DETERMINACION DEL

FACTOR VIII EN
COMPONENTE
SANGUINEO DE
PLASMA FRESCO
PROTOCOLO DE INVESTIGACION
Blanca Margarita Paredes Torrres

1
INDICE

INTRODUCCION…………………………………………………………………3

ANTECEDENTES E IMPORTANCIA DEL PROBLEMA…………………….4

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA…………………………………….……6

OBJETIVO GENERAL Y OBJETIVOS ESPECIFICOS……………….……..7

JUSTIFICACION E IMPORTANCIA DEL PROBLEMA……………….……..8

DELIMITACIONES Y LIMITACIONES DEL PROBLEMA…………….……..9

PRINCIPIOS TEORICOS FUNDAMENTALES O TEORIAS EN

LAS QUE SE BASA LA INVESTIGACION………………………………..….10

TIPO DE INVESTIGACION……………………………………………….……11

ESTABLECIMIENTO DE HIPOTESIS Y SISTEMA DE VARIABLES……..12

DEFINICION DE LA POBLACION…………………………………………….13

CAPITULO 2

2.0 MARCO TEORICO…………………………………………………… …14

2.1 ENSAYO COAGULOMETRICO………………………………………….15

2.2 EQUIPO DIAGNOSTICO/ PRINCIPIO…………………………………..16

CAPITULO 3

METODO DE CAMPO…………………………………………………………19

BIBLIOGRAFIA………………………………………………………………….21

CRONOGRAMA…………………………………………………………………22

2
 INTRODUCCION
El control de calidad de componentes sanguíneos, se refiere a las técnicas y
actividades periódicas de carácter operativo llevadas a cabo para asegurar el
cumplimiento de los requisitos establecidos para la producción de los
componentes sanguíneos procesados en el banco de sangre, dichas
actividades evalúan, desde el inicio todos los pasos involucrados en los
procedimientos de obtención de los componentes sanguíneos incluyendo la
aplicación de los estándares de recolección, procesamiento, funcionamiento de
los equipos empleados, capacitación del personal involucrado, almacenamiento
de los productos, entre otros; de manera que sea posible garantizar la calidad y
confiabilidad de los productos sanguíneos distribuidos.

El plasma es la fracción líquida de la sangre completa, se separa de los

eritrocitos y se congela en término de seis horas de haber sido obtenida la
muestra, para así usarlo como plasma fresco congelado; éste contiene factores
de coagulación en cantidades fisiológicas, factores de coagulación 11, V, VII,
VIII, IX, X y XI, proteínas naturales anticoagulantes, electrolitos, albúmina,
inmunoglobulinas y proteínas del complemento.

Los crioprecipitados son un concentrado del factor VIII que contienen 100 a 200
mg de fibrinógeno. Es extraído por centrifugación del plasma fresco y su
conservación es igual a la enunciada para el plasma.

La transfusión de plasma y crioprecipitados están indicados para reponer

factores de coagulación y en el tratamiento de coagulación intravascular
diseminada (CID).(18) El tratamiento incluye plasma fresco, crioprecipitados y
concentrado de factores con plasma fresco el cual se usa con mucha
frecuencia debido a que contiene todos los factores de coagulación a nivel del
adulto. Como tratamiento adicional se pueden agregar los crioprecipitados para
agregar factores VIII y fibrinógeno que se consumen de forma importante en la
coagulopatía intravascular diseminada.

Conservar a -30°C y transfundir a 37°C previa descongelación en el laboratorio

Las temperaturas extremas desnaturalizan las proteínas. El plasma se puede

conservar en refrigeración a 2°C para ser utilizado durante las 24 horas
siguientes

Como el plasma no tiene antígenos, sino anticuerpos, no necesita prueba de

compatibilidad, solamente requiere la identificación del grupo.

Junto con el agua y los electrolitos, el plasma contiene proteínas (albúmina,

globulinas y factores de la coagulación), siendo adecuado para la reposición de
éstos factores. La mayoría de los factores de la coagulación son estables a
temperatura de refrigeración, excepto el VIII y, en menor grado el V. Para
mantener niveles adecuados de los factores V y VIII debe conservarse el
3
plasma congelado. Generalmente el plasma se obtiene a partir de sangre total
durante la preparación de otros componentes como CH y plaquetas.

