REPORTE DE LA PRÁCTICA N.

°1 CORPÚSCULO DE BARR Y PRÁCTICA

N.°2 IDENTIFICACIÓN DEL CROMOSOMA “Y” EN RAÍ Z DE CABELLO.
Equipo 7°´´D´´
López Sánchez Clara Nereida, Oyarzabal Pérez Erika Libeth, Rodriguez Montañez
Emmanuel, Romero Reynoso Kassandra Stephanye.
Jueves 10:00-13 Hrs. 05 y 12 de septiembre de 2019. Agosto-Diciembre 2019.
Laboratorio de Genética, Programa de Q.F.B., Unidad Académica de Ciencias Químicas,
Universidad Autónoma de Zacatecas.

Resumen
La larga cadena de 3.2 meganucleótidos o megabases del DNA humano se encuentra
enrollada por un complejo de proteínas organizadas, que en conjunto constituyen la
cromatina. La cromatina se puede encontrar como heterocromatina (constitutiva y/o
Facultativa) y Eucromatina. En la práctica N.° 1 se tiene por objeto observar el Corpúsculo
de Barr en células de la mucosa oral y en neutrófilos de un frotis sanguíneo. Permitiendo
comprobar la existencia de dicha estructura y la “Hipótesis de Lyon”. Los corpúsculos o
cuerpos de Barr son masas de cromatina sexual altamente condensadas que encontramos en
los núcleos de las células somáticas de las hembras. Según la hipótesis de Mary Frances Lyon
de 1966 o también llamada “Hipótesis de Lyon”, dicha estructura aparece como consecuencia
de la inactivación azarosa de uno de los cromosomas X que pasará a ser genéticamente
inactivo. La información genética está almacenada en cada célula de nuestro cuerpo, en
estructuras llamadas cromosomas. De los 46 cromosomas que tienen nuestras
células, 44 son iguales en ambos sexos, se agrupan en 22 parejas de autosomas.
La otra pareja son los heterosomas o cromosomas sexuales; XX para la mujer y
XY para el hombre, siendo la pareja que determina el sexo. El cromosoma Y es más
pequeño y contiene menos genes que el cromosoma X. En la práctica N.° 2 se pretende
observar la presencia del cromosoma Y en una muestra de raíz de cabello (tomado de un
hombre) y compararlo con la muestra de una mujer, los resultados fueron tales que en la
muestra de cabello tomada del hombre se logró observar el cromosoma Y, y el la muestra de
cabello tomada de la mujer no se observó dicho cromosoma por razones obvias ya que en una
mujer seria algo anormal encontrar un resultado positivo a dicha prueba.

Palabras Clave
Cromosoma” X”, Cromosoma “Y”, Cromatina, Heterocromatina, Corpúsculo de Barr, Gen
SRY.

