UNIVERSIDA NACIONAL MAYOR DE SAN

MARCOS
(Universidad del Per, Decana de Amrica)

FACULTAD DE QUMICA, INGENIERA

QUMICA
DEPARTAMENTO ACADMICO DE QUIMICA
ORGANICA

Laboratorio
Practica
Profesor (a)
Integrantes
Horario
Fecha de practica
Fecha de entrega

Productos Naturales
Saponinas
Glroria Eva Toms Chota
Irribarren Ramos, Mara
Laureano Torres, Ivan
Jueves 9:00 1:00pm
Jueves 24 de Setiembre
Jueves 01 de Octubre

TABLA DE CONTENIDO

I.

INTRODUCCION
2

II.

PRINCIPIOS TEORICOS
3

III.

DETALLES EXPERIMENTALES
6

IV.

REACCIONES QUIMICAS
8

V.

RESULTADOS
11

VI.

DISCUSION DE RESULTADOS
12

VII.

CONCLUSIONES
12

VIII. RECOMENDACIONES
12
IX.

BIBLIOGRAFIA
13

X.

CUESTIONARIO
14

I.

INTRODUCCION
Las saponinas son sustancias con la capacidad de formar espuma
cuando son extradas con agua, esta espuma se forma debido a que
las saponinas disminuyen la tensin superficial del agua, es decir, son
tensioactivos
naturales.
Esta
propiedad
es
grandemente

aprovechada por comunidades rurales para el uso como

detergentes para ropa, evitando su deterioro. Adems, las saponinas
tienen la capacidad de aumentar la permeabilidad de las paredes
celulares y destruir los hemates por hemolisis, estas y otras propiedades
son aprovechadas por la industria farmacolgica.

Las saponinas se consideran una familia de metabolitos

secundarios y se lograron identificar 2 subgrupos mediante
reacciones de identificacin de Salkoswki y Liebermann - Burchard:
el primero son las saponinas triterpnicas, las segundas son las
saponinas esteroidales.
Segn su clasificacin tendr diferente aplicacin, como el caso de
la saponina esferoidal que a partir de su sntesis pueden obtener
diferentes tipos de esteroides

II.

PRINCIPIOS TEORICOS
Los triterpenos pertenecen a un gran grupo de compuestos
dispuestos en una configuracin de cuatro o cinco anillos, de 30
tomos de carbono con varios oxgenos unidos. Los Triterpenos se
ensamblan a partir de una unidad de isopreno C5 a travs de la va
del mevalonato citoslico para hacer un compuesto C30 y
son esteroides en la naturaleza. Aunque todos los compuestos
terpenoides tienen actividad biolgica en los mamferos, son los
triterpenos que son ms importantes para el efecto adaptognico
que
se
encuentra
en
plantas
como
el Panax
ginseng o Eleutherococcus senticosus . La mayora de los
compuestos
triterpenoides
en plantas
adaptognicas se
encuentran como saponina de glucsidos que se refieren a la
unin de diversas molculas de azcar a la unidad de triterpeno.
Saponinas
Las saponinas son un grupo de glucsidos oleosos, los cuales son
solubles en agua produciendo espumosidad cuando las soluciones
son agitadas. Las contienen plantas muy diversas, entre ellas
el abrojo, la saponaria o jabonera, el castao de Indias y muchas
otras. Estos principios activos estn relacionados con las esterinas
vegetales, su caracterstica principal es la de contener muchos
grupos hidroxilos y uniones de tipo ter y lactnicas. Son
metabolitos secundarios vegetales que tienen un inters
farmacolgico por sus acciones teraputicas.

La digitonina de las semillas de la digital es una saponina tpica.

Con la colesterina (un 3 - hidroxiesteroide) forma un compuesto
de adicin de muy baja solubilidad a lo cual puede atribuirse la
inhibicin de su accin hemoltica. La digitonina es un glucsido
formado por un pentasacrido y el esteroide digitogenina.

