PROTEINAS

¿QUÉ SON LAS

PROTEÍNAS?
 Biomoléculas formadas básicamente de C, H, O, N y
otro tipo de elementos.
 Son polímeros de pequeñas moléculas unidas entre
ellas por enlaces peptídicos.
 Macromoléculas de elevado peso molecular, que
considera más de 50 monómeros; normalmente
constituyen el principal nutriente para la formación de
los músculos del cuerpo.
 Conservan su actividad biológica solamente en un
intervalo relativamente limitado de pH y de
temperatura
 Las proteínas ejercen muy diversos papeles en los seres
vivos: la seda, el pelo, los músculos, el tejido conectivo
y casi todos los enzimas son proteínas.
PROTEINAS: IMPORTANCIA
 >50% del peso seco de las células.

 Sin ellas es imposible la vida.

 Presente hasta en las formas

simples de vida: virus.

 Su importancia biológica esta en

las funciones que realiza.
FUNCIONES BIOLÓGICAS

ENZIMAS ESTRUCTURA ENERGETICA

• Reacciones L • 15% de los
químicas • Membrana celular requerimientos
energéticos
 TRANSPORTE RESPUESTA MENSAJERO
Hemoglobina (O2) INMUNE QUÍMICO
Albumina (ac. Antígeno (hormona)
Grasos) Anticuerpo RECEPTOR
Ceruloplasmina
(Cu)
Transferrina (Fe)
CONTRACCION CRECIMIENTO Y REGULACION DE
MUSCULAR PROLIFERACION LA
(actina-miosina) CELULAR CONCENTRACION
DE
HIDROGENIONES
COAGULACION
SANGUINEA
 CLASIFICACIÓN DE
PROTEÍNAS
Una sola cadena peptídica

o Haloproteínas, formadas únicamente por

aminoácidos

: dos o más cadenas peptídicas

o Heteroproteínas, cadenas polipeptídicas con grupo prostético

COMPOSICIÓN ELEMENTAL
• aminoácidos. • aminoácidos +
• C:50%, O:23%, grupo prostético
N:16%, H:7%,
S:3%

SIMPLE CONJUGADA

El contenido de N permite estimar el contenido proteico de una muestra:

P= Np (100/16)

P: contenido proteico de una muestra.

Np: contenido de nitrógeno de la muestra
CARÁCTER
MACROMOLECULAR
Péptido
< 50 aa

Cadena poli
peptídica

Proteína
( >50aa
1 o + c. poli peptídica)
ENLACE
PEPTIDICO
AMINOÁCIDOS
 Unidades estructurales de las proteínas, son de bajo peso molecular.
 Solamente 20 aa son
codificados por el DNA
para formar las proteínas
(proteinogénicos)
 CLASIFICACIÓN

• Aa con cadena R • Aa con cadena R • Aa con cadena R • Aa con cadena R

no polar o polar pero sin polar y con carga polar con carga
hidrofóbica carga eléctrica a negativa a pH positiva a pH
pH cercano a la cercano a la cercano a la
neutralidad neutralidad neutralidad
GRUPO GRUPO
GRUPO I GRUPO II
III IV
 AMINOÁCIDOS DEL GRUPO I (APOLARES)
R alifática
*soluble R alifática R alifática

Iminoacido R aromática

R azufre

R alifática

R aromática
> PM
 AMINOÁCIDOS DEL GRUPO II (POLARES NO IONIZABLE
Hidroxilo
*enzimas
Hidrogeno
hidroxilo
+simple

hidroxilo
Sulfhidrilo

Amidas Amidas
AMINOÁCIDOS DEL GRUPO III(POLARES IONIZABLESÁ
AMINOÁCIDOS DEL GRUPO IV (POLARES IONIZABLES B

Imidazol

Guanidino

Épsilon
amino
AA: PROPIEDADES FÍSICAS
 Actividad óptica:
 Son capaces de desviar el plano de luz polarizada (carbono asimétrico)
 Excepto la glicina
 Se mide como rotación especifica
 Clasifica a los aa en Dextrógiros (+) si desvían el plano de luz polarizada hacia
la derecha, y Levógiros (-) si lo desvían hacia la izquierda.
 AA: PROPIEDADES FÍSICAS
 Absorción de luz:
 En el espectro UV lejano
 Triptófano, tirosina y fenilalanina (también cisteína)
 Permite estimar la concentración proteica de una muestra biológica.
 Permite estimar el grado de contaminación proteica en una preparación de ac. Nucleicos.
 AA: PROPIEDADES
ELÉCTRICAS
 En disolución acuosa, son capaces de ionizarse, dependiendo del pH:
 como un ácido (cuando el pH es básico),
 como una base (cuando el pH es ácido)
 Ojo
No lo olvides!
importante!
 No lo
olvides!
 K carboxilo= 5x10 -3

