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Potassium liquiUV

Prueba UV enzimtica en suero o plasma

Clculo y calibracin
1. Este ensayo debe calibrarse empleando [STD1] y [STD2] includos en el
estuche.

Presentacin del estuche


[REF]
10120

2. Grafique la lnea de calibracin usando las dos medias A para [STD1] y


[STD2] y las concentraciones respectivas.

40 ml

Estuche completo

[IVD]

Mtodo
Los iones de potasio se determinan enzimticamente mediante la
actividad de la piruvato kinasa que depende de potasio empleando
fosfoenolpiruvato (PEP) como sustrato. El piruvato producido reacciona
con NADH + H+ en presencia de LDH y forma lactato y NAD+. La
disminucin correspondiente de la absorbancia a 340 nm es proporcional
a la concentracin de potasio.
Principio de la reaccin

Piruvato + ATP

Piruvato + NADH + H
Contenido
30 ml

[SUB]

Caractersticas de la ejecucin
Linealidad
La reaccin es lineal a concentraciones de potasio entre 2 y 7 mmol/l.
Muestras con concentraciones ms altas deben diluirse 1 + 1 con salina
fisiolgica (0,9%). Multiplique el resultado por 2.

www.human.de/data/gb/vr/en-k.pdf o

Piruvato-kinasa
+

4. Este ensayo debe calibrarse cada 9 semanas.

Las caractersticas de la ejecucin de esta prueba pueden consultarse enel


informe de verificacin, accesible a:

K+

PEP + ADP

3. La concentracin de la muestra se interpola desde la lnea de


calibracin con su A respectivo.

www.human-de.com/data/gb/vr/en-k.pdf

LDH

Valores normales
Suero: 3,6 - 5,5 mmol/l

Lactato + NAD

Plasma: 4,0 - 4,8 mmol/l

Reactivo de sustrato (R1)


Buffer Tris
Criptando
PEP
ADP
-oxoglutarato
NADH
GLDH
PK

250 mmol/l
12 mmol/l
3,3 mmol/l
3,15 mmol/l
1,2 mmol/l
0,35 mmol/l
11 U/ml
1,2 U/ml

[ENZ]

10 ml

Reactivo enzimtico (R2)


LDH

65 U/ml

[STD1]

3 ml

Patrn
Potasio (K+), tapa roja

2,0 mmoI/l

[STD2]

3 ml

Patrn
Potasio (K+), tapa verde

7,0 mmoI/l

Control de calidad
Pueden emplearse todos los sueros de control con valores de potasio
determinados con este mtodo.
Notas
1. Utilizacin en analizadores automatizados: Recomendamos fuertemente examinar un posible efecto de arrastrecausado por otros parmetros/ reactivos en la aplicacin sobre analizadores automatizados!
2. Todas las muestras utilizadas en este ensayo deben considerarse como
potencialmente infecciosas. Por favor, tome las medidas de precaucin
comunes necesarias.
3. Dado que las hemates contienen una cantidad de potasio elevadas de
alrededor de un 25 veces, deben separadarse del suero en un perodo de
no ms de una hora despus de la recogida de sangre. De lo contrario,
se encontrarn concentraciones de potassium elevaas.

Preparacin de reactivos
Todos los reactivos son listos para usar.

4. Trazas de detergentes producen turbidez que lleva concentracionesde


potasio falsamente elevadas. Por eso eben evitarse.

Estabilidad del reactivo


Los reactivos ypatrones son estables hasta la fecha de caducidad indicada.
cuando se almacenan a 2...8C, y 9 semanas despus de abierto, si se
tapan bin despus de cada uso.

5. El material de vidrio contaminado es la ms alta fuente de error. El


material de vidrio debe por eso enjuagarse cuidadosamente con agua
desionizada. El material de plstico desechable puede contener
plastificantes que pueden reaccionar con el reactivo y por eso no se
recomienda para el uso.

Muestras
Suero y plasma con heparina.
Procedimiento
Longitud de onda

340 nm

Paso de luz:

1 cm

Literatura
1. Berry M.N. et al., Clin.Chem. 35, 817 (1988)
2. Tietz N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, Saunders, Philadelphia,
4th Edit., 984 (2006)

Temperatura:

37C

Medicin:

Calibracin a dos puntos

EN-K

INF 1012001 E

07-2012-03

Esquemade pipeteo
Pipetee en cubetas
[SUB]

Muestra o
[STD1] o [STD2]

750 l
20 l

Mezcle, incube para 5 minutos a 37 C, y despus agregue [ENZ]


[ENZ]

250 l

Mezcle, incube para 2 min, lea la absorbancia inicial y al mismo tiempo


encienda el cronmetro. Lea la absorbancia de nuevo exactamente
despus de 1, 2 y 3 minutos. Calcule la media A desde las tres A
mesuradas.

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