Transmitancia, Absorbancia

Ley de Lambert-Beer.

La ecuación de la transmitancia se define como sigue:

Transmitancia = P / P0

Donde:

 T = Transmitancia.
 P = Intensidad de la luz transmitida.
 P0 = Intensidad de la luz incidente.

La absorbancia

El logaritmo negativo de la transmitancia, y se observa que la absorbancia y la

transmitancia tienen una relación inversa, como se muestra a continuación:

Absorbancia = -log ( T ) = -log ( P ⁄ P0 )

Esto permite que diferentes espectrofotómetros con diferentes fuentes de luz produzcan
lecturas de absorción independientes de la potencia de la fuente de luz. (1)

Ley de Lambert-Beer

Disponemos de una fuente emisora de radiación electromagnética (lámpara), unos sistemas

de enfoque (rendijas) para hacer que la radiación incida perpendicularmente a la muestra, un
dispositivo que permita seleccionar la longitud de onda que incide sobre la muestra (red de
difracción) y un sistema electrónico de medida de intensidad de luz. (2)

Imaginemos también que hacemos dos medidas de la intensidad de luz:

1) La primera medida la muestra será una disolución con la misma matriz que el analito que
deseemos determinar pero en ausencia de éste (disolución blanco). La intensidad de radiación
(luz) que llega al lector será (3)

2) La segunda medida se hará en presencia del analito (cromóforo) que deseemos estudiar.
En este caso la intensidad de luz que llega al lector será I. Como trabajamos con analitos que
absorben radiación a la longitud de onda que selecciona la red de difracción, lógicamente
.

La expresión matemática de ambos parámetros es:

donde:

A = Absorbancia de la muestra

C = Concentración del cromóforo

L = Longitud del paso óptico que contiene la muestra

= Absorptividad molar. Depende del cromóforo en si mismo, de la y de las condiciones de

medida (pH, T...). Ya que la absorbancia es adimensional las unidades son concentración-1
longitud-1.

La ley de Lambert-Beer establece que la absorbancia está directamente relacionada con las
propiedades intrínsecas del analito, con su concentración y con la longitud de la trayectoria
del haz de radiación al atravesar la muestra. La expresión matemática de la ley de Lambert-
Beer es: A = C . . L
Según estas definiciones, queda finalmente la siguiente expresión que se conoce con el
nombre de la ley de Lambert-Beer:

Alc

donde 𝜆 es la “absortividad molar” (una medida de la radiación absorbida), que es un valor

constante para cada sustancia a cada longitud de onda l , y en unas condiciones
experimentales determinadas; también se denomina “coeficiente de extinción molar” si,
como es frecuente, la concentración se expresa en moles por litro. (4)

Si se opera, por tanto, a una longitud de onda dada y con una cubeta de un determinado
espesor, l , la absorbancia A, medible directamente, es proporcional a la concentración molar
de la muestra, c, lo que constituye el fundamento del análisis espectrofotométrico
cuantitativo.
Existen, sin embargo, distintos factores que afectan al cumplimiento de la ley de Lambert-
Beer, especialmente a concentraciones elevadas. Por ello antes de proceder al análisis de una
muestra es preciso comprobar experimentalmente el rango de concentraciones en que dicha
ley se cumple, obteniendo la curva de calibrado que relaciona las absorbancias con las
concentraciones. (5)

Ley de Lambert-Beer
Establece que hay una relación lineal entre la absorción de luz a través de una sustancia y la
concentración de la sustancia.
A = ε· l· c
Donde:
A = absorbancia
𝜀= Coeficiente de extinción molar (M-1cm-1)
l= longitud de la celda (cm).

Ejemplos de la aplicación de Lambert-Beer

1) Una disolución 100 µM de un determinado cromóforo tuvo una transmitancia a 525 nm

de 0.5 cuando se midió en una celda 1.5 cm de longitud. Calcular: a) la absorbancia de la
disolución; b) la absorptividad molar del cromóforo.

a) A = -log T = - log 0.5 = 0.301

b) A = C . . L Reordenando la ecuación obtendremos:

= A/(C x L) = 0.301 /(10-4 M x 1.5 cm) = 2 x 103 M-1 cm-1

2) Una disolución patrón de níquel 5.00 x 10-5 M se coloca en una cubeta de longitud de paso
1 cm. La absorbancia a 592 nm es 0.446. a) ¿Cuánto vale a 592 nm?. b) Si una disolución
problema de níquel tiene una absorbancia de 0.125 a la misma ¿cuál es la concentración de
níquel en la muestra?.
a) Dado que A = C . . L. Entonces 0.446 = 5 x 10-5 M x 1 cm x y deducimos = 8920 M-1
cm-1

b) Aplicando que A = C . . L. 0.125 = 8920 M-1 cm-1 x 1 cm x C; y por lo tanto C= 14 µM

BIBLIOGRAFÍA
1 Aplicada DdB. Universidad Miguel Hernández de Elche. [Online]. [cited 2019 01 27.
. Available from:
http://repositorio.innovacionumh.es/Proyectos/P_22CursoMateriales/Miguel_Angel_Sog
orb/Wimba/Espectroscopia_05.htm.

2 elespectrofotometro.com. elespectrofotometro.com. [Online]. [cited 2019 01 27.

. Available from: https://elespectrofotometro.com/transmitancia-y-absorbancia/.

3 depa. depa. [Online]. [cited 2019 01 27. Available from:

. http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/PRACTICA6ESPECTROFOTOMETRIA_2
1576.pdf.

4 Madera D. es.scribd. [Online].; 2015 [cited 2019 01 27. Available from:

. https://es.scribd.com/document/290123064/Transmitancia-Absorbancia-y-Ley-de-
Lambert-beer.

5 blogspot. blogspot. [Online]. [cited 2019 01 27. Available from:

. http://usoespectrofotometro.blogspot.com/p/transmitancia-y-absorbancia.html.

ANEXOS