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UNIVERSIDAD NORBERT WIENER

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


ESCUELA ACADÉMICA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR


PRÁCTICA N° 8

“EXTRACCIÓN DEL ADN”

INTEGRANTES:
• AUSHUQUI ALVARADO ANGEL SEBASTIÁN
• CUNZA RIVERA MELANY DAYANA
• GAVIDIA MEGO FRANCHESCA NAOMY
• PASCUAL CLEMENTE MÍA FERNANDA
• RAMIREZ MARTEL SHARON NIKOL
• UNTON VALDEZ RUTH YAQUELA
• SÁNCHEZ JHONG ALESSA JANNET

CICLO: I

SECCIÓN: MD1N4

DOCENTE: NOBLECILLA MAGGIE CAROLINA

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 24 DE MAYO DEL 2023

FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 31 DE MAYO DEL 2023

2023
I. INTRODUCCIÓN
El código genético de la vida está basado en cuatro bases nitrogenadas:
Adenina (A), Timina (T), Citosina (C) y Guanina (G), las cuales componen al
ADN (es el material que contiene la información hereditaria de todo ser vivo,
la mayoría de células de una persona tienen el mismo ADN y este suele
encontrarse en el núcleo de la célula o también en las mitocondrias, en este
caso, en el hígado de un pollo específicamente, y en una porción de plátano,
donde por lógica, presentan un ADN distinto entre sí).
Tiene como función más importante el resguardar la información genética, la
cual caracteriza y diferencia un individuo de otro, tantos animales, plantas,
frutas, etc., los cuales, en el siguiente experimento, están ligados a un hígado
de pollo y un trozo de plátano.
Se llevará a cabo y se tendrá como objetivo la extracción de ADN, el cual es
un método donde se utilizan técnicas químicas (uso de alcohol helado,
detergente) y física (uso del mortero) para poder separar y purificar el ADN
con el propósito de analizarlo, estudiarlo o manipularlo.

II. LOGROS DE APRENDIZAJE


Al finalizar la práctica, los alumnos somos capaces de aislar y observar el DNA
provenientes de una célula vegetal (plátano) y de una célula animal (hígado
de pollo).

III. MATERIAL Y MÉTODO

• Plátano (célula vegetal). • Embudo.


• Piña. • Tubos de ensayo.
• Lavavajillas líquido. • Pipeta pasteur.
• Agua destilada. • Batidora.
• Sal. • Vaso de precipitados.
• Agua. • Hígado crudo de pollo.
• Etanol 95° (helado). • SDS 20%.
• Balanza. • Cloruro de sodio 0.2 mM.
• Barilla agitadora. • Mortero y pilón.
• Erlenmeyer. • Arena fina lavada.
• Termómetro. • Gasas.
• Colador y filtro.

IV. PROCEDIMIENTO
EXTRACCIÓN DE DNA EN CÉLULA VEGETAL DE PLÁTANO
1. Pesar 100 gr de plátano.
2. Trituramos el plátano con un tenedor hasta obtener una masa
homogénea.
3. Depositarlo en el vaso precipitado.
4. Pesamos 3 gr de sal.
5. En una probeta, añadimos 100 ml de agua destilada y 10 ml de
detergente líquido, se mezcla todo en un Erlenmeyer, no debemos
formar muchas burbujas.
6. Añadimos detergente en el vaso precipitado que contiene el plátano y
lo mezclamos sin formar muchas burbujas.
7. Añadimos agua a calentar y con un termómetro medimos la
temperatura hasta 60° C.
8. Introducimos el vaso precipitado con la mezcla y se removió 15 minutos
con la varita agitadora.
9. Mantuvimos la temperatura y no se hizo burbujas.
10. Preparamos un recipiente con agua y hielo e introducimos el vaso de
precipitados durante 5 minutos removiendo constantemente.
11. Al mismo tiempo, preparamos el zumo de piña, trozando una piña y
triturando la parte central.
12. Posterior, filtramos la pasta con un colador para obtener el zumo.
13. Preparamos un erlenmeyer con un colador encima y vertemos el
contenido del vaso de precipitados.
14. Preparamos un embudo con un papel de filtro encima y vertemos la
solución obtenida anteriormente recogiendo el líquido en un tubo de
ensayo.
15. Con una pipeta Pasteur cogemos 1ml de zumo de piña y lo añadimos
a 5ml del extracto en un tubo de ensayo. Dejamos que actúe el zumo
en la solución de 2 o 3 minutos.
16. Sacamos el alcohol del congelador y preparamos en un tubo de
ensayo aproximadamente el mismo volumen de alcohol que de la
solución de interés.
17. Vertemos muy lentamente el alcohol en el tubo de ensayo con la
solución.

EXTRACCIÓN DE ADN DE CÉLULA ANIMAL DE HÍGADO DE POLLO


1. Pesar 10 mg de hígado de pollo.
2. Triturar hígado de pollo en 50 ml de agua corriente con un mortero con
arena lavada.
3. Filtrar varias sobre una gasa para separar los restos de tejidos que
hayan quedado por romper.
4. Añadir al filtrado un volumen igual de NaCl 0.2 nM.
5. Añadir 1ml de lavavajilla líquido.
6. Añadir con una pipeta 50 ml de alcohol de 96° (frio), se realiza de forma
que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas.
7. Introducir una bagueta e ir removiendo en la misma dirección.
V. RESULTADOS

