INSTITUTO TECNOLÓGICO DE PACHUCA

DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA QUÍMICA Y BIOQUÍMICA

ANALISIS INSTRUMENTAL

PRÁCTICA DE LABORATORIO

PRECISIÓN Y SENSIBILIDAD

AGOSTO-DICIEMBRE 2023
 1) DATOS DE LA PRÁCTICA

Asignatura: ANALISIS INSTRUMENTAL

Unidad: 1 Generalidades del análisis instrumental

Tema: 1.3 Sensibilidad y límites de detección

Práctica No. 2

Determinación de la mínima señal analítica distinguible (Sm )

Lugar de la Práctica: Laboratorio de Química Analítica

Tiempo de duración de la práctica:

2) COMPETENCIA ESPECÍFICA
Calcula la mínima señal analítica distinguible mediante la evaluación de 30 mediciones de un blanco analítico por medio espectrofotómetro GENESYS 20 para
determinar el límite de detección de métodos instrumentales.

3) MEDIDAS DE SEGURIDAD:
Las establecidas en el reglamento del laboratorio de Química Analítica.
El alumno debe portar el equipo de protección de uso obligatorio durante el desarrollo del trabajo en el laboratorio como:

I. La bata de algodón de su talla con mangas largas y abotonada.

II. Gafas de seguridad que protejan los ojos (de frente y lateral).
III. Guantes de nitrilo que protegen contra productos químicos y abrasivos.
IV. Cabello recogido.
V. Calzado cerrado (piel).

En particular:
VI. Evite beber líquidos en su lugar de trabajo.
VII. Emplear pipetor para medir las substancias líquidas para evitar ingerir cualquier sustancia corrosiva.
VIII. Utilizar mascarilla con filtro y guantes para el manejo de las substancias.
IX. Al medir y transferir líquidos como el ácido clorhídrico, nítrico y el hidróxido de amonio que desprenden vapores tóxicos o corrosivos deben realizarse en la
campana de extracción.
X. Las soluciones que se preparan deben etiquetarse correctamente.

4) MATERIAL Y EQUIPO SUSTANCIAS

5 Celdas para espectrofotómetro Agua destilada
1 Vaso de precipitado (100 mL) Papel seda
1 Piceta
1 Par de guantes
1 Googles

Espectrofotómetro GENESYS 20
Reportar cualquier anomalía que se detecte en el lugar de trabajo
 5) FUNDAMENTO
Al realizar la selección selección adecuada de un método instrumental, es necesario establecer la naturaleza del problema analítico mediante una serie de
preguntas como: i) ¿Qué exactitud se requiere?, ii) La cantidad de muestra que se tiene, iii) ¿Qué componentes de la muestra interfieren?, iv) ¿Cuáles son las
propiedades físicas y químicas de la matriz de la muestra?, v) ¿Cuánto tiempo se dispone para obtener los resultados?, vi) ¿Cuántas muestras hay que analizar?

La respuesta a las preguntas anteriores admiten seleccionar y desarrollar un método sencillo y preciso, para llevarlo a cabo en menor tiempo y costo.
Existen criterios cuantitativos como: la precisión, sesgo, sensibiidad, límite de detección, intervalo de concentración y selectividad, que permiten tomar la decisión
sí un método instrumental es útil para resolver un problema analítico. Cada criterio se determina por medio de ciertos parámetros de calidad, los criterios con
mayor aplicación son: precisión, sensibilidad y límite de detección.
Precisión: La precisión de los datos analíticos es el grado de concordancia entre los datos que se obtuvieron de la misma manera, y proporciona una medida del
error aleatorio o indeterminado de un analito. La precisión se determina mediante los siguientes parámetros de calidad:
a) Desviación estándar absoluta
b) Desviación estándar relativa
c) Desviación estándar de la media
d) Coeficiente de variación
e) Varianza
Los parámetros de calidad se utilizan para decidir si un método es adecuado o no para resolver un determinado problema analítico, estos parámetros de calidad
son la expresión numérica de características de calidad o indicadores de calidad de los métodos.

La sensibilidad es otro de los criterios numéricos que permite selección un método y se admite que la sensibilidad de un instrumento o método, es una medida de
su capacidad de diferenciar pequeñas variaciones en la concentración del analito.
Dos factores limitan la sensibilidad, la pendiente de la curva de calibración y la precisión del sistema de medida. Para dos métodos que tengan igual precisión, el
que tenga la mayor pendiente será el más sensible.
La definición de sensibilidad de acuerdo a la IUPAC, es la sensibilidad de calibrado, que se define como a pendiente de la curva de calibrado a la concentración
objeto de estudio. Se representa mediante a siguiente ecuación.
𝑆 = 𝑚𝑐 + 𝑆𝑏𝑙

