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PRÁCTICA DE LABORATORIO N° 10
AUTORA:
ID:
000237273
CURSO:
NRC:
3862 HORARIO 2:20PM
SEMESTRE ACADEMICO:
Trujillo-Perú
2021
LABORATORIO N° 10
DETERMINACIÓN DEL PERFIL LIPÍDICO
1. INTRODUCCIÓN.
La determinación del perfil lipídico incluye la medición sérica de colesterol total, triglicéridos,
HDL colesterol y LDL colesterol.
Indicaciones: despistaje, diagnóstico y monitoreo de las dislipidemias. Se consideran como
tales a las alteraciones del perfil lipídico sea aumento o disminución de alguno de sus
componentes.
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL
1. INTRODUCCIÓN.
El colesterol es una molécula lipídica, base de síntesis de los demás esteroides como las
hormonas masculinas, femeninas, gluco y mineralocorticoides, así como las sales biliares
y la vitamina D, con ellas comparte el núcleo ciclopentano perhidrofenantreno. Forma
parte de las biomembranas regulando su fluidez.
Tiene origen endógeno por síntesis a nivel hepático, intestino y otros tejidos; y exógeno
de la dieta (de origen animal como la yema de huevo, carnes etc.).
2. FUNDAMENTO
La secuencia reaccional es la siguiente:
CHE
ésteres del colesterol -----------------colesterol + ácidos grasos
CHOD
colesterol + O2 -------------------colesten-3-ona + H2 O2
POD
H2 O2 + 4-AF + aceptor------------------ quinonimina roja
3. MATERIAL Y REACTIVOS
• Toma de muestra: agujas o jeringas, ligadura, tubos
• Standard de colesterol: 200 mg/dl
• Reactivo A para colesterol: con CHE, CHOD, POD, AF, fenol
• Pipeta para 10 ul
• Puntas
• Espectrofotómetro
5. PROCEDIMIENTO
Armar el siguiente sistema
B St Desconocido
Standard 10 ul
Muestra 10 ul
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml
6. RESULTADOS
Blanco= 0,00
Estándar: = 0,200
Factor=
Desconocido 1: = 0,300
Desconocido 2 = 0,260
Desconocido 3 = 0, 180
Colesterol desconocido 1= 300 mg/dl
Colesterol desconocido 2= 260 mg/dl
Colesterol desconocido 3= 180 mg/dl
8. INTERPRETACIÓN
Paciente 1: En caso del primer paciente se observa que su colesterol esta por los 300 mg/dl
y en comparación, podríamos decir que el paciente estaría presentando un
hipercolesterolemia por sus es la presencia de niveles elevados de colesterol en la sangre.
No puede considerarse una patología sino un desajuste metabólico que puede ser
secundario a muchas enfermedades y puede contribuir a muchas formas de enfermedad,
especialmente enfermedad de las arterias coronarias. Debido esto podemos afirmar que este
paciente podría padecer de enfermedades coronarias.
Paciente 2: En el siguiente resultado es de 260 mg/dl por el cual podemos afirmar que esta
alto los niveles de colesterol, lo cual puede generar pueden ser causados por: Falta de
ejercicio esto puede aumentar sus niveles de LDL. No sólo eso, el ejercicio se ha
demostrado que incrementa los niveles de HDL saludables. Y si este paciente también
puede aumentar el colesterol malo, causando la acumulación de placa en las arterias.
9. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la estructura del colesterol?
El colesterol es un lípido esteroide, formado por una molécula de
ciclopentanoperhidrofenantreno, constituida por cuatro carboxilos condensados o
fundidos, denominados A, B, C y. Su estructura incluye:
Dos radicales metilos en las posiciones C-10 y C-13.
Una cadena hidrocarbonada ramificada de ocho carbonos en la posición C-17.
Un grupo hidroxilo en la posición C-3.
Un doble enlace entre los carbonos C-5 y C-6.
En la molécula de colesterol se puede distinguir una cabeza polar constituida por el grupo
hidroxilo y una cola o porción apolar formada por el carbociclo de núcleos condensados y
los sustituyentes alifáticos. Así, el colesterol es una molécula tan hidrófoba que la
solubilidad de colesterol libre en agua es de 10-8 M y, al igual que los otros lípidos, es
bastante soluble en disolventes apolares como el cloroformo.
