa Gram positiva
Figura 7. Esquema práctico que permite
visualizar las diferencias entre las PC
Importancia de la PC en medicina
Las macromoléculas de superficie (antígenos) determinan las
interacciones que tienen lugar entre las bacterias y los mecanismos de
defensa del huésped; permite por medio del estudio serológico la
identificación de esos antígenos (bacteriología diagnóstica).
Muchos antibióticos actúan sobre los mecanismos de biosíntesis de la
PC, por lo que es importante en la terapéutica.
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Gram positivas
La PC está compuesta por una capa ancha de peptidoglicano de 15 a
60 nm y ácidos teicoicos y lipoteicoicos. Algunas bacterias pueden
contener: polisacáridos, polipéptidos y cantidades ínfimas de
proteínas.
Ácidos teicoicos
La mayoría de las bacterias grampositivas contiene ácidos teicoicos
(del griego: “teichos”=pared). Estos son polímeros de glicerol y ribitol.
Las bacterias poseen por lo general un solo tipo de ácido teicoico,
ribitol-teicoico o glicerol-teicoico, unidos al peptidoglicano.
Funciones
-constituyen el antígeno de superficie con capacidad inmunogénica
-por sus uniones específicas a la fibronectina, permite la
colonización a las superficies mucosas del hospedador
Otros polímeros asociados al péptidoglicano:
-polisacáridos (por hidrólisis liberan azúcares neutros como ramnosa,
arabinosa, glucosamina y azúcares ácidos)
-lípidos, el contenido en lípidos es insignificante
Algunas bacterias tienen como componentes especiales, proteínas
como la proteína M o el carbohidrato C de los estreptococos, con
importancia antigénica.
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Figura 8. Envolturas celulares en Gram positivas
Gram negativas
El citoplasma de una bacteria Gram negativa queda rodeado por tres
espacios desde adentro hacia afuera que podemos denominar (Figura
8):
-la membrana citoplasmática
-un espacio periplásmico, capa intermedia densa donde se identifica el
peptidoglicano
-una membrana externa compleja
La PC en una Gram negativa es el peptidoglicano unido a un
lipopolisacárido (LPS). Este último es el que determina esa membrana
externa, y limita un espacio periplásmico donde pueden quedar
algunas enzimas de secreción retenidas, dando lugar a un sitio
hidrosoluble con actividad enzimática.
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Figura 8. Envolturas celulares en Gram negativas
Membrana externa: compuesta por fosfolípidos, lipopolisacáridos
(LPS o antígeno somático O) y proteínas, formando una doble capa.
Los lipopolisacáridos (LPS) constituyen el antígeno O y la
endotoxina de las bacterias Gram negativas
El LPS está constituido por 3 regiones
Una interna (lípido complejo denominado lípido A o región III), unido a
un polisacárido (que constituye el núcleo, parte central, o región II) y
una serie terminal de unidades repetidas de oligosacáridos (región I).
Entonces:
1º) Región I: Compuesta por unidades repetitivas de
oligosacáridos, que se unen a una parte central o núcleo del LPS.
Es la porción polisacárida variable de las bacterias gramnegativas,
responsable de la antigenicidad. Representa el antígeno principal de
la superficie de la célula bacteriana llamado antígeno (Ag) somático o
Ag O. Cada Ag O define una especie o subespecie de bacterias
gramnegativas. Puede ser reconocido por técnicas serológicas.
2º) Región II: Es la parte central constituida por polisacáridos.
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Esta región es constante en todas las especies de un mismo género
bacteriano.
3º) Región III: Compuesta por un lípido complejo, el lípido A. Es
la porción tóxica de la molécula del LPS. Al formar parte de la
estructura de la pared se lo denomina endotoxina y es de composición
lípidica. Siendo las exotoxinas productos de secreción proteicos, sin
importar si quedan dentro o fuera de la bacteria cuando se sintetizan.
Región
I
Región
II
Lípido A
Figura 9. Envolturas celulares en Gram negativas,
detalle del LPS
Porinas:
Las porinas son proteínas presentes en la membrana externa. Forman
poros relativamente no específicos que permiten la libre difusión de
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pequeños solutos hidrofílicos a través de la membrana, (ejemplo: Omp
C, D y F en pseudomonas y algunas enterobacterias.
Funciones de la membrana externa
-Actúa como tamiz molecular, dificulta e incluso impide la entrada
de moléculas de mediano o gran tamaño.
-Evita la pérdida de proteínas periplásmicas, protege a la célula,
por ejemplo de las enzimas hidrolíticas del medio.