En adición a las pruebas obligatorias descritas para todas las donaciones, 75%
de las unidades analizadas tendrán un volumen mayor o igual a 150 mL, una
tasa del factor VIII:C igual o superior a 70 % del factor VIII original y un
recuento de eritrocitos menor de 6.0 X10 9/L , y de leucocitos menores de de 0.1
X109/L y plaquetas menores de 50 x 109/L.

Si es almacenado a -30oC (mejor que a -18oC) el PFC tiene un periodo de

caducidad de 12 meses pasado este tiempo, el nivel de de Factor VIII puede
haber disminuido en algunas unidades de tal manera que el plasma ya no sea
óptimo para el tratamiento de pacientes con esta deficiencia.

RECOMENDACIONES ABSOLUTAS DEL PLASMA FRESCO CONGELADO

• Corrección de la deficiencia de un factor de la coagulación del cual no exista

disponibilidad de un concentrado específico o combinado asociado a sangrado
(deficiencia de factor II, V, VII, IX, X, XI).

• Deficiencia de factor XII y/o de anticoagulantes naturales (AT-III, Proteína C y

Proteína S) que se asocian a trombosis.

• Para revertir en forma inmediata el efecto de los anticoagulantes orales,

asociados con sangrado (para corregir los factores II, VII, IX y X) o con riesgo
de sangrado ante la necesidad de un procedimiento invasivo o quirúrgico de
urgencia.

• Deficiencia múltiple de factores de la coagulación como en las hepatopatías,

síndrome hemodilucional, transfusión masiva.

• Coagulación intravascular diseminada

• Procedimientos de recambio plasmático en la púrpura trombocitopénica

trombótica (PTT).

4
 USO CONDICIONAL DEL PFC EN PRESENCIA DE SANGRADO Y
ANORMALIDADES DE LA COAGULACIÓN

• Transfusión masiva (reemplazo equivalente o mayora 1,5 volumen sanguíneo

total en 24 horas).

• Ocasionalmente para proveer otros constituyentes del plasma, como el

inhibidor de C-1 esterasa en el edema angioneurótico hereditario.

• Uso de urgencia (excepcional)

• Tratamiento inicial de episodios hemorrágicos, en pacientes sin diagnóstico

confirmado del tipo de hemofilia (Hemofilia A o hemofilia B) o bien en pacientes
con hemofilia B y hemorragias que ponen en peligro la vida.

CONTRAINDICACIONES

• Hipovolemia.

• Procedimientos de recambio plasmático (sin deficiencia de factores de la

coagulación) excepto para tratamiento de PT.

• Apoyo nutricional.

• Hipoalbuminemia

• Tratamiento de inmunodeficiencias.

• Paciente asintomático con alargamiento de tiempos de coagulación o cuando

la coagulopatía pueda ser corregida con tratamiento específico (por ejemplo
vitamina K).

5
 ANTECEDENTES E IMPORTANCIA DEL PROBLEMA

La sangre ha sido transfundida con éxito durante unos 60 años. En este

periodo de tiempo la práctica transfusional ha cambiado radicalmente debido
mejoras en los métodos de extracción y conservación de la sangre. Los
objetivos principales de los procedimientos de extracción, preparación,
conservación y transporte de la sangre y sus componentes son:

 Mantener la viabilidad y la función de los componentes más importantes.

 Evitar los cambios físicos perjudiciales para los componentes.
 Minimizar la proliferación bacteriana.

La solución anticoagulante-conservante evita la coagulación y proporciona los

nutrientes adecuados para un metabolismo continuado de las células durante el
almacenamiento. Durante el almacenamiento la integridad de las células
sanguíneas depende de un delicado equilibrio bioquímico de muchos
materiales, especialmente la glucosa, los iones hidrógeno (pH), y el trifosfato
de adenosina (ATP). Este equilibrio se mantiene mejor en los hematíes cuando
se almacenan a una temperatura entre 1 y 6 ºC, en tanto que las plaquetas y
leucocitos mantienen mejor su función almacenados a temperatura ambiente.
Los factores de coagulación plasmáticos lábiles se mantienen mejor a una
temperatura de -18 ºC o inferior.

