UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E
HISTOPATOLÓGICO

INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

PERÍODO ACADÉMICO ABRIL 2023-AGOSTO 2023
ASIGNATURA BACTERIOLOGIA SEMESTRE: 4 PARALELO:
A
NOMBRE DEL ANA CAROLINA GONZÁLEZ R
DOCENTE
FECHA 23/05/2020
NÚMERO DE 4 HORA: 07:00-11:00H DURACIÓN: 3H
PRÁCTICA
NOMBRE DE LOS ESTUDIANTES:
Jaya Guilcapi Vani Yadira
Morales Cando María Daniela
Quispe Moreta Erika Jazmín
Toscano Toscano Leonela Dayan
Torres Gonza María Belén
Yubaile Alcocer Samantha Gisela
LUGAR DE LA LABORATORIO E303
PRÁCTICA
TÍTULO DE LA UNIDAD BACTERIAS GRAM POSITIVAS Y GRAM NEGATIVAS
TEMA DE LA Diagnóstico microbiológico de las infecciones del tracto respiratorio
PRÁCTICA superior (Exudado faríngeo y secreción nasal)
RESULTADO DE APRENDIZAJE.
Diagnostica e identifica las infecciones de bacterias Gram positivas y Gram negativas en
órganos y Sistemas. Evalúa la sensibilidad y resistencia bacteriana con la ayuda del
antibiograma.
Desarrollar la estrategia metodológica para el diagnóstico
OBJETIVO GENERAL
microbiológico de infecciones del tracto respiratorio superior
1.-Reconocer los microorganismos de la flora habitual y los
principales patógenos del tracto respiratorio superior.
2.-Esquematizar los pasos para la obtención y procesamiento de
muestras del tracto respiratorio superior
3.- Obtener y procesar muestras de exudado faríngeo y secreción
Objetivos específicos nasal
4. Obtener y procesar muestras de secreción y raspado conjuntival
para la investigación de agentes productores de conjuntivitis.
5. Identificar los microorganismos de interés clínico según los
esquemas convencionales del diagnóstico microbiológico

FUNDAMENTO TEÓRICO:
El tracto respiratorio (TR) está en contacto directo con el medio ambiente y se encuentra expuesto
continuamente a los microorganismos suspendidos en el aire que respiramos. El aparato respiratorio
está divido anatómicamente en superior (TRS) e inferior (TRI). EL TRS comprende: la boca, fosas
nasales, orofaringe, nasofaringe y senos paranasales. Otra clasificación incluye al oído medio por
la comunicación estrecha que existe entre éste y la nasofaringe a través de la trompa de Eustaquio,
sin embargo, los procesos infecciosos de oído medio serán considerados en un capítulo separado.
Las infecciones de vías respiratorias superiores (ITRS) afectan a la población en general, son causa
frecuente de consulta médica, sobre todo en la edad pediátrica, provocando ausentismo escolar y
laboral. Las ITRS involucran a la cavidad nasal, faringe y senos paranasales. El 80% de estas
infecciones son de etiología viral, en segundo lugar son producidas por bacterias y un reducido
número de casos son de origen micótico.
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ETIOLOGÍA DE LAS INFECCIONES DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR.