EXTRACCIÓN DE ADN ANIMAL

Se visualiza la extracción del ADN del


hígado gracias al uso del alcohol frío y
su importancia al agregarlo por las
paredes del tubo, ya que se crea un
campo o entorno en donde el ADN
crea una especie de “repulsión” por el
alcohol a diferencia de la solución
acuosa en donde estaba presente. Se
obtiene como resultado la
precipitación y formación de una capa
concisa entre el agua en donde se
encontraba el hígado y el alcohol, el
cual es una masa en donde se
encontraba rastros de ADN.
Este proceso se basa en la propiedad
del ADN de ser menos soluble en
alcohol frío que en agua. Es por esto
que el ADN se separa de la solución
ante la presencia del alcohol frío.
EXTRACCIÓN DE ADN VEGETAL

TUBO A
Se observa la extracción del ADN del
plátano debido a que, al agregar
alcohol frío por las paredes del tubo, se
crea un entorno donde el ADN se
siente menos atraído por el alcohol
que por la solución acuosa en la que
se encuentra. Como resultado, el ADN
comienza a agruparse y precipitar,
formando hilos que se vuelven visibles
en la superficie del tubo.
Este proceso se basa en la propiedad
del ADN de ser menos soluble en
alcohol frío que en agua. Por lo tanto,
cuando se agrega el alcohol frío, el
ADN se separa de la solución y se
acumula en la superficie.

VI. CONCLUSIONES

• El ADN es muy importante en todos los seres vivos ya que estamos


compuestos de este.
• Contiene la información de los organismos y es responsable de su
funcionamiento,
• Células animales con el hígado de pollo pudimos separar el ADN de
otros componentes celulares o las proteínas, tuvimos que romper la
membrana plástica para poder acceder al núcleo de la célula, vimos
como resultado la formación de una capa en donde se encontraba el
ADN.
• Células vegetales utilizamos el plátano para la extracción de ADN,
tuvimos que romper la membrana y la pared celular, lo que nos permitió
tener una idea más cercana de los filamentos obtenidos del tejido
vegetal, utilizamos métodos físicos y químicos para el procedimiento .
• Para poder extraer el ADN también se necesitó que el alcohol esté frio
y el macerado con una temperatura fresca y finalmente pudimos notar
en forma de hilos.
VII. CUESTIONARIO

1. ¿Qué función cumple el lavavajillas en el proceso de extracción de


ADN?
El jabón, mediante un proceso conocido como solubilización lipídica,
desestabiliza las membranas celulares al interactuar con los lípidos que
las componen. Esto se debe a las propiedades anfifílicas del jabón, es
decir, su capacidad para interactuar tanto con sustancias lipídicas como
acuosas. Al entrar en contacto con la membrana celular, las moléculas de
jabón se insertan entre los lípidos que forman la bicapa lipídica,
interrumpiendo las fuerzas de atracción intermoleculares entre ellos.

2. ¿Para qué́ utilizamos el zumo de piña en la extracción de ADN?


El zumo de piña contiene una enzima llamada bromelina, que tiene
propiedades proteolíticas, es decir, tiene la capacidad de descomponer las
proteínas. La bromelina actúa desnaturalizando y rompiendo las proteínas
presentes en las células. Al hacerlo, facilita la liberación del ADN al
degradar las proteínas que se encuentran asociadas al ADN y que podrían
estarlo protegiendo. Esto permite un mayor acceso al ADN y facilita su
extracción.

3. ¿Qué función cumple el etanol en el proceso de extracción de ADN?


Cuando se añade alcohol (en este caso etílico) se produce una
disminución en la solubilidad del ADN. El etanol actúa como un
deshidratante, ya que tiene una afinidad por el agua y tiende a "robar" las
moléculas de agua de la solución. Cuando el alcohol reemplaza el agua
en la solución, las interacciones entre las moléculas de ADN se vuelven
más fuertes que las interacciones con el agua, lo que lleva a la formación
de agregados o precipitación de ADN. Esta precipitación permite su
separación de otras moléculas presentes en la solución, como proteínas y
lípidos, que pueden interferir en experimentos.

4. ¿Para qué́ utilizamos sal en el proceso de extracción de ADN?


Se utiliza sal como un agente para precipitar y separar el ADN de otros
componentes celulares y proteínas presentes en la muestra. Además,
ayuda a los demás componentes como el lavavajillas, zumo de piña o
etanol en sus propios procesos, como aumentar la fuerza iónica de la
solución, lo que afecta la interacción entre las moléculas de ADN y las
proteínas. Al aumentar la fuerza iónica con la sal, se reducen las
interacciones electrostáticas entre el ADN y las proteínas, lo que facilita la
separación del ADN de otras moléculas. De la misma manera, la alta
concentración de sal provoca cambios en la solubilidad del ADN,
promoviendo su precipitación. El ADN se vuelve menos soluble en
soluciones salinas, lo que lleva a su agrupación y posterior precipitación.
La sal también ayuda a eliminar las proteínas presentes en la muestra. Las
altas concentraciones de sal desestabilizan las interacciones proteína-
proteína, provocando la precipitación de las proteínas.

5. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

• Alberts et al. Introducción a la Biología Celular. México: Editorial Médica


Panamericana; 2020.
• Marcos-Merino, José María, Gallego Rocío Esteban, Ochoa de Alda
Jesús Gómez. Extracción de ADN con material cotidiano: desarrollo de
una estrategia interdisciplinar a partir de sus fundamentos científicos.
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58-69. Disponible en:
http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-
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• Fernandes AZ. Extracción de ADN: experimento casero (con explicación)
[Internet]. Toda Materia. 2019 [citado el 29 de mayo de 2023]. Disponible
en: https://www.todamateria.com/extraccion-adn-experimento/

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