LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

Semana 9-Sesión 9-2020

 DETERMINACIÓN DE
TRIGLICÉRIDOS Y COLESTEROL
EN SUERO

Cursos Básicos de CienciasBioquímica

Dra. María del Pilar Navarro
mnavarron@ucientifica.edu.pe
COLESTEROL

TRIGLICÉRIDOS
Cualquier alteración en los niveles normales de lípidos plasmáticos
(fundamentalmente colesterol y triglicéridos) se conocen como
DISLIPEMIAS. Son una serie de diversas condiciones patológicas cuyo único
elemento común es una alteración del metabolismo de los lípidos, con su
consecuente alteración de las concentraciones de lípidos y lipoproteínas en
la sangre.

Se clasifican según su etiología en dos grandes grupos:

1.HIPOLIPIDEMIAS: Raras y de origen genético

1.HIPERLIPIDEMIAS: Muy comunes en la población general

Concentraciones anormales de lípidos sanguíneos:

•Incremento de colesterol o hipercolesterolemia

•Incremento de triglicéridos o hipertrigliceridemia
•Incremento de LDL-c o disminución de la HDL-C
Son consideradas como un factor de riesgo para enfermedades cardiovasculares.
Logros de la sesión de aprendizaje:

•Determinar la concentración sérica de

colesterol total y triglicéridos
 DETERMINACION DE LIPIDOS Y LIPOPROTEINAS

Condiciones para la toma de muestra.

-Ayuno de 9-12 horas. 
-No ingerir bebidas alcohólicas 24 horas antes. 
-Conveniente que el paciente permanezca 5-10
minutos sentado antes de la extracción. 
-No oclusión venosa prolongada antes de la
venipuntura. La oclusión prolongada puede
conducir a hemoconcentración y aumento en un
15 % de los niveles de CT.

ALMACENAMIENTO: MUESTRA:
-Colesterol, HDL, Tg 4 C < 48 horas o
o
-Suero, Plasma (EDTA)
(LDLc Friedewald) -20 ó –70oC > 48 horas -Plasma: (lipoproteínas
ultracentrifugación, electroforesis)
-Lipoproteínas (Ultracentrifugación):
4oC procesar de inmediato, no congelar
 DETERMINACION DE LIPIDOS Y LIPOPROTEINAS

Aspecto del Suero:

Orienta:
-Suero lechoso: Quilomicrones
-Sueros turbios u opalescentes: por lo general aumento
de las VLDL

NOTA: Un suero límpido no excluye la presencia de una

hiperlipoproteinemia

•Aspecto del suero: Permite inferir el origen de la hipertrigliceridemia, con diferentes situaciones
a la extracción y después de la refrigeración a 4 °C por 12 horas. 

1.Lechoso. Se separa arriba una capa cremosa y abajo turbia, lo que hace pensar en
hipertrigliceridemia mixta. 

2.Se separa arriba una capa cremosa y abajo transparente, lo que pudiera tratarse de
hipertrigliceridemia exógena. 

3.Homogéneamente turbio. Pudiera significar hipertrigliceridemia endógena. 

PARTE EXPERIMENTAL

•Determinar la concentración sérica de

colesterol total
 DETERMINACION DE COLESTEROL TOTAL

Métodos Analíticos

Enzimáticos (CHOP-POD):

Esteres + H2O Colesterol + A.G.

Colesterol Colesterol esterasa

Colesterol + O2 Colestenona + H2O2

Colesterol oxidasa

H2O2 + Fenol + 4 amino antipirina Rx de color (505 nm)

Peroxidasa

TÉCNICA: 1,0 mL de reactivo de trabajo y 0,01 mL de muestra, mezclar e

incubar por 10 minutos a 37ºC. Intervalos de referencia: ≤ 200 mg/dL.
 Procedimiento experimental
1. Identificar tubos de ensayos de 13x100 mm

Concentración del St: 200 mg/dL

B St P
¿Material? LEER TÉCNICA

AJUSTAR EL
EQUIPO

Abs Estándar: 0.280 Conc. Paciente=FC x

FC= Conc. St/Abs St
Abs Paciente: 0.460 Abs Paciente
INTERPRETACIÓN Intervalos de referencia: ≤ 200 mg/dL
PARTE EXPERIMENTAL
•Determinar la concentración sérica de
triglicéridos
 DETERMINACION DE TRIGLICÉRIDOS

Enzimático- Colorimétrico

Triglicéridos + H2O Glicerol + AG

Lipasa

Glicerol + ATP Glicerol-3-fosfato + ADP

Glicerol quinasa

Glicerol-3-fosfato + O2 Dihidroxiacetona + H2O2

Glicerofosfato oxidasa fosfato

H2O2 + 4-AAP* + DCBS** Reacción de Color (520 nm) + 4 H 2O

Peroxidasa
TÉCNICA: 1 mL del reactivo con 0,01 mL del suero, se mezcló e incubó por 5 minutos a 37ºC.
Valores de referencia: 36 a 165 mg/dL.
*4-Amino antipirina ; **Acido 3,5-Dicloro-2-Hidroxibencensulfónico
 Procedimiento experimental
1. Identificar tubos de ensayos de 13x100 mm

Concentración del St: 200 mg/dL

¿Material? LEER TÉCNICA
B St P

AJUSTAR EL
EQUIPO

Abs Estándar: 0.380 FC= Conc. St/Abs St Conc. Paciente=FC x

Abs Paciente: 0.620 Abs Paciente
INTERPRETACIÓN Valores de referencia: 36 a 165 mg/dL.
 Actividad Asincrónica
Realizar un informe (trabajo colaborativo). Este informe debe presenter las siguientes
partes:

•Portada (titulo: DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS Y COLESTEROL EN

SUERO, persona quien lo realizó, sección-hora-docente)
•Introducción
•Objetivos
•Materiales y métodos (Procedimiento experimental)
•Resultados
•Conclusiones
•Referencias

Fecha y hora de entrega será establecida por el docente.

 GRACIAS
Cursos Básicos de CienciasBioquímica
Dra. María del Pilar Navarro
mnavarron@ucientifica.edu.pe