Además, la refrigeración o congelación minimizan la proliferación de bacterias

que podrían haberse introducido en la unidad mediante la venipuntura o el
procedimiento.

De la sangre total pueden separarse varios componentes en el mismo banco

de sangre. Los hematíes y las plaquetas se aíslan de la sangre total mediante
centrifugación suave, siendo posteriormente procesados para obtener varios
preparados distintos.

El plasma residual puede utilizarse directamente o bien ser fraccionado

nuevamente para obtener otros componentes.

Entendemos por COMPONENTE SANGUÍNEO al producto separado de una

unidad de sangre total, mientras que la denominación DERIVADO DEL
PLASMA hace referencia a un producto separado de un gran volumen de
mezclas de plasma mediante un proceso llamado FRACCIONAMIENTO.

Una de las numerosas prácticas del médico en cualquiera de sus

especialidades es la indicación de hemoderivados (concentrado globular,
plasma fresco congelado, concentrados plaquetarios, criopecipitado, y
sobrenadante de crioprecipitado), ya sea por requerimientos de los médicos
6
para una intervención quirúrgica, sangrado por prolongación de los tiempos de
coagulación o cifras plaquetarias disminuidas. Es por ello que se requieren
conocimientos básicos y suficientes de los recursos terapeúticos disponibles
para la transfusión; su composición, características generales, indicaciones
precisas, modo de uso y administración y sus afectos adversos de manera que
esta parte del tratamiento sea realizada de manera idónea, coherente, oportuna
para así alcanzar el objetivo final: la mejor atención de todos los enfermos que
requieren terapia transfucional. En muchas ocasiones se hacen transfusiones
innecesarias que llevan a reacciones transfucionales hemolíticas y no
hemolíticas y, posibles infecciones virales, aunque las pruebas de despistaje
sean negativas, por eso la mejor transfusión es la que no se realiza.

El plasma fresco congelado de obtiene a partir de una unidad de sangre total

después de la separación de los glóbulos rojos y congelado a menos de 30oC
para garantizar la presencia de los factores lábiles de la coagulación,
principalmente el V y el VIII. Contiene todos los factores de coagulación y
proteínas plasmáticas como albúmina e inmunoglobulinas; razón por lo que se
usa cuando hay déficit de los factores de la coagulación. Un mililitro de
plasma fresco congelado tiene una unidad de actividad de factor de
coagulación. La disponibilidad de factores de coagulación especifico en el
mercado para tratar cualquier deficiencia ha ilimitado el uso del plasma fresco
congelado a las siguientes condiciones:
1. Deficiencia de múltiples factores de la coagulación
2. Sangrado con tiempo de protrombina o tiempo de tromboplastina
prolongados
3. Sangrado asociado a mala absorción de vitamina K y en la enfermedad
hemorrágica del recién nacido.
4. Sangrado por coagulopatia dilucional posterior a transfusiones masivas.
5. Revertir el efecto de los anticoagulantes orales en pacientes con
sangrado inminente.
6. Corregir el déficit de los inhibidores fisiológicos de la coagulación como
proteína C y S y antitrombina III, con alto riesgo de trombosis.
7. Coagulación intravascular diseminada
8. En los casos de sobredosificación de anticoagulantes orales
9. Trasplante de hígado
10. Hepatopatía con hemorragia difusa
11. Cirugía extracorpórea
12. Déficits congénitos de factores de coagulación, en ausencia de
concentrado de factores específicos.
 

7
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En la actualidad se obtienen más de 100,000 ml de plasma fresco en el

departamento de Banco de Sangre del Hospital General de Zona # 6 IMSS Cd
Madero “Ignacio García Tellez” , de los cuales cerca de 89,000 ml son
transfundidos a diversos servicios de este hospital, esta cantidad expuesta en
números nos permite reflexionar acerca de la importancia de obtener en las
mejores condiciones este componente sanguíneo puesto que la salud,
recuperación y calidad de vida de nuestros derechohabientes es nuestra meta
principal.

