CUANTIFICACIÓN COLORIMÉTRICA DE LA CONCENTRACIÓN DE UNA

DISOLUCIÓN.

COLORIMETRIC QUANTIFICATION OF THE CONCENTRATION OF A

DISSOLUTION.

Carlos Alberto Gonzalez Largo1 y Diego Alejandro Bedoya Jiménez1

1. Departamento de ingeniería Química, Facultad de Ingeniería, Universidad Nacional de Colombia,
sede Bogotá, Cra. 30 No. 45-03, Bogotá DC, Colombia.
Laboratorio técnicas básicas en Química.
Autor para correspondencia: algonzalezla@unal.edu.co.

Resumen. Por último, se calculó la concentración de

azul de metileno en una solución dada por el
Cuando se realizan mediciones de docente, en la que se relacionó la
concentración en disoluciones, hay varios absorbancia con la ley le Beer-Lambert.
tipos de métodos para hallar la cantidad de
un soluto en una cantidad de disolución. Uno Palabras clave: concentración, ley Beer-
de estos métodos, fue el utilizado en la Lambert, absorbancia, espectrofotómetro,
pasada práctica de laboratorio, el método dilución seriada, factor de dilución.
colorimétrico que relaciona propiedades
ópticas como: la absorbancia y la Abstract.
transmitancia con la concentración de una When concentration measurements are made
sustancia, se trabajó con este método para on solutions. There are several types of
hallar la concentración de azul de metileno, methods for finding the amount of a solute;
en una disolución de agua y azul de in one solution, one of these methods was
metileno. used in the past laboratory practice the
Usando un espectrofotómetro para medir la colorimetric method, which relates optical
absorbancia de disoluciones de azul de properties such as absorbance and
metileno a distintas concentraciones, que transmittance with concentration of a
fueron hechas a partir de una disolución de substance, this method was used to find the
partida, hasta llegar a las concentraciones concentration of methylene blue in a solution
necesitadas usando el factor de dilución. of water and methylene blue.

A partir de las medidas tomadas, se anotaron  Using a spectrophotometer to measure the

