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, &
Richard A. Martnez. (2017).
Resumen
Las medidas biocorrectivas o los sistemas de biorremediacin consiste principalmente en el
uso de los microorganismos naturales (levaduras, hongos o bacterias) existentes en el
medio para descomponer o degradar sustancias peligrosas y hidrocarburos en sustancias de
carcter menos txico o bien inocuas para el medio ambiente y la salud humana. El proceso
de biorremediacin de hidrocarburos, contaminantes del suelo, llevado a cabo por bacterias
est condicionado por factores biticos y abiticos como los nutrientes, respiracin, pH,
humedad y temperatura propios del microorganismo, los cuales al ser modificados limitan o
favorecen la capacidad metablica de la bacteria y su adaptabilidad con el cambio de
posicin de los cidos grasos de la membrana celular, en este artculo de revisin vamos a
ver la importancia que tienen estas bacterias para la biorremediacin de hidrocarburos y el
uso adecuado de esta, tambin diferentes procesos realizados a partir de las bacterias para la
descomposicin de estas materia prima de la actualidad .
Palabras Clave
cido ctrico, Aspergillus, industria,
Abstract
Keywords
INTRODUCCIN no es lo suficientemente bien con los mtodos
biotecnolgicos (Papagianmi (2007), por lo tanto,
El cido ctrico (2-hidroxi-1,3-propano- una gran proporcin de la demanda mundial de
tricarboxilico) es un cido orgnico natural dbil cido ctrico se santifica a partir de la biotecnologa.
que se encuentra en muchas frutas y verduras, en La produccin de cido ctrico mediante A. niger
especial ctricos; este compuesto, es producido tiene muchas ventajas sobre el uso de otras cepas,
mediante la fermentacin, y se utiliza en el sentido de que aspergillus niger es fcil de
principalmente en la industria farmacutica, textil y encargare de fermentar una variedad de materia
galvanoplastia. Debido a su sabor, su calidad de prima de bajo costo, produciendo un alto
conservante y su capacidad para actuar como rendimiento terico de ms del 70% (Papagianni,
tampon, por esta y otras razones, el cido ctrico se 2007)
encuentran en la lista de ingredientes de muchos
alimentos, (Gueguim-Kana et al, 2012a). HISTORIA
Contribuyendo a la formacin de muchos alimentos El cido ctrico fue descubierto en 1784 por el
como un acidulante, antioxidante y emulsionante, qumico Scheele a partir del jugo de limn, usando
siendo un compuesto de gran demanda mundial de el proceso de cal-sulfrico para aislarlo (AUSTIN,
consumo de cido ctrico, debido a su baja toxicidad 1983). En 1860 se empez a obtener cido ctrico a
en comparacin con otros acidulantes partir de frutas de modo industrial, pero la
(Vasanthabharathi et al, 2013). eficiencia de esta era baja, se necesitaban alrededor
de 30 a 40 toneladas de limones para obtener una
El hongo Aspergillus niger (A. niger), es un tonelada de cido ctrico, por lo que este compuesto
microorganismo el cual produce diversos era muy costoso. El descubrimiento de la capacidad
compuestos de gran inters para las industrias
de produccin de cido a partir de medios
farmacuticas y de alimentos (enzimas, acidos
azucarados de algunos hongos filamentosos se
organicos), y es el principal productor de cido
remonta a 1883, gracias a estudios realizados por
ctrico a nivel industrial por cultivo lquido, debido
Wehlmer, pero no fue hasta 1917 que Currie
a su alto rendimiento de cido ctrico, cuando existe
demostr que la especies de Aspergillus niger
una alta acumulacin de este en el micelio, el cual
acumulaban cido ctrico y oxlico como reservas
se asocia con una alta concentracin de glucosa y de
oxgeno disuelto en el medio liquido (Wolshek y de energa. Los hermanos Pfizer lograron mejorar el
col,. 1999). proceso de produccin de acido ctrico por
fermentacin y purificacin del acido por medio de
El cido ctrico tiene una tasa de produccin anual A.niger y montarlo a escala industrial, eso se debio
de cido ctrico estimada de alrededor de 1,4-1,7 a la escases de formas de importacin y produccin
millones de toneladas y una tasa de demanda de limones debido a la guerra.
estimada entre 3,5 y 5 al ao (Husseimy et al 2010).