Espacio periplásmico
Se ubica entre membrana citoplasmática y la membrana externa. En
este espacio se encuentran proteínas, enzimas hidrolíticas como las
betalactamasas, fosfatasa, fosfatasa alcalina, entre otras. También se
hallan lipoproteínas que unen el peptidoglicano con la membrana
externa.
Enzimas que actúan sobre el peptidoglicáno
Las bacterias poseen diversas enzimas o autolisinas que hidrolizan la
capa de peptidoglicáno (glucosidasas, amidasa, endopeptidasas).
La función de estas autolisinas es degradar y reformar la PC en las
zonas donde aparece un septo de división.
Las mutantes bacterianas que carecen de algunas de estas
autolisinas, pueden ser incapaces de separar entre sí las células hijas,
o dar lugar a formas aberrantes.
La lisozima (enzima que se encuentra en las lágrimas, moco, clara de
huevo, saliva) es capaz de digerir el glucopéptido (actúa en el enlace
1.4 de las moléculas de NAG-NAM).
En las bacterias gramnegativas, esta enzima no puede atravesar la
membrana externa, por lo que la mureína está protegida de la
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digestión. No obstante el tratamiento de una bacteria gramnegativa
con un agente quelante EDTA, que acompleja a los iones Ca ++ (el ion
Ca ++ es necesario para mantener la estabilidad de la capa
lipopolisacárida), desestabiliza y deja libre una parte de los
lipopolisacáridos y permite la entrada de la lisozima.
La PC de las grampositivas no están protegidas y el tratamiento con la
enzima produce la digestión completa de la pared.
Acción de los antibióticos sobre el peptidoglicáno
La penicilina y demás antibióticos betalactámicos, interfieren en la
síntesis de la PC al bloquear la formación de enlaces cruzados en el
peptidoglicáno, en las bacterias grampositivas y también en algunas
gramnegativas.
Las bacterias gramnegativas, son impermeables a la entrada de
penicilina a través de la membrana externa y por consiguiente impide
el acceso de la penicilina al sitio de acción (es un ejemplo de
resistencia natural de bacterias a antibióticos, se verá en otra clase).
La actividad bactericida de penicilina u otro betalactámico, la ejerce
exclusivamente sobre las bacterias en crecimiento al unirse con las
proteínas ligando de penicilina (PBP, denominadas así por ser sitio de
unión del antibiótico), proteínas que cuentan con una acción
enzimática de transpeptidasas, necesarias para la unión éntre los
tetrapéptidos del NAM en la remodelación de la pared bacteriana.
Como consecuencia de la acción del betalactámico, las bacterias
dejan de sintetizar PC, la cual primero se debilita (efecto
bastariostático), luego se hinchan y se produce la lisis (efecto
bactericida).
La lisis, así como la formación de esferoplastos, parece ser el
resultado de la acción de las autolisinas en los puntos de crecimiento
de la PC.
Otros antibióticos que actúan sobre la PC son: vancomicina,
bacitracina, fosfomicina, cicloserina (con más detalle se estudiará en la
sección: antimicrobianos).
Casos especiales: Protoplastos y esferoplastos
Si se elimina la PC de las bacterias por la acción de enzimas
peptidasas, lisozimas y EDTA, y se coloca a las bacterias en un medio
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hipertónico (por ejemplo, sacarosa al 20 %), la membrana bacteriana
continuará conteniendo su contenido en forma de una esfera, pero
osmóticamente sensible.
En los organismos Gram positivos esta formación se encuentra libre
de PC y se los denomina protoplasto.
En los organismos Gram negativos se liberan esferas osmóticamente
sensibles, pero con restos de PC las que se denominan
esferoplastos.
Tanto los protoplastos como los esferoplastos son muy frágiles pero
en soluciones isotónicas, son capaces de desarrollar casi todas las
funciones biológicas (síntesis de enzimas, reproducción).
Formas L
Una forma L es una variante bacteriana carente de PC o con PC
defectuosa. Se estudió por primera vez en Streptobacillus
moniliformis, donde se observó la producción en forma espontánea de
una serie de variantes capaces de reproducirse en forma de pequeños
elementos filtrables (pasaban poros de filtros que retienen
habitualmente bacterias) los cuales eran carentes de PC o con PC
defectuosa. Estos microorganismos, descriptos por Listes, reciben el
nombre de formas L (L: proviene de Lister Institute, Londres). Estas
bacterias tienen una morfología colonial muy parecida a la de los
micoplasmas.
