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GLUCÓGENO Ros86 \l 2058 ].

Melisa Cadavid Molina- 1037662221 En la práctica se indago sobre las


Manuela Correa Ríos – 1020490750 características metabólicas del glucógeno, en
donde se especificó que se encuentra de dos
formas diferentes en el organismo; las cuales
son: en el hígado y en el músculo, en el
OBJETIVOS
primero el glucógeno se difunde fuera del
hepatocito mientras que el segundo se
Extraer el glucógeno del hígado de cerdo sintetiza y se libera en la célula del músculo,
mediante reacciones cualitativas. lo cual se relaciona con lo mencionado
anteriormente por (Domínguez, 1986).
Determinar la existencia de polisacáridos en el También se mencionó en el laboratorio que la
hígado de cerdo, a través de la prueba de cantidad de glucógeno en el organismo de un
animal no supera el 1% de su peso vivo.
Difenilamina.

Identificar la presencia de carbohidratos


El glucógeno muscular proporciona una fuente
generales en el hígado a partir de la prueba fácilmente disponible de glucosa 1-fosfato
de Molisch. para glucólisis dentro del músculo en sí. La
concentración de glucógeno en el hígado es
Verificar la presencia de almidón y glucógeno, de alrededor de 450 mol/L equivalentes de
en el hígado de cerdo por medio de la prueba glucosa después de una comida; disminuye a
de Lugol (yodo). alrededor de 200 mmol/L tras ayuno de toda la
noche; luego de 12 a 18 horas de ayuno, el
glucógeno hepático está agotado casi en su
totalidad. Si bien el glucógeno hepático no
1. ESTADO DEL ARTE produce de manera directa glucosa libre
(porque el músculo carece de glucosa 6-
fosfatasa), el piruvato formado mediante
El glucógeno es el principal carbohidrato de glucólisis en el músculo puede pasar por
almacenamiento en animales; corresponde al transaminación hacia alanina, que se exporta
almidón en los vegetales; es un polímero desde el músculo y se usa para
ramificado de a-d-glucosa. Se encuentra gluconeogénesis en el hígado. [ CITATION
sobre todo en hígado y músculos, con Vic10 \l 2058 ]
cantidades modestas en el cerebro. Aunque el
contenido de glucógeno en hígado es mayor
que en músculos, dado que la masa muscular La mayoría de los órganos animales puede
del cuerpo es bastante mayor que la del metabolizar diversas fuentes de carbono para
hígado, alrededor de tres cuartas partes del generar energía: triacilgliceroles, diversos
glucógeno corporal total están en el músculo. azúcares, piruvato, aminoácidos, etc. Sin
La función del glucógeno hepático es la de embargo, el cerebro y el sistema nervioso
servir de reserva de glucosa, la cual puede ser central necesitan glucosa como única o
rápidamente formada a partir del glucógeno, principal fuente de carbono. Lo mismo ocurre
cuando las necesidades del organismo así lo en algunos otros tejidos, como la médula
requieran. La capacidad para el renal, los testículos y los eritrocitos. Por
almacenamiento del glucógeno está limitada consiguiente, las células animales deben ser
simplemente por la cantidad de espacio que capaces de sintetizar glucosa a partir de otros
puede ocupar en el citoplasma. La precursores y también de mantener las
degradación del glucógeno por la fosforilasa concentraciones sanguíneas de glucosa
da como resultado la formación de hexosas dentro de unos límites estrechos, tanto para el
monofosfatos, Las cuales en el hígado pueden funcionamiento adecuado del cerebro y del
ser utilizadas al menos para dos propósitos: sistema nervioso central como para
-Degradación. Vía glucólisis, para proporcionar precursores para el
proporcionar energía y actuar como almacenamiento de glucógeno en otros
intermediario en procesos biosintéticos. tejidos. Cuando se produce un periodo de
-Hidrólisis a glucosa en la reacción catalizada ayuno de más de un día, la glucosa debe
por la glucosa-6-fosfatasa. [ CITATION formarse a partir de otros precursores. En el
estado de post-absorción nocturno, la transporta a otros tejidos para su catabolismo.
glucogenólisis y la gluconeogénesis El hígado actúa principalmente como un
contribuyen ambas a la producción global de glucostato, que ajusta la síntesis y
glucosa. [ CITATION CKM13 \l 2058 ] degradación del glucógeno para mantener la
concentración adecuada de glucosa
sanguínea. Como corresponde a este papel,
el hígado contiene unas reservas de