Caractersticas y Propiedades de las saponinas

Las saponinas son excelentes agentes emulsionantes y algunas de
ellas fueron utilizadas como detergente en sustitucin del jabn,
sobre todo, como espumantes, en especial en lquidos de extincin
de incendios.
Tienen sabor acre y en forma de polvo producen estornudo y estn
casi exentas de toxicidad por va oral. Algunas saponinas son
marcadamente txicas. Estas son llamadas sapotoxinasy tienen
una accin hemoltica sobre los glbulos rojos sanguneos si son
inyectadas directamente por va intravenosa.
La mayora se ajustan a la frmula general CnH2n-8O10.
Las agliconas, usualmente preparadas por hidrlisis catalizadas
con cido, rinden una sopogenina y un azcar que generalmente
es glucosa.
Se conocen dos tipos generales: esteroides como la digitonina
y triterpenoide como la aesculina (presente en las semillas del
falso castao).
Las investigaciones con el objetivo de conocer los precursores de
la cortisona dieron como resultado la presencia de saponina en las

plantas. Las saponinas estn ampliamente distribuidas en el reino

vegetal. La saponina comercial se prepara a partir de la planta de
yuca (Yucca) o de la Quillaja o Quillay (Quillaja saponina). Algunas
saponinas son utilizadas en la sntesis de hormonas esteroides.
Las plantas que contienen saponinas deben utilizarse bajo control
mdico por el riesgo de intoxicacin.

Saponinas esteroidales
Las saponinas esteroideas derivan de un esqueleto hexacclico de
27 tomos de carbono, que es el ncleo espirostano.
Algunas saponinas esteroidales son de gran inters e importancia
por su relacin con compuestos como las hormonas sexuales,
cortisona, esteroides diurticos, vitamina D y hetersidos
cardacos. Por este motivo, algunos son utilizados como material
de partida para la sntesis de estos compuestos. En este sentido,
destaca el uso de la diosgenina, saponina que se obtiene,
principalmente a partir de las partes subterrneas de distintas
especies de lianas herbceas tropicales del gnero Dioscorea. Para
que stas posean inters industrial, su contenido en diosgenina
debe ser superior al 3%. Adems, hay otras plantas utilizadas
como fuente de diosgenina, como la alholva (Trigonella
foenumgraecum), que es bastante interesante por tener un ciclo
de cultivo corto (las semillas se obtienen en 3-5 meses). Tambin
se utiliza mucho la hecogenina, que es un saponsido muy
semejante a la diosgenina. La hecogenina se obtiene de distintas
especies de agaves o sisales.
Saponinas triterpnicas
Las saponinas del grupo triterpeno se encuentran extensamente
distribuidas, y constituyen la mayora de las saponinas
encontradas en la naturaleza: una gran variedad de ellas difieren
nicamente en el nmero y tipo de unidades de azcares unidas a
las sapogeninas; generalmente pertenecen al grupo de la Bamirina, otras pocas son derivadas de la amirina, del lupeol y del
grupo de triterpeno tetraciclios. Las fuentes naturales ricas en

saponinas triterpenoidales son el ginseng, la alfalfa, la avena, la

quinua y soya entre otras.

III.

DETALLES EXPERIMENTALES
Materiales
5 tubos de ensayo
Mortero
Goteros (pasteur)
Quinua
Peseta
Reactivos

cido actico
Anhidrido actico
H2SO4 concentrado
Cloroformo

La muestra de quinua se moli en un mortero hasta polvo, para

una mejor apreciacin de las reacciones de identificacin.
1. Prueba de la espuma
A una solucin acuosa de la muestra se sometio a una agitacin
vigorosa durante 30 segundos, la cual se pudo apreciar la
presencia de saponinas por la formacin de espuma persistente
durante unos minutos.
2. Reactivo de Salkowski
A 2 mg de la muestra en polvo se le aadi aproximadamente 1
mL de H2SO4 concentrado y luego de 5 gotas de anhidrido
actico.
El reactivo de Salkowsky, indica la presencia de saponinas; que
pueden ser triterpenicas o esteroidales.

3. Primera variante de la reaccin de Salkowski

Se disolvi la muestra en polvo con 1mL de cloroformo y se le
agreg unas 10 gotas de anhdrido actico refrigerado, luego
unas gotas de cido sulfrico concentrado, por las paredes.
La coloracin verdosa indica la presencia de saponinas
esteroidales y la coloracin rojiza indica la presencia de
saponinas triterpenicas.
4. Segunda variante de la reaccin de Salkowski
Se disolvi la muestra en polvo con 1mL de cloroformo y se le
agrego 1 mL de cido sulfrico concentrado.
Si la coloracin es rojo azulado hasta purpura se le considera
saponina esteroidal, si es rojo colesterol.
5. Reaccin de Liebermann Burchard

Finalmente a una pequea cantidad de muestra en polvo se le

aadi unas 5 gotas de cido actico ms 3mL de AC2O/H2SO4
(50:1).
Si la reaccin da coloracin rosado a purpura se le considera
como saponina triterpenoidales mientras las saponinas
esteroidales dan coloracin verdosa.

