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1.

3 DESARROLLO DE LOS
MICROORGANISMOS
CRECIMIENTO
En un sistema biológico se define como el aumento ordenado
de las estructuras y los constituyentes celulares de un
organismo. Consiste en el aumento del tamaño y peso de las
células que precede a la división celular.
Mientras que cuando el crecimiento es seguido de división
celular hay un aumento en el número de células.
CRECIMIENTO INDIVIDUAL Y
POBLACIONAL
Es importante distinguir entre el crecimiento de células individuales y el
crecimiento de poblaciones, ya que en los microorganismos debido a
su pequeño tamaño no se hacen estudios de crecimiento individual
sino estudios de crecimiento de poblaciones. El crecimiento de una
población es el aumento del número de células como consecuencia de
un crecimiento individual y posterior división.

El crecimiento de una población ocurre de una manera exponencial. El


crecimiento exponencial es una consecuencia del hecho de que cada
célula se divide dando dos (2) células hijas, las cuales al dividirse darán
cada una dos células hijas, así es que en cada período de división la
población se duplica.
Analicemos un ejemplo
Cuando se siembran microorganismos en un medio de cultivo apropiado, los mismos
comienzan a dividirse activamente empleando los nutrientes que le aporta el medio de
cultivo para "fabricar" nuevos microorganismos. Este proceso continúa hasta que algún
nutriente del medio de cultivo se agota (sustrato limitante) y el crecimiento se detiene.

Las poblaciones microbianas raramente mantienen un crecimiento exponencial prolongado


ya que está limitado por la disponibilidad de nutrientes y la acumulación de productos del
propio metabolismo microbiano que en altas concentraciones resultan tóxicos para la
población.
Crecimiento exponencial

El crecimiento exponencial en un cultivo microbiano


monofásico, es decir, en un sistema cerrado sin que haya
renovación de nutrientes, el crecimiento no puede continuar
de forma indefinida.

Si lo representamos mediante una gráfica donde vemos el


tiempo y la concentración de microorganismos, podemos
identificar cuatro fases: fase Log o de latencia, fase
exponencial, fase estacionaria y fase de declive o muerte.
CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO
1. Fase lag o fase de latencia: Es una fase de adaptación de los microorganismos al medio. Aunque
no hay crecimiento neto (no hay aumento de células), esta fase es metabólicamente muy activa. Las
células reconocen los nutrientes disponibles y comienzan a transcribir los mRNA necesarios para
utilizarlos. Al mismo tiempo las células bloquean la expresión de aquellas enzimas que no necesitan.
La duración varía según el microorganismo y según el medio.
CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO
2. Fase exponencial: El cultivo empieza a dividirse a su máxima capacidad genética. Las células
se duplican ‘’todo lo que pueden’’. Esta fase también se llama de crecimiento equilibrado, donde
la división celular se correlaciona con la duplicación de todos los componentes celulares. La
pendiente de esta fase exponencial viene definida por µ (Media matemática de todos los
miembros de una población a partir de la cual puede tomarse una muestra).

No es un parámetro fijo para cada microorganismo: depende del medio y las condiciones de
cultivo. Por lo tanto, la pendiente será distinta. Llega un momento en el que el crecimiento
exponencial se agota y el cultivo entra en una fase estacionaria.
CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO
3. Fase estacionaria: En esta fase el crecimiento es desequilibrado: hay unas células que se están
dividiendo, otras que se están muriendo, y los componentes celulares se sintetizan a distinta velocidad.
El incremento del número de células con respecto al tiempo es cero.
Las células estacionarias son en su estructura y composición química distintas a las exponenciales: las
células estacionarias son más pequeñas y son mucho más resistentes a las agresiones ambientales del
medio (calor, oxidantes, antibióticos,…). Es más interesante que la exponencial porque la mayor parte de
los productos y sustancias de interés clínico y comercial son los metabolitos secundarios que se
sintetizan en esta fase. Entra aquí por dos razones:

Porque se agota algún nutriente esencial, que de alguna manera es el limitante del crecimiento.
Porque empiezan a liberarse al medio productos de desecho (tóxicos a veces).
CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

4. Muerte celular: El agotamiento de nutrientes es máximo y la


acumulación de productos de desecho se hace demasiado
tóxica: la mayor parte del cultivo comienza a morirse. Es
también una fase exponencial de pendiente negativa.
Crecimiento sincrónico

Un cultivo también puede estar en crecimiento sincrónico cuando


todas las células se encuentran simultáneamente en la misma fase del
crecimiento celular. Los cultivos sincrónicos son muy difíciles de
mantener por lo que su importancia está principalmente ligada a los
estudios básicos de biología microbiana.