En los animales, la digestión del almidón y del
glucógeno relativamente grandes, desde el 2
glucógeno empieza en la boca, con la acción
% al 8 % del peso del órgano. En el hígado,
de la amilasa que se secreta en la saliva. Esta
las velocidades máximas de síntesis y
enzima rompe los enlaces internos: alfa 1-4 de
degradación del glucógeno son
ambos polímeros. En el intestino, la digestión
aproximadamente iguales, mientras que, en el
continúa, facilitada por la amilasa secretada
músculo, la velocidad máxima de la
por el páncreas. Esta enzima degrada la
glucogenólisis supera la de la síntesis de
amilosa a maltosa y un poco de glucosa. Sin
glucógeno unas 300 veces. Aunque la
embargo, solo degrada parcialmente la
enzimología de la síntesis y degradación del
amilopectina y el glucógeno, porque no es
glucógeno es semejante en el hígado y el
capaz de romper los enlaces alfa 1-6 que se
músculo, el control endocrino en el hígado es
encuentran en los puntos de ramificación. El
producto de la digestión exhaustiva de la bastante diferente. [ CITATION CKM13 \l
amilopectina o del glucógeno por la amilasa 2058 ]
se denomina una dextrina límite; para
continuar su degradación es necesaria la
acción de una enzima desramificante, la alfa En la práctica se hizo énfasis en que el
(1-6) glucosidasa (también llamada glucógeno está relacionado con una serie de
isomaltasa). Esta acción expone un grupo procesos metabólicos para su síntesis o su
nuevo de ramificaciones con enlaces alfa (1-4) formación dependiendo de la disponibilidad de
que pueden ser atacadas por la amilasa, glucosa en el organismo. Uno de estos
hasta alcanzar una nueva serie de procesos es la Glucogenosíntesis, la cual se
ramificaciones con enlaces alfa (1-4). El da cuando se presenta en el organismo un
resultado final de la acción secuencial de excedente de glucosa para ser almacenada y
estas dos enzimas es la degradación transformada en glucógeno, la
completa del almidón o del glucógeno en Glucogenosíntesis muscular se da después de
maltosa y algo de glucosa. La maltosa se la digestión y absorción de los carbohidratos,
rompe hidrolíticamente por la maltasa, dando en donde dicha glucosa es captada por el
2 moles de glucosa, que se absorbe a músculo y se formará glucógeno cuando se
continuación al torrente sanguíneo y se satisface su demanda de energía y queda
transporta a los diversos tejidos para su glucosa disponible en el organismo.
utilización. [ CITATION CKM13 \l 2058 ].
Por otro lado, está el proceso de
Glucogenólisis que se da cuando la célula
detecta bajos niveles de acetil Co-A,
Las diferencias y semejanzas entre el oxalacetato, ATP y piruvato en el organismo,
glucógeno y el almidón mencionadas en esta en donde el músculo aprovecha su reserva
práctica de laboratorio aparte de la mayor ante la falta de energía, y su producto final es
cantidad de ramificaciones que posee el la glucosa-6-P para consumo propio del
glucógeno, son el número de unidades de miocito, debido a que carece de la enzima
glucosa que presenta cada uno de estos Glucosa-6-fosfatasa y no puede liberar
polisacáridos para que se produzca una glucosa al torrente sanguíneo.
ramificación, en el caso del almidón se
presentan cada 24 a 30 unidades de glucosa y En cuanto a las propiedades fisicoquímicas
para el caso del glucógeno cada 8 a 10 del glucógeno, las más importantes son las
unidades de glucosa. siguientes:
a) En un estado deshidratado posee un color
El glucógeno es la principal fuente de energía blanco y un aspecto Pulverulento. En
para la contracción del músculo esquelético. disolución acuosa presenta un aspecto
Debido a que el hígado obtiene la mayor parte lechoso y opaco, Dependiendo de su
de su energía metabólica propia a partir de la concentración.
oxidación de los ácidos grasos, el glucógeno b) Es insoluble en alcohol etílico, alcanzando
hepático tiene una función bastante distinta: a ser la máxima insolubilidad al 66%. Están
es fuente de glucosa sanguínea, que se bien insoluble en éter y muy soluble en agua.
c) Es estable en medio alcalino, mientras que
en medio ácido se degrada fácilmente dando
lugar a D-glucosa.
d) Es capaz de reaccionar con yodo dando 1. P
lugar a una coloración caoba. Cabe explicarlo R
por su grado de ramificación, porque el U
almidón con una orden de ramificación más E
pequeña, presenta una coloración violeta B
azulada.[ CITATION Ros86 \l 2058 ] A

