Aqu estn algunas de las Pruebas Bioqumicas ms frecuentes:

Fermentacin de la lactosa (Mc Conkey) Agar Hierro de Kliger (KIA) Prueba del
Indol Citrato de Simmons Agar Hierro Lisina (LIA) Agar Urea de Christiansens
Prueba de la Fenilalanina (PPA) Reduccin de los Nitratos Movilidad RM - VP
Oxidasa y Catalasa
Fermentacin de la lactosa (Mc Conkey)
El agar Mc Conkey es un medio slido, diferencial y selectivo. Se usa para la
discriminacin de bacterias con capacidad de fermentar la lactosa (Lac + y -
).Composicin g/l :
- Peptona 20.0 : fuente de nitrgeno y carbono para las Lac -.
- Lactosa 10.0 : fuente de carbono para las Lac +.
- Sales biliares 2.5 : le confiere carcter selectivo, inhibiendo el crecimiento de Gram +.
- Cloruro sdico 5.0 : para mantener la tonicidad del medio (evitar osmosis).
- Rojo neutro 0.05 : indicador que va hacer que el medio vire de coloracin. Si las
bacterias son Lac +, producirn cidos derivados de la fermentacin que darn al medio
un aspecto rosceo; si por el contrario son Lac -, el medio se basificar por el uso de la
peptona y se tornar amarillo.
- Cristal violeta 0.001 : interfiere junto con las sales biliares en la selectividad del
medio.
- Agar-agar 15.0: da consistencia al medio







Prueba del Indol
Pone de manifiesto la presencia de la encima Triptofanasa en nuestras bacterias, si esta
presente degradar el triptofano y liberar al medio Indol, para revelar su presencia usaremos
el reactivo de Kovac; si hay indol se formar un anillo rojo en la superficie, sino este ser
amarillo. Para esto sembramos en caldo con triptofano.







Citrato de Simmons
Se usa para determinar si el organismo es capaz de utilizar el citrato como nica
fuente de carbono y compuesto amoniacales como nica fuente de nitrgeno. El
medio contiene citrato sdico, fosfato de amonio y azul de bromotimol como
indicador; este se tornar azul cuando el medio se basifica. Las bacterias que
metabolizan el citrato liberan iones amonio al medio (degradacin del fosfato
amnico) lo que provoca que este se alcalinice y el indicador vire azul.

Agar Hierro Lisina LIA
Este medio pone de manifiesto:
- Si la bacteria posee la enzima descarboxilasa (LDC). el
medio contiene como indicador Purpura de Bromocresol,
cuando la lisina se descarboxila, el medio se acidifica y
el indicador vira amarillo en el fondo.
- Si es productora de c. sulfhdrico, en cuyo caso el
precipitado negro nos impedir ver si es LDC + o -.
- Si es productora de gas.
1. LDC -, NO H2S, PRODUCTORA GAS.
2. LDC + -, PRODUCTROA H2S Y GAS.
3. LDC - , NO H2S, PRODUCTORA DE GAS
Agar UREA
Pone de manifiesto la actividad de la enzima ureasa, para degradar la urea en dos molculas
de amoniaco. El medio lleva como indicador Rojo fenol, que se torna amarillo cuando es
negativo y rosa cuando es positivo. Hay que tener precaucin por que tambin puede ocurrir
que no se produzca cambio de coloracin, en este caso es negativo. el medio posee un color
rosceo (mucho menos intenso que los verdaderos positivos) lo
que puede llevarnos a error (considerar falsos positivos).
Prueba de la Fenilalanina Desaminasa (PPA)
Determina la capacidad e la bacteria para desaminar el aminocido
fenilalanina en cido fenilpirvico por accin de la enzima
Fenilalanina desaminasa, esto va a producir una acidificacin del
medio, que se va a poner de manifiesto mediante la aplicacin de
0,2 - 0,3 mL de Cloruro frrico al 10 %, si hay en el medio c.
fenilpirvico aparece una coloracin verde-azulada.