IV.

REACCIONES QUIMICAS
a) Reactivo de Salkowski
Saponina triterpenoidal

HO

H2SO 4(cc)

+
OH 3C

(l)

Acetil-saponina (amarillo-rojo)

Anhidrido actico

Saponina triterpenoide (l)

Saponina esteroidal
O

O
O

H2SO 4(cc)

O
O

+
O

HO
Saponina esteroidal (l)

Anhidrido actico

(l)

OH 3C
Acetil-Saponina (amarillo - rojo)

b) Variante A de Reaccin de Salkowsky

Saponina triterpenoidal

OH 3C
O

RO

H2SO 4(cc)

O
CHCl 3(l)

Acetil-sapogenina

(l)

HO
HO

Anhidrido actico (l, ref)

Saponina triterpenoide (l)

OH
O
OH

OH

R - Azcar
(Rojizo - Grosella)

Saponina esteroidal
O
O

OH 3C

O
O

H2SO 4(cc)

CHCl 3(l)

+
O

RO

(l)

HO
HO

Anhidrido actico (l,ref)

Saponina esteroidal (l)

Acetil-Sapogenina

OH
O
OH

OH

R - Azcar
(Azul - verdoso)

c) Variante B de Reaccin de Salkowsky

Saponinas esteroidales

CHCl 3
H2SO 4(cc)

RO
Saponina esteroidal

Colesterol

O 3SH
Intermediario

HSO 3
Bicolestadieno (rojizo)

10

H3C

CH3

CH3
H3C
CH3

H3C

CH3

H3C

H3C

CH3

H 2SO 4 cc

CH3

CH3

CHCl3

SO2H

HO2S

c olesterol

coloracion rojiza

d) Reaccin de Liebermann Burchard

Saponina triterpnica

(HOAc/H 2SO 4)
- H 2O

HO
Catin triterpenoideo (rosado - prpura)
Saponina triterpenoidal

Saponina esteroidal

CH3

CH3

H3C

11

V.

RESULTADOS
Los resultados e identificacin fueron determinados a travs de la
coloracin.
Ensayo

Coloracin
apariencia

Prueba de la espuma

Espuma de perduro
por minutos.

Reactivo
Salkowski

de Rojo sangre

o Resultado

Presencia
de
Saponinas, pueden
ser triterpenicas o
esteroidales.
Presencia
de
saponinas
triterpenicas

Variante
reaccin
Salkowski

de Rojizo
de

Variante
reaccin
Salkoswki

de Rojo
de

Presencia
Colesterol

de

de naranja

Presencia
Saponinas
triterpenicas.

de

Reactivo
Liebermann
Burchard

12

1.
2.
3.
4.
5.

VI.

Prueba de espuma
Reactivo de Salkowski
Variante A
Variante B
Reactivo de Liebermann

DISCUSIN DE RESULTADOS
En la prueba de la espuma, el resultado perduro por ms de 3
minutos, lo cual confirma la presencia de saponinas.
En las reacciones de identificacin de Salkowski y Libermann
Burchard, dieron positivas para la presencia de saponinas
triterpenicas ya que estasestubieron en el rango de coloracin que
corresponde. En la reaccin de Salkowski con variante B se pudo
comprobar que la quinua presentaba colesterol (debido a la
coloracin roja), este esterol es el precursor de los esteroides o
esteroles, lo cual ya habamos confirmado su presencia.

VII.

CONCLUSIONES
La quinua presenta gran cantidades de saponinas, ya que se
determin su presencia mediante la prueba de espuma. Las
saponinas presentan dos clasificaciones segn su estructura, la
cual se pudo determinar la presencia de la saponina triterpenica
presente en la quinua, mediante reacciones de identificacin como

13

la Salkowski y la de Limbermann Burchard por la coloracin que

presentaron.

VIII. RECOMENDACIONES
Observar que la quinua este limpia, que no haya presencia
de contaminantes solidos (piedra astilla, etc.)

IX.

Moler la quinua para un mejor ensayo de anlisis. Cuando la

quinua esta molida es ms fcil que se pueda disolver con el
cloroformo.

Realizar los ensayos en paralelo para poder comparar los

resultados.

Agregar agua destilada para apreciar mejor la coloracin de

los ensayos.