Las formas L pueden presentarse también en otras bacterias, siempre
que la síntesis de la PC esté alterada. La formación de las formas L,
es favorecida por acción de penicilina en dosis bajas, por enzimas
líticas que digieren el péptidoglicano, por concentraciones elevadas de
sales como ocurre con la mayoría de las células grampositivas.
Algunas bacterias gramnegativas pueden convertirse a formas L en
medios con osmolaridad normal o fisiológica.
Las formas L son el equivalente morfológico de los protoplastos y
esferoplastos. Sin embargo el término de formas L se limita a los
organismos capaces de multiplicarse. Algunas formas L, si se elimina
el agente inductor, pueden revertir a la forma original (variante
transitoria). Otras son formas L estables, aún se conservan algunas
formas L descriptas por Lister que no revertieron a la expresión de su
PC.
27
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Durante muchos años se creyó que las formas L eran micoplasmas,
pero se diferencian de ellos porque:
a) algunas formas L pueden volver a poseer pared celular (formas
inestables). Los micoplasmas nunca poseen pared celular.
b) las membranas celulares de las formas L carecen de esteroles y/o
carotenoides, a diferencia de lo que ocurre con los micoplasmas en los
que estas sustancias brindan rigidez a su membrana celular.
c) el análisis de homología de ácidos nucleicos demuestra que estos
dos grupos no tienen ninguna vinculación taxonómica. La similitud de
sus colonias y el parecido morfológico obedece a la ausencia de PC.
d) las formas L de algunas especies bacterianas, requieren una
concentración de sales en el medio que funcione como estabilizador
osmótico, para mantener la integridad celular.
Rol en la patogénesis de estas variantes bacterianas o formas L:
se observa que in vivo pueden existir los componentes necesarios
para la formación de formas L. Algunos antibióticos son capaces de
alterar la síntesis de la PC, también anticuerpos específicos junto al
complemento y lisozima sérica o hidrolasas lisosómicas que degradan
la PC. Estas bacterias pueden ser resistentes a los antibióticos que
actúan sobre la PC y pueden permanecer en estado de latencia ser
fagocitadas sin ser destruidas.
Pared celular de micobacterias
Otro tipo de pared celular es la que presentan las bacterias
pertenecientes al género Mycobacterium, formada por alto porcentaje
de ceras y lípidos complejos, difíciles de teñir con la coloración de
Gram. Para observarlas se utiliza la coloración diferencial de Zhiel-
Neelsen o coloración ácido alcohol resistente (AAR).
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Cátedra de Microbiología
La propiedad tintorial de ácido resistencia se correlaciona con la
presencia de ácidos micólicos unidos a la PC de las micobacterias,
corinebacterias y nocardias.
Estos microorganismos poseen una estructura similar del glicopéptido
y un patrón similar de enlaces cruzados, además de un
arabinogalactano unido covalentemente al glicopéptido (Figura 10).
Las micobacterias poseen glicopéptidolípidos específicos de especie,
lipooligosacáridos con trehalosa y glicolípidos fenólicos.
La PC de estas bacterias debido a su composición química le otorga
características relacionadas con
- la virulencia,
- la resistencia a la acción de muchas sustancias químicas y
- la lentitud de crecimiento por la menor tasa de absorción de los
nutrientes.
Figura 10. Esquema de envolturas celulares en
micobacterias, bacterias ácido alcohol resistentes
29
Cátedra de Microbiología
Figura 11. Coloración de Zhiel Neelsen
FLAGELOS
Muchas bacterias presentan apéndices largos y delgados, con un
extremo libre y por el otro unido a la bacteria, denominándose flagelos
(látigos pequeños).
Función
Son prolongaciones responsables de la motilidad bacteriana
Su extremo libre puede constituir un factor de virulencia
Se los puede ver al microscopio óptico solamente utilizando tinciones
especiales. La presencia de flagelos está determinada genéticamente.
Composición química: compuestos por la repetición de subunidades
de una proteína denominada “flagelina”.
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Cátedra de Microbiología
Mediante técnicas de microscopía electrónica, los flagelos parecen
consistir en hasta 11 subfibrillas que como filamentos de una cuerda,
están enrollados helicoidalmente, y por medio de dos parejas de
discos fijan al tallo del flagelo en el corpúsculo basal, por debajo de la
membrana citoplasmática (ver dibujo).
