BIOQUÍMICA CLÍNICA

ESPECTROFOTOMETRÍA

Dr. Keylor Arroyo Gutiérrez

MQC 1778
Limitaciónes de la Ley de Lambert y Beer

 Dispersión de la luz por particulas en la muestra

 Fluorescencia de la muestra
 Radiación no monocromática
 Luz extraña (ruido)
 Cubetas sucias
 Interferentes analiticos (Lipemia, Hemolisis, Ictericia)
ESPECTROFOTOMETRÍA

SELECCIÓN DE LONGITUD DE
ONDA:
 Según cada analíto y cada reacción
química se selecciona la longitud
de onda específica en la cual la
absorbancia producto de la reacción
o del analito sea MÁXIMA

 ESPECTRO DE ABSORCIÓN:
Calibradores

 Para poder calibrar son necesarios estándares o calibradores, estas son sustancias de
referencia, se conoce su valor y es considerado exacto.
 Con los calibradores se construye una curva de calibración y con ella se determina:
 Linealidad
 Sensibilidad
 Límite de detección
 Límite de cuantificación
 Intervalo analítico
PRACTICA DE CÁLCULOS

 CURVA DE CALIBRACIÓN E INTERPOLACIÓN DE UNA INCÓGNITA

Absorbancia de la muestra considerando el blanco
0,334-0,087=0,247

CM= (0,247/0,339)×7g/dl = 5,1 g/dL

FACTOR: 10+7,5 +5+2,5 / 0,432+0,279+0,169+0,041 = 27,14

Absorbancia de la muestra considerando el blanco

0,334-0,087=0,247

CM= 0,247×27,14= 6,70 g/dL

OTROS MÉTODOS
TURBIDIMETRÍA y NEFELOMETRÍA
OTROS MÉTODOS
TURBIDIMETRÍA y NEFELOMETRÍA
OTROS MÉTODOS
TURBIDIMETRÍA y NEFELOMETRÍA