La produccin de cido ctrico a partir de mtodos Durante 1960 se hicieron reportes de especies de
sintticos o qumicos, econmicamente hablando, levaduras productoras de acido a partir de
hidrocarburos, con rendimientos cercanos al 100%, dlares en 2008. En el mundo gran parte de la
pero debido al aumento del precio del petrleo y sus produccion se realizaba en europa, siendo la planta
derivados, este mtodo de produccin fue Pfitzer la mayor productora, ahora la mayor
abandonado rpidamente (Rohr, 1983). Poesterores proctora es china y en menor medida canada,
estudios tambin descubrieron que otras especies de acaparando alrededor del 40-50% del mercado por
levaduras y bacterias tenan la capacidad de sus bajos precios y alta calidad
acumular acido ctrico usando como sustrato Los producores destinanan el 70% de su produccion
glucosa (Rohr, 1983), con una mayor ventaja en el a la industria de alimentos y bebidas, 18% a
tiempo de produccin, debido a que este lo realiza industrias farmaceuticas y 18% a otros usos
en un menor tiempo, pero la eficiencia es mucho (Kappor, 1982). En la industria de alimentos su
menor a la de A. niger. empleo equivale a un 55-65%, el 20 y 25% a acido
fosforico, principalmente en bebidas de cola, y un
5% usado es el acido malico (Sinskey, 1983).
PRE-FERMENTADOR #1
CULTIVO EN PROFUNDIDAD O
En esta fase se debe pasar aun fermentador de 20 L,
SUMERGIDO este ser inoculado con el contenido del matraz
Este tipo de proceso se realiza en un biorreactor o anterior. Antes de que d comienzo al proceso es
fermentador tipo air-lift que se caracteriza por agitar necesario preparar previamente el pre-fermentador
el medio por flujo de aire filtrado y ayudado por un con el siguiente medio:
mesclador por aspas, pro en menor medida debido 16 L de melazas diluidas (20% en peso de
a que las aspas provocan un crecimiento sacarosa), esterilizadas y
desmineralizadas (por columna de intercambio
fragmentado y un menor rendimiento; el tipo de
inico). Se pueden
tanques usados favorecen el crecimiento en forma obtener de un fermentador tras la esterilizacin.
de pellets que favorecen la produccin; en este tipo 800 mg de NH4Cl.
de tanques se usan para la produccin por lotes. 540 mg de KH2PO4.
La melaza previamente esterilizada con vapor a 360 mg de MgSO47H2O.
120C para eliminar bacterias y otros hongos 180 mg de FeSO47H2O.
contaminantes. La inoculacin se realiza por 180 mg de ZnCl2.
180 mg de CuSO45H2O.
cultivos en reactores mas pequeos de Como se logra observar, no se suministra solamente
aproximadamente el 10% del volumen del la fuente de carbono sino tambin ciertas cantidades
fermentador, se realiza este tipo de inoculacin de metales en trazas que son importantes para e
seriada hasta llegar a un 10% del volumen total del crecimiento del Aspergillus niger. Todos los
fermentador final, este tipo de incoulacion re realiza componentes deben estar esterilizados.
de la siguiente manera: Una vez preparado el medio de cultivo se inocula
con el contenido del
matraz preparado en la fase anterior. Las
PRIMER INOCULO
condiciones de trabajo que debe tener
el pre-fermentador sern las siguientes:
Para la preparacin del primer inoculo de
Aspergillus niger del tipo ATTC 11414 en el primer
Temperatura de 30 C.
pre-fermentador, se utilizar un matraz obturado
pH inicial de 6.
con algodn en el cual se prepara un medio de
La aireacin debe de estar entre los 1 dm3/min y
cultivo con los siguientes componentes:
los 2 dm3/min, este
50 g de glucosa.
parmetro deber afinarse experimentalmente.
