PRUEBAS DE

FUNCION HEPATICA Y
PANCREATICA
 HÍGADO

Generalidades.
1200-1600 g
El lobulillo hepático es la unidad
funcional del hígado
 FUNCIONES HEPÁTICAS

•Sintesis Proteica
•Destoxificacion
•Sintesis de los factores de
coagulacion
•Metabolismo de carbohidratos,
lípidos, aminoácidos, proteínas
•Metabolismo de la bilirrubina
 PRUEBAS DE FUNCIÓN HEPÁTICA

• Las PFH son determinaciones de componentes sanguíneos que

proporcionan información sobre la existencia, la magnitud y el
tipo de una lesión hepática.
• No sirven para valorar cuantitativamente la capacidad del hígado
para llevar a cabo las funciones enumeradas con anterioridad.
• Estas pruebas bioquímicas sirven para diferenciar entre:
■ obstrucción del tracto biliar
■ lesiones hepatocelulares agudas
■ enfermedad hepática crónica.
 PRUEBAS DE FUNCIÓN
HEPÁTICA
• La concentración de bilirrubina sérica total y la
actividad de la fosfatasa alcalina en suero sirven como
marcadores de colestasis, es decir, de un flujo
defectuoso de bilis;
• La primera también puede mostrar indicios de lesiones
del parénquima hepático.
• Las actividades de las aminotransferasas en suero son
indicativas de la integridad de los hepatocitos
 PRUEBAS DE FUNCIÓN
HEPÁTICA

• La concentración de albúmina en
suero mide de manera aproximada la
capacidad sintética del hígado,
aunque el tiempo de protrombina es
mejor indicador de la misma.
 PRUEBAS DE FUNCION Y LESION
HEPATICA
• Básicas Bilirrubina (función)

Enzimas (daño u obstrucción)

Proteínas totales (síntesis)

Albúmina (síntesis)

• Especiales Ferritina

Ceruloplasmina

1-antitripsina

-fetoproteína

• Inmunológicas Inmunoglobulinas/Anticuerpos
Serología hepatitis y VIH

• Hematológicas T. protrombina (síntesis)

• Diagnóstico molecular
UTILIDAD DE LAS PRUEBAS
HEPÁTICAS
• Determinar presencia o no de
enfermedad hepática.
• Hacer diagnóstico específico.
• Establecer severidad.
• Monitoreo del curso de la
enfermedad.
1 . METABOLISMO DE
FORMACIÓN DE LA
BILIRRUBINA
OBJETIVOS

Al finalizar la unidad, el estudiante será capaz de:

•Explicar la formación y metabolismo de la
bilirrubina.
•Desarrollar el mecanismo patológico de las
ictericias.
•Fundamentar el método de determinación de
bilirrubinas.
 CAPITULO 1. METABOLISMO DE
FORMACION DE LA BILIRRUBINA

• 1. Origen de la bilirrubina.
• 2. La bilirrubina y su metabolismo como
prueba de excreción hepática.
• 3. Clasificación de las ictericias
• 4. Diagnóstico diferencial de la ictericia.
• 5. Determinación de la bilirrubina.
 BILIRRUBINA
• Producto del catabolismo de la hemoglobina, a
partir de las porfirinas del núcleo hemo.
 FORMACION DE
BILIRRUBIBA
• En el cuerpo humano se degradan cada día 300-400 mg de
hemo, la mayor parte del cual procede de la hemoglobina.
• Los eritrocitos senescentes son englobados por macrófagos,
principalmente en el bazo.
• Los macrófagos eliminan el hemo de la apoproteína, y en
este proceso oxidan el hierro al estado férrico.
• Después convierten la hemina resultante en el pigmento
verde biliverdina, y la biliverdina en bilirrubina, de color
amarillo.
 CONJUGACION DE
BILIRRUBINA
• Desde el bazo se transporta la bilirrubina hasta el hígado en
un fuerte enlace no covalente con la albúmina sérica.
• Entra en el hepatocito por mecanismos poco conocidos y es
transferida hasta el retículo endoplásmico, donde es
conjugada a diglucurónido de bilirrubina por dos reac­ciones
sucesivas con difosfato de uridina (UDP)­ácido glucurónico.
• La reacción es catalizada por la enzima UDP-
glucuronosiltransferasa
(PARENTESIS)