10. CONCLUSIONES:
Se concluyó que el colesterol es una sustancia cerosa y parecida a la grasa que se encuentra
en todas las células de su cuerpo. Su hígado produce colesterol. También se encuentra en
algunos alimentos, como la carne y los productos lácteos. Su cuerpo necesita algo de
colesterol para funcionar bien.
También aprendimos acerca del hipercolesterolemia una elevación del colesterol total (TC)
y/o del colesterol de lipoproteínas de baja densidad (colesterol LDL) o del colesterol de
lipoproteínas de alta densidad (colesterol HDL) (definido como la sustracción del
colesterol HDL del colesterol total) en la sangre, también se conoce como dislipidemia,
DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS
1. INTRODUCCIÓN.
Los triglicéridos son lípidos simples formados por esteres de glicerol con tres ácidos grasos.
Estos pueden ser saturados, monoinsaturados o poliinsaturados.
Según ATP III son considerados factores de riesgo coronario; asimismo es un constituyente
del síndrome metabólico (>= 150 mg/dl).Pueden tener origen exógeno (dieta) o endógeno
(síntesis en hígado, tejido adiposo u otros tejidos).
2. FUNDAMENTO
El esquema de reacción es el siguiente:
lipoprotein lipasa
triglicéridos-------------------------- glicerol + ácidos grasos
glicerol kinasa
glicerol + ATP ---------------------------glicerol-3-P + ADP
GPO
glicerol-3-fosfato + O2 -----------------H2 O2 + dihidroxiacetonafosfato
POD
2 H2 O2 + 4-AF + clorofenol ---------------quinonimina roja
GPO: glicerolfosfato oxidasa
POD: peroxidasa
4-AF: 4 aminofenazona
3. MATERIAL Y REACTIVOS
• Toma de muestra: agujas o jeringas, ligadura, tubos
• Standard de triglicéridos: 200 mg/dl
• Reactivo A para triglicéridos AA
• Pipeta para 10 ul
• Puntas
• Espectrofotómetro
Muestra 10 ul
Standard 10 ul
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml
6. RESULTADOS
Lecturas
Blanco= 0,00
Estándar= 0, 250
Factor=
Desconocido 1 = 0, 360
Desconocido 2= 0, 310
Desconocido 3= 0,150
Triglicéridos desconocidos 1= 360 mg/dl
Triglicéridos desconocidos 2 = 310 mg/dl
Triglicéridos desconocidos 3= 150 mg/dl
8. INTERPRETACIÓN
Paciente 1: En el primer paciente se observa que tiene sus triglicéridos elevados por lo
cual podemos decir que el paciente presenta hipertrigliceridemia moderada ya que como
sabemos es la presencia de una concentración de triglicéridos en la sangre superior a 150
mg/dl. Se asocia al aumento del riesgo de desarrollar enfermedad coronaria, si bien el
ajuste estadístico por otros factores de riesgo atenúa su nivel de influencia en forma
independiente. Por lo cual podemos decir que este paciente puede desarrollar alguna
enfermedad coronaria
Paciente 2: El siguiente paciente igual nos muestra nivel alto de triglicéridos ya que son
los valores de 310 mg/dl, podemos asociar este aumento con una alimentación
excesivamente grasa, lógicamente, la reducción de los triglicéridos es resultado de una falta
de este material. Sin embargo, una baja tasa de triglicéridos en la sangre no es responsable
de ninguna enfermedad en particular.
Paciente 3: Podemos decir que este paciente si tiene los valores normales, Aunque los
niveles de triglicéridos varían con la edad, se considera que un nivel es "normal" si es
menor que 150 mg/dL. Los valores normales pueden variar según el laboratorio. Las
causas de hipertrigliceridemia pueden incluir: Edad: los niveles de triglicéridos aumentan
con la edad.
9. CONCLUSIONES:
Se aprendió que la hipertrigliceridemia es el exceso de triglicéridos en la sangre. Los
triglicéridos son sustancias grasas en la sangre y en el organismo que obtienen su nombre
por su estructura química.
