UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

TRABAJO DE BIOFERMENTACION

CARLOS VIDAL ORTIZ

CRECIMIENTO MICROBIANO

ELIANA SALOM MEDINA

VALLEDUPAR-CESAR

2019
 INTRODUCCION

Se denomina cultivo al proceso de propagar los microorganismos,

proporcionándoles las condiciones ambientales adecuadas. Los microorganismos
en fase de crecimiento realizan réplicas de sí mismos y requieren de los
elementos que se encuentran en su composición química. Se le deben brindar los
elementos nutritivos en una forma accesible desde el punto de vista metabólico.
Además, los microorganismos requieren energía metabólica con el objetivo de
sintetizar macromoléculas conservar los gradientes químicos esenciales a través
de sus membranas. Durante el crecimiento se deben regular los factores
nutricionales (carbono, nitrógeno, azufre y fósforo, elementos trazas y vitaminas) y
los factores físicos (pH, temperatura, oxígeno, humedad, presión hidrostática,
presión osmótica y radiación).

MARCO TEORICO

¿QUE ES EL CRECIMIENTO MICROBIANO?

En microbiología el crecimiento se define como el incremento en el número de

células.

•La bipartición (fisión binaria) es el proceso por el cual una célula se divide para
formar dos células iguales. •El intervalo que transcurre en la formación de dos
células a partir de una célula se llama generación y el tiempo requerido para esto
es el tiempo de generación o tiempo de duplicación.

FISIÓN BINARIA

Durante la fisión binaria cada célula hija recibe una copia del cromosoma, de los
ribosomas, complejos macromoleculares, así como monómeros y iones
inorgánicos para existir como una célula independiente. El ADN se ancla a la
membrana y así, cada célula hija se queda con una copia. Se forma un septo que
dará lugar a cada una de las células, las envolturas rodean a cada copia del ADN
y finalmente se da la separación de las células.

CRECIMIENTO EXPONENCIAL

Cuando un cultivo se duplica de manera regular durante un intervalo de tiempo, se

denomina crecimiento exponencial. Una gráfica aritmética del crecimiento muestra
un incremento constante mientras una logarítmica (log10) permite observar con
respecto al tiempo cuando el crecimiento es exponencial y puede entonces
calcularse el tiempo de generación.
TIEMPO DE GENERACIÓN

Tiempo de generación (G) es el tiempo requerido para que una célula se divida o
una población se duplique.

G = t/n

Si partimos de una célula al cabo de una generación habrá duplicado su número y

así sucesivamente en cada generación. Como se puede comprobar el crecimiento
se produce en progresión geométrica:

1 generación -------------> 2 células

2 generaciones -------------> 4 células

3 generaciones -------------> 8 células

4 generaciones -------------> 16 células

5 generaciones -------------> 32 células

FASE I: Fase lag o de retraso Vc = 0 Adaptación a un medio ambiente de
células empobrecidas del arsenal metabólico (enzimas) y de sustratos como
resultado de las condiciones desfavorables al final del cultivo. Existe un cese
parcial de las funciones metabólicas. Formación de enzimas y metabolitos
intermediarios necesarios para la reanimación del crecimiento.

FASE II: Fase de aceleración positiva Vc = Creciente Las células disminuyen

de tamaño, comienzan a utilizarse las reservas, aparecen nuevas funciones

.FASE III: Fase exponencial o de crecimiento logarítmico Vc = Constante

Proceso de catálisis que conlleva al aumento en forma exponencial de la masa
bacteriana. Existe un equilibrio de flujo de material. Este proceso se mantiene
hasta que:

1. Se agoten los nutrientes (fundamentalmente oxígeno en los aerobios)

2. .2. Se acumulen muchas sustancias tóxicas que inhiban el crecimiento.
3. 3. Se pongan de manifiesto las propiedades más importantes de la célula.

FASE IV: Fase de desaceleración o retardo Vc = Decreciente Estado de

deficiencia. Las células viven del metabolismo endógeno, disminuye la velocidad
de crecimiento.

FASE V: Fase estacionaria máxima Vc = 0 Cese completo del crecimiento

por agotamiento de nutrientes y acúmulo de sustancias tóxicas. Pérdida lenta de
células por muerte compensada debido a la formación de células nuevas
mediante su crecimiento y división.

FASE VI: Fase de declinación o muerte Vc = Negativa (muerte) Aumento

de la tasa de mortalidad hasta un nivel sostenido. Persiste un número pequeño de
sobrevivientes por meses o años a expensas de los nutrientes de las que mueren.
La célula pierde toda capacidad para los procesos degradativos.
(1). Gelificación de la membrana; los procesos de transporte se llevan a cabo
lentamente y no hay crecimiento.