BIBLIOGRAFIA
Luck de Ugaz O. 1988. "Investigacin fitoqumica: Mtodos
en el estudio de productos naturales". Editorial de la
Pontificia Universidad Catlica. Per. p 1, 9, 63.

O. Lock de Ugaz, Invetigacion Fitoquimica, Metodos en el estudio de

productos naturales, 2 Edicin, Lima, Editorial PUCP, 1994.

http://www.plantas-medicinalfarmacognosia.com/temas/glucosidos/saponinas/

http://farmacia.udea.edu.co/~ff/saponinas2001.pdf

http://www.dfarmacia.com/farma/ctl_servlet?
_f=37&id=13015492

14

X.

CUESTIONARIO
1. Indique la clasificacin de las saponinas segn su
estructura y de un ejemplo para cada una.
Las saponinas se clasifican segn su estructura en
esteroideas y triterpenicas
Saponinas esteroideas
Las geninas esteroideas derivan de un esqueleto hexacclico
de 27 tomos de carbono, que es el ncleo espirostano.
Algunos saponsidos esterodicos son de gran inters e
importancia por su relacin con compuestos como las
hormonas sexuales, cortisona, esteroides diurticos,
vitamina D y hetersidos cardacos. Por este motivo, algunos
son utilizados como material de partida para la sntesis de
estos compuestos. En este sentido, destaca el uso de la
diosgenina, saponsido que se obtiene, principalmente a
partir de las partes subterrneas de distintas especies de
lianas herbceas tropicales del gnero Dioscorea. Para que
stas posean inters industrial, su contenido en diosgenina
debe ser superior al 3%. Adems, hay otras plantas
utilizadas como fuente de diosgenina, como la alholva
(Trigonella foenum-graecum), que es bastante interesante
por tener un ciclo de cultivo corto (las semillas se obtienen
en 3-5 meses). Tambin se utiliza mucho la hecogenina, que
es un saponsido muy semejante a la diosgenina. La

15

hecogenina se obtiene de distintas especies de agaves o

sisales (Agave sp.).
Otras drogas con saponsidos esterodicos se utilizan por sus
acciones farmacolgicas concretas. Es el caso del rizoma de
rusco (Ruscus aculeatus), con ruscogenina de propiedades
diurtica, antiinflamatoria, protectora vascular y venotnica,
y el rizoma de zarzaparrilla (Smilax sp.) que contiene
sarsapogenina con efecto expectorante, diurtico y
depurativo. La zarzaparrilla tambin se utiliza como fuente
de esteroides.
Saponinas triterpnicas
Sus geninas tienen una estructura triterpnica, son
compuestos qumicos de tipo terpenoide presentes en las
plantas de las familias Apiaceae y Pittosporaceae, derivando
todas del dammarano. Estas geninas pueden conservar la
estructura tetracclica del dammarano (p. ej., algunas
geninas de los ginsensidos) o, en el caso ms frecuente, ser
pentacclicas (en este caso la mayora son derivados del
oleanano y, ms raramente, del ursano). A continuacin
revisaremos las caractersticas de las drogas con saponinas
triterpnicas ms importantes.
2.

Escriba dos reacciones diferentes a las realizadas en

la prctica para diferenciar las saponinas segn su
estructura.
Reactivo de Salkowski
Saponina triterpenoidal
O

HO

H2SO 4(cc)

+
O

Saponina triterpenoide (l)

Saponina esteroidal

Anhidrido actico

(l)

OH 3C
Acetil-saponina (amarillo-rojo)

16

O
O

H2SO 4(cc)

O
O

+
O

HO

(l)

OH 3C
Acetil-Saponina (amarillo - rojo)

Anhidrido actico

Saponina esteroidal (l)

Reaccin de Liebermann Burchard

Saponina triterpnica

(HOAc/H 2SO 4)
- H 2O

HO
Catin triterpenoideo (rosado - prpura)
Saponina triterpenoidal

Saponina esteroidal

3.

Con un diagrama de flujo describa un mtodo de extraccin de

una saponina

17

4.

Mencione 5 ejemplos de saponinas con actividad

farmacolgica, con su respectiva estructura.
a. Races y estolones del regaliz (Glycyrrhiza
glabra)
El regaliz contiene como principales principios activos
saponsidos y flavonoides. Dentro del grupo de
saponsidos destaca la glicirricina, cuyo contenido
puede variar de un 6 a un 13%, segn su origen. De su
hidrlisis se liberan cido glucurnico y cido
glicirrtico. El gran poder edulcorante de la planta de
regaliz se debe a la glicirricina.
Las principales acciones farmacolgicas de esta droga
son su accin expectorante, antitusiva,

18

antiinflamatoria, antiulcerosa y antiespasmdica.