Indague que el hígado produce triglicéridos. Cualquier caloría adicional en su dieta puede
convertirse en triglicéridos. Los triglicéridos también pueden transformarse en colesterol.
Además, se concluyó que el alimento que consume se usa o se almacena. Cuando come, la
grasa de los alimentos es digerida y los triglicéridos son liberados al torrente sanguíneo.
Esto le dará energía para realizar actividades, o simplemente para mantener sus funciones
vitales. Si come de más, el resto del alimento se almacenará como grasa. Aunque los
niveles de triglicéridos varían con la edad, se considera que un nivel es "normal" si es
menor que 150 mg/dL. Los valores normales pueden variar según el laboratorio.
10. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la estructura de un triglicérido? ¿De qué depende su estado físico?
Los triglicéridos son químicamente triesteres de ácidos grasos y glicerol. Los triglicéridos
se forman combinando glicerol con tres moléculas de ácidos grasos. Los alcoholes tienen
un grupo hidroxilo (HO–). Los ácidos orgánicos tienen un grupo carboxilo (-COOH). Los
alcoholes y ácidos orgánicos se unen para formar ésteres. La molécula de glicerol tiene tres
grupos hidroxilo (HO–). Cada ácido graso tiene un grupo carboxilo (–COOH). En los
triglicéridos, los grupos hidroxilo del glicerol se unen a los grupos carboxilo del ácido
graso para formar enlaces éster:
Los tres ácidos grasos son generalmente diferentes, pero se conocen muchos tipos de
triglicéridos. Las longitudes de cadena de los ácidos grasos en los triglicéridos naturales
varían, pero la mayoría contiene 16, 18 o 20 átomos de carbono.
Aceite de oliva: El aceite de oliva extra virgen está compuesto por ácidos grasos
monoinsaturados. Estos estimulan el aumento del colesterol bueno en las arterias.
Legumbres: Son valoradas por su alto contenido de nutrientes esenciales. Las
legumbres son una excelente opción alimentaria para proteger la salud cardiovascular.
Su significativo aporte de fibra soluble, ayuda a remover los niveles altos de colesterol
y triglicéridos en el organismo, y también evita su acumulación en las paredes
arteriales.
Pescado azul: Los pescados grasos son uno de los mejores alimentos para proteger
la salud cardiovascular y también la cognitiva.Se destacan como la principal fuente de
ácidos grasos omega 3, un tipo de lípido saludable que facilita la disminución de los
triglicéridos, según un estudio publicado en Endocrine Practice.
Avena: Se destaca por ser una de las principales fuentes energéticas para el
organismo. La avena también es un excelente apoyo para disminuir la presencia de
estos lípidos en las arterias. Cuenta con una cantidad importante de fibra soluble,
nutriente que impide la acumulación de grasas dañinas.
Frutos secos: Las nueces, las almendras y otras variedades de frutos secos aportan
una cantidad interesante de ácidos grasos omega 3. Este es un nutriente esencial que
limpia la sangre y protege la salud cardíaca.
Aguacate: La ingesta de un aguacate al día le brinda muchos beneficios a la salud
cardiovascular y al bienestar general del organismo. Este delicioso fruto cuenta con una
increíble riqueza en nutrientes que, entre otras cosas, disminuyen la inflamación y
también el riesgo de padecer enfermedades crónicas.
Ajo para los triglicéridos: El ajo es uno de los condimentos que no deben faltar
en los planes de alimentación de los pacientes con hipertrigliceridemia. Rico en
sustancias sulfurosas que, según estudios, contribuyen a regular los lípidos de la sangre
y, a su vez, favorece la eliminación de las toxinas. Se aconseja su ingesta en ayunas,
crudo, ya que es la mejor forma de aprovechar al máximo sus propiedades.
2. FUNDAMENTO.
Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan precipitando selectivamente las
lipoproteínas de baja y muy baja densidad (LDL y VLDL) mediante el agregado de sulfato de
dextrán de PM 50.000 en presencia de iones Mg++. En el sobrenadante separado por
centrifugación, quedan las HDL y se realiza la determinación del colesterol ligado a las
mismas, empleando el sistema enzimático Colesterol oxidasa/Peroxidasa con colorimetría
según Trinder (Fenol/4- Aminofenazona).
