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UNIVERSIDAD DEL QUINDIO

FACULTAD DE CIENCIAS AGROINDUSTRIALES


PROGRAMA ACADEMICO INGENIERIA DE ALIMENTOS
ASIGNATURA MICROBIOLOGÍA GENERAL

Profesora: María Inés Gallego Murillo


Alumno: Mariana Corredor Peña

TALLER DE APLICACIÓN A LOS CONCEPTOS DE MICROBIOLOGÍA No.02

1. Defina crecimiento microbiano.

Se define como el aumento del número de microorganismos a lo largo del tiempo, o sea,
el incremento en el número de células. La bipartición (fisión binaria) es el proceso por el
cual una célula se divide para formar dos células iguales y el intervalo que transcurre en la
formación de dos células a partir de una célula se llama generación y el tiempo requerido
para esto es el tiempo de generación o tiempo de duplicación.
Durante la fisión binaria cada célula hija recibe una copia del cromosoma, de los
ribosomas, complejos macromoleculares, así como monómeros y iones inorgánicos para
existir como una célula independiente. El ADN se ancla a la membrana y así, cada célula
hija se queda con una copia. Se forma un septo que dará lugar a cada una de las células,
las envolturas rodean a cada copia del ADN y finalmente se da la separación de las
células.
2. Distinga entre los términos velocidad de crecimiento y tiempo de generación.
Tiempo de generación: Las principales reacciones de la síntesis celular son reacciones de
polimerización, proceso por el cual los polímeros (macromoléculas) se sintetizan a partir
de monómeros: síntesis de DNA, RNA y proteínas; que una vez sintetizadas se
ensamblan formando las estructuras celulares tales como la envuelta celular, flagelos,
ribosomas, cuerpos de inclusión, etc. En la mayor parte de los microorganismos este
crecimiento continúa hasta que las células se dividen en dos nuevas células. El tiempo
que requiere una célula para completar su ciclo es muy variable y depende de factores
nutricionales y genéticos. El intervalo que transcurre en la formación de dos células a
partir de una célula se llama generación y el tiempo requerido para esto es el tiempo de
generación.
Tiempo de generación G es el tiempo requerido para que una célula se divida o una
población se duplique
G=t/n

Velocidad de crecimiento: Es la representación gráfica del logaritmo del número de células


frente al tiempo. La curva teórica sería una recta pues los microorganismos estarían
creciendo constantemente, pero en la práctica la curva presenta distintas fases:

 Fase de latencia: período de adaptación de un microorganismo a un nuevo medio


de cultivo.
 Fase exponencial o logarítmica: aumento regular de la población que se duplica
a intervalos regulares de tiempo (G).
 Fase estacionaria: cese del crecimiento por agotamiento de nutrientes, por
acumulación de productos tóxicos, etc.
 Fase de declinación o muerte: el número de células que mueren es mayor que el
número de células que se dividen.

María Inés Gallego Murillo: Magíster en Microbiología, Especialista en Salud Ocupacional e Higiene del trabajo, bioquímica,
Diplomados en Inducción Universitaria y Modelos Pedagógicos.
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Las propiedades de un microorganismo dependerán de la fase de la curva en que se


encuentren (la producción de antibióticos se lleva a cabo en la fase estacionaria).

3. ¿Por qué el crecimiento exponencial conduce a una gran población celular en un


corto período de tiempo?

En el crecimiento exponencial, la tasa de crecimiento per capita (por individuo) de una

población es la misma sin importar el tamaño de la población, lo que hace que crezca

cada vez más rápido conforme se hace más grande. En la naturaleza, las poblaciones

pueden crecer de manera exponencial por un tiempo, pero finalmente se ven limitadas

por la disponibilidad de recursos. El crecimiento exponencial produce una curva en

forma de J.

4. ¿Qué es una gráfica semilogarítmica?

Una población microbiana muestra generalmente un modelo característico de crecimiento


cuando se inocula en un medio fresco. Hay una fase inicial de acomodación y después
comienza el crecimiento exponencial. A medida que se acaban los nutrientes o se
acumulan los productos tóxicos, el crecimiento cesa y la población entra en la fase
estacionaria. Si la incubación continúa, las células pueden comenzar a morir y la
población se dice que entra en fase de muerte.
Es el periodo de la curva del crecimiento en el cual el microorganismo crece
exponencialmente, es decir que cada vez que pasa un cierto tiempo de generación la
población se duplica. Bajo condiciones apropiadas la velocidad de crecimiento es máxima.
Las condiciones ambientales afectan la velocidad de crecimiento exponencial.