8
OBJETIVO GENERAL

DETERMINACION DEL FACTOR VIII EN COMPONENTE

SANGUINEO DE PLASMA FRESCO

Sustentar mediante este trabajo de investigación de manera demostrativa el

control de calidad establecido en el componente sanguíneo de Plasma Fresco
Congelado poniendo en evidencia mediante un sistema gráfico su variabilidad
en cuanto a la concentración de Factor VIII requerido por la NORMA Oficial
Mexicana NOM-253-SSA1-2012, para la disposición de sangre humana y sus
componentes con fines terapéuticos señalado en su apartado 8.6.2.6 . en el
departamento de Banco de Sangre del Hospital General de Zona # 6 IMSS Cd
Madero “Ignacio García Tellez”

OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Selección al azar de Plasmas frescos

 Llevar a cabo determinaciones del Factor VIII en cuanto a análisis se
refiere, apegados a la requisición de la norma oficial.
 Medir concentraciones obtenidas y comparar con controles de
concentración conocida de acuerdo a la técnica.
 Exponer de manera grafica nuestros resultados tanto del componente
sanguíneo como control.

9
 Discusión

JUSTIFICACION E IMPORTANCIA DEL PROBLEMA

En el mes de Junio se atendieron 1405 candidatos a donación en el Banco de

Sangre del Hospital Regional de Zona #6 IMSS en Ciudad Madero de los
cuales solo 506 se consideraron aptos para la donación, esta consideración es
sustentada por una entrevista previa de un médico, el candidato de acuerdo a
la evaluación del médico pasa ahora a la evaluación analítica que consta de
una toma de muestra sanguínea de la cual se procede a determinar el estudio
de Biometría hemática completa, grupo sanguíneo y Factor Rh , brucellla
abortus (con reactivo de Rosa de Bengala) , VDRL y también muy importante
ver el grado de lipemia que el suero presenta, obteniendo estos resultados se
pasan a manos nuevamente de los médicos para que a su consideración
profesional determinen si son o no candidatos a donación; es importante
mencionar que cada candidato a donación se le proporciona peso, talla, y
presión arterial sanguínea, además de leer y firmar el consentimiento previo de
los estudios y preguntas a los cuales va a ser sometido.
De cada donador se obtiene una cantidad de 500 ml de sangre total la cual
es fraccionada de acuerdo a la normatividad en una centrifuga con una
temperatura calibrada a 4 grados centígrados, con 4000 RPM durante 12
minutos, se fracciona de manera automatizada, y se obtiene plasma fresco en
una cantidad alrededor de 200 ml , paquete globular además de el precipitado
para obtener concentrados plaquetarios.
Obtenido el Plasma Fresco, se seleccionan aquellos que tienen el
colorido amarillo que lo caracteriza, que no tenga mucho contenido de burbujas
además de una buena cantidad de este; unos para su congelación mientras
que en un promedio de 6 – 8 son elegidos para la determinación de Factor VIII,
fibrinógeno y proteínas esto para cumplir con los requerimientos de la NORMA
Oficial Mexicana NOM-253-SSA1-2012, para la disposición de sangre humana
y sus componentes con fines terapéuticos

10
Al obtener los resultados que avalan las condiciones en los que se encuentra
este componente sanguíneo, podemos decir que se sustenta el cumplimiento
de la norma de acuerdo al control de calidad especificado para Plasmas
Frescos, y poder ser empleado para el uso de transfusiones de este
componente según sean las requisiciones del médico tratante de cada paciente
que necesite una transfusión.

DELIMITACIONES Y LIMITACIONES DEL TRABAJO DE

INVESTIGACION

El presente trabajo de investigación hace referencia a datos obtenidos

solamente en el mes de Junio del presente año en el Banco de sangre del
Hospital General de Zona #6 IMSS ciudad Madero, toda la información
obtenida está sustentada de acuerdo al informe mensual presentado al
departamento del SIMO de esta institución y presentada así mismo al centro
estatal de transfusión sanguínea.

Este trabajo se limita a evaluar solamente las concentraciones de Factor VIII en

cada uno de los plasmas elegidos al azar de acuerdo a los lineamientos de
NORMA Oficial Mexicana NOM-253-SSA1-2012, para la disposición de sangre
humana y sus componentes con fines terapéuticos

11
PRINCIPIOS TEORICOS FUNDAMENTALES

Marco terorico
Cumplir con una de las limitaciones requeridas por NORMA Oficial Mexicana
NOM-253-SSA1-2012, para la disposición de sangre humana y sus
componentes con fines terapéuticos, sustentando la importancia de la
transfusión del Plasma Fresco Congelado en cuanto a la concentración del
Factor VIII se refiere.