Tambin se utiliza mucho como aromatizante.
El consumo abusivo de regaliz ocasiona edemas e
hipertensin, debido a que los principios activos del
regaliz causan hiperactividad mineralocorticoide, que
conduce a un aumento de la retencin de sodio, cloro
y agua y a un incremento en la excreccin de potasio,
con la consecuente disminucin de la diuresis.
b. Semillas de castao de Indias (Aesculus
hippocastanum)
Las semillas del castao de Indias contienen
saponsidos, flavonoides, taninos y cumarinas, siendo
la escina el principal principio activo.
La escina es un saponsido con propiedad
antiinflamatoria, antiedematosa, vasoconstrictora,
protectora de la pared vascular y venotnica, por lo
que sta bsicamente se utiliza en trastornos de la
circulacin venosa.
c. Hojas de hiedra (Hedera helix)
Contienen hederacsido, con propiedades
antiespasmdicas y antitusiva.
El extracto de hojas de hiedra se emplea tpicamente
como anticelultico
d. Raz de ginseng (Panax ginseng)
Existen diferentes especies de ginseng pero, en
general, todas las races de ginseng contienen
numerosos principios activos, de los cuales destacan
los saponsidos. stos son denominados gingensidos
por los cientficos japoneses y panaxsidos por los
rusos. Aunque parece ser que estas dos series de
saponsidos no son completamente iguales entre s.
El ginseng tiene accin tnica y revitalizante general.
Se le denomina como droga adaptgena. Parece ser
que el ginseng tiene una accin anabolizante con
efecto tnico estimulante de la biosntesis proteica y

19

activa el metabolismo de glcidos y lpidos. Tambin

tiene accin antirradicalar.
e. Raz de eleuterococo (Eleutherococcus
senticosus)
Entre otros muchos principios activos, contiene
saponsidos derivados del cido oleanlico
denominados eleutersidos. El eleuterococo presenta
acciones farmacolgicas semejantes a las del ginseng.

5.

Con un ejemplo de sntesis indique la aplicacin

industrial de las saponinas.

20

6.

Esta sintesis resume esquemticamente el proceso. Una vez

formado un precursor esteroide con 27 tomos de carbono
(p.ej. colesterol), este es deshidrogenado para originar 3colestanona. La colestanona es hidroxilada en los carbonos
16, 22 y 27. Este intermedio altamente hidroxilado en la
cadena lateral puede sufrir una deshidratacin entre los
hidroxilos 16 y 22, lo que origina 3-furostanona; o puede
sufrir adems otra deshidratacin entre los hidroxilos 22 y
27 restantes, lo que da lugar al anillo espirostano
propiamente dicho. La 3- espirostanona puede ser reducida a
3-espirostanol, el cual puede sufrir procesos enzimticos de
glicosilacin para originar las saponinas esteroides.
Indique un mtodo para cuantificar las saponinas.

21

Determinacin
del
contenido
espectrofotometra UV-VIS

de

saponina

por

Para esta determinacin de saponinas se hace uso de la adicin

del reactivo de Lieberman-Burchard (LB) para formar productos
coloridos al reaccionar con saponinas. El reactivo LB consiste en
una mezcla al 16,7 % de Anhdrido actico en cido sulfrico
concentrado. Se elabora una curva de calibracin Absorbancia vs.
Concentracin. Para esta curva se prepara soluciones a las
siguientes concentraciones: 0,00; 0,05; 0,1; 0,15; 0,20; 0,25; 0,30;
0,35 mg/m, de cada concentracin se prepara 2 m, a los cuales
se adiciona 7 m del reactivo de LB, se agita 20 s y se dej en
reposo 30 min. Finalmente para determinar la longitud de onda de
la mxima absorcin (max) se realizar las lecturas posteriores en
el espectrofotmetro (la max es de 528 nm).A esta longitud de
onda se realiza las mediciones para la curva de calibracin y
posteriormente para las muestras seleccionadas. La curva de
calibracin dar una ecuacin y a partir de la curva de calibracin
se puede cuantificar el porcentaje de saponinas presentes en cada
muestra.