• Las fases de la degradación del hemo se pueden obser var

en los cambios de color de un hematoma (p. ej., cuan do un
puñetazo en la cara deja un «ojo morado»). Des pués de la
rotura de los capilares, los eritrocitos infiltran los espacios
intersticiales, en los cuales se desoxigena la hemoglobina.
La desoxihemoglobina es azul. A los pocos días, los
eritrocitos son fagocitados por los macrófagos tisulares, y el
hemo es degradado primero a biliverdina y después a
bilirrubina. Desaparece la coloración azul y es sustituida
primero por un color verdoso y después ama rillo.
 EXCRECION DE
BILIRRUBIBA
• 60 a 80 % de la Bilirrubina que se excreta hacia la
bilis es diglucurónido de bilirrubina, y el 20-40%
es monoglucurónido de bilirrubina.
• Los glucurónidos de bilirrubina hidrosolubles son
segregados de forma activa hacia los canalículos
biliares principalmente por el transportador
dependiente de ATP MRP2 (proteína asociada a
resistencia a múltiples fármacos 2).
EXCRECION DE BILIRRUBIBA
• En el intestino, las bacterias desconjugan la bilirrubina biliar y la reducen a
urobilinógeno, que no tiene color.

• Parte del urobilinógeno se absorbe en el íleon.

• La mayor parte es eliminada por el hígado, que lo vuelve a segregar hacia la bilis.

• Una pequeña cantidad de urobilinógeno, habitualmente menos de 4 mg/día, llega a

los riñones y es excretado hacia la orina sin modificaciones o después de su
oxidación a urobilina, de color amarillo, que contribuye al color normal de la orina.
• En el intestino, las bacterias intestinales reducen primero el urobilinógeno no
absorbido a estercobilinógeno. Una proporción importante de este se oxida a
estercobilina, que es responsable del color marrón de las heces.
• Bilirubina indirecta o libre:
• Es la recién formada .
• Se transporta unida a la albúmina, no se elimina
por la orina.
• Captada por el hígado y al conjugarse con dos
ácidos glucorónicos se convierte en directa.
• Bilirrubina directa o conjugada: formada en el
hígado es excretada por la bilis. Es soluble y si
aumenta se elimina por la orina.
• Bilirrubina total: suma de directa e indirecta.
 LAS ELEVACIONES DE LA
BILIRRUBINA SÉRICA PRODUCEN
ICTERICIA
• La sangre normal contiene menos de 1 mg/dl de bilirrubina.
La mayor parte corresponde a bilirrubina no conjugada en
tránsito desde el bazo hasta el hígado.
• Las elevaciones de la bilirrubina conjugada o no conjugada
se denominan hiperbilirrubinemia.
• Los dos tipos de hiperbilirrubinemia dan lugar al depósito
de bilirrubina en la piel y la esclerótica del ojo. La
coloración amarilla resultante se denomina ictericia, y
aparece cuando la concentración de bilirrubina sérica
aumenta por encima de 4 mg/dl.
 BILIRRUBINA DIRECTA VS.
INDIRECTA
1. Solo la bilirrubina no conjugada, que es liposoluble,
puede entrar en el encéfalo. En los lactantes, esto puede
producir encefalopatía por bilirrubina, que avanza
rápidamente hasta una lesión cerebral irreversible. Esto
último se denomina ictericia nuclear o kernícterus.
2. Solo la bilirrubina conjugada se filtra por los riño­nes.
Por tanto, es excretada hacia la orina, a la que imparte un
color amarillo-marrón. Esto se denomina ictericia
colúrica.
 VALORES NORMALES DE
BILIRRUBINA
• Niños y Adultos
• Bilirrubina total: hasta 1,2 mg/dL
• Biliirubina directa: hasta 0,2 mg/dL
• Biliirubina indirecta: hasta 1,0 mg/dL
 VALORES NORMALES