Existen cultivos continuos en sistemas abiertos donde se mantiene un


volumen constante de medio de cultivo debido a que se añade
continuamente medio fresco. El aparato más común utilizado para
cultivo continuo es el quimiostato, que permite controlar tanto la
velocidad de crecimiento como la densidad de población de un cultivo.
MÉTODOS PARA Número de células: Distinguimos entre el recuento de

VALORAR EL células totales, donde no se diferencia entre células


vivas y células muertas, y el recuento de células
viables, donde solo se cuentan las células vivas.
CRECIMIENTO Definimos que una célula está muerta cuando pierde
la capacidad de dividirse. Definimos una célula viable
MICROBIANO aquella que aún puede dividirse.

Masa celular: Se puede medir de la siguientes maneras:


Vamos a medir el crecimiento Turbidimetría (fotómetro, espectofotómetro,
poblacional a partir del nefelómetro). Se mide la turbidez: a mayor
crecimiento celular. turbidez=mayor absorbancia=mayor número de
microorganismos.
Se usan generalmente dos
Peso seco. Tenemos un volumen celular que se filtra y,
parámetros: en lugar de incubarlo, se va evaporando el agua y se
pesa hasta que el peso es constante (agua
evaporada) y sólo queda el peso celular
FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO
MICROBIANO
Existen diferentes factores que influyen en el crecimiento de los microorganismos:

Factores externos o ambientales: Las actividades de los microorganismos se ven


afectadas de modo muy importante por las condiciones químicas y físicas del medio
Factores internos: Están relacionados con la capacidad metabólica que se encuentra codificada en
el genoma y que influye en el tipo de medio de cultivo y requerimientos nutricionales necesarios para
su desarrollo.
Factores externos o ambientales

Temperatura
Es uno de los factores más importantes debido a que a
temperaturas muy frías o muy calientes los microorganismos
no crecerán y pueden incluso morir; a medida que se eleva la
temperatura, las reacciones químicas y enzimáticas de la
células son más rápidas y el crecimiento se acelera, sin
embargo por encima de una cierta temperatura algunas
proteínas particulares pueden sufrir daños irreversibles.
Factores externos o ambientales

De acuerdo a la temperatura
óptima de crecimiento de los
microorganismos podemos
clasificarlos en cuatro grupos:
• psicrófilos, con temperaturas
óptimas bajas
• mesófilos, con temperaturas
óptimas moderadas
• termófilos, con temperaturas
óptimas elevadas
• hipertermófilos, con
temperaturas óptimas muy
elevadas.
Factores externos o ambientales

Psicrófilos

Entre 0-20ºC, con un óptimo en torno a 15ºC. Son organismos que tienen
como hábitat ambientes fríos, como los polos, el océano ártico y antártico,
etc. Hay representantes de todos los grupos microbianos: Pseudomonas,
Vibrio, algunas archeas, etc.

La base molecular de los psicrófilos se debe a que sus membranas poseen


altos niveles de ácidos grasos insaturados, lo que les permite mantener un
estado de semifluidez de la membrana a bajas temperaturas. Si les subimos
la temperatura por encima de 20ºC sus membranas se desorganizan.
Hay una variante de este grupo, que son los llamados psicrófilos facultativos
o psicrótrofos: tienen un rango entre 20-30ºC, e incluso pueden vivir por
encima de 30ºC sin problema, pero también son capaces de crecer a bajas
temperaturas (0-5ºC). Incluyen bacterias y hongos, que son los principales
responsables del deterioro de alimentos refrigerados.
Factores externos o ambientales

Mesófilos

Entre 20-45ºC. Son muy sensibles y


mueren rápidamente a temperaturas
por encima de 45-50ºC. La gran
mayoría de microorganismos
pertenece a esta categoría: aquí
están todos los patógenos de los
animales. Todos los
quimioheterótrofos son mesófilos. Se
incuban a una temperatura de 37ºC.
Factores externos o ambientales

Termófilos

Entre 45-65/70ºC, con un óptimo entre 55-60ºC. Aquí encontramos organismos que viven en aguas
termales, en geiseres, cauces de agua caliente, etc. Además, aparecen en medios artificiales, como
las pilas de heno y en el proceso de degradación de materia orgánica para obtener abono
(compostaje).