(2). Las reacciones enzimáticas aumentan su velocidad.

(3). Las reacciones enzimáticas se llevan a cabo a su máxima velocidad.

(4). Desnaturalización de proteínas y membrana citoplasmática. Lisis térmica.

ANALISIS Y OBSERVACIONES DEL LOS VIDEOS

El crecimiento microbiano se define como el incremento de números de células

Las bacterias deben de crecer antes de reproducirse

Deben sintetizar los componentes necesarios para duplicar el material genético y

el contenido celular

Repartir el material genético, duplicar el contenido celular repartir el material

genético y el contenido celular por último la septacion; estos procesos son
independientes entre si pero tienen que estar coordinados temporal como en el
espacio.

Los parámetros para el crecimiento microbiano son: tiempo de iniciación, masa de

iniciación, tiempo de replicación del DNA tiempo de división celular.
El tiempo que tarda una bacteria en hacer su replicación del cromosoma es 40
minutos

El crecimiento de una población de microorganismos se ve afectada por: masa de

cultivo, numero de microorganismos. La masa del cultivo se puede medir por
gravimetría o turbidimedria.

El metabolismo microbiano es el conjunto de procesos por los cuales un

microorganismo obtiene la energía y los nutrientes (carbono, por ejemplo) que
necesita para vivir y reproducirse. Los microorganismos utilizan numerosos tipos
de estrategias metabólicas distintas y las especies pueden a menudo distinguirse
en función de estas estrategias.

Cuando un microorganismo crece en un medio con nutrientes en exceso, consigue

completar sus vías metabólicas generando los productos finales del metabolismo
energético y todos los compuestos necesarios para su ciclo de vida (aminoácidos,
proteínas, nucleótidos, ácidos orgánicos, vitaminas, azúcares, grasas, alcoholes).
Estas moléculas se denominan metabolitos primarios

El metabolismo energético es el conjunto de procesos por los cuales un

microorganismo obtiene la energía y los Nutrientes (carbono, por ejemplo) que
necesita para vivir y reproducirse. Los microorganismos utilizan numerosos Tipos
de estrategias metabólicas distintas y las especies pueden a menudo distinguirse
en base a estas estrategias. Las características metabólicas específicas de un
microorganismo constituyen el principal criterio para determinar su Papel
ecológico, su responsabilidad en los ciclos biogeoquímicos y su utilidad en los
procesos industriales.

Los metabolitos secundarios, en cambio, se producen cuando algún nutriente

del medio se encuentra en concentraciones limitantes. Los más importantes
comercialmente son los antibióticos, los pigmentos, las toxinas, los inhibidores
enzimáticos y los alcaloides.

En los sistemas de cultivo de alimentación continua y discontinua, una parte del

substrato se transforma en células Nuevas, y otra parte se oxida y forma
productos finales orgánicos e inorgánicos. Se ha observado que la cantidad de
células nuevas producidas es la misma para un substrato dado.

Según ensayos, la producción depende de:

El estado de oxidación de la fuente de carbono y de los nutrientes.

– El grado de polimerización del substrato.

– De las vías de metabolismo.

– De la tasa de crecimiento.

– Parámetros físicos del cultivo

Los metabolitos primarios se sintetizan durante el crecimiento exponencial donde

los microorganismos y bacterias se reproducen (dividen) necesitan del consumo
de los nutrientes en exceso.

Los metabolitos secundarios se sintetizan en la fase idiofase ya que hay no hay

crecimiento microbiano se genera un consumo de la fuente de carbono para
sintetizar el metabolito secundario, en la trofofase los microorganismos cesan su
crecimiento se da en la fase estacionaria para producir el metabolito secundario

Velocidad de crecimiento se define como el cambio de número de células o de

masa en una unidad de tiempo.

Tiempo de generación es el tiempo en que tarda en dividirse y crear dos células. O

bien, tiempo que tarda una población dada en duplicarse ya sea en número o
masa

Presión osmótica

La mayoría de las bacterias pueden tolerar un rango amplio de concentraciones

desustancias disueltas. Su membrana celular contiene un sistema enzimático
llamado permeasas

Cultivo y crecimiento de los microorganismos que regulan el movimiento de las

sustancias disueltas a través de las membranas. Si la concentración fuera de la
célula se torna demasiado alta, la pérdida de agua puede inhibir o detener el
crecimiento celular. Ciertas bacterias llamadas halofílicas requieren de una
moderada a gran cantidad de sal y se hallan en el océano donde la
concentración de sal (3,5 %) es óptima para su crecimiento.