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5. ¿A qué fase de la curva de crecimiento es aplicable la teoría matemática?


Las bacterias crecen siguiendo una progresión geométrica en la que el número de
individuos se duplica al cabo de un tiempo determinado denominado tiempo
de generación (ô). De esta forma, podemos calcular el número de bacterias (N) al cabo de
un número de generaciones (n) usando la ecuación siguiente:
N = N0 2n
siendo N0 el número de células en el momento actual. El número de generaciones se
puede calcular de la siguiente forma:
n=t/ô
donde t es el tiempo transcurrido.
Los tiempos de generación de bacterias creciendo en ambientes favorables pueden ser
muy cortos (valores de ô de 20 min). Esto lleva a que una única célula (N0 = 1) creciendo
con un ô = 20 min, llegue a poder producir 4.7 x 1021 células en 24 horas. Si la bacteria
crece en un medio líquido, las células que se producen en cada división continúan su vida
independientemente en la mayoría de los casos formando una suspensión de células
libres. Cuando una célula aislada comienza a crecer sobre un substrato sólido, el
resultado del crecimiento al cabo del tiempo es una colonia. Se denomina unidad
formadora de colonia (UFC) a una célula viva y aislada que se encuentra en un substrato
y en condiciones ambientales adecuadas y produce una colonia en un breve lapso de
tiempo. Una UFC también puede corresponder a más de una célula cuando éstas forman
parte de grupos unidos fuertemente (estreptococos o diplococos, por ejemplo) ya que
cada grupo formará una sola colonia.

6. ¿Cuándo no ocurre una fase de acomodación?

7. ¿Por qué las células entran en fase de estacionaria?

En ella no se incrementa el número de bacterias (ni la masa u otros parámetros del


cultivo). Las células en fase estacionaria desarrollan un metabolismo diferente al de la
fase de exponencial y durante ella se produce una acumulación y liberación de
metabolitos secundarios que pueden tener importancia en el curso de las infecciones o
intoxicaciones producidas por bacterias.
Los microorganismos entran en fase estacionaria bien porque se agota algún nutriente
esencial del medio, porque los productos de desecho que han liberado durante la fase de
crecimiento exponencial hacen que el medio sea inhóspito para el crecimiento microbiano
o por la presencia de competidores u otras células que limiten su crecimiento.
La fase estacionaria tiene gran importancia porque probablemente represente con mayor
fidelidad el estado metabólico real de los microorganismos en muchos ambientes
naturales.

El crecimiento se mide por el cambio en el número de células con el tiempo. Los contajes
celulares realizados con el microscopio miden el número total de células de una
población, mientras que el contaje de células viables mide solamente la población viva.
Las medidas de la masa celular o turbidez son indirectas pero muy útiles.

8. ¿Qué se asume como cierto en relación del contaje en placa con el número de
células?
El conteo bacteriano señala la magnitud de la población total bacteriana. En ese sentido
se puede determinar por diversas técnicas que se basan en algunos de los siguientes
tipos de medida: cuenta celular (directamente al microscopio o mediante un contador
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electrónico de partículas o indirectamente con la cuenta de colonias), masa celular (en
forma directa pesando el contenido celular del nitrógeno o indirectamente por
turbidimetría, proporcional al número de células) y actividad celular (indirectamente
relacionando el grado de actividad bioquímica al tamaño de la población bacteriana)

9. Describa cómo diluiría un cultivo bacteriano por 10.7.


Para obtener estas concentraciones primero en 7 tubos de ensayo se agregan 9ml
de agua destilada y en un beaker se agregan 30ml de agua destilada más 3 gotas
de azul de metileno esta nos daría la concentración 1:1, de este beaker se saca
1ml de la solución y se añade al primer tubo de ensayo y se agita suavemente
este tubo de ensayo contendría la concentración 1:2, luego de ese mismo tubo de
ensayo se saca 1ml y se añade al tubo de ensayo 2 teniendo así este la
concentración de 1:3, del tubo de ensayo 2 se saca 1ml y se añade al tubo de
ensayo 3 a este se le saca 1ml y se añade a el tubo de ensayo4 que queda con la
concentración de 1:4 y asi sucesivamente hasta que el tubo de ensayo 7 quede
con la concentración de 1:7

10. ¿Qué uso tiene un espectrofotómetro para el estudio del crecimiento microbiano?