En la práctica también se realizaron unas


aclaraciones relacionadas a la identificación
en laboratorio de estos dos
homopolisacáridos, mediante la prueba de
Lugol (yodo), en donde para el almidón se
presenta una coloración azul o violenta
intensa y para el glucógeno una coloración
roja.

1.1 Ecuaciones y reacciones químicas

La muestra que se utilizó para reconocer la


presencia de glucógeno fue hígado de cerdo.
Se utilizó arena para realizar el daño DE DIFENILAMINA
mecánico de la estructura celular en el hígado
y poder de esta forma liberar el glucógeno. Se agregó una pizca de la muestra a un tubo
Se llevó a centrifugación para separar las de ensayo, se le agregó agua desmineralizada
sustancias contenidas allí por medio del peso caliente (5 ml) y difenilamina (2,5 ml), se
molecular, en la parte de abajo va a quedar la calentó en baño de agua hirviendo (40 min) y
arena, en la parte media los residuos celulares se dejó enfriar.
y en la parte superior el glucógeno soluble.
Se utilizaron solventes orgánicos para realizar Esta prueba se utilizó con el fin de observar la
daño químico y de esta forma dar la aparición presencia de polisacáridos en la muestra, dio
de flóculos insolubles, debido a la alteración positiva debido a la aparición en el tubo de
en la carga eléctrica. ensayo de un aro color café, lo que corrobora
Se llevó a Baño maría para estabilizar la la presencia de polisacáridos (glucógeno) en
molécula. la muestra.
Y finalmente de nuevo se centrifugó y se Se debe tener en cuenta que esta es una
desechó la parte líquida. prueba altamente sensible y por ende no se
En la parte sólida queda el glucógeno debido debe poner en agitación.
al peso molecular.

Imagen IV: Prueba positiva para


Difenilamina.
Imagen I: Muestra de hígado y arena.

Imagen II: Método de centrifugación de la


muestra. 2. PRUEBA DE MOLISCH
Imagen III: Baño María de la muestra.
Se agregó una pizca de la muestra a un tubo determinar qué tipo de polisacáridos estaban
de ensayo y se le adiciono agua presentes en la muestra, específicamente
desmineralizada, posterior a esto se le agrego para almidón en donde la coloración de la
2 gotas del reactivo de Molisch y se agitó, muestra tiene que ser azul o violeta intenso y
también se añadió 1 ml de H2SO4 (p.a), sin el glucógeno con una coloración roja de la
agitación. muestra. Se pudo observar que la prueba dio
positiva para glucógeno debido a la presencia
Esta prueba es utilizada para el de la coloración característica para este
reconocimiento en general de carbohidratos, polisacárido.
se pudo observar que la prueba dio positiva ya
que se formó una coloración violeta en la
muestra, lo cual nos indica la presencia de
carbohidratos generales.

Imagen VI: Prueba positiva para yodo

CONSULTA
Imagen V: Prueba positiva para Molisch.
1. Describir la estructura del glucógeno y
compararla con el almidón.