El lugar de unión a la célula, así como el número de flagelos es una
propiedad utilizada para clasificar a las bacterias según se gráfica
Monótrica
Lofótrica
Anfítrica
Perítrica
Figura 12. Clasificación de los microorganismos
según número y ubicación de los flagelos
Las espiroquetas presentan alrededor de su periferia un haz de fibras
enrollado, unido a los extremos de la célula, denominado axostilo o
filamento axial. El movimiento se produce por expansión y contracción
alternativa del filamento.
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Cátedra de Microbiología
Figura 13. Espiroquetas con filamento axial
Algunas bacterias filamentosas y mixobacterias se desplazan con un
movimiento de reptación o deslizamiento cuando están en contacto
con una superficie. El mecanismo por el que se produce esta motilidad
es desconocido.
PILI, PELOS O FIMBRIAS
Muchas bacterias gramnegativas y algunas grampositivas presentan
apéndices filamentosos, rígidos y delgados que no se hallan
relacionados con la motilidad, llamados pilus, pelos o fimbrias. En la
célula bacteriana, son más cortos, delgados y numerosos que los
flagelos.
Están compuestos por monómeros de una proteína denominada
pilina.
Estos pilus se clasifican según su función, en fimbrias ordinarias o
comunes y en pili sexuales o conjugativos según la función que
desarrollan.
FUNCIONES
Fimbrias: factor de adherencia (adhesinas) se adhieren a
determinados tejidos del huésped y le permiten colonizar.
Pili sexual: pelo hueco que permite el pasaje de material genético
de una bacteria a otra mediante el mecanismo de conjugación
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Cátedra de Microbiología
En las bacterias gramnegativas pueden encontrarse de 100 a 200
fimbrias o adhesinas en su superficie celular, mientras sólo 1 a 4 pili
sexuales.
Los pili sexuales, son pelos huecos que actúan en la adhesión
intercelular en la conjugación bacteriana (desarrollado en la unidad 6).
Al permitir el paso de material genético entre las células, permite
explicar, en parte, la resistencia bacteriana a determinados
antibióticos, en bacterias que originalmente eran sensibles a esos
antibióticos, o la producción de toxinas en aquellas que no producían
toxinas. La transferencia de material genético en este caso está
determinada por la presencia del plásmido conjugativo que codifica y
expresa la producción de este pili y el proceso de transferencia.
ESPORA BACTERIANA
Espora, del griego semilla, es la forma que adoptan algunas
bacterias para sobrevivir en condiciones ambientales desfavorables.
Las esporas son frecuentemente denominadas endosporas pues se
forman en el interior de la célula vegetativa.
La endospora bacteriana es única en su resistencia al calor, a la
desecación y a los agentes químicos.
En veterinaria, el género Bacillus, aerobio y el género Clostridium,
anaerobio; están integrados por bacilos grampositivos, esporulados,
ampliamente distribuidos en la naturaleza, especialmente en el suelo.
La espora es una estructura compleja que mantiene a la bacteria en
estado latente por largos períodos de tiempo. Cuando las condiciones
ambientales se tornan favorables se restablece la célula vegetativa
original.
Las esporas bacterianas no constituyen una forma de
reproducción, son una forma de resistencia ambiental.
En los géneros que producen esporas, ante diversos estímulos cada
célula vegetativa esporulará, es un proceso fisiológico que se dará en
las mismas condiciones que el microorganismo suele desarrollar. En
los aerobios en aerobiosis, en anaerobios en anaerobiosis. De cada
espora que provenía de una célula vegetativa, en condiciones
favorables volverá a restablecerse la célula vegetativa, con toda su
actividad metabólica.
33
Cátedra de Microbiología
Visto por microscopía electrónica, la estructura de una espora es muy
diferente a la de una célula vegetativa. Está formada por varias capas:
Exosporio, cubierta fina y delicada
Cutícula compuesta por una o varias capas de una sustancia similar a
la queratina
Córtex región compuesta por muchos anillos concéntricos
Luego se observan las envolturas y estructura de la bacteria: PC;
membrana celular y el citoplasma con el ADN, ribosomas y enzimas
como la dipicolínico sintetasa. La extraordinaria resistencia al calor
de la espora se atribuye entre otras cosas, a la presencia del
dipicolinato de calcio, ausente en las células vegetativas.
Las esporas son muy impermeables a los colorantes. Existen técnicas
especiales para teñir las esporas (veremos coloraciones especiales
Unidad 3).