Hay una variante de este grupo, que son los llamados hipertermofilos (como Pyrodictium). La
mayoría son archeas, que viven en ambientes donde la temperatura habitual está por encima de
90ºC (100-110ºC). Si esa temperatura baja mueren.
Bases moleculares de la termofilia: la estabilidad celular de los termófilos se debe a que sus
membranas contienen enlaces internos hidrofóbicos reforzados por puentes de hidrógeno.
Normalmente contienen proteínas que se unen al DNA y los protegen del calor.
Factores externos o ambientales

Presión osmótica

Los microorganismos tienden a desarrollarse


en ambientes osmóticamente estables, y son
muy sensibles a cambios en la concentración
osmótica. Para compensarlo, los eucariotas
sintetizan solutos compatibles: moléculas
pequeñas que no aumentan la masa celular
pero mantienen estables las membranas.
Estos solutos compatibles son, por ejemplo, el
potasio, la trealosa, las betainas, etc.
Factores externos o ambientales

Hay un parámetro clave que nos mide, en un medio con


solutos, la actividad de agua (Aw actividad acuosa), que es igual
a la presión del vapor de agua en presencia de un soluto con
respecto de la presión del agua pura (PS/P0). Oscila entre 0-1.
Es un indicador de la cantidad de agua metabólicamente
disponible para la actividad de los microorganismos.
Aw = Ps / Po
Todos los bichos requieren una alta actividad de agua para
llevar a cabo su metabolismo. En bacterias la aw=0.9. Los
hongos pueden vivir en ambientes con aw=0.8. Si la aw baja
mucho (0.6-0.5), los microorganismos no pueden crecer.
Factores externos o ambientales
Clasificación de los microorganismos en base a su Aw:

Osmófilos. En ambientes muy secos, con una alta concentración de


azúcar. Por ejemplo, Saccharomyces balii (la levadura del pan) o
Penicillium.
Xerófilos. Crecen en ambientes extremadamente secos. Si el Aw sube
mucho, la actividad del microorganismo se para. Muchos hongos son
xerófilos.
Halófilos. Adaptados a ambientes con alta concentración de sal. Suelen
ser marinos.

Muchos de los tratamientos de conservación de alimentos pretenden bajar


la Aw y paralizar el crecimiento microbiano. Los métodos de conservación
de fruta en almíbar, o de salmuera, son tratamientos muy antiguos cuyo
objetivo es ese. Al poner un soluto desciende la Aw, y se paraliza el
Factores externos o ambientales

pH

El pH es la acidez, o alcalinidad, de una


solución. Es un parámetro crítico para el
crecimiento microbiano. Los microorganismos
solo toleran cambios mínimos del pH del
medio en el que viven. Generalmente viven a
pH neutro. Las bacterias toleran variaciones
ligeramente acidas (pH=6,5). Los hongos
permiten ambientes un poco más ácidos
(pH=5’5-6’5).

El pH interno de la célula es ligeramente


superior al pH del medio siempre.
Factores externos o ambientales

Clasificación de los microorganismos según su pH óptimo

Neutrófilos. pH óptimo = 7. Ejemplo: bacterias patógenas humanas.


Acidófilos. pH óptimo < 7. Ejemplo: muchas archeas (Sulfolobus, Ferroplasma) y hongos.
Basófilos. pH óptimo > 7. Viven en suelos y aguas ricas en carbonatos.

Determinados microorganismos son capaces de acidificar el medio mediante la actividad de su


metabolismo, como las bacterias lácticas o las bacterias del acido acético. Usan determinados
compuestos y acidifican el medio: todas ellas son tolerantes de medios ácidos, y así eliminan
muchos competidores.
Estos procesos son útiles dentro del campo de la industria. Igual que hay alimentos que se
conservan en presencia de azúcar o sal, hay algunos que se conservan en medios ácidos.
EXCELENTE Y BENDECIDO DIA
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/08_Tema_6_crecimiento.pdf
https://dmd.unadmexico.mx/contenidos/DCSBA/BLOQUE2/BI/03/BMTM/unidad_01/descargables/BMTM_U1_Contenido.pdf
https://dmd.unadmexico.mx/contenidos/DCSBA/BLOQUE2/BI/03/BMTM/unidad_02/descargables/BMTM_U2_Contenido.pdf
https://www.unirioeditora.com.ar/wp-content/uploads/2018/10/978-987-688-124-1.pdf
https://microbiologia.net/microbiologia/analisis-crecimiento-microbiano/
https://csaconsultores.com/que-es-la-cinetica-microbiana/

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