Introducción
Los cromosomas son estructuras localizadas dentro de las células vivas que contienen el
material genético. Los seres humanos tenemos 23 pares de cromosomas, o sea 46 pares en
total. entre estos pares hay 22 que no influyen sobre el sexo del individuo, llamados
autosomas y los cromosomas del par 23 que se conocen como los cromosomas sexuales o
gonosomas. En los humanos hay dos tipos de cromosomas sexuales: el cromosoma X y el
cromosoma Y.
La heterocromatina son regiones de la cromatina más compactas, condensadas, empaquetadas
que se tiñen fuertemente con coloraciones para ADN. Cromosoma, más proteínas, histonas,
que están en estado condensado, por lo que no se puede transcribir en esta conformación.
Hay dos tipos de heterocromatina, heterocromatina constitutiva y heterocromatina facultativa:
Heterocromatina constitutiva: Es idéntica para todas las células del organismo y estable ,
carece de información genética, incluye a los telómeros y centrómeros de los cromosomas.
Heterocromatina facultativa: su estado depende de la etapa del desarrollo y del tipo celular, es
reversible y contiene genes que no se expresan o que pueden expresarse en algún
momento.Ej. cromosoma X inactivo (cuerpo de Barr).
La eucromatina es una forma de la cromatina ligeramente compactada con una gran
concentración de genes, y a menudo se encuentra en transcripción activa.
En el año de 1923 Painter demostró citologicamente la existencia de los cromosoma X e Y en
el humano.Siguiendo estos descubrimientos los canadienses Murray Barr y Ewart Bertram en
el año de 1949 demostraron así que es posible determinar genéticamente el sexo de un
individuo dependiendo de que exista o no esta masa de cromatina en la superficie interna de
la membrana nuclear (cromatina sexual).
Mediante filogénesis se puede deducir que el cromosoma Y surge con bastante posterioridad
al cromosoma X tratándose de una mutación de dicho cromosoma X. La pérdida de uno de
los segmentos de X dio lugar a la forma estructural del cromosoma Y. De esta manera, por lo
general la dimensiones de los cromosomas Y son bastante más reducidas que las de las
cromosomas X. El cromosoma Y dado su menor tamaño incluye también menos información
genética que el resto de los cromosomas de lo que se puede deducir una relación entre el
tamaño y la cantidad de información contenida.
Los cromosomas sexuales humanos X e Y son morfológicamente muy diferentes entre sí
(heteromorfismo cromosómico). El cromosoma Y es es de menor tamaño, sub acrocéntrico
con un brazo largo.
El cromosoma Y es el determinante de la masculinidad. Las hembras son el sexo
homogamético y por tanto tienen dos cromosomas sexuales (XX) mientras que los machos
son el sexo heterogamético y tienen dos cromosomas distintos (XY), por lo tanto las hembras
solo aportan X y los machos X o Y.El cromosoma por sí solo no determina el sexo de un
individuo, el cromosoma Y es el portador de un factor genético capaz de determinar la
formación del testículo, el gen SRY se encuentra en el brazo corto del cromosoma Y, más
concretamente se localiza en la región YPII3. Constituida por un solo exón, este gen produce
una proteína denominada TDF que es la responsable de que el embrión desarrolle los
testículos y se convierta en masculino.
La herencia holándrica es el tipo de herencia en el cual los genes encontrados en el
cromosoma Y son directamente traspasados a los descendientes masculinos.
En algunos casos, la mayor parte de un cromosoma está condensado, de modo que es
inaccesible para la ARN polimerasa. Un ejemplo son los cromosomas sexuales de las
hembras de los mamíferos. Los machos tienen un cromosoma X y un cromosoma Y (XY) y
las hembras dos cromosomas X (XX). Como consecuencia, las hembras tienen la capacidad
de sintetizar ARNm a partir de los genes de sus dos cromosomas, mientras que los machos,
que tienen un solo cromosoma X, sólo producen la mitad.
El corpúsculo de Barr o cromatina sexual es una minúscula masa de cromatina (forma bajo la
cual el ADN está presente en el núcleo de las células) que encontramos únicamente en las
hembras de los mamíferos: se forman por el equilibrio genético que se realiza por la
diferencia de 2 alelos presentes en el cromosoma sexual femenino y un solo alelo en el
cromosoma sexual masculino que se inactiva debido al proceso llamado ionización (proceso
por el cual una de las copias del cromosoma X presente en mamíferos hembra está
inactivada) en animales donde el sexo se determina con la presencia del cromosoma Y.
En 1961, la genetista Mary Lyon formuló la hipótesis de que uno de los dos cromosomas X
de las hembras está inactivado de manera tal que sus genes no se expresan. Ahora sabemos
que alrededor de 85% de los genes de un cromosoma X inactivado no se transcriben. A
comienzos del desarrollo (en los seres humanos, alrededor del día decimosexto), un
cromosoma X de las células de las hembras comienza a producir grandes cantidades de una
molécula de ARN regulador llamada Xista, que recubre la mayor parte del cromosoma, se
condensa en una masa apretada y evita la transcripción. El cromosoma X condensado,
llamado cuerpo de Barr por el apellido de su descubridor, Murray Barr, aparece como un
punto en el núcleo de las células de las hembras de los mamíferos.
El resultado de este fenómeno se observa fácilmente en los gatos tricolores . El cromosoma X
de un gato contiene un gen que codifica la enzima que produce el pigmento del pelaje. Hay
dos alelos comunes de este gen. Uno produce pelaje anaranjado y el otro un pelaje negro. Si
un cromosoma X de una gata tiene el alelo anaranjado y el otro cromosoma X el alelo negro,
la gata tendrá parches de pelaje anaranjado y negro. Estos parches representan zonas de la
piel que se desarrollaron de células embrionarias con diferentes cromosomas X inactivados.
El pelaje tricolor se encuentra casi exclusivamente en las gatas. Como los machos tienen un
solo cromosoma X, que está activo en todas las células, normalmente tienen pelaje negro o
anaranjado, pero no ambos.
La inactivación del cromosoma X requiere del gen XIST que se encuentra en este
cromosoma.
El RNA XIST se acumula y cubre el cromosoma X. Esto desencadena el reclutamiento de un
complejo proteico que induce la metilación de los residuos lisina-27 y lisina-9 de la histona
H3, generando la condensación de la cromatina y la conversión de la mayoría del X inactivo
en heterocromatina. Una vez que una célula progenitora en el embrión temprano se
comprometió a inactivar el cromosoma X paterno o el X materno, el patrón de inactivación
muestra herencia clonal: todos los descendientes de la célula dentro del linaje celular
resultante llevan el mismo patrón de inactivación de X que la célula progenitora. Esto
significa que todos los mamíferos hembra son mosaicos y comprenden mezclas de líneas
celulares en las que se inactiva el X paterno y líneas celulares en las que se inactiva el X
heredado de la madre.
Durante las primeras semanas del desarrollo embrionario de la hembra el locus XIST se
expresa en ambos cromosomas X pero rápidamente se inactiva en uno y permanece en otro.
La transcripción continúa en uno de los cromosomas lo que lleva lo que lleva a la
acumulacion de XIST RNA convirtiendo a ese cromosoma en un corpúsculo de Barr. La
transcripción de XIST cesa en el otro cromosoma X permitiendo que sus genes se expresen,
el apagado del locus XIST en el cromosoma X activo es realizado por la metilación.
Material y Métodos
I.- Identificación del corpúsculo de Barr en células de la mucosa oral
Se tomó la muestra de una persona de género femenino, se realizó un raspado de la mucosa
interna de la mejilla con un extremo del abatelenguas, se eliminó el primer raspado y se
repitió la toma de muestra en el mismo sitio con el extremo opuesto del abatelenguas, se
extendió la muestra en un portaobjetos previamente secado y esterilizado, se fijó con calor en
una plancha, se añadió una gota de aceto orceina y se cubrió la muestra con un cubreobjetos,
se observó en el microscopio a 40X para localizar las células, posteriormente se observó a
inmersión en 100X para identificar el corpúsculo de Barr.

