Métodos Analíticos

Métodos químicos por Métodos instrumentales

vía húmeda
Se obtiene una señal:
S  Canalito

Gravimetría Análisis Electroquímicos Separación Opticos

volumétrico

Cromatográfico
Precipitación Titulación Potenciométrico Emisión

Pesada Conductimétrico Absorción

 Métodos Clásicos
 Separación de los componentes de interés de una
muestra (analitos) mediante:
 Precipitación
 Extracción
 Destilación
 Análisis Cualitativos
 Los componentes separados se trataban con
reactivos dando origen a productos que se podían
identificar por su color, punto de ebullición o de
fusión, su solubilidad, su olor, su actividad óptica
o su índice de refracción.
 Análisis Cuantitativos
 La cantidad de analito se determinaba mediante
medidas gravimétricas o volumétricas.
Metodos Instrumentales
 Métodos modernos que separan, identifican y cuantifican
diferentes especies químicas (orgánicas, inorgánicas,
bioquímicas, etc.)
 Se basan en fenómenos físicos-químicos conocidos.
Su aplicación ha ido en paralelo al desarrollo de la
electrónica.
 Para el análisis cuali o cuanti se miden las propiedades
de los analitos.
SEÑALES ANALITICAS
 Ej.
Absorción o emisión de luz
Conductividad o potencial de electrodo
Dispersión, rotación, refracción, difracción
 Instrumentos para el Análisis
 Un instrumento para análisis químico debe:
– convertir las señales químicas o físicas almacenadas del
analíto, en información que puede ser manipulada e interpretada
por el ser humano.
 El instrumento es un dispositivo de comunicación entre el
sistema de estudio y el investigador.
 Para obtener información el analíto se estímula con energía
electromagnética, eléctrica, mecánica o nuclear.
Componentes de un Instrumento
– Generador de señales
– Transductor de entrada o detector
– Procesador de señales
– Transductor de salida o dispositivo de lectura
DIAGRAMA OPTICO DEL FLUOROMETRO
La selección de un método analítico
 Definición del Problema
- De cuánta muestra se dispone
- Qué componentes de la muestra interferirán
- Cuáles son las propiedades físicas y químicas de la
matriz de la muestra
- Cuántas muestras deben analizarse

- Parámetros de Calidad
- Exactitud y Precisión
- Sensibilidad Y Selectividad
- Límite de detección e intervalo de concentración
Selección de un Método
Analítico
 Otras características a tener en cuenta en la
elección del método
1. Velocidad
2. Facilidad y comodidad
3. Habilidad del operador
4. Coste y disponibilidad de equipo
5. Coste por muestra
 Precisión
 Grado de concordancia
entre los datos que se
obtienen de una misma
forma.
 Mide el error aleatorio o
indeterminado de un
análisis. Ej.
% Hum.
Vibraciones
Cambio T o
Sus parámetros de
calidad son Desv. est.
media, absoluta, relativa,
CV y varianza
Precisión
 Repetitividad
Precisión determinada cuando las mediciones se realizan en
condiciones repetibles, es decir: el mismo método, mismo
material, mismo operador, mismo laboratorio; período de
tiempo limitado.

 Reproducibilidad
Precisión determinada cuando las mediciones se realizan en
condiciones reproducibles, es decir: el mismo método;
diferentes operadores; diferentes laboratorios, diferentes
equipos y un largo período de tiempo.
Exactitud
 Mide el error sistemático, o determinado de un método
analítico.
 Se define por la ecuación:  = u – xt
 es la media de la población para la
concentración del analito en una muestra cuya
concentración verdadera es xt
La exactitud se determina analizando estándares de
referencia.
Ej. Mala calibración, equipo dañado (causas
defindias) Preci si on and A ccuracy

Preci si on – Preci si on + Preci si on – Preci si on +

A ccuracy – A ccuracy – A ccuracy + A ccuracy +

F undam entals of m odern U V-visible s pectrosc opy

F ig ure : 71
Sensibilidad
 Capacidad de un método o instrumento de diferenciar
pequeñas diferencias en la concentración de los analitos
 La IUPAC, define la sensibilidad como:
La pendiente de la curva de calibración a la [ ] de
interés
 Depende de:
La pendiente de la curva de calibración y
Reproducibilidad o precisión del sistema de medición
 Para dos métodos con igual precisión,
el que presente la mayor pendiente en la curva de
calibración será el más sensible
  Sensibilidad de Calibración: Pendiente de la curva de
calibración a la concentración de interés.