2g de KH2PO4.
Agitacin de 200 rpm.
1g de MgSO47H2O.
8 g de pepsina.
PRE-FERMENTADOR #2 tubera hacia el tanque de lechada. En el tanque de
lechada, el lquido que se va filtrando en la etapa
El producto del pre-fermentador anterior de 20 L anterior, se (se ira mezclando) con una lechada
servir como inculo de otro pre-fermentador de preparada, se produce una reaccin qumica que
600 L. Segn este dato, el pre-fermentador de 600 L transforma el cido clorhdrico del licor post-
ser cargado con un inculo de ms del 3%; aunque fermentado en citrato clcico, el cual es slido y se
esto es perjudicial para la produccin de cido precipita; es necesario un sistema de agitacin que
ctrico, no lo es para el crecimiento de la biomasa promueva la mezcla de las sustancias y un serpentn
pues, segn estudios consultados, a mayor volumen refrigerante, debido a lo exotrmico de la reaccin.
de inculo ms crecimiento se obtiene. (La reaccin de la lechada de cal se realiza en
descontinuo).
El medio de cultivo que se utilizar en este pre-
fermentador ser el siguiente: La masa proveniente de la lechada, es entonces
transportada a un reactor, el cual se calienta hasta
480 L de melazas diluidas (20% en peso de una temperatura cercana a la ebullicin, crendose
sacarosa), esterilizadas y desmineralizadas (por un vapor condensante que se hace circular por el
columna de intercambio inico). interior del serpentn del reactor.
24 g de NH4Cl.
14,40 g de KH2PO4. Una vez calentado el licor, se enva por una tubera
9,60 g de MgSO47H2O. hacia un nuevo filtro de tambor rotatorio al vaco, el
4,80 g de FeSO47H2O. cual separa el citrato clcico en forma de masa y lo
4,80 g de ZnCl2. enviara mediante una cinta transportadora hacia el
4,80 g de CuSO45H2O. reactor de descomposicin del citrato. El lquido
filtrado (Licor-post-fermentado sin cido ctrico) es
El tiempo de fermentacin, en este caso, estar entonces almacenado.
comprendido entre 2 y 3 das, el tiempo exacto
deber de afinarse una vez en marcha la planta. La En el reactor de craqueo, la torta de citrato cancuco
concentracin de clulas viables tras el tiempo de se ira mezclando con una disolucin de acdo
crecimiento deber estar entre los 5,5 y 25 millones sulfrico, producindose una reaccion quemica que
de esporas por litro. Una vez acabada esta pre- forma yeso el cual es solido y precipita, dejando
fermentacin ya est preparado el inculo de uno de libre la solucin de cido ctrico. Tambin existe un
los fermentadores principales; este inculo obtenido serpentn de refrigeracin el dispersar el calor
esta en cantidad ideal para que en el fermentador producido durante la reaccin. (La reaccin ser
industrial se produzca la mxima cantidad de cido discontinua).
ctrico.
Tras el craqueo del citrato clcico, la masa
reaccionante es llevada a un filtro de banda de vaco
que ser el sulfato clcico o yeso del lquido que
PROCESO DE SEPARACIN contiene el cido ctrico. El yeso se lleva a
almacenamiento, mientras que el lquido filtrado
ser conducido por tubera hasta un sistema
El proceso de separacin, comienza con la llegada combinado de desmineralizacin y carbn activado
del licor post-fermentado al filtro rotatorio a vaco que eliminara impurezas que an tiene el producto.
con pre-capa, el cual separa el micelio del
microorganismo muero, el cual ser almacenado. El
lquido filtrado, compuesto por el licor post-
fermentado sin micelio, es transportado mediante
dependiendo delas caractersticas deseadas de
cristalizacin, ya sea grnulos, polvo o escamas.
PROCESO DE PURIFICACIN.