Los aparatos para cultivo continuo (quimiostato) constituyen un medio para mantener las
poblaciones celulares en fase exponencial durante largos períodos. En un quimiostato la
velocidad a la que un cultivo es diluido gobierna la velocidad de crecimiento y el tamaño
de la población es gobernado a su vez por la concentración de nutriente limitante.
El espectrofotómetro es un instrumento que sirve para medir, en función de la longitud de
onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces
de radiaciones. También es utilizado en los laboratorios de química para la cuantificación
de sustancias y microorganismos.

Hay varios tipos de espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica o


espectrofotómetro de masa.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través
de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le
permite al operador realizar dos funciones:

1. Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra.


2. Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en
la muestra

11. ¿En qué difieren los microorganismos en un quimiostato con respecto a un cultivo
monofásico?
En un quimiostato, los microorganismos pueden cultivarse a una amplia variedad de tasas
de crecimiento exponencial, mientras que, en un cultivo monofásico el crecimiento
exponencial no puede continuar indefinidamente y se obtiene la típica curva de
crecimiento.

12. ¿Cómo se controla la velocidad de crecimiento en un quimiostato?

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La temperatura es el factor ambiental más importante que controla el crecimiento
microbiano. Los microorganismos difieren mucho en sus requerimientos de temperatura
para su crecimiento.
El volumen del líquido en el reactor se mantiene constante, ajustando los flujos de entrada
y salida al mismo valor, el Ph del medio mediante la adición de ácido o base, el suministro
continuo de O2 para sistemas anaeróbicos y un nivel de agitación adecuado que
garantice la homogeneidad del sistema, la temperatura para que se produzca el
crecimiento óptimo de los microorganismos deseados, el nivel de espuma.

13. ¿Cuáles son las temperaturas cardinales para Escherichia coli? ¿A qué clase de
temperatura pertenece?
Puede crecer a temperaturas que oscilan entre 7 °C y 50 °C, con
una temperatura óptima de 37 ºC. Algunas pueden proliferar en alimentos ácidos, hasta a
un pH de 4,4, y en alimentos con una actividad de agua (aW) mínima de 0,95.
Escherichia coli pertenece a un grupo de bacterias presentes en el intestino del
ser humano y animales, siendo, la gran mayoría, inocuas en ellos. Sin embargo,
hay algunas cepas de E. coli productoras de toxinas, llamadas verotoxinas o
toxinas de tipo shiga que pueden causar cuadros gastrointestinales graves en el
ser humano.

14. ¿En qué difiere un hipertermófilo de un psicrófilo?

Los organismos con temperaturas óptimas frías se llaman psicrófilos, mientras que los de
temperaturas muy altas se llaman termófilos e hipertermófilos. Estos organismos tan
inusuales han desarrollado maquinaria celular estable y que funciona óptimamente a
temperaturas extremas.

Se le denomina psicrófilo a los organismos capaces de vivir a temperaturas por debajo de