S  mc  Sbl
La sensibilidad de calibración tiene el inconveniente
de no tomar en cuenta la precisión. Por ello, Mandel
y Stiehler proponen la Sensibilidad analítica γ:

  m / ss
Es insensible a los factores de amplificación e
independiente a las unidades en que miden S.
Límite de detección
 Concentración o peso mínimo de analito que puede detectarse
para un nivel de confianza dado.
 Cuando nos aproximamos al límite de detección, la señal
analítica se aproxima a la señal del blanco Sbl.
 La mínima señal analítica distinguible Sm se toma como la
suma de la señal medida del blanco Sbl más un múltiplo k de
la desviación estándar del mismo.

Sm  Sbl  ksbl
LINEALIDAD
Capacidad del método de producir
resultados que son directamente
proporcionales a la [ ] del analito en
la muestra.

ROBUSTEZ
Capacidad del método para no ser
afectado por pequeños cambios
deliberados en sus parámetros y
provee una indicación de su
confiabilidad durante su uso normal.
Selectividad
 Grado de ausencia de interferencias debidas a otras
especies contenidas en la matriz de la muestra.
 El coeficiente de selectividad de B con respecto a A se
define como:
kB,A = mA/mB
Da la respuesta relativa del método para la especie B cuando
se compara con A
Los coeficientes de selectividad pueden variar desde 0 (no hay
interferencia) hasta valores superiores a uno.
 Calibración de los métodos
Instrumentales

 ISO (International Estándar Office)

Define la calibración como:
El conjunto de operaciones que
permiten establecer en determinadas
condiciones experimentales, la relación
existente entre los valores indicados por
el instrumento con los valores obtenidos
con la medida de un valor conocido.

Curvas de calibración
Método de las adiciones estándar
Método del estándar interno.
 Curva de calibración
 Se utilizan estándares de concentraciones conocidas del analito de
interés.
 Se requiere un blanco que contenga los componentes de la muestra
original excepto el analito
 Se obtiene una gráfica (recta) de respuesta del instrumento vs
concentración del analito.
 Método de mínimos
cuadrados.
Señales y Ruido
 Cada medida analítica lleva
dos componentes:

La que lleva la información

del analito de interes
La que tiene información
ajena, no deseada: el ruido

Definición de la relación señal/ruido (S/N)

S media .. de ..la .. medida x
 
N desviación ..estándar .. de ..la .. media s
 La detección de una señal
mediante un sistema visual
resulta imposible cuando la
relación señal/ruido es < 2
o 3
Fuentes de ruido

 Ruido químico
- Fluctuaciones en la humedad de la muestra
- Estratificaciones en un sólido o polvo
- Cambios en la intensidad de la luz que afectan
sustancias fotosensibles
- Cambios de presión o temperatura que afectan
el equilibrio (ej. humos)
 Ruido instrumental
Se asocia a cada componente del instrumento:
fuente, transductor de entrada o transductor de salida

Puede ser de distinto tipo y provenir de distintas

fuentes
 tipos de ruido instrumental:
1)Ruido térmico (o Johnson)
2)Ruido de disparo
3)Ruido de parpadeo (o 1/f)
4)Ruido ambiental
 Ruido térmico, o ruido Johnson
Se debe a la agitación térmica de los electrones u
otros portadores de carga
Dicha agitación o movimiento origina periódicamente
heterogeneidades de carga que a su vez crean
variaciones de voltaje

 Ruido de disparo:
Se origina siempre que exista una corriente que
produzca un movimiento de electrones o de otras
partículas cargadas a través de una unión 8p y n o el
vacío para un tubo de vacío.

Puede minimizarse reduciendo el ancho de banda de

las frecuencias.
 Ruido de parpadeo
- Sus causas no se comprenden bien.
- Su valor es inversamente proporcional a la
frecuencia de la señal que se observa.
Ruido 1/f
- Significativo para frecuencias < 100 Hz

 Ruido ambiental
Proviene del entorno; cada conductor de un instrumento
es una antena potencial que capta radiación
electromagnética y la convierte en señal eléctrica.
Aumento de la relación S/N
 Puede mejorarse por hardware o software

Hardware: incorpora al diseño del instrumento filtros, cortadores,

escudos, moduladores, detectores sincrónicos

Software: se basan en distintos algoritmos digitales de

ordenador que permiten extraer las señales de entornos
ruidosos