Observación:
A B
Figura 14. Microorganismos en fase de esporulación
A: bacilos con esporas que no deforman la bacteria (género Bacillus)
B: bacilos con esporas que deforman la bacteria (género Clostridium)
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Cátedra de Microbiología
Cutícula
Figura15. Esquema de espora
Formación de la espora
Al microscopio óptico, en la primera fase de esporulación se forma una
zona de mayor refringencia, llamada preespora, situada a un extremo
de la célula o en la región central, dependiendo de cada especie. La
refringencia aumenta paulatinamente hasta que en aproximadamente
6 horas se forma la espora definitiva. El tiempo es dependiente de la
especie. El proceso puede llevar varios días. Se observa que toda la
población bacteriana en el mismo contexto actúa de la misma forma, lo
cual indicaría que existen sustancias que se liberan al medio en ese
contexto y determinan un comportamiento poblacional, producido por
moléculas de comunicación entre las bacterias.
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Cátedra de Microbiología
Figura 16. Esquema del proceso de la esporulación
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Cátedra de Microbiología
Germinación
Es el pasaje de espora a forma vegetativa (bacilo metabólicamente
activo). En este caso la comunicación entre células no es factible, y la
respuesta de germinación de cada espora dependerá de las
situaciones ambientales en las que se encuentra. En el laboratorio
muchas veces depende de ligeras abrasiones sobre la superficie de la
espora.
La germinación se produce en tres etapas
1. Activación
Resultado de una lesión de la cutícula por acción del calor, pH,
agente traumatizante (vidrio molido) etc.
2. Germinación o iniciación
Se pierde el dipicolinato de calcio y se capta agua, potasio y
magnesio, disminuyendo la refringencia y la resistencia al calor.
3. Crecimiento
Se degradan la corteza y las capas exteriores y se reconstituye la
forma vegetativa.
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Cátedra de Microbiología
MICOPLASMAS
Los micoplasmas son las células procariotas de vida libre de menor
tamaño (0,1m a 0,3 m).
No debemos confundir micoplasma y micobacterias. Ambas reciben el
mismo prefijo debido a que su observación hizo pensar en primera
instancia que se trataba de hongos, al observar formas peomorficas.
Sin embargo hemos visto la compleja PC de las micobacterias en las
bacterias ácido alcohol resistentes, en el caso de los micoplasmas que
ahora detallamos, los mismos carecen de PC.
El primer micoplasma fue aislado de bovinos con pleuroneumonía
contagiosa, por Nocard y Roux a partir del líquido pleural.
Posteriormente se reconocieron otros microorganismos que forman lo
que comúnmente se denomina "microorganismos del grupo de la
pleuroneumnía" o PPLO (del inglés pleuropneumonia-like-organisms).
Se caracterizan por:
a) carecer de material genético para formar PC, están rodeados por
una triple membrana citoplasmática integrada por lípidos, proteínas y
esteroles
b) habitualmente forman colonias en forma de huevo fritos de 0,001 a
1,00mm de diámetro que crecen introduciéndose en el medio de
cultivo
c) ser formas filtrables (su naturaleza flexible y pequeño tamaño les
permite atravesar filtros de membrana con poros de 0,2 a 0,4 m).
La ausencia de PC hace que sean muy pleomórficos (en un mismo
medio de cultivo pueden presentar morfología cocoide, estrellada,
hasta filamentos ramificados. No se tiñen con la coloración de Gram.
Se tiñen con coloraciones especiales (Giemsa, Romanowsky).
Los micoplasmas incorporan esteroles a su MC, a partir del medio de
cultivo, por ello debe adicionarse suero equin, de animales viejos, con
mayor contenido de esteroles, y extracto de levaduras. La presencia
de esteroles les confiere resistencia a las variaciones osmóticas.
Son resistentes a los antibióticos que tienen su acción sobre la PC y
también a la acción de la lisozima. Son sensibles a las sustancias que
disminuyen la tensión superficial (jabones, amonio cuternario y tween),
el yodo y compuestos fenólicos.
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Cátedra de Microbiología
MORFOLOGÍA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA DE RICKETTSIAS
Las rickettsias son microorganismos diminutos y delgados de 0,3 a 0,5
µm de diámetro y una longitud de hasta 5 µm. Se presenta en forma
bacilar, cocoide, cocobacilar, algunas con gran pleomorfismo. Son
inmóviles, no forman esporas. Las microfotografías electrónicas
muestran una morfología bacteriana corriente, con membrana celular y
PC, esta última contiene peptidoglicanos. Poseen ADN y ARN; un
sistema metabólico complejo ya que tienen sistema citocromo
completo, pueden realizar fosforilación por transporte de electrones y
sintetizar su propio ATP. Sin embargo, gran cantidad de nutrientes
son obtenidos a partir del huésped, presentando para ello una
membrana celular algo más laxa que la de las bacterias de vida libre.