La manera de determinar analíticamente en qué condiciones se encuentra este

componente sanguíneo es sometiéndonos a las requisiciones que la NORMA
Oficial Mexicana NOM-253-SSA1-2012, para la disposición de sangre humana
y sus componentes con fines terapéuticos señala en su apartado 8.6.2.6 Los
requisitos de calidad del Plasma fresco y del plasma desprovisto de factores
lábiles indicados en la siguiente tabla:

Requisitos que deberán reunir el 100% de las unidades de plasma fresco

probadas
REQUISITOS A EVALUAR REQUISITOS DE CALIDAD FRECUENCIAS DEL
(ESPECIFICACION) CONTROL
INSPECCION VISUAL a) Integridad de la bolsa: Sin
fugas al comprimir la bolsa en Todas las unidades
un extractor de plasma, antes y
después de su congelamiento, y
b) Sin color anormal ni coágulos
visibles
VOLUMEN a) +-200 mL, obtenido por
fraccionamiento de sangre
fresca, sin haber efectuado
leucodepleción ni haber Todas las unidades
obtenido concentrado de
plaquetas;

b) +-140 mL obtenido por

fraccionamiento de sangre
fresca, después de separar
plaquetas a partir de la capa
leucoplaquetaria o del plasma
rico en plaquetas;
c) +-450 mL, obtenido por

12
 aféresis
PROTEINAS TOTALES >50 g/L Mínimo diez unidades al mes
FACTOR VIII =70% de la unidad recién Cada tres meses
extraída (antes de congelar); Mínimo diez unidades en el
- En el caso de que el plasma primer mes de almacenamiento
haya sido sometido a un
proceso de inactivación, es
esperable una pérdida máxima
del 15%
CONTEO DE CELULAS Eritrocitos: <6.0 × 109 /L 1% de las unidades o cuatro
RESIDUALES PREVIO AL - <0.1 × 109 /L unidades al mes, lo que sea
CONGELAMIENTO Leucocitos: <50 × 109 /L mayor
- Plaquetas:

TIPO DE INVESTIGACION

Se trata de una investigación de tipo no experimental puesto que es un estudio

que voy a realizar sin la manipulación deliberada de variables y en los que solo
se observan los fenómenos en el ambiente natural para después analizarlos.

Los datos a poner a prueba serán obtenidos de plasmas frescos

congelados de donadores reales, y realizados mediante el método de
coagulometria mediante el equipo encontrado en el Hospital Regional Numero
6 IMSS cd Madero “Ignacio Garcia tellez” conocido como Elite 7000

13
ESTABLECEMIENTO DE HIPOTESIS Y SISTEMA DE VARIABLES

HIPOTESIS NULA

El Factor VIII de los Plasmas Frescos obtenidos en el Banco de Sangre del

Hospital general de Zona #6 IMSS Cd madero “Ignacio García Tellez” cumple
con las especificaciones de concentración de dicho factor de acuerdo a la
NORMA Oficial Mexicana NOM-253-SSA1-2012, para la disposición de sangre
humana y sus componentes con fines terapéuticos

HIPOTESIS ALTERNA

EL FACTOR VIII de los plasmas Frescos obtenidos en el Banco de Sangre del

Hospital general de Zona Zona #6 IMSS Cd madero “Ignacio García Tellez” no
cumple con las especificaciones de concentración de dicho factor de acuerdo a
la NORMA Oficial Mexicana NOM-253-SSA1-2012, para la disposición de
sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos

14
DEFINIR LA POBLACION
La población se limita a donadores de sangre total atendidos en el mes de
Junio del Banco de Sangre del Hospital general de Zona #6 IMSS Cd Madero “
Ignacio García Téllez”.

CAPITULO 2
MARCO TEORICO

2.1 ENSAYO COAGULOMETRICO

El APTT( Tiempo de Tromboplastina Parcial Activado), es la prueba más
sensible para evaluar la vía intrínseca de la coagulación. Consiste en activar el
plasma por contacto con superficies cargadas negativamente. En esta prueba
se fija la concentración de fosfolípidos presentes en la reacción mediante el
agregado de cefalina (tromboplastina parcial). La activación por contacto se ve
favorecida por el agregado de caolín (sustancia inerte, con cargas negativas)
que aumenta la superficie de contacto.