El 80% de las ITRS son de etiología viral. El resfriado común es causado principalmente por el
grupo de los rinovirus y coronavirus.
La faringitis aguda en su gran mayoría es causada por rinovirus, adenovirus, parainfluenza y
coxsackie. La causa bacteriana más frecuente de faringoamigdalitis y, por lo tanto, susceptible de
ser tratada con antimicrobianos es Streptococcus pyogenes, responsable de 15 a 30% de las
faringitis agudas en niños y de 5 a 10% en adultos.(1)
En la tabla 7 se señalan otras bacterias causantes de faringitis, entre éstas tenemos a los
Estreptococos beta-hemolíticos de los grupos C y G que se han asociado a brotes epidémicos de
faringitis transmitidas por alimentos, a faringitis endémica en comunidades cerradas donde
concurren jóvenes y adultos.
Otros agentes etiológicos poco frecuentes lo constituyen: Arcanobacterium haemolyticum, y
Neisseria gonorrhoeae, esta última debe ser considerada entre los jóvenes y adultos como
consecuencia del contacto buco-genital.(1) Existen microorganismos que forman parte de la
microbiota habitual de la faringe, algunos participan en la etiología de infecciones del tracto
respiratorio bajo, sin embargo, no se consideran patógenos en faringoamigdalitis aguda en
pacientes inmunocompetentes; es el caso de H. influenzae, S. pneumoniae, M. catarrhalis y S.
aureus. H. influenzae es un agente causal de faringitis en niños.(1)
En pacientes inmunocomprometidos, se debe informar el hallazgo de Candida sp, bacilos
gramnegativos y S. aureus. Tanto en la sinusitis como en otitis media, entre los microorganismos
etiológicos frecuentemente implicados se señala a: S. pneumoniae, H. influenzae y, en menor
proporción M. catarrhalis.
La Angina de Vincent es producida por una mezcla de bacterias anaeróbicas y espiroquetas. Estos
cuadros son muy raros y se producen en adultos jóvenes.
 Coloración de Hansel:
 Fije la lámina con metanol absoluto por 3 minutos
 Cubrir la lámina con el colorante durante 1 minuto.
 Agregar agua destilada sobre el colorante por 30 segundos
 Lavar con agua destilada
 Decolorar ligeramente con metanol (dos a tres gotas)
 Dejar secar y examinar el extendido con objetivos de 10X y 40X (no utilice aceite de
inmersión

Muestra de Secreción nasal

Esta muestra solo se utiliza para buscar portadores de S. aureus o en diagnostico etiológico, no es
útil para el diagnóstico etiológico en caso de rinitis ni en caso de otitis media ni cuadros
respiratorios (1).

Pruebas que analizan

 PCR nasal (Reacción de cadena polimerasa)
Materiales
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 Hisopo de algodón con medio de transporte.

 Lamina de vidrio (portaobjetos).
Condiciones del paciente:
 No requiere ayuno
 Paciente no debe ingerir medicamentos antihistamínicos y antialérgicos, 2 días previos al
examen, sin prescripción médica
 Evitar las gotas o lavados nasales antes de la toma de la muestra (2).
Procedimiento
 Introducir el hisopo dentro de la fosa nasal del paciente, tan profundo como el paciente
soporte, frotando la mucosa, con movimientos rotatorios, para que se impregne con la
secreción nasal.
 Realizar este mismo procedimiento en cada fosa nasal.
 Con cada hisopo impregnada de secreción nasal, realizar extendido sobre cada portaobjeto,
de forma suave y a manera de rodillo sobre dicha lámina.
 Identificar cada lámina de vidrio, con lápiz permanente, con el nombre completo y número
del paciente (3).

Transporte Almacenamiento
 Enviar de inmediato  Tener la muestra en
al laboratorio (no una temperatura de 5
superior a dos a 10°C.
horas).

Muestra de secreción faríngea

Un cultivo del exudado faríngeo es una prueba para detectar microbios que pueden causar una
infección (4).

Pruebas que analizan

 Prueba rápida de estreptococo
 Prueba rápida de antígenos
Materiales
 Bajalenguas
 Hisopo de algodón con medio (Stuart y Amies).

Condiciones del paciente

 No tomar antibióticos.
 No haber ingerido agua.
 Sin aseo bucal.
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 Tomar la muestra 72 horas después.

 Tener un Ayuno

Procedimiento
 Se sujeta la lengua del paciente con el abatelenguas y se frota con firmeza la pared posterior
de la garganta (orofaringe) con el hisopo de algodón seco y estéril, se debe tener cuidado
de no tocar la epiglotis para no provocar el vómito en el paciente.
 El hisopo se introduce en el tubo de ensayo, la parte del hisopo que contiene la muestra se
mantiene dentro del tubo, el resto se corta y se desecha.
 Cada tubo se marca colocando un adhesivo en el cual se escribe el nombre del paciente y la
fecha de la toma (4).