3. MATERIAL Y REACTIVOS
• Toma de muestra: agujas o jeringas, ligadura, tubos
• Standard de colesterol: 200 mg/dl
• Reactivo A: solución de sulfato de dextrán (PM 50.000)0,032 mmol/l. Reactivo
B: solución de cloruro de magnesio 1,5 M Reactivo precipante: A + B en cantidades
iguales.
• Pipeta para 10 ul
• Puntas
• Espectrofotómetro
• Centrífuga
• Baño María
• Reactivo de trabajo
5. PROCEDIMIENTO
En un tubo de vidrio medir 0,5 ml (500 ul) de muestra, y agregar 50 ul de Reactivo
Precipitante.
Homogeneizar agitando (sin invertir) durante 20 segundos y dejar 30- 40 minutos en
refrigerador (2-10o C) o 15 minutos en baño de agua a la misma temperatura. No colocar
en congelador.
Centrifugar 15 minutos a 3000 r.p.m.
Usar el sobrenadante límpido como muestra.
Sobrenadante 1 00 ul
S 20 ul
Reactivo de trabajo 2 ml 2 ml 2 ml
Se trabajará con muestras de tres pacientes, desconocidos 1, 2 y 3
Mezclar e incubar 5 minutos a 37o C si se usa el Reactivo de Trabajo de Colestat
enzimático AA/líquida o 15 minutos con Colestat enzimático
Retirar del baño y enfriar. Leer a 505 nm en espectrofotómetro o en colorímetro con
filtro verde (490-530 nm), llevando a cero con el Blanco.
Color es estable 2 horas
Cálculos: HDL Colesterol (mg/dl) = D x f
f = 45.77
S
45.77 resulta de corregir los diferentes volúmenes y se aplica para reactivo de 2ml y
concentración de S de 200 mg/dl
6. RESULTADOS:
Blanco = 0,00
Estándar= 0,200
Desconocido 1=0, 150
Desconocido 2= 0, 180
Desconocido 3= 0,250
7. VALORES DE REFERENCIA
Normal: 40 a 60 mg/dl
Bajo o de riesgo: < 40 mg/dl
Protector. >= 60 mg/dl
8. INTERPRETACIÒN:
Paciente 01: El primer paciente nos muestra que tiene bajo nivel de colesterol HDL con
34.3 mg/dl por lo cual podemos decir que el paciente con valores bajos de colesterol HDL,
también conocido como colesterol 'bueno', tienen una mayor probabilidad de padecer
síndrome coronario agudo es un conjunto de manifestaciones de cardiopatía isquémica o
insuficiencia coronaria, con empeoramiento clínico del paciente en horas o días.
Comprende tres grupos de afecciones: angina de pecho inestable aguda, el infarto
miocárdico agudo y la muerte cardiaca súbita. La forma más común de presentarse es el
denominado dolor anginoso (en el pecho).
Paciente 02: Este paciente tiene un valor debajo de lo debido que es 41.1mg/dl En la
mayoría de los casos, el bajo HDL tiene un origen genético. El paciente tiene HDL bajo
porque su organismo produce, naturalmente, poco HDL. Además, los valores se pueden
reducir en virtud de malos hábitos de vida, como mala alimentación, inactividad física y
tabaquismo.
Paciente 03: En el último paciente si tiene sus valores de colesterol de HDL son 57.2 mg/dl
por lo cual se dice que son buenos, Ya el HDL es una lipoproteína que hace una función
opuesta al LDL. El HDL actúa como un «selector» de colesterol tomando el exceso
circulante en la sangre o depositado en los vasos sanguíneos para llevarlo de vuelta al
hígado, donde será «desmantelado», agregado a la bilis y eliminado por las heces.
9. CONCLUSIONES:
Se aprendió que cuánto mayores son los niveles de colesterol HDL, menor será el riesgo
de formación de placas de colesterol en los vasos sanguíneos. Por eso el HDL es
considerado el colesterol bueno o colesterol saludable.