en una tabla, se construyó una curva absorbance of methylene blue solutions at
espectral y una curva de calibración. A partir different concentrations, which were made
de las cuales se halló la longitud de onda en from a starting solution, to reach the
la cual el azul de metileno presenta la concentrations needed using the dilution
absorbancia máxima y la absorbancia del factor.
azul de metileno en distintas From the measurements taken, they were
concentraciones. recorded in a table and a spectral curve and a
calibration curve were constructed. From posee una longitud de onda o un solo color.
which the wavelength at which the (3,4).
methylene blue shows the maximum
absorbance and the absorbance of methylene Para calcular la concentración de una
blue at various concentrations was found. disolución de azul de metileno a partir de la
absorbancia, se usó la ley Beer-Lambert 3 que
 Finally, the concentration of methylene blue es una relación lineal entre la absorbancia o
was calculated in a solution given by the absorción de luz y la concentración de una
teacher in which the absorbance was related sustancia, propuesta por August Beer en
to the Beer-Lambert law. 1852, posteriormente agrego a su ley la
teoría de Lambert que fue anterior a la suya.
Keywords: concentration, Beer-Lambert (4)
law, absorbance, spectrophotometer, dilution
factor, serial dilution. A pesar de la utilidad de esta ley y su
precisión, posee una serie de limitaciones a
Introducción. la hora de usarla estas son: pierde precisión,
El método colorímetro, es un método usado si la concentración de la disolución es mayor
-2
para calcular la concentración de una a 10 M. Incumplimiento de los postulados
sustancia que se encuentra disuelta en otra, de la ley, debido a la interacción de los
usando radiación electromagnética que es componentes de la disolución entre sí y con
“la combinación de campos magnéticos la luz. Errores al aplicar la ley, debido a las
oscilantes, que se propagan, transportando interferencias que generan ciertas sustancias
energía de un lugar a otro”1. En este en los instrumentos de medición. (5)
método se usa la luz, en la colorimetría se A partir de los datos que se tomaron de la
relaciona la concentración con propiedades absorbancia en la disolución, se construyeron
ópticas como la transmitancia1 y la dos graficas que fueron una curva espectral y
absorbancia2. una de calibración.
La transmitancia se define como la cantidad La curva espectral es la representación del
de radicación o energía que atraviesa un porcentaje o medida de la transmitancia y la
cuerpo en este caso fue la disolución de azul absorbancia en función de la longitud de
de metileno y la absorbancia es la medida de onda, en la cual se mantiene constante la
la atenuación de una radiación o energía al concentración de la muestra; esta curva se
atravesar una sustancia o cuerpo, en la utiliza para hallar la longitud de onda en la
práctica fue la disolución de azul de cual se presenta la absorbancia máxima.(6)
metileno. (2)
La curva de calibración es una manera de
Para medir la absorbancia se utilizó un calcular la concentración de una sustancia
espectrofotómetro, es un instrumento de que esta disuelta en otra, es una relación
análisis y medición, que analiza la proporcional entre la concentración de una
absorbancia de una muestra, atreves de sustancia y una señal analítica en este caso la
medir la cantidad de luz monocromática absorbancia. (7)
proyectada por el mismo espectrofotómetro
absorbida por una muestra; la luz Para la realización de la curva espectral y la
monocromática es una radiación que solo de calibración, no solo se utilizó la muestra
de la disolución sino que también se usó un
1
Ecuación de la Transmitancia. T =I /I 0 3
Ecuación de la Ley de Beer-Lambert.
2
Ecuación de la Absorbancia. A=log 10 T A=abc
blanco de reactivos es decir una disolución Este procedimiento se repitió varias veces
preparada con todos los componentes pero manejando distintas longitudes de onda.
excepto la sustancia a analizar, en esta caso Las longitudes de onda que se trabajaron
es agua destilada solamente. (8) estuvieron entre 550 nm y 700 nm.
Se usó el blanco para calibrar el Finalizada la toma de datos se construyó la
espectrofotómetro y detectar posibles curva espectral y se hallo la longitud de onda
impurezas o interferencias. donde la disolución presenta mayor
absorbancia.
Para construir la curva de calibración además
del blanco de reactivos fue necesario hacer Construcción de la curva de calibración.
una dilución seriada, es la disminución
progresiva de la concentración de una Para la construcción de la curva de
sustancia, para esto se utiliza el factor de calibración, lo primero fue, la elaboración de
dilución4 que es el número de veces que una las disoluciones a las cuales se les iba a
dilución es más diluida que la otra. También medir la absorbancia. Para ello el docente
se usa la formula general para preparar las nos asignó las concentraciones a las cuales
disoluciones5 para hacer la disolución deben estar las disoluciones con las se
seriada. (9,10) trabajaron.