los 5°C. sus temperaturas mínimas de desarrollo van de −5 a +5 °C, sus temperaturas
óptimas de desarrollo se encuentran entre 12 y 15 °C y sus temperaturas de desarrollo
máximas son de 15 a 20 °C.
Hay dos tipos de psicrófilos:
Psicrófilos obligados. Su temperatura óptima está en torno a los 15-18 °C, aunque viven
perfectamente a cero grados e incluso a temperaturas más bajas; un ejemplo
es Methanogenium frigidum, una arquea metanógena que vive en las aguas de
la Antártida; su temperatura óptima es de 15 °C y no sobrevive por encima de 18 °C.Hay
algunos cuya temperatura óptima es aún más baja, los psicrófilos extremos; un ejemplo
es un Polaromonas vacuolata, que vive en las aguas de la Antártida; su temperatura
óptima es de 4 °C y no sobrevive por encima de 14 °C.
Psicrófilos facultativos. Como su nombre indica, tienen la facultad de resistir el frío, pero
su temperatura óptima es más alta, en torno a los 20-30 °C. Estos organismos son los
culpables de que los alimentos se estropeen en los frigoríficos
Son hipertermófilos aquellos organismos que habitan a altas temperaturas, que
normalmente llegan al punto de ebullición. Por lo común crecen bien y se reproducen a
temperaturas mayores a 70 °C, un calor letal para la mayoría de los seres vivos.
Los hipertermófilos son procariontes, como algunas bacterias, principalmente arqueas, en
las que además imperan otras condiciones extremófilas, como
ser hiperhalófilas e hiperacidófilas.

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Arqueas hipertermófilas, Ignicoccus parasitado por dos Nanoarchaeum a 90°C en una
fuente hidrotermal de Islandia.

15. ¿En qué difieren los microorganismos psicrofílicos y psicrotolerantes?


Los microorganismo psicrofilicos son auqellos cuya temperatura optimca de crecimiento
es baja , aproximadamente de 15°C o inferior y poseen una temperatura máxima de
crecimiento aproximadamente de 20°C y los microorganismos psicrotolerantes son
aquellso cuya temperatura optima de crecimiento se encuentra en el rango mesofilo por
encima de entre los 15°C y 20°C mas cercana a la temperatura ambiente pero también
pueden multiplicarse a tempratura de 7°C

16. ¿Dónde puede buscar los microorganismos psicrofílicos?


Los microorganismo psicrofilicos se encuentran en en suelos árticos y alpinos , altas
latitudes, formación de hielo y aguas oceánicas profundas

17. ¿Dónde puede encontrar los hipertermófilos? ¿Qué importancia pueden poseer en
la industria y en la biotecnología?

La acidez o basicidad de un ambiente puede afectar enormemente el crecimiento


microbiano. Algunos organismos han evolucionado parea crecer a pH muy bajos o muy
altos, pero la mayoría lo hacen entre pH 6 y 8. el pH interno de una célula debe
mantenerse siempre próximo a la neutralidad con independencia del pH exterior.
Muchos de ellos viven en el entorno de fumarolas volcánicas oceánicas a más de 2 000 m
de profundidad, donde la gran presión del mar eleva el punto de ebullición por encima de
los 100 °C. El récord es de la cepa arqueana 121, que sobrevivió a 130 °C. Se cree que
no pueden existir microbios a más de 150 °C, ya que a esa temperatura el ADN pierde
la cohesión.
La gran biodiversidad existente entre los microorganismos extremófilos y su capacidad
para sintetizar proteínas y enzimas (extremoenzimas), capaces de funcionar bajo
condiciones extremas, ha abierto un prometedor panorama en la biotecnología, ya que
gran parte de los procesos industriales ocurren bajo condiciones extremas de
temperatura, presión, fuerza iónica, pH y solventes orgánicos. Además, las
extremoenzimas pueden ser usadas como un modelo para diseñar y construir proteínas
con nuevas propiedades de interés para determinadas aplicaciones industriales, a través
de la manipulación genética de microorganismos, La realización de procesos
biotecnológicos a elevadas temperaturas tiene muchas ventajas. El incremento en la
temperatura tiene una influencia significativa en la biodisponibilidad y solubilidad de los
compuestos orgánicos, en la disminución en la viscosidad y en el incremento en el
coeficiente de difusión de los compuestos orgánicos (en especial substratos hidrofóbicos
poco solubles, como hidrocarburos y g rasas alifáticas), por lo que las velocidades de
reacción son más altas; Esto es especialmente importante en procesos que involucran el
manejo enzimático de lípidos y de efluentes industriales ricos en aceites. En la industria
de los alimentos, las lipasas termoestables se requieren para el procesamiento enzimático
de algunos lípidos, como la manteca animal y el aceite de palma, que son los principales
materiales utilizados en la producción de ácidos grasos libres, pero se encuentran en
estado sólido a las temperaturas normales en las que se llevan a cabo estas reacciones.