PPA - PPA +
Reducion de Nitratos
Va a poner de manifiesto la capacidad de transformar los Nitratos en Nitritos. Para esto
inoculamos tres tubos en el medio para dicha prueba y los incubamos 24, 49 y 72 horas
respectivamente. Tras 24 h. aadimos 2 o 3 gotas del reactivo "A-B", si aparece coloracin rojo
cereza indica que es positivo, si no aparece coloracin es un presunto negativo, para
confirmarlo basta con aadir una punta de esptula de Zinc y si realmente es negativo se
tornara rojo. Si el ultimo da (72 h.) la bacteria da negativo, entonces podemos decir con
seguridad que no tiene capacidad para reducir los nitratos.






Positivo Presunto negativo
Movilidad
Se realiza una siembra en picadura, y tras incubar 24 h. observamos si se ha producido
crecimiento entorno a la zona inoculada.







Rojo de Metilo - Voges Proskauer
Las enterobacterias son anaerobios facultativos que usan la glucosa en dos fases: 1
Degradan la glucosa por la va oxidativa hasta que consumen el oxigeno del medio. 2
Metabolizan la glucosa por la va fermentativa, que puede ser de dos tipos:
- Fermentacin cido mixta: los productos finales son cidos orgnicos, que disminuyen
el pH del medio, lo que se manifiesta con el Rojo de metilo.
- Fermentacin butiln-gliclica: los productos finales, como butanodiol y etanol, son
neutros y producen como intermediarios acetoina, que puede detectarse con el reactivo
de Voges Proskauer, el react. A que es KOH, y el B alfa-naftol, estos reaccionan con la
acetoina originando coloraciones violceas.
Para realizar el ensayo, dividimos el medio inoculado y que ha incubado tres das en dos
tubos (la mitad en cada uno) y revelamos con los reactivos.
Rojo de metilo (posit. y negat.)






Voges Proskauer (negativo)



Prueba de la Oxidasa y la Catalasa
Ambas pruebas se caracterizan por poder realizarse de forma inmediata a partir de
nuestro cultivo problema.
La oxidasa, es una prueba que se usa para poner de manifiesto el sistema
citocromoxidasa, que se encuentra en organismos aerobios, anaerobios facultativos y
ocasionalmente en microaerfilos, careciendo los anaerobios estrictos de esta. El
mtodo ms frecuento es el indirecto, se realiza en un trocito de papel de filtro, de forma
que colocamos una gota del reactivo de Kovacs en el papel y posteriormente tomamos
parte de nuestra colonia con el asa de siembra, que frotaremos sobre el papel. El
resultado ser positivo se se produce una reaccin de color a los pocos segundos.
La catalasa, va a degradar el peroxido de oxigeno que se produce como consecuencia de
la acumulacin de oxigeno. Para esto en un tubo de ensayo colocamos 2 o 3 ml de
peroxido de oxigeno, tomamos muestra con el asa de siembra y la introducimos en el
tubo, el resultado ser positivo si se observa la produccin de pequeas burbujas.
http://perso.wanadoo.es/microdominguez/a.htm
http://perso.wanadoo.es/microdominguez/coprocultivo.htm
http://inmunologia.galeon.com/
http://www.ispch.cl/lab_amb/serv_lab/salmonella.html
http://wwwmesa4.blogspot.com/
http://microbiologiabioanalisis.blogspot.com/2012/06/bienvenidos-al-blog-de-
microbiologia.html
http://tamyvelasquezporta.blogspot.com/2013/07/consideraciones-generales-para-
lectura.html
http://quizlet.com/17046489/microbiology-lab-final-flash-cards/
http://miyospiral.blogspot.com/2013/12/practica-8-coprocultivo.html
http://ankirinaslaboratory.tumblr.com/post/85160317597/bateria-bioquimica-de-klebsiella-
pneumoniae
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identificacin salmonella a shared