Además, que las únicas medidas para bajar el HDL son aquellas relacionadas con los
cambios de los hábitos de vida, lo que buena parte de las personas se muestra muy
resistente a hacerlo.
10. CUESTIONARIO
1. ¿Cómo es el metabolismo del HDL?
la Vía para el transporte del colesterol desde la periferia al hígado (vía de retorno). Es un
sistema mediado por apo AI, contenido en las HDL, utilizado en el transporte del colesterol
desde la periferia hacia el hígado. Este sistema está interconectado con la vía exógena y
endógena del transporte de lípidos. Sirve de reservorio circulante para apoproteínas: apo C-
I, apo C-II y apo E. Las partículas HDL derivan de precursores complejos aportados por el
hígado e intestino. La vía se inicia cuando las HDL nacientes, provenientes del hígado o
intestino delgado incorporan colesterol libre desde las membranas celulares. En este
proceso la lecitin-colesterol-acil-transferasa LCAT) esterifica el colesterol libre con ácidos
grasos provenientes de la posición C-2 de la lecitina que son transferidos al C-3- OH del
colesterol libre. Al incorporar colesterol la partícula HDL se transforma de discoidal en
esférica HDL2 y luego en HDL3 y vuelve nuevamente al hígado donde es incorporada
mediando receptores específicos para apo A-I. Los macrófagos también vía receptores
incorporan a las HDL y éstas captan colesterol y apo E en el interior de ellos. La presencia
de apo E en las HDL facilita posteriormente la captación por los receptores hepáticos y su
catabolismo. La función principal de las HDLs es el intercambio de colesterol libre y
su esterificación. Las HDL al captar el colesterol de las membranas celulares, reducen el
colesterol almacenado dentro de las células al momento que éste se desplaza para
reemplazar el colesterol retirado de las membranas. El colesterol esterificado de las HDL a
su vez puede ser transferido a las LDL y VLDL mediante la acción de la enzima asociada,
denominada proteína de transferencia para ésteres de colesterol (CETP). La ventaja de este
paso es permitir mediante un doble mecanismo de receptores para LDL y HDL devolver
colesterol al hígado.
2. FUNDAMENTO
Las lipoproteínas de baja densidad (LDL o βlipoproteínas) se separa del suero precipitándolas
selectivamente mediante el agregado de polímeros de alto peso molecular. Luego de
centrifugar, en el sobrenadante quedan las demás lipoproteínas (HDL y VLDL); el colesterol
ligado a las mismas se determina empleando el sistema enzimático Colesterol oxidasa/
Peroxidasa con colorimetría según Trinder (Fenol/4-AF). Por diferencia entre el colesterol
total y el determinado en el sobrenadante, se obtiene el colesterol unido a las LDL.
3. MATERIAL Y REACTIVOS
• Reactivo precipitante; sulfato de polivinilo disuelto en polietilen glicol al 5 %
• Reactivo de trabajo (para colesterol)
• Estándar: colesterol 200 mg/dl
• Material para toma de muestras
• Espectrofotómetro
• Centrífuga
• Pipeta
• Baño María 37 °C
Sobrenadante 100 ul
S 20 ul
Reactivo de 2 ml 2 ml 2 ml
trabajo
6. RESULTADOS
Blanco = 0,00
Estándar= 0,200
Factor= 62.4/ estándar
Desconocido 1 = 0,670
Desconocido 2= 0,540
Desconocido 3 = 0,316
8. INTERPRETACIÓN
Paciente 1: En el primer paciente se observa el LDL con 209 mg/dl, por lo cual podemos
decir que es muy alto de colesterol LDL es demasiado alto, puede acabar acumulándose
en las paredes de las arterias. Esta acumulación es conocida como placa de colesterol, la
cual puede llegar a estrechar las arterias, limitando el flujo sanguíneo y, finalmente,
aumentando el riesgo de formación de coágulos sanguíneos.