El APTT es más sensible al defecto de los factores VIII, IX, XI,XII o fase de
contacto como precalicreína (PK, quiminogenos de alto peso molecular
(HMWK). Es menos sensible al defecto de factores de la vía común (X,V,o II).

Este método mide la formación de fibrina por acción de la trombina generada

en un sistema coagulante que aporta todos los factores excepto el factor en
estudio. El tiempo de coagulación del sistema es dependiente de la
concentración del factor presente en la muestra problema.

Los resultados se expresan en por ciento de actividad.

2.1 COAGULOMETRO AUTOMATIZADO

Son equipos utilizados para determinar cualquiera de las pruebas de
hemostasia que utilicen el método coagulométrico (TP,APTT, fibrinógeno,

15
factores etc.). Desde el punto de vista práctico ahorran tiempo para procesar
muchas muestras, pero fundamentalmente logran altos grados de
reproductividad. Básicamente su funcionamiento se basa en dos métodos de
detección: óptico (turbodensitometría) y/o magnético. Los que utilizan el
método magnético toman el tiempo que tarda en formarse el coágulo desde el
momento de mezcla hasta que una varilita de metal deja de girar. Los basados
en métodos ópticos utilizan medidas de transmitancia para dar el tiempo de
formación del coágulo.

Dentro de las funciones que pueden brindar estos equipos esta la incubación
de muestras por medio de fuentes secas, ésta se realiza por el tiempo
estipulado para cada prueba que puede ser determinado por el operador o bien
ya viene estandarizado en el equipo.

Cabe aclarar que en estos equipos se trabaja de modo muy similar al método
manual en lo que se refiere a preparación de diluciones y curvas de actividad,
la ventaja de estos equipos radica en agilizar el trabajo en caso de elevado
número de muestras y la de permitir mayor reproducibilidad.

2.2 EQUIPO DIAGNOSTICO

ACL-ELITE PRO
Es un autoanalizador centrifugo de alta velocidad controlado por
microprocesadores que realiza técnicas coagulométricas, colorimétricas e
inmunológicas de coagulación y fibrinólisis.

El sistema está totalmente robotizado con lo que no es necesario ningún

tipo de manipulación. El LCD de pantalla táctil, con un software altamente
intuitivo, hace muy fácil su manejo y aprendizaje: con un solo dedo se puede
controlar el analizador.

En estado de standby, el instrumento siempre se encuentra preparado para

procesar muestras sin demora de tiempo para la estabilización de temperatura,
etc. Esta característica es imprescindible en laboratorios donde se procesan
muestras de urgencia.

MODULO ANALITICO
Basado en tecnología de mezcla por microcentrifugacion, los ACL
ELITE/ELITE PRO se componen de:

AREA DE MUESTRAS
El plato de muestras tiene una capacidad hasta de 40 muestras con
carga continua. El pipeteo de la muestra se realiza directamente desde tubo
16
primario de extracción de diferentes volúmenes evitándose así el decantado
del plasma vial.

El analizador también puede trabajar con viales de 0.5 mL y/o 2mL para los
casos de muestras con muy poco plasma. Un mismo plato de muestras puede
ser cargado simultáneamente con tubos y viales.

El ACL/ELITE/ ELITE PRO permiten la carga continua de muestras y además

las muestras urgentes pueden ser insertadas en cualquier momento y serán
procesadas con prioridad.

Plasma humano inmunodeprimido en Factor VIII para la determinación

cuantitativa de la actividad del Factor VIII ( FVIII ) en plasma humano citratado,

Basada en la prueba del Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada (TTPA),

en los sistemas de coagulación.

PRINCIPIO
El Factor VIII es una glicoproteína plasmática, de composición polipeptídica,
que se sintetiza en el hígado, y que circula en sangre formado un complejo no
covalente con el factor von Willebrand (FVW). Durante la cascada de la
coagulación, el Factor VIII es activado como Factor VIIIa, gracias a una
protolisis mediada por la Trombina o Factor Xa (FXa). El Factor FVIIIa funciona
como cofactor para el factor IX(FIX), acelerando (hasta 200.000 veces), la
conversión del FX a FXa por el FIXa.

