INTRODUCCIÓ

N
Hace más de una década, la ingeniería metabólica comenzó a
diferenciarse de otros campos relacionados (Bailey, 1991; Cameron y
Tong, 1993). Ahora está claro que la ingeniería metabólica se ocupa
de sistemas que involucran interacciones entre múltiples componentes
en una ruta, red u organismo completo, mientras que la mayoría de los
otros campos se enfocan más en componentes biológicos individuales.
Inspiradas y facilitadas por el progreso de diversas técnicas
genómicas en la última década, las actividades de ingeniería
metabólica que van desde la construcción de cepas hasta el análisis de
sistemas se han vuelto cada vez más sofisticadas. Como resultado de
estos avances, los resultados exitosos se han vuelto frecuentes en la
literatura científica y han llevado a muchos avances comerciales.
 Construcción de Circuitos de
Regulación No Nativos
La expresión génica celular es dinámica y está estrictamente controlada. Las
variaciones en los estados fisiológicos y las condiciones ambientales cambian la
concentración de metabolitos clave y moléculas de señal. Una serie de vías de
transducción de señales, como los reguladores de dos componentes en las
bacterias, detectan estos desafíos y transducen la señal a factores de
transcripción específicos que modulan la expresión de una gran cantidad de
genes. Estos circuitos constituyen una red regulatoria de alta efectividad para
hacer frente a los desafíos internos y externos. Bajo estas circunstancias, el
objetivo del ingeniero metabólico es reconfigurar estos circuitos para facilitar la
formación del producto.
Por lo general, la sobreexpresión de proteínas y metabolitos conduce a un
desequilibrio celular debido al agotamiento constante de energía y
recursos en la vía de producción diseñada. Estas perturbaciones provocan
un retraso del crecimiento y niveles de producción subóptimos de la cepa
modificada. Por lo tanto, se necesita una coexistencia armónica de las
funciones celulares y los modos de producción. Esto se puede lograr
expresando los genes de producción de acuerdo con la fisiología celular
de forma dinámica.
El desafío es encontrar una molécula de señal
que refleje el estado fisiológico, un sensor que
detecte la señal y un regulador que module la
transcripción. Hacia este final, Farmer y Liao
(2000) utilizaron fosfato de acetilo (AcP) como
molécula de señal para reflejar el exceso de
glucosa y la proteína NRI (o NtrC) como sensor y
regulador en un trasfondo genético que carece
de su principal compañero de detección, NRII
(NtrB). Cuando la glucosa no se usa de manera
eficiente para el crecimiento, se canaliza a
acetato. En este estado, AcP aumenta, lo que
fosforila NRI, que a su vez regula al alza la
glnAp2promotor. Cuando los genes que controlan
la velocidad se colocan bajo el control
delglnAp2promotor, se crea un circuito de
retroalimentación artificial, que responde
dinámicamente al estado fisiológico.
CONCLUSIONES

Ha habido cambios significativos tanto en las herramientas de

investigación como en la filosofía de la investigación en la última década.
Debido al éxito de la genómica, se han desarrollado varias herramientas de
alto rendimiento. Como resultado de la gran cantidad de datos generados,
los enfoques de sistemas han ganado una aceptación cada vez mayor en
biología. Mientras tanto, la ingeniería metabólica también se ha
transformado de un campo altamente teórico a un campo que ha generado
muchos productos tangibles. A medida que mejora la eficiencia de la
clonación y la expresión de genes, es probable que el enfoque de la
ingeniería metabólica se desplace de las vías a las redes y de la
estequiometria a la regulación. Se espera que el progreso futuro se acelere
cuando las redes de regulación estén completamente dilucidadas e
integradas en las estrategias de ingeniería metabólica.