La estructura del glucógeno está formada por


varias cadenas que contienen de 12 a 18
unidades de α-glucosas formadas por enlaces
glucosídicos 1,4; uno de los extremos de esta
cadena se une a la siguiente cadena mediante
un enlace α-1,6-glucosídico, tal y como
sucede en la amilopectina. Una sola molécula
de glucógeno puede contener más de 120.000
moléculas de glucosa. La importancia de que
el glucógeno sea una molécula tan ramificada
es debido a que:
-La ramificación aumenta su solubilidad.
-La ramificación permite la abundancia de
residuos de glucosa no reductores que van a
ser los lugares de unión de las enzimas
glucógeno fosforilasa y sintetasa, es decir, las
ramificaciones facilitan tanto la velocidad de
síntesis como la de degradación del
glucógeno.
Reacción I: Prueba de Molisch. [ CITATION Ros86 \l 2058 ]

3. PRUEBA DE YODO

Se agregó una pizca de la muestra a un tubo


de ensayo junto con agua desmineralizada (5
ml) y se le adiciono solución de yodo (2
gotas).

Esta prueba se realizó con la finalidad de


debería dar una solución de glucógeno y
una solución de almidón al ser tratados
con Lugol.

El reactivo de Lugol se puede utilizar para


reconocer la presencia de almidón, porque
esta sustancia absorbe el yodo produciendo
una coloración azul intensa, coloración que
desaparece al calentar, porque se rompe la
estructura que se ha producido, pero vuelve a
aparecer al enfriar. [ CITATION Man13 \l
2058 ]

Imagen VII: Estructura del glucógeno. El Lugol es una solución yodada, compuesta
por 0,5 % I2/1,5 % KI, con afinidad por los
polímeros de glucosa. El Lugol tiñe el almidón
debido a que las moléculas de yodo se
El almidón es un polímero formado por la alinean en el interior de las hélices formadas
unión de moléculas de α - D - glucosa, unidas por las cadenas de glucosa. [ CITATION
mediante enlaces glucosídicos a - 1 —> 4. Pau12 \l 2058 ]
Existen dos tipos de almidón, la amilosa y la
amilopectina, el primero consiste de cadenas Esta reacción es el resultado de la formación
de glucosa unidas en la forma y con la de cadenas de poliyoduro a partir de la
isomería indicada. La amilopectina tiene la reacción del almidón con el yodo presente en
misma estructura que la amilosa pero, la solución de un reactivo llamado Lugol. La
además, tiene ramificaciones α - 1 —> 6. amilosa, el componente del almidón de
[ CITATION Jua02 \l 2058 ] cadena lineal, forma hélices donde se juntan
las moléculas de yodo, formando un color azul
oscuro a negro.
La solución de yodo también reacciona con el
glucógeno, aunque el color producido es más
castaño y mucho menos intenso. Esta prueba
se utiliza como indicador del grado de
madurez de los frutos. El fruto cuando está
inmaduro contiene altas cantidades de
almidón, que son detectadas a través de la
tinción con la prueba de almidón, apareciendo
Imagen VIII: Estructura de la amilosa como grandes zonas en el fruto teñidas de
azul. Mientras que cuando un fruto está
maduro, ese almidón se ha transformado en
azúcares y por lo tanto no se tiñe en la
prueba. [ CITATION Mar17 \l 2058 ]

3. Escribir un segmento corto de la


estructura del glucógeno. Compararla con
la de amilopectina.

Imagen IX: Estructura de la amilopectina.

La estructura del glucógeno puede parecerse


a la de amilopectina del almidón, aunque
mucho más ramificada que ésta.
Imagen X: Estructura del glucógeno.

2. Consultar sobre la coloración que


en sí. El glucógeno hepático funciona para
almacenar glucosa y exportarla para mantener
la concentración de glucosa en sangre
durante el estado de ayuno. [ CITATION
Vic10 \l 2058 ].