Se tiñen escasamente con la coloración de Gram. Para la observación
microscópica se usa la técnica de Giemsa, Macchiavello y Castañeda.
Al ser parásitos intracelulares, se los cultiva en saco vitelino de huevos
embrionados y en cultivos celulares.
La excepción la cumple la especie denominada antiguamente como
Rickettsia quintana, especie capaz de crecer en medios comunes de
laboratorio. Por ello y en la continua revisión de la taxonomía esta
especie ha sido reclasificada como perteneciente al género Bartonella,
correspondiendo entonces a Bartonella quintana. En la bibliografía
pueden encontrarlo bajo las dos denominaciones, siendo la de
Bartonella quintana la correcta en la actualidad. La penetración a una
célula huésped es un proceso activo y depende tanto de que el
parásito como la célula huésped estén vivos y sean metabólicamente
activos.
Las Rickettsias extraídas del medio intracelular son muy sensibles al
calor, la desecación y a los productos químicos, por ello la transmisión
de un animal a otro se realiza principalmente mediante vectores:
artrópodos hematófagos, como garrapatas pulgas y piojos; quienes
además de transmisores son multiplicadores de estas bacterias (ya
que las mismas se dividen varias veces en las células epiteliales de
las vías digestivas de los vectores incrementando así la población y
pasando luego a glándulas salivales o a las heces como vía de
contaminación).
Esto ocurre en todos los casos excepto con Coxiella burnetti, agente
etiológico de la Fiebre “Q”, transmisible por ingestión de leche cruda
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Cátedra de Microbiología
de rumiantes infectados o por inhalación. De allí la importancia de su
control mediante la pasteurización. Las rickettsias suelen ser sensibles
a las tetraciclinas, quimoterápicos que atraviesan las membranas de la
célula infectada actuando en el interior de la misma.
MORFOLOGÍA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA DE CLAMIDIA
El género Chlamydia comprende bacterias muy pequeñas, de aspecto
cocoide de 0,3 a 1 µm con cuerpos elementales y cuerpos reticulados,
según sean formas metabólicamente inactivas, e infectantes, o activas
como paásito intracelular. Son parásitos intracelulares y al igual que
Rickettsia fueron consideradas emparentadas con los virus por su
tamaño, dificultad para cultivarlos y vida intracelular. Posteriormente
por estudios morfológicos y bioquímicos se demuestra que son
bacterias, al poner en evidencia que poseen una pared celular típica
de células procariotas, contener ambos ácidos nucleicos (ADN y ARN)
y ser sensibles a los quimioterápicos y antibióticos que llegan al
interior de las células huéspedes infectadas donde se reproducen.
Se tiñen escasamente con la coloración de Gram. Para la observación
microscópica se usa la técnica de Giemsa, Macchiavello y Castañeda.
A diferencia de las rickettsias, las clamidias tienen un ciclo de
desarrollo característico con dos tipos celulares morfológica y
funcionalmente distintos.
El primero se denomina “cuerpo elemental”, que consta de una célula
pequeña y densa, de 0,3 µm de diámetro, relativamente resistente a
las condiciones de vida libre, por lo que su función es la propagación o
diseminación, denominándose forma infectante.
El otro tipo celular es de mayor tamaño, menos denso, lábil en
condiciones de vida libre, cuyo habitan es el interior de las células a
las que parasita, denominado “cuerpo reticular”. El cuerpo elemental
infectante penetra en la célula huésped que lo engloba con su
membrana; una vez adentro, se organiza en una partícula mayor,
crece en tamaño, pierde la densidad y comienza a dividirse en forma
binaria repetidamente (cuerpo reticular) hasta formar una inclusión en
la célula infectada; esa inclusión contiene decenas de bacterias, que
luego pasan nuevamente a su forma elemental y son liberadas al
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Cátedra de Microbiología
medio cuando la célula parasitada se rompe. Este ciclo dura entre 24 y
48 horas.
Si bien se han encontrado artrópodos que puedan llevar algunas
clamidias, su papel como vectores no se ha probado y no serían
indispensables para la diseminación debido a que los cuerpos
elementales poseen relativa resistencia a la vida extracelular.