Las deficiencias congénitas del Factor VIII son las responsables de la hemofilia
A, patología de herencia recesiva ligada al sexo, que puede producir desde
hemorragias leves a severas. El grado de la intensidad hemorrágica esta
inversamente relacionado con la concentración del Factor VIII .

La actividad del Factor VIII en el plasma del paciente se determina llevando a

cabo una prueba modificada del Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada
(TTPA). El plasma del paciente se diluye y se añade a un plasma deficiente en
Factor VIII. La corrección del tiempo de coagulación prolongado del plasma
deficiente es proporcional a la concentración (%actividad) del Factor en el
plasma del paciente, que se obtiene a partir de una curva de calibración.

COMPOSICION

17
El Kit Factor VIII déficit plasma consta de:

VIII Factor VIII déficit plasma: 5 viales de 1mL de plasma humano liofilizado del
que se ha eliminado artificialmente el Factor VIII, contiene tampón y
estabilizantes. La actividad residual del Factor VIII es menor o igual al 1%,
mientras que todos los demás factores de coagulación se encuentran a niveles
normales.

MEDIDAS DE PRECAUCION Y ADVERTENCIAS

El material usado en estos productos han sido verificados por métodos

aprobados por la FDA y encontrado no activo al virus de superficie de la
Hepatitis B(HBsAg), anti HCV y anticuerpos HIV. Manejar con precaución como
si fuese potencialmente infeccioso.

Evítese el contacto con los ojos y la piel. No tirar los residuos por el desagüe.

Producto para el diagnostico in vitro.

PREPARACION
Disolver el contenido de cada vial con 1mL de agua destilada. Cerrar el vial y
homogeneizar suavemente. Asegúrese de la completa disolución del producto.
Mantener el control durante 15 y 25oC durante 30 minutos. Mezclar por
inversión del vial antes de su uso. No agitar. Evitar la formación de burbujas.

CONSERVACION Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS

Los plasmas deficientes que no hayan sido abiertos son estables hasta la fecha
de caducidad indicada en el vial si se mantienen entre 2 – 8oC.

Estabilidad después de su reconstitución : 24 hrs a 2-8oC en el vial original ó

24 hrs a 15oC en los sistemas ACL Futura, ACL advance y ACL TOP.

18
Para obtener una estabilidad óptima, sugerimos que una vez acabado el
trabajo, retire los plasmas deficientes del analizador y los conserve a 2-8oC en
su vial original.

CONTROL DE CALIDAD
Para realizar un programa completo de control de calidad, se recomienda el
uso de controles normales y anormales. Los controles de IL adecuados para
este programa son el control normal (sistemas de coagulación IL), el plasma
referencia normal y anormal.

RESULTADOS
Los resultados de los pacientes se expresan en actividad (%), UI o segundos.

LIMITACIONES / INTERFERENCIAS

Las muestras con excesiva hemolisis, ictericia o lipemia deberán ser utilizadas
no deberán ser utilizadas para las pruebas de coagulación, ya que pueden
producirse interferencias debido a ello.

VALORES ESPERADOS
FACTOR VIII: 50-150% (0.5-1.50 UI).

19
 CAPITULO 3
METODO DE CAMPO

3.1 MARCO DE REFERENCIA O SITUACION DEL OBJETO A

INVESTIGAR
Las concentraciones evaluadas de Factor VIII en plasmas frescos congelados
disponentes a transfusión pondrán en situación determinativa la calidad y
cumplimiento de la norma la NORMA Oficial Mexicana NOM-253-SSA1-2012
respecto a concentraciones de FVIII en PFC.

3.2 TIPO DE INVESTIGACION

Se trata de una investigación de tipo no experimental puesto que es un estudio
que voy a realizar sin la manipulación deliberada de variables y en los que solo
se observan los fenómenos en el ambiente natural para después analizarlos.

3.2 .1 POBLACION ESTUDIADA

La población se limita a donadores de sangre total atendidos en el mes de
Junio del Banco de Sangre del Hospital general de Zona #6 IMSS Cd Madero “
Ignacio García Téllez”.