II.- Identificación del corpúsculo de Barr en neutrófilos de un frotis sanguíneo

Se llevó a cabo la toma de muestra de una persona de género femenino, para ello se
desinfectó el dedo índice, se hizo una punción con una lanceta, se colocó una gota de sangre
sobre un extremo del portaobjetos previamente secado y esterilizado y se realizó un frotis
sanguíneo con ayuda de otro portaobjetos, se dejó secar el frotis al aire, se tiñó con tinción de
wright y se incubó, posteriormente se lavó con agua y se dejó secar, finalmente se observó en
microscopio a 100X con ayuda de aceite de inmersión.

III.- identificación del cromosoma Y en células de raíz de cabello

Se tomó la muestra (cabello) de una persona de género masculino, se marcó en un extremo
del portaobjetos las iniciales de la persona que donó la muestra, se agregó sobre el cabello
una gota de aceto orceína y posteriormente se calentó en una plancha por 30 segundos a
60°C, se retiró al término de lo establecido, se agrego una gota de ácido acético al 50%,, se
separó la vaina externa del cabello con un bisturí, se secó el exceso de ácido acético con
papel y se cubrió la vaina con 2 gotas de aceto orceína se colocó un cubreobjetos (se verificó
que la orceína cubriera la vaina) y se aplico un poco de presión, se calentó nuevamente la
laminilla en una plancha por 5 minutos a 40°C posteriormente se observó en microscopio a
un objetivo de 40X.