Recién nacidos
• Bilirrubina total:
Neonatos 24hs. hasta 8.7 mg/dL
2° dia 1.3 a 11.3 mg/dL
3° día 0.7 a 12.7 mg/dL
4° a 6° día 0.1 a 12.6 mg/dL
< 1 mes 0.2 a 1.0 mg/dL
• Bilirrubina directa: varía con los días hasta 0.6 mg/dl
 ICTERICIA
• La ictericia es una coloración amarillenta de la piel
o de la esclerótica
• Se debe a la presencia de bilirrubina en plasma, y no
suele ser detectable hasta que la concentración de
bilirrubina sube por encima de 3-4 mg/dl,
aproximadamente.
TIPOS DE ICTERICIA
TIPOS DE ICTERICIA
 ICTERICIA PREHEPÁTICA
• También denominada ictericia hemolítica, es la
consecuencia de enfermedades hemolíticas graves en las
que se forma una gran cantidad de bilirrubina a partir
del hemo.
• El exceso de bilirrubina es bilirrubina no conjugada en
tránsito desde el bazo hasta el hígado.
• Más urobilinógeno en intestino y orina.
• La concentración de bilirrubina raras veces es mayor de
3-4 mg/dl.
 ICTERICIA HEPÁTICA
• Producida por enfermedades del parénquima hepático.
• Hepatitis vírica ictericia hepática aguda
• Cirrosis hepática ictericia crónica.
• Están elevadas las dos formas de bilirrubina en grados variables.
• Urobilinógeno está elevado en la sangre y en la orina porque el
hígado enfermo pierde la capacidad de recuperar el urobilinógeno
desde la circulación portal.
• Si se produce colestasis durante el transcurso de la enfermedad,
desaparece el urobilinógeno.
 Heces
hipocólicas
 ICTERICIA HEPÁTICA

Síndrome de Gilbert: es una enfermedad

hereditaria que se manifiesta por niveles
elevados de bilirrubina no conjugada o indirecta
en sangre provocada por una deficiencia parcial
de la enzima glucuroniltransferasa.
Síndrome de Dubin Johnson: El síndrome de Dubin-
Johnson es un trastorno heredado de manera
autosómica recesiva, que causa un aumento de la
concentración de bilirrubina conjugada sin la
elevación de enzimas del hígado y no asociada con
hemólisis. Se debe al fallo del transportador MRP-2
en los hepatocitos. Este se encarga de transportar la
bilirrubina conjugada en los hepatocitos hacia los
canalículos biliares. En los pacientes la bilirrubina
conjugada no es excretada acumulándose en el
hígado y pasando a la sangre.
Síndrome de Crigler Najar (SCN): es un trastorno
hereditario del metabolismo de la bilirrubina
caracterizado por una hiperbilirrubinema no
conjugada debido a un déficit hepático de la
actividad de la bilirrubina glucuronosiltransferasa
(GT). Se han descrito dos tipos, el SCN tipo 1 y tipo
2.
El SCN1 se caracteriza por un déficit completo del
enzima y no mejora con la terapia de inducción con
fenobarbital, mientras el déficit enzimático parcial
responde al fenobarbital en el SCN2 .
 ICTERICIA POSTHEPÁTICA
• Denominada ictericia colestática, está causada por una obstrucción biliar, a nivel
del conducto colédoco o a nivel de los canalículos biliares del hígado.
• Cálculo biliar impactado, cáncer de la cabeza del páncreas que comprime el
colédoco, enfermedades hepáticas que son suficientemente graves como para
impedir la formación de bilis, o la destrucción autoinmunitaria de los canalículos
biliares.
• Se sigue conjugando la bilirrubina, aunque la bilirrubina conjugada no llega al
intestino. Se «desborda» hacia la sangre.
• El urobilinógeno desaparece de la sangre, las heces y la orina.
• En la obstrucción completa biliar, las heces pierden su color marrón.
 DETERMINACIÓN DE BILIRRUBINAS
Reacción de Malloy Evelyn
•La bilirrubina reacciona específicamente con el ácido sulfanílico diazotado
produciendo un pigmento color rojo-violáceo (azobilirrubina) que se mide
fotocolorimétricamente a 530 nm.
• Si bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el
diazorreactivo, la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la presencia de un
desarrollador acuoso que posibilite su reacción. De forma tal que, para que
reaccione la bilirrubina total (conjugada y no conjugada) presente en la muestra,
debe agregarse benzoato de cafeína al medio de reacción.
2. ENZIMAS HEPÁTICAS
 OBJETIVOS
Al finalizar la unidad, el estudiante será capaz de:

•Explicar las propiedades de las enzimas y mencionar el

origen de las isoenzimas.
•Mencionar la función y localización de distintas
enzimas.
•Describir las características de las enzimas hepáticas.
•Relacionar los valores de las distintas enzimas.
•Fundamentar los métodos de determinación de las
enzimas hepáticas.
CONTENIDO

• Definición.
• Características.
• Isoenzimas.
• Localización de las enzimas.
• Enzimas hepáticas.
• Métodos de Determinación.
• Interpretación de resultados.
CONCEPTOS
 ENZIMAS Y DISMINUCIÓN DE LA
ENERGÍA DE ACTIVACIÓN