3.3 OBJETIVOS DE LA INVESTIGACION DE CAMPO

20
Sustentar mediante este trabajo de investigación de manera demostrativa el
control de calidad establecido en el componente sanguíneo de Plasma Fresco
Congelado poniendo en evidencia mediante un sistema gráfico su variabilidad
en cuanto a la concentración de Factor VIII requerido por la NORMA Oficial
Mexicana NOM-253-SSA1-2012, para la disposición de sangre humana y sus
componentes con fines terapéuticos señalado en su apartado 8.6.2.6 . en el
departamento de Banco de Sangre del Hospital General de Zona # 6 IMSS Cd
Madero “Ignacio García Tellez”

3.4 UNIDAD DE ANALISIS

Los datos a poner a prueba serán obtenidos de plasmas frescos
congelados de donadores reales, y realizados mediante el método de
coagulometria mediante el equipo encontrado en el Hospital Regional Numero
6 IMSS cd Madero “Ignacio Garcia tellez” conocido como Elite 7000

3.5 SISTEMA DE VARIABLES E INDICADORES

VARIABLES DIMENSION INDICADOR REACTIVO INSTRUMENTO A
APLICAR
CONCENTRACION CUANTIFICACION VALORES DE PLASMA DEFICIT ANALISIS DE
DE FVIII EN PFC DE FVIII EN PFC REFERENCIA DE FVIII EVIDENCIA
70- 150% MEDIANTE
EQUIPO
AUTOMATIZADO
ACL ELITE PRO

3.6 INSTRUMENTO DE MEDICION Y DESCRIPCION

Fundamentos de coagulometría por método automatizado coagulómetro ACL
ELITE PRO.

3.7 METODO DE RECOLECCION DE DATOS

Mediante análisis de evidencia y con la autorización y apoyo del sistema
de enseñanza del HGR# 6 IMSS CD MADERO la obtención de datos
recolectados en el mes de junio 2013 de Plasmas Frescos Congelados
disponentes a transfusión en el Banco de sangre del mismo.

21
3.8 JUSTIFICACION DEL INTRUMENTO DE MEDICION
RELACIONADO CON EL SISTEMA DE VARIABLES.

ACL-ELITE PRO
Es un autoanalizador centrifugo de alta velocidad controlado por
microprocesadores que realiza técnicas coagulométricas, colorimétricas e
inmunológicas de coagulación y fibrinólisis.

El sistema está totalmente robotizado con lo que no es necesario ningún

tipo de manipulación. El LCD de pantalla táctil, con un software altamente
intuitivo, hace muy fácil su manejo y aprendizaje: con un solo dedo se puede
controlar el analizador.

3.9 TECNICAS DE ANALISIS QUE APLICARAN A LOS

RESULTADOS DE LA INVESTIGACION DE CAMPO.

METODOS DE LECTURA
 TECNICAS COAGULIMETRICAS
La luz generada por un LED (660nm) es dirigida hasta la muestra por
una fibra óptica. La detección se produce a 90º con respecto al rayo
incidente (NEFELOMETRIA)

 TECNICAS CROMOGENICAS
La luz producida por una lámpara halógena es transmitida hacia la
cámara de lectura por un sistema de lentes y fibra óptica. La luz que se
transmite a través de la cubeta de reacción es detectada por un filtro de
405 nm y leída por un sensor óptico.

 TECNICAS INMUNOLOGICAS
La aglutinación de partículas recubiertas con anticuerpos es detectada a
405 nm (Inmunoturbidimetria)

22
B IBLIOGRAFIA

1. NORMA Oficial Mexicana NOM-253-SSA1-2012, para la disposición de

sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos. 26 de
Octubre 2012.
2. Guía para el uso clínico de la sangre
Secretaría de salud
Asociación Mexicana de Medicina Transfusional A.C.
Agrupación Mexicana para el estudio de la Hematología A.C.
3. Reglamento de la ley general de Salud en materia de Investigacion para
la salud.
4. Principios de urgencias, emergencias y cuidados críticos.
tratado.uninet.edu/c060102.html
5. Procedores de Bancos de sangre. Ministerio de salud pública, grupo
nacional de hematología y Banco de Sangre .

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6. Estándares de trabajo para Bancos de Sangre. Segunda edición.
Noviembre 1999.OPS.OMS.

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