18. ¿Cuál es el incremento en la concentración de protones al variar el pH de 7 a 4?


indica la concentración de iones hidrógeno en una disolución. Se trata de una medida de
la acidez de la disolución. El término se define como el logaritmo de la concentración de
iones H+ (protones) cambiado de signo: pH = -log [H+], donde [H+] es la concentración de
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iones H+ en moles por litro. Debido a que los iones H+ se asocian con las moléculas de
agua para formar iones hidronio, (H3O+), el pH también se expresa a menudo en términos
de concentración de iones hidronio.En agua pura a 22 °C de temperatura, existen
cantidades iguales de iones H3O+ y de iones hidroxilos (OH-); la concentración de cada
uno es 10-7 moles/litro. Por lo tanto, el pH del agua pura es -log (0.107), que equivale a 7.
Sin embargo, al añadirle un ácido al agua, se forma un exceso de iones H3O+ en
consecuencia, su concentración puede variar entre 10-6 y 10-1 moles/litro, dependiendo
de la fuerza y de la cantidad de ácido. Así, las disoluciones ácidas tienen un pH que varía
desde 6 (ácido débil) hasta 1 (ácido fuerte). En cambio, una disolución básica tiene una
concentración baja de iones H3O+ y un exceso de iones OH- y el pH varía desde 8 (base
débil) hasta 14 (base fuerte).

19. ¿Qué son los tampones y por qué se necesitan?

El agua puede no estar disponible para los microorganismos si la concentración de


solutos en el medio exterior es muy alta. Para contrarrestar esto, los microorganismos
acumulan intracelularmente solutos compatibles cuya función es mantener el citoplasma
en balance positivo de agua. algunos microorganismos han evolucionado de modo que
crecen mejor con un reducido potencial de agua e incluso algunos requieren muy altos
niveles de sal para crecer.

20. ¿Cuál es la aw del agua pura?

21. ¿Qué es un soluto compatible y por qué se necesita?

Los microorganismos aerobios requieren oxígeno para vivir, mientras que los anaerobios no, e
incluso pueden ser destruidos por él. En la célula, se pueden formar diversos derivados tóxicos del
oxígeno, pero las enzimas pueden neutralizar la mayoría de ellos. Se requieren métodos especiales
para el crecimiento de bacterias aerobias o anaerobias estrictas.
Se les llama así a los compuestos orgánicos de bajo peso molecular que mantienen
el equilibrio osmótico sin interferir con el metabolismo celular. Los solutos compatibles
pueden acumularse tras su transporte al interior de la célula desde el medio externo, o
bien mediante síntesis como sucede, por ejemplo, cuando las bacterias se cultivan en un
medio mínimo. Este proceso se encuentra ligado al mecanismo de adaptación de los
microorganismos, en respuesta al estrés osmótico

22. ¿Cuál es la estructura química del anión superóxido?


Un superóxido o hiperóxido es un anión con fórmula O2−. Se considera que el oxígeno, el
cual siempre tiene estado de oxidación −2, tiene un estado de oxidación de −1/2. Se
nombra como los peróxidos tan solo cambiando peróxido por superóxido o hiperóxido.
23. ¿Cómo funciona un agente reductor?
Un agente reductor es aquel que cede electrones a un agente oxidante. Existe
una reacción química conocida como reacción de reducción-oxidación, en la que se da
una transferencia de electrones. Así mismo, la mayoría de los elementos metálicos y no
metálicos se obtienen de sus minerales por procesos de oxidación o de reducción. Una
reacción de reducción-oxidación consiste en dos semireacciones: una semireacción
implica la pérdida de electrones de un compuesto, en este caso el compuesto se oxida;
mientras que en la otra semireacción el compuesto se reduce, es decir gana los
electrones. Uno actúa como oxidante y el otro como reductor
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24. ¿Cómo protege la superóxido dismutasa a la célula?


La enzima superóxido dismutasa (SOD), antiguamente hemocupreína y eritrocupreína,
cataliza la dismutación de superóxido en oxígeno y peróxido de hidrógeno.1 Debido a esto es
una importante defensa antioxidante en la mayoría de las células expuestas al oxígeno. Una
de las excepciones se da en Lactobacillus plantarum y en lactobacilli relacionados que poseen
un mecanismo diferente.

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