Materiales y métodos. Para realizar las soluciones de trabajo, se

partió de una solución de partida de 50 ppm
Construcción de la curva espectral. y se calculó cuanto volumen de agua y de
solución de partida era necesaria para llegar
Para la curva espectral se utilizó, una a la concentración de la disolución de
disolución de azul de metileno a una trabajo, para esto se usó la fórmula del factor
concentración de 10 ppm, fue preparada a de dilución y la fórmula general para las
partir de una disolución con una disoluciones.
concentración de 50 ppm y un blanco de
reactivos que es agua destilada sin la Luego de preparadas las disoluciones se
sustancia a analizar. Después depositamos el tomó cada una de estas disoluciones y se
blanco y la solución en las celdas para trasvasaron en una celda de muestra del
llevarlas al espectrofotómetro. espectrofotómetro.
Se encendió el espectrofotómetro, se esperó Para medir la absorbancia de las disoluciones
hasta que la lámpara estuviera lista. Luego se al igual que con la curva espectral primero se
tomó el blanco de reactivos y se colocó en el calibro el espectrofotómetro con el blanco de
compartimiento de muestra, se calibro el reactivos y luego se midió la absorbancia de
espectrofotómetro con la longitud de onda cada muestra, usando la longitud de onda en
con la cual se iba a trabajar, finalizada la la cual se presentó mayor absorbancia. Se
calibración se procedió a medir la tomaron los datos y se realizó la curva.
absorbancia de la disolución y se tomó el
dato. Calculo de la concentración de la solución
problema.
Para el cálculo de la concentración de la
disolución problema, se tomó una muestra de
4
Formula del factor de dilución. C f =Ci/ Vt
la disolución que había sido previamente
5
Formula general para las disoluciones.
preparada por el docente, se realizó el mismo
C i∗V i=C f ∗V f
procedimiento anteriormente expuesto para
medir la absorbancia. Para calcular la
concentración se tomó la absorbancia y se
relacionó con la ley Beer-Lambert.
Además de la ecuación de la ley fue
necesario calcular el coeficiente de
absortividad que se sacó a partir de la
ecuación de la pendiente6.
Discusión y Resultados.
En la Tabla 1 se presentan los datos
obtenidos de absorbancia de una disolución
de azul de metileno a concentración
constante. En los resultados se observó la
cantidad de absorbancia que presenta una
disolución de azul de metileno a diferentes
longitudes de onda.
La Figura 1 es la representación gráfica de
los datos de la Tabla 1, observamos en la
Figura 1 no crece de manera lineal sino que
forma una curva y que la máxima
absorbancia es el pico de esta curva, luego
decrece a medida de que aumenta la longitud
de onda.
Tanto en la Tabla 1 como en la Figura 1, la
longitud de onda en la cual se reportó el
valor más alto de absorbancia fue a 660 nm.
Con el valor de la longitud de onda de la
máxima absorbancia, se construyó la Tabla 2
y Figura 2.

6
Ecuación de la pendiente.
m= y 2 − y 1 /x 2−x 3
 Longitud de Onda
Absorbancia (U.A)
(nm)
550 0,038
600 0,166
630 0,219
660 0,361
680 0,239
700 0,043
Tabla 1. Datos de la absorbancia de una disolución de azul de metileno a 10 ppm.

Figura 1.
Curva Espectral Curva
espectral de la
0.4
0.36
absorbancia
0.35
del azul de
0.3 metileno
Absorbancia (U.A)

0.24
0.25 0.22

0.2 0.17
0.15

0.1
0.04 0.04
0.05

0
530 550 570 590 610 630 650 670 690 710
Longitud de onda (nm)

En la Tabla 2 se presentan los resultados de concentración se presenta una mayor

la absorbancia de disoluciones de azul de
metileno a distintas concentraciones, pero se
trabajó con la misma longitud de onda en la
cual se presenta absorbancia máxima que es
a 660 nm. Estos datos se utilizaron para la
construcción de la Figura 2.
En la Figura 2 se representa por medio de
una gráfica los datos obtenidos en la Tabla 2.
En esta se observa que hay una relación
lineal entre absorbancia y la concentración
de la sustancia, debido a que entre mayor
absorbancia en la disolución.
En esta grafica también está la ecuación de la
recta con la que se halló la concentración de
la disolución problema, la concentración de
la disolución problema también tiene su
punto en la Figura 2 pero no está en la recta,
esto se debe a una variación en los cálculos
de la ley Beer-Lambert con respecto a la
concentración, pero esta variación es
mínima.
El crecimiento lineal se puede explicar, de la cantidad de luz va a retener debido a que los
siguiente manera, entre más cantidad de átomos de una sustancia se excitan o
sustancia halla en una solución, mayor reaccionan en contacto con los fotones.

Concentración (ppm) Absorbancia (U.A.) Tabla 2.

15 0,517 Absorbancia de
10 0,358 disoluciones de
8 0,282 azul de metileno
a distintas
5 0,183
concentraciones.
3 0,129
0 (Blanco de reactivos) 0
7,1 (disolución problema) 0,228

Figura 2.
Curva de Calibracion Curva de
0.52
0.5 f(x) = 0.03 x + 0.01
calibración de
R² = 1 la
concentración
0.4 0.36
de azul de
Absorbancia (U,A)

0.28
metileno
0.3 (ppm) frente a
0.23
la absorbancia.
0.18
0.2
0.13

0.1

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
Concentración (ppm)

En