El sistema enzimático de las clamidias es muy pobre; carecen de un
sistema generador de energía. Si bien pueden oxidar la glucosa no
pueden obtener energía de esa oxidación, y el ATP necesario para la
vida lo obtienen del huésped al que parasitan, de quien obtienen
además una variedad de coenzimas y estructuras básicas de bajo
peso molecular. De los organismos celulares, las clamidias son
quienes poseen los sistemas metabólicos más primitivos. De esto se
deduce que para cultivarlas, debemos utilizar sistemas vivos, como el
huevo embrionado de pollo o cultivos celulares.
Son sensibles a la mayoría de los agentes físicos y químicos (se
destruyen a 60ºC en 10 minutos).
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Cátedra de Microbiología
MORFOLOGIA DE VIRUS
Definiciones útiles
Cápside: estructura proteica simétrica que envuelve al ácido nucleico
viral.
Nucleocápside: la cápside junto con el ácido nucleico encapsulado.
Capsómeros: representan racimos de polipéptidos que cuando están
reunidos forman la cápside.
Virión: es la partícula viral completa.
Provirus: situación en la que un virus no existe como tal, sino que su
genoma está integrado al de la célula huésped.
Viroides: Son los agentes patógenos más pequeños que se conocen,
pues consisten en fragmentos de ácido nucleico desprovistos de
cápside.
Priones: agentes virales no convencionales
Se trata de agentes infecciosos sin cápside ni envoltura ni ácido
nucleico, producen enfermedades en el hombre y en animales, de los
que solo se aisló una glicoproteína con una marcada resistencia a los
agentes físicos y químicos.
VIRUS
El término deriva del latín y significa veneno líquido. Los virus a
diferencia de las bacterias y hongos no son células, sino partículas
infecciosas de muy pequeño tamaño (18 a 350 nm), constituidas por
una estructura química bastante simple, que se caracterizan porque se
multiplican exclusivamente en células vivas, lo que los convierte en
parásitos intracelulares obligados.
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Cátedra de Microbiología
Propiedades
Los virus poseen un solo tipo de ácido nucleico, ADN o ARN, de
cadena simple o doble, de estructura lineal (plana o hiperenrollada),
entero o segmentado.
1) El ácido nucleico viral está rodeado por una cubierta proteica.
Algunos virus, poseen además una envoltura de lípidos,
carbohidratos y proteínas.
2) Los virus carecen de ribosomas, mitocondrias u otros organoides,
necesarios para la síntesis de sus propias proteínas.
3) Los virus pueden contener enzimas especiales, que no se
encuentran en la célula huésped, como las transcriptasas
necesarias para su replicación.
4) Los virus carecen de sistemas enzimáticos necesarios que les
permitan realizar un metabolismo autónomo.
5) Los virus se replican por síntesis y luego por reunión de todos sus
componentes.
6) Los componentes principales: proteínas, ácido nucleico, cubierta
vírica, se replican separadamente y son ensambladas antes de su
liberación. Algunos virus adquieren una envoltura externa derivada
de la célula que infectan.
7) De las propiedades arriba mencionadas, se explica el parasitismo
intracelular obligatorio de los virus.
8) Los virus poseen en su capacidad infectante especificidad de :
especie, órgano, tejido y célula. Esta especificidad depende tanto
de la cubierta del virión, como de la presencia de receptores
específicos en la superficie de la célula blanco, y fueron motivo de
las primeras clasificaciones por su tropismo.
9) Los virus de acuerdo a las células en que se multipliquen, se
subdividen en tres clases: animales, vegetales y bacterianos.
Morfología de la partícula viral
Contenido de Ácidos Nucleicos (AN)
Los virus pueden contener ADN o ARN como portadores de
información genética. En los virus ARN, el ácido nucleico es
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Cátedra de Microbiología
generalmente monocatenario (formado por una cadena única de
ácidos nucleicos), a excepción de los reovirus.
Los virus ADN presentan en general ácido nucleico bicatenario
(formado por una cadena doble de ácidos nucleicos) a excepción de
los parvovirus y algunos fagos.
Los virus ARN monocatenarios pueden ser de polaridad o tira positiva
cuando actúan directamente como ARN mensajero en los ribosomas
celulares para sintetizar proteínas, o presentar tira negativa cuando
funcionan como “moldes” para sintetizar un nuevo ARN y esta copia
actúa en los ribosomas durante la síntesis proteica.
Los ácidos nucleicos (AN) pueden presentarse a veces segmentados
(por ejemplo Ortomyxoviridae poseen 8 segmentos), favoreciendo la
variabilidad genética. La proporción de AN es muy variable en las
diferentes familias como la cantidad de genes que cada uno contiene.