En bajas concentraciones de sustrato afecta la velocidad de crecimiento en

concentraciones más alta la célula se puede dividir casi a la velocidad máxima que
posee

Los cultivos que han permitido el estudio de la curva de crecimiento bacteriano

son discontinuos o cultivos batch, donde los nutrientes no se renuevan y la fase
exponencial se manifiesta durante unas pocas generaciones; precisamente esto
se puede lograr mediante un sistema de cultivo continuo, añadiendo medio
fresco constantemente y eliminando el exceso, de manera que el volumen del
recipiente se mantenga constante. La velocidad de adición de medio fresco
determina la velocidad del cultivo; este sistema se encuentra autorregulado por la
adición de uno de los nutrientes esenciales al microorganismo. Esto se controla
con:

1. Quimiostatos: la velocidad de crecimiento está ajustada por la velocidad de

flujo
2. . Turbidostatos: controla el flujo y la velocidad de crecimiento mediante un
dispositivo óptico que mide la absorbancia.

1. Son una fuente constante de células en fase exponencial de crecimiento.

2. Permiten el crecimiento continuo con una concentración muy baja del
sustrato. Esto ha permitido, entre otros, estudios tales como: la medida
precisa de la frecuencia de mutaciones en las bacterias, cambios evolutivos
en las poblaciones bacterianas y cinética de inducción de una enzima
inducible a concentraciones muy bajas del inductor.

Cultivos microbianos

El cultivo siempre se mantiene creciendo exponencialmente, el cultivo crece a la

velocidad máxima que le permiten las condiciones.
El cultivo discontinuo es donde se lleva a cabo todas las fases del crecimiento
pero culmina con la muerte o agotamiento de los nutrientes.

El cultivo continuo aquí se renueva los nutrientes se adiciona un medio fresco

DILUCIÓN.

Los métodos de siembra en placa por lo general son satisfactorios para el

aislamiento de bacterias y hongos. Sin embargo, muchos protozoos son sólo
cultivables en líquido. El método más sencillo de aislamiento en medios líquidos es
el método de las diluciones. Con una suspensión del microorganismo, se realiza
una dilución en serie utilizando un medio estéril y se inocula un gran número de
tubos con el medio de cultivo, con partes alícuotas de cada una de las diluciones
sucesivas. Como resultado de esto, si un tubo muestra algún crecimiento
subsiguiente, existe una elevada probabilidad de que este crecimiento sea el
resultado de la introducción de un solo organismo. Cuando no puede aplicarse ni
el método de siembra en placa ni el de las diluciones, una alternativa consiste en
recurrir al aislamiento microscópicamente controlado, de un solo organismo a
partir de una población mixta.
Combinando la ecuación de Monod y la ecuación de crecimiento microbiano se
tiene la siguiente ecuación: 𝑑𝑥 𝑑𝑡 = 𝜇 𝑚𝑎𝑥 𝑆 𝑘 𝑆 + 𝑆 𝑥 cuando se desea obtener 𝜇
𝑚𝑎𝑥 y 𝑘 𝑆 se linealiza la ecuación diferencial de la siguiente manera: si 𝑑𝑥 𝑑𝑡 = 𝑟𝑥

𝑟𝑥 = 𝜇 𝑚𝑎𝑥 𝑆𝑥 𝑘 𝑆 + 𝑆 1 𝑟𝑥 = 𝑘 𝑆 + 𝑆 𝜇 𝑚𝑎𝑥 𝑆𝑥 1 𝑟𝑥 = 𝑘 𝑆 𝜇 𝑚𝑎𝑥 𝑆𝑥 + 1 𝜇 𝑚𝑎𝑥 𝑥

Multiplicando por 𝑆𝑥: 𝑆𝑥 𝑟𝑥 = 𝑘 𝑆 𝜇 𝑚𝑎𝑥 + 1 𝜇 𝑚𝑎𝑥 𝑆

La linealización anterior se hace cuando se desea averiguar el crecimiento celular

para el caso que la velocidad específica de crecimiento sea constante.

En la fermentación los metabolitos

 La formación de producto está directamente relacionada con la

utilización de la fuente de carbono (fase energética metabolito
primario)
 La formación esta indirectamente relacionada con la utilización de la
fuente de carbono (intermedio del metabolito primario o fuente que
utiliza)
 La formación de producto no parece estar relacionada con la
utilización de la fuente de carbono (metabolitos secundarios)