6. Describa las diferencias y semejanzas de


cada uno de los siguientes pares de
polisacáridos: a. Glucógeno y
Imagen XI: Estructura de la amilopectina. amilopectina. b. Amilosa y glucógeno. c.
Amilosa y celulosa
La amilopectina y el glucógeno son similares
en su estructura, ya que ambos están hechos a. Glucógeno y Amilopectina:
de monómeros D-glucosa con enlaces alfa 1-
4, sin embargo, el glucógeno está más Semejanzas:
ramificado, y su molécula es más reducida
que la amilopectina; las ramificaciones -Están constituidos por la unión de moléculas
aparecen cada 8 a 12 residuos de glucosa, en de α - D glucosa, mediante enlaces
cambio en la amilopectina aparecen cada 25- glucosídicos α - 1 —> 4 y con ramificaciones α
30 unidades de glucosa. [ CITATION - 1 —> 6.
Jua02 \l 2058 ] -Ambos sirven como reserva energética
-Los dos son polímeros
4. Bajo qué condiciones ocurre la síntesis -Al reaccionar con yodo ambos se tiñen de
de glucógeno en el hígado. color rojo oscuro.

El exceso de glucosa de la dieta se almacena Diferencias:


como glucógeno. Se moviliza cuando surge
una necesidad: actividad muscular, entre -El glucógeno es producido por las células
comidas (reserva energética 12 - 24 h) animales y la amilopectina es producida por
La regulación del metabolismo glucídico en las células vegetales.
el hígado cumple la función de mantener un
nivel de glucosa constante en sangre; para lo -En el glucógeno las ramificaciones aparecen
cual la moviliza desde el glucógeno y la cada 8 a 12 glucosas, en la amilopectina las
exporta, o bien la importa y la almacena en ramificaciones aparecen cada 20 a 30
forma de glucógeno, para cuando la necesita; glucosas.
e incluso la produce.
El hígado responde ante la hipoglicemia. Su -La diferencia estructural más relevante es
producto final es la glucosa libre (por acción que el polímero de glucógeno es más denso,
de la enzima glucosa-6-fosfatasa), tanto para con más ramificaciones que la amilopectina,
consumo interno como para “exportarla” a la ya que las bifurcaciones que dan lugar a otra
sangre. Estimulada por el Glucagón ante rama de moléculas de glucosa se producen
estados de ayuno y por la Adrenalina cada menos residuos que en el caso de la
en momentos de Stress. Inhibida por la amilopectina, de manera que la molécula de
Insulina. [ CITATION Cri12 \l 2058 ] glucógeno resulta más compacta.

5. En qué partes del organismo animal se


almacena el glucógeno.

El glucógeno se encuentra sobre todo en


hígado y músculos, con cantidades modestas
en el cerebro. Aunque el contenido de
glucógeno en hígado es mayor que en
músculos, dado que la masa muscular del
cuerpo es bastante mayor que la del hígado, Imagen XII: Estructura glucógeno.
alrededor de tres cuartas partes del glucógeno
corporal total están en el músculo.
El glucógeno muscular proporciona una fuente
fácilmente disponible de glucosa 1-fosfato
para glucólisis dentro del músculo
Imagen XV: Estructura glucógeno
Imagen XIII: Estructura amilopectina
c. Amilosa y celulosa
b. Amilosa y glucógeno
Semejanzas:
Semejanzas:
-Están formadas por la unión de alfadiglucosa
-Ambos sirven como reserva energética
-Ambas son producidas por las células
-Los dos se unen por enlaces glucosídicos vegetales

-Son polímeros de la glucosa, es decir, se -Las dos son polímeros no ramificados


forman por la unión de muchas moléculas de
glucosa. Diferencias:

Diferencias -La amilosa es soluble en agua caliente por su


parte la celulosa es altamente cristalina y
-La amilosa es un polímero de cadena lineal y prácticamente no se disuelve en nada
el glucógeno de cadena ramificada.
-En la amilosa todos los monómeros se
-La amilosa es soluble en agua, en cambio el orientan en la misma dirección, en la celulosa
glucógeno es insoluble. cada monómero sucesivo total 180°alrededor
del eje de la cadena polimérica con respecto
-La amilosa es un polímero de reserva al monómero anterior.
energética que se encuentra en los vegetales,
y el glucógeno se encuentra en los animales -La celulosa es un carbohidrato estructural de
especialmente en el hígado y músculo. pared, en cambio la amilosa es un
carbohidrato de reserva energética.
-La amilosa se tiñe de azul al reaccionar con
yodo y el glucógeno se tiñe de rojo. -La amilosa está formada por la unión de
moléculas de α - D - glucosa, unidas mediante
-El glucógeno se encuentra en forma de enlaces glucosídicos a - 1 —> 4, la celulosa
gránulos dispersos en el citoplasma de las está constituida por la unión de moléculas de
células hepáticas, la amilosa se acumula en β - D - glucosa, unidas mediante enlaces
forma de gránulos dentro de los plastos, en la glucosídicos β - 1 —> 4.
célula vegetal.
-La Celulosa es el principal componente de las
paredes celulares de los árboles y otras
plantas, la amilosa junto con la amilopectina
forma el almidón, este se encuentra en raíces,
tubérculos y semillas.

Imagen XIV: Estructura amilosa

Imagen XVI: Estructura amilosa


Referencias
[1] Gutiérrez, R. D. (1986). Obtenido de
https://idus.us.es/bitstream/handle/114
41/74423/TD%20D-020.pdf?
sequence=1&isAllowed=y

[2] Rodwell, V. W. (2010). En Harper.


Imagen XVII: Estructura celulosa
Bioquimica Ilustrada (pág. 189).
McGRAW-HILL INTERAMERICANA
EDITORES, S.A. de C. V.
CONCLUSIONES
[3] Mathews, C. (2013). Bioquimica . Pearson
Educaticion .
Se determinó la existencia de polisacáridos en
el hígado de cerdo por medio de la prueba de
Difenilamina, la cual dio un resultado positivo, [4] Guerra, J. J. (2002). Obtenido de
debido a que se presentó la aparición en el https://libroelectronico.uaa.mx/present
tubo de ensayo de un aro color café, lo que acion.html
confirmó la presencia de polisacáridos en este
caso del glucógeno. [5] Sánchez, M. M. (2013). Obtenido de
http://www.scielo.org.mx/pdf/eq/v24n1/
Se identificó la presencia de Carbohidratos en
general en el hígado de cerdo, por medio de la v24n1a6.pdf
prueba de Molish, la cual dio un resultado
positivo, debido a la aparición de un anillo [6] Torre, P. R. (2012). Obtenido de
color violeta en el tubo de ensayo, lo que https://idus.us.es/bitstream/handle/114
corroboró la presencia de carbohidratos en la 41/55115/2012ragelident.pdf?
muestra. sequence=1&isAllowed=y
Se verificó la presencia de almidón y
glucógeno en el hígado de cerdo por medio de [7] Xuyá, M. D. (2017). Obtenido de
la prueba de Lugol, ya que se dio una http://www.repositorio.usac.edu.gt/645
coloración azul- violeta intenso, lo que 3/1/Marvin%20Danilo%20Ajcip
confirmó la presencia de almidón, y para el %20Xuy%C3%A1.pdf
caso del glucógeno se observó una coloración
rojiza.
[8] Tejedor, C. (2012). Obtenido de
http://www3.uah.es/bioquimica/Tejedo
Se analizó la utilización de componentes
físicos en el proceso de obtención de r/inicio.htm
carbohidratos en el hígado de cerdo, como lo
fueron la arena, el uso del método de
centrifugación y baño maría, para de esta
forma realizar el daño mecánico de la
estructura celular del hígado, separar las
sustancias contenidas en la muestra por
medio del peso molecular y estabilizar la
molécula.

Se observó la importancia de utilizar solventes


orgánicos en los procesos de obtención de
carbohidratos, para realizar un daño químico
en la muestra y de esta forma dar la aparición
de flóculos insolubles, por medio de la
alteración en la carga eléctrica.

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