Resultados
El corpùsculo de Barr se observa solamente en las cèlulas de las hembras y de las mujeres,
en el nùcle de la cèlula se ve una especie de grumo oscuro, color morado, en la práctica se
observó la presencia del corpúsculo de Barr .Los cromosomas sexuales del hombre son XY,
en el brazo corto del cromosoma Y se encuentra en gen SRY, el cual tiene la función de
activadora de la diferenciaciòn testicular. en la práctica se observó y se comprobó que en el
cromosoma Y solo se observa en los hombres, los resultados de ambas prácticas coinciden
con lo establecido en la literatura.
Discusión:
Para la identificación de los corpúsculos de Barr (cromosomas X inactivados) provenientes
de muestras tales como células de la mucosa oral y neutrófilos, fue necesario el investigar de
manera teórica el origen y descubrimiento de estas estructuras así como el estudiar y aprender
la técnica de observación citológica que en lo general resulta muy sencilla y rápida pero
deben de considerarse varios aspectos en el procedimiento y ser cauteloso al realizarse para
evitar errores al momento de la interpretación.

En el caso de la la identificación del cromosoma Y en un cabello mediante la técnica de

schmid se indago un poco sobre el origen de la dicha técnica la cual dentro de su fundamento
menciona que el cromosoma Y se encontrará solo presente en machos y es considerado un
genotipo , el método realizado para la detección del cromosoma Y a partir del bulbo piloso
de un cabello es una forma rápida y eficiente en la cual se emplearon diferentes tinciones
(como la de Wright) que facilitaron la observación de dicho fenotipo en el microscopio.

Conclusión:
Las células del tejido bucal son mejores para la observación del corpúsculo de Barr; Se debe
tener en cuenta que este cuerpo es una condensación de alguno de los cromosomas X y que se
presenta en las hembras de algunas especies mientras que en los machos, estos cromosomas
se encuentra activo y por ello no es visible, cabe resaltar que las dos muestras la que permite
mejor la observación fue la teñida con la tecnica de tincion de Wright ya que indica mejor la
zona donde se encuentra el corpúsculo, pero se debe tener cuidado especial al momento de
hacer la tinción puesto que satura la muestra y con ello, afectar la observación con el
microscopio por que impide el paso de la luz.

Es de suma importancia el conocer los principios de la invención y realización de la

identificación del cromosoma Y en raíces de cabello ya que trata de una técnica bastante
aplicada en nuestro campo laboral, en general resulta una metodología muy sencilla y rápida
pero que es demasiado útil en el área de la salud, especialmente para la identificación del tipo
de sexo.

Referencias
1) Elena Feduchi, Isabel Blasco, Carlos Romero, Esther Yañes.Editorial medica
panamericana. Bioquímica conceptos esenciales,pp. 304.
2) Angel Herraez. Texto ilustrado e interactivo de biologia molecular e ingenieria
molecular.Editorial el Sevier.2 Ed, pp. 96
3) Dalia Diez De Tancredi, El concepto de gen y cromosoma, conocimiento estructurante
de la biología. Algunas aportaciones desde lasa enseñanzas de las ciencias, Vol. 1,
num. 59, (2006), pp.189-219.
4) Maria Liliana Mora, Sergio Gustavo Rodriguez Gil, Pablo Javier Rebagliati,
Cromosomas Sexuales: Cien años una historia, Encrucijadas, Vol. 5, num. 34, (2005),
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5) Teresa Audesirk, Gerald Audesirk, Bruce E. Byers. Biologia la vida en la tierra con
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6) Victor Manuel Valdespino Gomez, Patricia Margarita Valdespino Castillo y Victor
Edmundo Valdespino Castillo, Organización estructural y funcional del genoma
humano: Variaciones en el número de copias predisponetes de enfermedades
degenerativas, Vol. 12, num. 6, (2013), pp.426-432.