Transporte Almacenamiento
 Temperatura:  Tener la muestra en
ambiente una temperatura de 4
 Plazo de entrega en el a 8°C.
laboratorio:
 Recomendado: ≤ 2 h
− Límite: 24 h

MATERIALES Y MÉTODOS
Equipos Materiales Reactivos
Microscopios, mecheros Asas, placas, láminas portaobjeto Coloración de
Gram,
Estufa Hisopos estériles, Medios de cultivo: agar Hansel
Sangre, agar manitol salado, Plasma
citratado, bajalengua.
PROCEDIMIENTO / TÉCNICA:
Obtención y procesamiento de exudado nasal

Condiciones previas del paciente:

No debe estar recibiendo antibióticos, ni antiinflamatorios, ni
antialérgicos.
Procedimiento:
1. Elevar la punta de la nariz con el dedo pulgar.
2. En caso de ausencia de secreción, humedecer la punta del
hisopo en solución salina estéril e introducirlo hasta la base de la
fosa nasal, donde se rota suavemente.
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3. Dejar reposar por 10 s, retirar el hisopo con cuidado de evitar la contaminación del mismo con
las bacterias de la piel, proceder a realizar los extendidos finos sobre láminas portaobjetos
nuevas y limpias para teñir con Gram y Hansel.

4. Proceder de igual forma con un segundo hisopado para la siembra en medios de cultivo: agar
sangre (AS) y agar manitol salado (AMS)

5. Incubar los medios de cultivo a 36 ºC, en condiciones de aerobiosis por 18 a 24horas.

6. Con las colonias formadas proceder a realizar la tinción

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7. Procedemos a ver microscópicamente

Obtención y procesamiento de exudado faríngeo

El cultivo faríngeo es el método estándar para documentar la presencia de S. pyogenes en la

faringe, esta prueba alcanza una sensibilidad del 90 a 95%.
Condiciones previas del paciente:
El paciente no debe haber recibido antibióticos en los últimos 8 días, previos a la obtención de
la muestra.
El paciente debe acudir en ayunas al laboratorio.
Debe cepillarse los dientes y no practicar gargarismo.
Procedimiento:
1. Inspección de la faringe: ubicar al paciente en una posición
cómoda y con buena iluminación, deprimir la lengua con el baja
lengua, visualizar la fosa amigdalina y faringe en busca de
exudado posterior, presencia de pseudomembrana o placas.
2. Indicar al paciente que abra la boca y que pronuncie un largo
“ah”, el cual sirve para elevar la úvula y evitar las náuseas.
3. Introducir la paleta para evitar que la lengua no nos permita
tomar la muestra

4. Introducir el hisopo y frotar enérgicamente ambas amígdalas y la pared posterior de la faringe

con movimientos de barrido.
5. Retirar el hisopo cuidando de no tocar las paredes laterales de orofarínge, úvula, lengua,
encías y dientes.

6. Extender la muestra con suaves movimientos sobre la superficie de los portaobjetos para
realizar los frotis que serán teñidos al Gram y con la técnica de Hansel.
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7. Obtener un segundo hisopado de fauces para la siembra en AS de carnero, siguiendo la

técnica de estriado sobre superficie, realizando siembras de profundidad con el asa para la
detección de hemolisinas estreptocócicas .
8. Siembra en los Agares correspondientes

9. Incubar el AS a 36ºC, en condiciones de 5-7% CO2, por 24-72 horas.

10. Con el resultado de los cultivos procedemos a realizar la tinción

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RESULTADO (Gráficos, cálculos, etc.)

Toma de muestra de exudado faríngeo

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Toma de muestra: Secreción Nasal

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Exudado faríngeo

AS ó AS con STX

Gram

Incubar a 36 º C por 18-48 h

Si no se observan colonias Colonias pequeñas β-hemolíticas

Gram Subcultivar en AS y
Negativo o

 Pruebas

Report
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Exudado nasal

Gram

Incubar a 37 º C por 18-24 h

Crecimiento
bacteriano

Negativo reincubar Gram

Negativo o
Gram
Lectura de Pruebas flora habitual
bioquímicas y
antibiograma

Reporte
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RESULTADO EXUDADO FARINGEO

