LICENCITURA EN BIOIMAGENES DIAGNOSTICAS

SEGUNDO SEMESTRE
FISICA DE TOMOGRAFÍA
INGENIERO AUGUSTO.

INVESTIGACION LEY DE
LAMBERT

WILSON GIRÓN
Carnet: 202142013
Imaginemos un dispositivo experimental como el de la siguiente Figura 3. Disponemos
de una fuente emisora de radiación electromagnética (lámpara), unos sistemas de
enfoque (rendijas) para hacer que la radiación incida perpendicularmente a la muestra,
un dispositivo que permita seleccionar la longitud de onda que incide sobre la muestra
(red de difracción) y un sistema electrónico de medida de intensidad de luz.

Imaginemos también que hacemos dos medidas de la intensidad de luz:

1) La primera medida la muestra será una disolución con la misma matriz que el analito
que deseemos determinar pero en ausencia de éste (disolución blanco). La intensidad
de radiación (luz) que llega al lector será sub_Io.bmp

2) La segunda medida se hará en presencia del analito (cromóforo) que deseemos

estudiar. En este caso la intensidad de luz que llega al lector será I. Como trabajamos
con analitos que absorben radiación a la longitud de onda que selecciona la red de
difracción, lógicamente.
Existen dos maneras de expresar la relación entre I e Io. La relación directa se
denomina transmitancia (T), mientras que se denomina absorbancia al logaritmo
con signo cambiado de la transmitancia. La absorbancia es un término
actualmente mucho más utilizado que la transmitancia.
La expresión matemática de ambos parámetros es:

La ley de Lambert-Beer establece que la absorbancia está directamente relacionada con

las propiedades intrínsecas del analito, con su concentración y con la longitud de la
trayectoria del haz de radiación al atravesar la muestra. La expresión matemática de la
ley de Lambert-Beer es:

A=C. .L

Donde:

A = Absorbancia de la muestra
C = Concentración del cromóforo

L = Longitud del paso óptico que contiene la muestra

= Absorptividad molar. Depende del cromóforo en si mismo, de la y de las

condiciones de medida (pH, T...). Ya que la absorbancia es adimensional las unidades
son concentración-1 longitud-1.

Ejemplos de la aplicación de Lambert-Beer

1) Una disolución 100 µM de un determinado cromóforo tuvo una transmitancia a 525
nm de 0.5 cuando se midió en una celda 1.5 cm de longitud. Calcular: a) la absorbancia
de la disolución; b) la absorptividad molar del cromóforo

a) A = -log T = - log 0.5 = 0.301

b) A = C .e.bmp . L Reordenando la ecuación obtendremos:

e.bmp = A/(C x L) = 0.301 /(10-4 M x 1.5 cm) = 2 x 103 M-1 cm-1

2) Una disolución patrón de níquel 5.00 x 10-5 M se coloca en una cubeta de longitud
de paso 1 cm. La absorbancia a 592 nm es 0.446. a) ¿Cuánto vale e.bmp a 592 nm?.
b) Si una disolución problema de níquel tiene una absorbancia de 0.125 a la misma
landa_simple.bmp ¿cuál es la concentración de níquel en la muestra?.

a) Dado que A = C . e.bmp . L. Entonces 0.446 = 5 x 10-5 M x 1 cm x e.bmp y deducimos

e.bmp = 8920 M-1 cm-1

b) Aplicando que A = C . e.bmp . L. 0.125 = 8920 M-1 cm-1 x 1 cm x C; y por lo tanto C=

14 µM
Ley de Beer-Lambert
La ley de Beer-Lambert relaciona la intensidad de luz entrante en un medio con la
intensidad
De luz saliente después de se produzca absorción en dicho medio. Esta relación queda
definida por la
Siguiente ecuación:
Por un lado la ley de Beer-Lambert explica la relación exponencial que hay entre la
trasmitancia de una sustancia y su concentración. Esto se resume a que si la
concentración de la solución aumenta, la cantidad de luz que es trasmitida a través del
espacio que ocupa la solución disminuye, debido a que la cantidad de soluto que
absorbe dicha luz es mayor.

De la ley de Beer-Lambert se deriva

Esta derivación nos indica la relación directamente proporcional que tiene la

absorbancia con la concentración de la solución, es decir que conociendo c y l la
concentración de la mezcla puede obtenerse a partir de la absorbancia. Esta relación
tiene un límite el cual es la saturación de la mezcla, pasado tal límite de saturación la
relación se comporta de forma exponencial.
Por ultimo cabe destacar la relación logarítmica que se presenta entre la absorbancia y
trasmitancia de un material, esto pasa por relación existente de estos valores con la
concentración que posea la solución.