K amino=2.5x 10 -9

Como son cifras tan pequeñas es mas practico expresarlas como su logaritmo
negativo = pK

pK= -Log 5x10-

3-
pK = - (Log 5 +log 10 )
3
pK = - (0.69 -3)
pK = -(-2.31)
pK = 2.31

[H+] K [aa]
[base]
1 1 [base]
[H] K [aa]
Log 1/H= log 1[base] / k[aa]
-log [H] = -log K + log [base]/[aa] Ecuación de
pH = pK + log [base]/[aa] Henderson-Hasselbach
 El pH en el cual un aa tiende a adoptar
una forma dipolar neutra (igual número de
cargas positivas que negativas) se
denomina Punto Isoeléctrico.
pH / aa NH2- -COOH TOTAL
9.9 2.3
0 – 2.3 + 0 +1
2.3 – 9.9 + - 0
9.9 - 14 0 - -1
 100%
de C

C=D D=E
A=B B=C

pH = pK PI = (4.3 + 9.0) / 2
50% R-COOH PI =6.65
50% R- COO-
pH/aa Lis –NH2 Lis –R Leu Trp Glu –R Glu_COOH TOTAL
9 10.5 4.3 2.2
0-2.2 + + X X 0 0 +2
2.2-4.3 + + X X 0 - +1
4.3-9 + + X X - - 0
9-10.5 0 + X X - - -1
10.5-14 0 0 X X - - -2

PI= (4.3+9)/2
AA: PROPIEDADES
ELÉCTRICAS
 Separación de aa por
cromatografía de
intercambio iónico
AA: PROPIEDADES
ELÉCTRICAS
 Separación de aa
por electroforesis
AA: PROPIEDADES
ELÉCTRICAS
 Separación de aa por cromatografía de partición (papel)
 AA:
 Reacciones del grupo alfa amino:
 Los aa experimentan arilacion cuando reaccionan
con el 1- fluoro 2,4 dinitrobenceno.
PROPIEDADES  Los aa reaccionan con el fenilisotiocianato,

QUÍMICAS reacción de Edman.

AA: PROPIEDADES QUÍMICAS
 Reacciones del grupo alfa amino:
 Los aa reaccionan con el cloruro de dansil

Prolina
 La reacción de los aa con ninhidrina
AA: PROPIEDADES
QUÍMICAS
 Reacciones del grupo alfa carboxilo:
 Reacción de reducción
 AA: PROPIEDADES QUÍMICAS
 Reacciones de los grupos de reactivos de la cadena lateral:

Reacción Reactivo Aminoácido Color

Millon Nitrato de mercurio en ac. nitrico Tirosina Rojo
Ehrlich Triptófano Azul
Nitroprusito Nitroprusiato de sodio en Cisteína Rojo
amoniaco diluido
Sullivan Sulfonaptoquinona e hidrosulfito Cisteína Rojo
de sodio
Pauli Ac. Sulfamílico en medio alcalino Histidina y Rojo
tirosina
Folin Ac. fosfomolibdotungstico Tirosina Azul
PROTEÍNAS: PROPIEDADES
FÍSICO QUÍMICAS
 Derivadas de su peso molecular

Análisis por
Separación por ultra
Separación por diálisis cromatografía de
centrifugación
exclusión molecular
• Incapacidad de • Capacidad de
atravesar membranas sedimentar cuando
semipermeables estando en solución
son centrifugadas a
alta velocidad
• >PM >coeficiente de
sedimentación
PROTEÍNAS: PROPIEDADES
ELÉCTRICAS
 Comportamiento anfótero.
 Valores de pK no son iguales a los de aa libres.
 El PI depende de los aa constituyentes.

Precipitación

Separación
Electroforesis
Acción buffer
PROTEÍNAS
 Acción buffer: regulación del pH (cede o acepta hidrogeniones)
PROTEÍNAS
 Electroforesis:
PROTEÍNAS
 Precipitación:
 Fuerza iónica de la solución

 Salting in: fuerza iónica ( solución mas diluida), proteína es mas soluble

 Salting out: fuerza iónica (solución mas concentrada) , proteína es menos soluble.
 pH:
 pH de la solución es cercano al PI, proteína es menos soluble
 pH > o < al PI, proteína es mas soluble
 Naturaleza del solvente:
 depende de la constante dieléctrica de la solución.
 Temperatura: (0° - 40°)
 A mayor T° la proteína es mas soluble
PROTEÍNAS
 Reacciones de color:
 CANTIDAD TOTAL DE PROTEINAS

 Método de Biuret: (La reacción debe

su nombre al biuret, una molécula
formada a partir de dos de urea )

H2N-CO-NH-CO-NH2

Cu+2