DETERMINACION DE HEMATOCRITO Y HEMOGLOBINA

TECNICA DE HEMATOCRITO

OBJETIVO

Aprender a realizar la prueba del hematocrito utilizando el macro y micrométodo, conocer su

importancia en el diagnóstico de enfermedades y la forma adecuada de su procedimiento.

FUNDAMENTO

El hematocrito es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que
está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende del número de glóbulos rojos y de su
tamaño. El resultado se expresa en porcentaje.
El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguíneo
completo (hemograma).
Para la realización de esta prueba, con el macrométodo, la sangre se extrae típicamente de una
vena, por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano.
Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado,
mientras que otras sólo sienten un pinchazo o sensación de picadura. Posteriormente, puede
haber algo de sensación pulsátil.
Un volumen de sangre se deposita en un tubo de Wintrobe, por medio de una pipeta, hasta la
marca del 10 y se debe de centrifugar. Al terminar la prueba, deben de quedar separados el plasma
de la sangre y las células, depositándose en el fondo y presentando un color rojo intenso.
Para la realización del micrométodo, se utilizan unos tubos de un calibre muy delgado, llamados
capilares, y pueden ser llenados con la misma sangre venosa o de capilar. Este último es el más
usado, por ser más rápido y menos riesgoso al usar sangre capilar. Para su lectura se usa una
escala estandarizada.

MATERIAL

tubo capilar heparinizado

pipeta Pasteur de punta larga
bulbo
MATERIAL BIOLOGICO : SANGRE VENOSA CON ANTICOAGULANTE

APARATOS

centrifuga cerologica
microcentrifuga
lector para micrometodo

PROCEDIMIENTO HEMATOCRITO

1 Tomar la muestra en capilares azules sin heparina para sangre venosa con
anticoagulante EDTA. Debe llenarse aproximadamente 70-80% del capilar, sin
dejar burbujas de aire.
 Ocluir (tapar) el extremo del capilar que no estuvo en contacto con la sangre, con
plastilina o sellando con fuego

3 Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de la microcentrifuga, con el

extremo ocluido adherido al reborde externo de la plataforma

Centrifugar por 10 min a 5 000 r.p.m

5 Para leer el resultado, se lleva a cabo una regla de tres, midiendo el volumen total
de plasma y eritrocitos o por medio de la regleta.
6 Para la regleta, se sostiene el tubo frente a la escala de manera que el fondo de la
columna de eritrocitos, quede exactamente al mismo nivel de la línea hroizontal
correspondiente al cero

Desplazar el tubo a través de la escala hasta que la línea marcada con el 1.0 quede
al nivel del tope del plasma. El tubo debe de encontrarse completamente en
posición vertical.

La línea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicara la fracción
del volumen de estos.

RESULTADOS

MUJER : 42.6%
DETERMINACION DE HEMOGLOBINA

OBJETIVO

Deteminar la concentración de hemoglobina en una muestra sanguínea.

INTRODUCCION

La hemoglobina es una proteína conjugada que sirve para el transporte de

oxígeno y dióxido de carbono. La masa total de eritrocitos de un adulto contiene
unos 600gr. De hemoglobina capaces de transportar 800ml de oxígeno.

Una molécula de hemoglobina consta de 2 pares de cadenas polipepticas (unión

de aminoácidos) (globina) y 4 grupos proteicos HEM que contienen cada uno un
átomo de fe en estado ferroso. Cada punto HEM se localiza en una zona
determinada de una de las cadenas de polipepticos. Localizando cerca la
superficie de la molécula, el HEM se combina de forma reversible con una
molécula de oxigeno y dióxido de carbono. Este grupo HEM es el responsable
del color rojo de la hemoglobina (hb).

MATERIAL

tubos de ensaye
pipetas serológicas
pipetas de sahli
boquillas
gradilla
gasa
celdas
SANGRE VENOSA CON ANTICOAGULANTE

APARATOS
espectofotometro

REACTIVOS

EDTA AL 10%
reactivo de drabkin

PROCEDIMIENTO

colocar en un tubo de ensaye 5 ml de reactivo de drabkin.

mezclar perfectamente la sangre
llenar la pipeta de sahli calibrada a 0.02ml
limpiar la sangre adherida en el exterior de la pipeta y vacia la sangre de la pipeta
al liquido diluyente , enjuagando tres veces la pipeta con el mismo liquido.
mezclar perfectamente la sangre con el liquido.
medir la extinción del problema contra la solución reactiva antes de 3 min a
540nm.

CALCULOS
[ Hb ] = absorbancia x 36.8 de Hb/dl

RESULTADO

MUJER : 13.6 g/L