Los AN constituyen la base de la infectividad del virus.
Morfología
Según la arquitectura de la cápside y la presencia o no de cubierta o
envoltura, las partículas virales pueden tener forma:
1. Poliédrica (Picornaviridae)
2. Esférica (Togaviridae)
3. Alargada (Rhabdoviridae)
4. Pleomórfica (Paramixoviridae - Herpesviridae)
5. Otras (Poxviridae - Virus bacteriófagos)
La simetría de un virus está determinada por la estructura
tridimensional de las proteínas de la cápside, pudiendo ser:
Icosaédrica : (poliedro de 20 caras)
Helicoidal (disposición cilíndrica que puede replegarse sobre sí
misma)
Compleja
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Cátedra de Microbiología
Figura 17. Esquema de virus con y sin envoltura
La cápside es de naturaleza proteica (proteínas estructurales), y está
formada por polipéptidos que unidos entre sí constituyen unidades
básicas denominadas “protómeros”.
En las cápsides icosaédricas, los protómeros superficiales se reúnen
de a 5 ó 6 determinando unidades mayores conocidas con el nombre
de “capsómeros”; los capsómeros de 5 protómeros (denominados
pentámeros) ocupan los vértices, mientras que aquellos de 6
protómeros (hexámeros) se ubican en las aristas o en las caras. El
número de capsómeros es constante para un virus determinado, por lo
tanto es un criterio útil para realizar la clasificación viral.
Los Poxvirus tienen simetría compleja, con forma de ladrillo; el ADN
se une a una proteína con aspecto de disco bicóncavo, rodeado a su
vez por varias capas de lipoproteína.
En los virus de simetría helicoidal, las cápsides están constituidas
por un solo tipo de proteína.
Las proteínas superficiales son antigénicas (útiles tanto al sistema
inmune de un animal infectado como a los investigadores para
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Cátedra de Microbiología
clasificar e identificar un virus cualquiera), protegen al genoma viral de
la acción de enzimas tisulares que podrían degradarlo (ADN asas y
proteasas en general), y se encargan de reconocer a los receptores de
las células que serán invadidas por el virus en cuestión mediante los
procesos de adsorción primero y penetración después. Algunos virus
tienen proteínas no estructurales, como por ejemplo aquellas de
función enzimática como ARN polimerasas del virus de la influenza.
Envoltura
En la mayoría de las familias de virus, la nucleocápside está rodeada
por envolturas que son adquiridas a medida que el virus emerge por
las membranas de las células que han sido infectadas (sean
membranas externas, vacuolares o nucleares). Esta envoltura, si bien
es de origen celular, es modificada por el virus, apareciendo proteínas
virales en la misma que cambian la naturaleza proteica original, por
ejemplo pueden surgir espículas (constituidas por glucoproteínas
virales). En general la envoltura carece de rigidez, razón por la cual
cada vez que no cubran a la nucleocápside en forma apretada, la
partícula viral completa presenta pleomorfismo. Los virus carentes de
envoltura son llamados “virus desnudos”.
VIRUS BACTERIANOS
Los virus bacterianos también pueden contener ADN o ARN. Se han
encontrado hasta la fecha, de cadena simple o doble. Los
bacteriófagos mas estudiados son los virus con cola, que infectan a
Escherichia coli y que poseen ADN de doble cadena, se los denomina
con la letra “T”. También hay fagos sin cola, de simetría helicoidal e
icosaédrica, esféricos o filamentosos, con o sin envoltura. Aquí
presentaremos solo un fago como ejemplo, el T4.
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Cátedra de Microbiología
Figura 18. Esquema del virus bacteriófago T4 de E. coli
La proteína simétrica de la cabeza que rodea al ADN es la cápside,
La cola está constituida por 3 partes:
Un tubo central, hueco, a través del cual pasa el AN desde el
fago a la bacteria infectada
Vaina rodeando al tubo central, es contráctil y se extiende
desde el cuello hasta la placa basal
Placa basal: es de forma hexagonal, con una punta en c/u de
sus extremos y está conectada a 6 fibras terminales delgadas.
Estas fibras son los órganos de unión de fago a la pared de la
bacteria huésped (que al igual que las células animales, tiene
receptores específicos).
Importancia
Los fagos son estructuras importantes para el intercambio genético
entre las bacterias.
Los fagos pueden desarrollar ciclos líticos o lisogénicos, y según estas
opciones, serán el tipo de intercambio que podrán establecer. El
mismo se estudiará en detalle en la Unidad 7.
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