FACULTAD DE MEDICINA

ESCUELA DE MEDICINA

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BASICAS MDICAS

INFORME DE PRACTICA NRO 17

SECCIN

BIOQUMICA

DOCENTE

DR. HECTOR RODRIGUEZ BARBOZA

ALUMNOS

:
PAICO AZCARATE CRHISTIAN PETER.
PAREDES AVILA CLAUDIA CECILIA.
PAREDES GARCA, JOSMELL HUSSEIN.

TRUJILLO PER
2012

REUNION DE LABORATORIO N 08
PRACTICA N 17

IDENTIFICACIN DE LOS CUERPOS CETONICOS EN LA ORINA.

DETERMINACION SEMICUANTITATIVA DE CUERPOS CETONICOS EN ORINA
I.

INTRODUCCION:
La beta oxidacin de los cidos grasos en el hgado, a nivel mitocondrial,
produce acetil CoA que ingresa al Ciclo de Krebs y en parte se utiliza en la
sntesis de cuerpos cetnicos (cetognesis). Estos son el cido acetoactico, el
cido beta hidroxi butrico y la acetona. Los dos primeros pasan a la sangre y
son fuente de energa en los tejidos extrahepticos como el corazn y el
msculo esqueltico, incluyendo el cerebro en el ayuno prolongado. Los
cuerpos cetnicos son eliminados por la orina y la acetona tambin por la
respiracin.
Su concentracin normal en orina es de 125 mg/ 24 horas, y en sangre hasta
1mg/dl. Aumentan en sangre (cetonemia) y en orina (cetonuria) por condiciones
fisiolgicas como el ayuno prolongado, en la dieta pobre en carbohidratos. En
condiciones patolgicas como la Diabetes mellitus, el hiperinsulinismo, en la
enfermedad de Von Gierke y otras glucogenosis, en los vmitos, en el sndrome
de Fanconi, en toda hipercatabolia como la fiebre, hipertiroidismo. En la
Diabetes mellitus, el aumento de la liplisis, de la beta oxidacin y de la
cetognesis, al superar la capacidad de oxidacin de los tejidos extrahepticos
lleva a niveles aumentados de cuerpos cetnicos. Dado que stos son cidos
se produce acidosis metablica, la denominada cetoacidosis diabtica. El
diagnstico y monitoreo de su tratamiento se hace con su determinacin en
sangre o/i orina.

II.

REACTIVOS

III.

Sulfato de amonio, cristales.

Nitroprusiato de sodio, solucin al 10% en H2O

Cloruro Frrico, solucin al 5% en H2O.

PROCEDIMIENTO
INVESTIGACIN DE ACIDO ACETOACETICO
-

Armar dos sistemas que contengan orina normal y patolgica.

Prueba de Cloruro Frrico o de Gerhart. Se basa en que en presencia de
cloruro frrico, el cido acetoactico rinde una coloracin rojo burdeos.
Procedimiento (Se utiliza orina filtrada):

COMPONENTES

TUBO

Orina filtrada

5 ml

Cloruro Frrico, solucin 5% en agua

gota a gota hasta la

aparicin del
Color rojo burdeos si existe
cido
Acetoactico

IV.

RESULTADOS Y DISCUSIN
Se evidencio la presencia de cido acetoactico en la orina problema,
dado que al adicionarle cloruro frrico se evidencio un cambio de color
virando de un color semitransparente hacia un color rojo burdeos.
Esta prueba permite identificar la presencia de altas concentraciones de
cido acetoacetico en la orina, aunque pueden dar falsos positivos los
salicilatos, la antipirina, el bicarbonato de sodio y otras drogas eliminadas
por la orina que se reconoce porque el calentamiento no aclara el color
oscuro.

V.
1. Hacer un

CUESTIONARIO:
esquema de la

sntesis

y degradacin de los

cuerpos

cetnicos

2. Importancia energtica de los cuerpos cetonicos

a. Suministrar energa al corazn y al cerebro en algunas ocasiones
excepcionales.

b. Que sirven como importantes combustibles metablicos para

muchos tejidos perifricos. Por ejemplo, el cerebro normalmente
utiliza glucosa como fuente de energa (los cidos grasos no pueden
atravesar la barrera sangunea cerebral), pero durante ayuno
prolongado, los cuerpos cetnicos son la mayor fuente de energa
del cerebro. Los cuerpos cetnicos son los equivalentes
hidrosolubles de los cidos grasos.

3. Causas del aumento de los cuerpos cetonicos

a. Descompensacin diabtica: con cifras elevadas de glucosa en
sangre
b. Hipoglucemia
c. Ayuno prolongado
4. Mtodos para la determinacin de los cuerpos cetnicos.
Existen varios mtodos para determinar la presencia de cuerpos cetnicos
tanto en orina como en suero, dentro de los principales tenemos:
- Prueba de Legal, Se utiliza el nitroprusiato de sodioel cual diluido en
presencia de cuerpos cetnicos, especialmente de acetona, rinde un
-

color azul violeta.

Prueba de Rothera: Se usa Utilizar nitroprusiato en polvo, este alcanza
una mxima dilucin de la orina cuando aparece color azul violeta,
luego se multiplicar por el denominador de la dilucin alcanzada por 10 y
de esta manera se tendr la cantidad aproximada de acetona en mg por
100ml. Esto es debido a que el nitroprusiato de sodio en polvo da
reaccin positiva solo cuando en la orina sin diluir alcanza la
concentracin mnima de 10 mg% de acetona y por eso, para calcular la
concentracin en orina diluida, se debe multiplicar por 10 el nmero de

veces que se ha diluido sta.

Uso de tira reactiva. Para ello se sumerge la tira en el frasco
conteniendo la orina. Esperar 20 segundos, se lee en escala
colorimtrico, estimando la concentracin como negativo 5, 15, 50, 150
mg/dl.

Prueba de Cloruro Frrico o de Gerhart. Se basa en que en presencia

de cloruro frrico, el cido acetoactico rinde una coloracin rojo

burdeos.
5. Importancia de la cuantificacin de cuerpos cetnicos.
La concentracin normal de cuerpos cetnicos normal en orina es de 125
mg/ 24 horas, y en sangre hasta 1mg/dl. La importancia de su cuantificacin
est relacionado con algunos procesos fisiolgico y otros patolgico en los
cuales los niveles normales de concentracin estn aumentados asi
tenemos cuando aumentan en sangre (cetonemia) y en orina (cetonuria),
estos niveles pueden estar aumentados en el ayuno prolongado, en la dieta
pobre en carbohidratos. En condiciones patolgicas como la Diabetes
mellitus, el hiperinsulinismo, en la enfermedad de Von Gierke y otras
glucogenosis, en los vmitos, en el sndrome de Fanconi, en toda
hipercatabolia como la fiebre, hipertiroidismo. En la Diabetes mellitus, el
aumento de la liplisis, de la beta oxidacin y de la cetognesis, al superar
la capacidad de oxidacin de los tejidos extrahepticos lleva a niveles
aumentados de cuerpos cetnicos.
El exceso de cuerpos cetnicos en sangre puede producir acidosis
metablica, la denominada cetoacidosis diabtica. El diagnstico y
monitoreo de su tratamiento se hace con su determinacin en sangre o/i
orina.