REPORTE

Nombre y Apellido: Samanta Yubaille FTM: 16-05-2023

Muestra: Exudado Faríngeo Fecha de emisión: 16-05-2023

Gram: No se observaron leucocitos polimorfonucleares

Cocos grampositivos
dispuesto en cadenas

Cultivo: Desarrollo abundante de cocos grampositivos

Estreptococos del grupo A

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RESULTADO SECRECIÓN NASAL

REPORTE

Nombre y Apellido: Leonela Toscano FTM: 23-05-2023

Muestra: Secreción nasal Fecha de emisión: 23-05-2023

Examen solicitado: Cultivo y antibiograma

Gram: Cocos grampositivos, cadenas largas polimorfonucleares, alo transparente

Cultivo: Desarrollo de microbiota en la región

AS: Agar sangre
AMS: Agar manitol salado
OBSERVACIONES
 En el agar sangre del exudado faríngeo se logro observar el crecimiento de colonias lo
cual nos da a entender que crecieron pequeñas colonias β-hemolíticas, para poder saber
que tipo son, se realizó una tinción Gram en la cual logramos identificar a través del
microscopio que estas colonias se trataban de Streptococcus del grupo A las cuales se
pueden relacionar a enfermedades como infección a la garganta.

 Dentro de la prueba del exudado nasal tanto en el cultivo agar sangre y en la de agar
manitol salado obtuvimos colonias leves, las cuales tratan de la microbiota de la región
nasal y en la tinción de Gram no se observaron leucocitos polimorfonucleares que
indiquen alguna infección presente en la zona.
CONCLUSIONES
 Los estudiantes aplicaron los conocimientos sobre técnicas de toma de muestra y
procesamiento adecuado para el diagnóstico de infecciones del tracto respiratorio superior
(Exudado faríngeo y secreción nasal).
 Un cultivo del exudado faríngeo es una prueba que se realiza para detectar una infección
bacteriana o micótica en la garganta. Los resultados de las pruebas del cultivo del exudado
faríngeo para infecciones bacterianas están listos en 1 o 2 días, según cuál sea la bacteria
respecto de la cual se realiza la prueba.
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Un cultivo de exudado faríngeo, o prueba estreptocócica, se hace frotando la garganta

con un hisopo para detectar bacterias estreptocócicas del grupo A, la causa más frecuente
de la faringitis estreptocócica. Estas bacterias también pueden causar otras infecciones,
incluyendo la escarlatina, los abscesos y la neumonía (pulmonía).
 Una muestra obtenida frotando la parte posterior de la garganta con un hisopo (o
bastoncillo de algodón) se coloca en una placa especial (o cultivo) que permite que las
bacterias crezcan en el laboratorio. Si no hay crecimiento de bacterias, el cultivo es
negativo y la persona no tiene una infección por estreptococos.
RECOMENDACIONES
 Mantener en todo momento el mandil abrochado.
 Utilizar guantes desechables
 Utilizar gorro para el cabello
 No abandonar objetos personales en mesas de trabajo.
 No ingerir alimentos en el laboratorio.
 Lavarse las manos antes de abandonar el laboratorio

BIBLIOGRAFÍA
1. Microbiologia en Práctica de Jawets, Melnick y Adelberg E. Alche Editorial Atlante s.r.l
2. Microbiologia Fuerst Nueva Editorial Interamericana
3. [Online].; 2019 [cited 2023 Mayo 30. Available from:
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/downloads/testing/QuickieAnteriorSwab-
es.pdf.

4. [Online].; 2020 [cited 2023 Mayo 30. Available from: https://www.suizalab.com/cual-es-la-

diferencia-entre-hisopado-nasofaringeo-y-nasal/.

5. Angulo CM. scielo. [Online].; 2021 [cited 2023 Mayo 30. Available from:
https://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2444-79862020000400001.

6. Thompson G. [Online].; 2021 [cited 2023 Mayo 30. Available from:

https://www.cigna.com/es-us/knowledge-center/hw/pruebas-mdicas/cultivo-del-exudado-
farngeo-hw204006.

Ximena Robalino
Ana Carolina González
DIRECTOR/A DE CARRERA DOCENTE