Paciente 2: En el siguiente paciente igual nos muestra niveles altos con un 168 mg/dl esto
significa que tiene demasiado colesterol LDL en la sangre. Este LDL adicional, junto con
otras sustancias, forma placa. La placa se acumula en sus arterias; lo que se conoce
como arterioesclerosis. La enfermedad de las arterias coronarias ocurre cuando la
acumulación de placa se encuentra en las arterias de su corazón. Hace que las arterias se
endurezcan y se estrechen, lo que disminuye o bloquea el flujo de sangre a su corazón.
Paciente 3: El ultimo paciente tiene un LDL de 99 mg/dl por lo cual podemos decir que es
óptimo, por lo que podemos decir que el valor de LDL debe ser siempre el menor posible y
es por esto que, para la población en general, el LDL debe mantenerse por debajo de 130
mg/dl. Sin embargo, las personas que tienen un alto riesgo de tener un problema
cardiovascular se benefician de tener niveles aún más bajos de LDL.
9. CONCLUSION:
Se concluyó que el HDL significa lipoproteínas de alta densidad en inglés. A veces se le
llama colesterol "bueno" porque transporta el colesterol de otras partes de su cuerpo a su
hígado. Su hígado luego elimina el colesterol de su cuerpo. A comparación del LDL
significa lipoproteínas de baja densidad en inglés. En ocasiones se le llama colesterol
"malo" porque un nivel alto de LDL lleva a una acumulación de colesterol en las arterias.
Adema se aprendió que Normalmente, las personas con un estilo de vida sedentario, que no
hacen una alimentación adecuada, que tienen exceso de peso y que tienen otros factores de
riesgo como fumar o beber alcohol, tienen un riesgo cardiovascular alto y, por lo tanto,
deben tener un LDL bajo.
También se aprendió que El colesterol total encima de 190 es menos preocupante si los
valores de LDL se encuentran normales, pero la persona deberá tomar ciertos cuidados
como reducir la ingestión de alimentos ricos en grasa para evitar que el colesterol se
mantenga muy alto y perjudique la salud.
10. CUESTIONARIO
1. Haga un esquema con la síntesis del LDL colesterol
2. ¿Cuáles son las causas primarias y secundarias del aumento del LDL colesterol?
Causas primarias
Edad y sexo. El colesterol empieza a elevarse hacia los 20 años y continúa subiendo
hasta los 60 o 65 años. Por ejemplo, a medida que envejeces, el hígado puede cada vez
menos eliminar el colesterol LDL.El colesterol en los hombres tiende a ser más alto
antes de los 50 años que el de las mujeres con esa misma edad. Pero después de los 50
ocurre lo contrario. Los niveles de colesterol LDL en las mujeres tienden a subir con la
menopausia.
Causas secundarias:
Es importante saber que las grasas saturadas dentro de su dieta son las que más suben los
niveles de su c-LDL. Dietas con demasiada grasa saturada, ácidos grasos “trans” y
colesterol son la principal causa de aumento de colesterol en sangre. Y contribuyen de
manera determinante en el elevado número de infartos de miocardio.
Peso: Tener sobrepeso tiende a elevar su nivel de LDL, disminuir su nivel de HDL y
aumentar su nivel de colesterol total. Un índice de masa corporal (IMC) de 30 o más
aumenta el riesgo de tener colesterol alto.
Sedentarismo: el ejercicio ayuda a aumentar los niveles de colesterol HDL (“colesterol
bueno”) a la vez te permite reducir el colesterol LDL (“colesterol «malo”). La práctica
de ejercicio habitual es buena para casi todo, y el colesterol no es una excepción.
Diabetes: los pacientes con diabetes tienen niveles de azúcar elevados por encima de la
normalidad y también presentan un aumento del colesterol LDL y reducción del HDL.
Dado que los niveles de azúcar en sangre dañan la pared de las arterias, ambos factores
unidos suman riesgo.
Fumar: las sustancias nocivas que contiene el tabaco causan daño en las paredes de los
vasos sanguíneos, lo que facilita el depósito de grasa y, por lo tanto, favorece el
desarrollo de aterosclerosis.
Videos https://www.youtube.com/watch?v=LiqsW6gLI_Q
https://www.youtube.com/watch?v=QUgvD-FLirY&t=4s