Dónde:
𝑆 = Señal medida
𝑐 = Concentración del analito
𝑆𝑏𝑙 = Señal de incremento para un blanco
𝑚 = Pendiente de la recta
Límite de detección: Es la concentración de masa mínima del analito que puede ser detectada con un nivel de confianza dado. El límite dependerá de la relación entre
la magnitud de la señal analítica y el tamaño de las fluctuaciones estadísticas de la señal del blanco.
̅𝑏𝑙 ) más un múltiplo k de la desviación estándar del
La mínima señal analítica distinguible (Sm) se determina mediante la suma de la medida de la señal blanco (𝑆
blanco, mediante a siguiente ecuación:
𝑆𝑚 = 𝑆 ̅𝑏𝑙 + 𝑘𝑠𝑏𝑙

𝑆𝑚 = 𝑀í𝑛𝑖𝑚𝑎 𝑠𝑒ñ𝑎𝑙 𝑎𝑛𝑎𝑙í𝑡𝑖𝑐𝑎 𝑑𝑖𝑠𝑡𝑖𝑛𝑔𝑢𝑖𝑏𝑙𝑒

̅̅̅̅
𝑆𝑏𝑙 = 𝑆𝑒ñ𝑎𝑙 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
𝑘 = 𝐶𝑜𝑛𝑡𝑎𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝐾𝑎𝑖𝑠𝑒𝑟 = 3
𝑠𝑏𝑙 = 𝐷𝑒𝑠𝑣𝑖𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎

La mínima señal analítica distinguible se determina experimentalmente al realizar de 20 a 30 medidas del blanco, preferiblemente durante un amplio periodo de
tiempo.
Mediante la pendiente (m) y la mínima señal analítica distinguible (𝑆𝑚 ) se establece el límite de detección mediante la siguiente ecuación:
𝑆𝑚 −𝑆̅𝑏𝑙
𝐶𝑚 =
𝑚
𝐶𝑚 = 𝐿í𝑚𝑖𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝑑𝑒𝑡𝑒𝑐𝑐𝑖ó𝑛
𝑆𝑚 = 𝑀í𝑛𝑖𝑚𝑎 𝑠𝑒ñ𝑎𝑙 𝑎𝑛𝑎𝑙í𝑡𝑖𝑐𝑎 𝑑𝑖𝑠𝑡𝑖𝑛𝑔𝑢𝑖𝑏𝑙𝑒
̅̅̅̅
𝑆𝑏𝑙 = 𝑆𝑒ñ𝑎𝑙 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
𝑚 = 𝑃𝑒𝑛𝑑𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒
6. PROCEDIMIENT0

1) Encender el espectrofotómetro 30 minutos antes de empezar las mediciones.

2) Ajustar el espectrofotómetro a 525 nm de absorbancia.
3) Colocar agua destilada en las celdas disponibles, aproximadamente ( ¾) de su volumen.
4) Limpiar los dos lados de la celda translucidas con los pañuelos, tomando por los lados los extremos más opacos.
5) Colocar la celda en el portacelda del espectrofotómetro, cuidando de orientar en la dirección correcta (que la flecha de la celda tenga la misma dirección
que la del espectrofotómetro).
6) Registrar la lectura.
7) Repetir el paso 5 y 6 para cada una de las celdas restantes.
8) Apagar el espectrofotómetro.
9) Secar las celdas usando los pañuelos y almacénalas.

Posteriormente al tener todos los datos de la señal del blanco, calcular la mínima señal analítica

7. CÁLCULOS

Instrucciones: A partir de los datos obtenidos determinar Sm 1

No. de replicados (N) Señal

1
2
3
….
….
30

Media de la señal Desviación estándar (ss ) Calcular la mínima señal analítica

̅̅̅̅
𝑆𝑏𝑙 distinguible Sm

8. RESULTADOS

9. CUESTIONARIO

1) ¿Cuál es la aplicación de los criterios de calidad?

2) Establezca las expresiones matemáticas para calcular los parámetros de los criterios de precisión, sesgo, sensibilidad y límite de detección..
3) ¿Cuál es la diferencia la precisión del sesgo?
4) ¿Cuál es la diferencia entre sensibilidad de calibrado y sensibilidad analítica?
5) ¿Cuál es el procedimiento para determinar la mínima señal analítica distinguible (Sm )?
6) ¿De qué depende el límite de detección?
7) Se requiere validar un método para la determinación de alcohol en un fármaco. Para ello se realizan 20 medidas del blanco y las lecturas
que se obtienen en unidades arbitrarias (UA) son las siguientes:

0.02 0.01 0.03 0.00 0.02 0.04 0.01 0.03 0.02 0.00
0.04 0.01 0.02 0.00 0.01 0.03 0.03 0.02 0.01 0.04

Determinar la mínima señal analítica distinguible (Sm).

10. CONCLUSIONES

11. FUENTE

SKOOG, D.A., HOLLER, F.J., CROUCH, S.R. Principios de análisis instrumental. Ed. Cengage Learning, México, 2008.

12. GLOSARIO

13. ANEXOS

La calificación del reporte se asigna de acuerdo a los siguientes aspectos:

1) La organización y desarrollo del trabajo en el laboratorio.

2) El trabajo en equipo.
3) El trabajo desarrollado en la bitácora y la entrega del reporte de práctica.