1. ¿QUÉ ES LA CINETICA?

Es el estudio de las velocidades de las reacciones, aporta las bases para el

entendimiento de cómo ocurre una reacción.

2. ¿QUE ES ENZIMA?

La Enzima tiene capacidad de manipular otras moléculas, denominadas sustratos. Este es

capaz de unirse al sitio activo de la enzima que lo reconozca y transformarse en un
producto a lo largo de una serie de pasos denominados mecanismo enzimático.

3. CINETICA ENZIMATICA

la cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones químicas que son catalizadas
por enzimas. Estos estudios proporcionan información directa acerca del mecanismo de la
reacción catalítica. La velocidad de una reacción catalizada por una enzima puede medirse
con relativa facilidad, ya que en muchos casos no es necesario purificar o aislar el enzima.

La medida se realiza siempre en las condiciones óptimas de Ph, temperatura, presencia de

cofactores, etc., y se utilizan concentraciones saturantes de sustrato. En estas condiciones,
la velocidad de reacción observada es la velocidad máxima (vmax). La velocidad puede
determinarse bien midiendo la aparición de los productos o la desaparición de los reactivos.
3.2. LA IMPORTANCIA DEL ESTUDIO DE LA CINÉTICA ENZIMÁTICA

Reside en dos principios básicos:

• EN PRIMER LUGAR, permite explicar cómo funciona una enzima.

• EN SEGUNDO LUGAR, permite predecir cómo se comportará esa enzima in vivo.

4. LAS DOS PROPIEDADES CINÉTICAS MÁS IMPORTANTES DE UNA ENZIMA

 EL TIEMPO: que tarda en saturarse con un sustrato en particular.

 LA MÁXIMA VELOCIDAD: de reacción que pueda alcanzar.
 EL CONOCIMIENTO: de estas propiedades hace posible hipotetizar acerca del
comportamiento de una enzima en el ambiente celular y predecircómo responderá
frente a un cambio de esascondiciones.

5. CARACTERÍSTICAS DE LA ACCIÓN CARACTERÍSTICAS DE LA
ACCIÓNENZIMÁTICA ENZIMÁTICA

 La acción enzimática se caracteriza por la información de un complejo que

representa el estado de transición.

 El sustrato se une al enzima a través de numerosas interacciones débiles

como son: puentes de hidrógeno, electrostáticas, hidrófobas, etc., en un lugar
específico, el centro activo.

 Este centro es una pequeña porción del enzima, constituido por una serie de
aminoácidos que interaccionan con el sustrato.

 Cofactor: cuando se trata de iones o moléculas inorgánicas.

 Coenzima: cunado es una molécula orgánica.

6. APLICACIÓN
 Mejor comprensión de las rutas metabólica.
 Diseño de tratamientos más adecuados.
 7. AL SEGUIR LA VELOCIDAD DE APARICIÓN DE PRODUCTO (o de
desaparición del sustrato) en función del tiempo se obtiene la llamada curva de
avance de la reacción, o simplemente, la cinética de la reacción. a medida que la
reacción transcurre, la velocidad de acumulación del producto va disminuyendo
porque se va consumiendo el sustrato de la reacción.

8. PARA ESTUDIAR LA CINÉTICA ENZIMÁTICA:

Se mide el efecto de la concentración inicial de sustrato sobre la velocidad inicial de la

reacción, manteniendo la cantidad de enzima constante. Si representamos v0 frente a [S]0
obtenemos una gráfica.

Cuando [S]0 es pequeña, la velocidad inicial es directamente proporcional a la

concentración de sustrato, y por tanto, la reacción es de primer orden. A altas [S]0, el
enzima se encuentra saturada por el sustrato, y la velocidad ya no depende de [S]0. En este
punto, la reacción es de orden cero y la velocidad es máxima (Vmax).
 9. ENSAYOS ENZIMATICOS

Un ensayo enzimático es un procedimiento, llevado a cabo en un laboratorio, mediante el

cual se puede medir la velocidad de una reacción enzimática. Como las enzimas no se
consumen en la reacción que catalizan, los ensayos enzimáticos suelen medir los cambios
experimentados bien en la concentración de sustrato (que va decreciendo), bien en la
concentración de producto (que va aumentando).

Existen diversos métodos para realizar estas medidas.

 LA ESPECTROFOTOMETRÍA: permite detectar cambios en la radiación de luz por

parte del sustrato o del producto (según la concentración)
 LA RADIOMETRÍA: implica incorporación o liberación de radiactividad para medir
la cantidad de producto obtenido por tiempo.

10. FACTORES FISICOS Y QUIMICOS QUE PUEDEN MODIFIAR LA ACIVIDAD

ENZIMATICA
TEMPERATURA: Los rangos de temperaturas óptimos pueden llegar a variar
sustancialmente de unas enzimas a otras. Normalmente, a medida que aumente la
temperatura, una enzima verá incrementada su actividad hasta el momento en que comience
la desnaturalización de la misma, que dará lugar a una reducción progresiva de dicha
actividad.

CONCENTRACIÓN SALINA: Una elevada concentración o una ausencia de sales en el

medio pueden impedir la actividad enzimática, ya que las enzimas precisan de una
adecuada concentración de iones para mantener su carga y su estructura

PH: el rango de pH óptimo también es muy variable entre diferentes enzimas. Si el pH del
medio se aleja del óptimo de la enzima, esta verá modificada su carga eléctrica al aceptar o
donar protones, lo que modificará la estructura de los aminoácidos y por tanto la actividad
enzimática.

11. ECUACIÓN DE MICHAELIS MENTEN

Los estudios sistemáticos del efecto de la concentración inical del sustrato sobre la
actividad enzimática comenzaron a realizarse a finales del siglo XIX. Ya en 1882 se
introdujo el concepto del complejo enzima-sustrato como intermediario del proceso
de catálisis enzimática. En 1913, Leonor Michaelis y Maud Menten desarrollaron
esta teoría y propusieron una ecuación de velocidad que explica el comportamiento
cinético de los enzimas.

Para explicar la relación observada entre la velocidad inicial (v0) y la concentración

inicial de sustrato ([S]0) Michaelis y Menten propusieron que las reacciones
catalizadas enzimáticamente ocurren en dos etapas: En la primera etapa se forma el
complejo enzima-sustrato y en la segunda, el complejo enzima-sustrato da lugar a la
formación del producto, liberando el enzima libre:
En este esquema, k1, k2 y k3 son las constantes cinéticas individuales de cada proceso y
también reciben el nombre de constantes microscópicas de velocidad. Según esto, podemos
afirmar que:

 v1 = k1 [E] [S]
 v2 = k2 [ES]
 v3 = k3 [ES]

Se puede distinguir entre enzima libre (E) y enzima unido al sustrato (ES), de forma que la
concentración total de enzima, [ET], (que es constante a lo largo de la reacción) es:

[ET] = [E] + [ES]

Como [E] = [ET] - [ES], resulta que: v1= k1[S] [ET] - k1 [S] [ES]