• Una enzima aumenta la velocidad de la reacción

disminuyendo la energía de activación (La energía
necesaria para romper los enlaces en las moléculas de
los reactivos).
• Las enzimas permiten
a la célula tener un
metabolismo
dinámico.
CARACTERÍSTICAS DE LAS ENZIMAS
ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
PRINCIPIOS DEL ANÁLISIS DE ENZIMAS
FASES DE UNA REACCIÓN
ENZIMÁTICA
TÉCNICAS DE EVALUACIÓN
ENZIMÁTICA
Vt : Volumen reactivo + Volumen muestra
Vm: Volumen muestra
Ɛ: Coeficiente de extinción de la reacción en las condiciones
adecuadas de pH y Tº
Δ abs: variación de la absorbancia en función del tiempo
t: tiempo

Actividad enzimática= Δ abs/t x factor cinético

CONSIDERACIONES
IMPORTANTES
 ENZIMAS HEPÁTICAS:
DISTRIBUCIÓN SUBCELULAR

• ASAT (GOT) y ALAT (GPT): citoplasma y mitocondria

• ALP (F.A.): membrana

sinusoides, venas central y periportal
• GGT: membrana
canalículo biliar, ductus periportales
TRANSAMINASAS

(transaminasa glutàmico piruvico sèrica)

TRANSAMINASAS
Marcadores de daño en los hepatocitos.
•Más útiles para detectar enfermedades hepatocelulares
agudas como las hepatitis.
•Aspartato aminotransferasa (ASAT) o Transaminasa
Glutámico Oxalacética o GOT. Poco específica:
músculo cardiaco, hígado, músculo esquelético, riñón,
cerebro, pulmones, páncreas, leucocitos, hematíes.
•Alanina aminotransferasa (ALAT) ó Transaminasa
Glutámico Pirúvica o GPT. Más específica del hígado.
 DETERMINACIÓN DE TRANSAMINASAS

• Método cinético manual o automatizado.

• Muestra: suero. Evitar hemólisis
• V.N. Depende del método

• GOT:
• Varón: 5-37 U/L
• Mujer: 5-31 U/L
• GPT:
• Varón: 4-42 U/L
• Mujer: 4-32 U/L
TRANSAMINASAS
Alteraciones:
• Aumento
-hepatitis aguda ,GPT>GOT, generalmente >500 U/l
- hepatitis crónica :GPT>GOT, <300 U/l
- hepatitis alcohólica y cirrosis hepática,
GOT:GPT >2, sugestivo.
- ictericia obstructiva: discreto aumento
• Disminución
- Desnutrición
- Anticonceptivos orales
Fundamento de la determinación de GOT
FOSFATASA ALCALINA
Enzima marcadora de colestasis u obstrucción total o
parcial del flujo biliar intra o extrahepática.

•Valores normales: En los niños los valores son mayores que en los adultos, aumento en el
embarazo.
• Lactante 50 – 800 U/l
• Niños menores de 18 años 50 – 750 U/l
• Niñas menores de 18 años 90 – 750 U/l
• Hombres 50 – 270 U/l
• Mujer 50 – 240 U/l

•Isoenzimas: hígado, hueso, placenta

e intestino.
FOSFATASA ALCALINA
• Aumento
• Fisiológico: crecimiento, reparación ósea, embarazo y menopausia.
• Causas Óseas: raquitismo, osteomalacia, fracturas, neoplasias óseas, mieloma múltiple y
metástasis óseas.
• Causas Hepatobiliares: obstrucción intra y extrahepática, tumores hepáticos y biliares,
metástasis hepáticas.
Aumento discreto <3 veces normal: hepatitis aguda, hepatitis crónica, hepatitis
alcohólica, cirrosis.
Aumento marcado frecuentemente >4 veces normal: Ictericia obstructiva y obstrucción
parcial .
• Disminución
• Patología hepática grave: cirrosis, hepatitis
• Quemaduras graves
Determinación de Fosfatasa Alcalina
•Muestra: suero
•Método: colorimétrico, o cinético manual o
automatizado
Fundamento de la determinación de Fosfatasa Alcalina
Colorimétrico: La fosfatasa alcalina desdobla al fenilfosfato de sodio en
medio alcalino tamponado con aminometil propanol (AMP). El fenol
liberado se determina por reacción con 4-aminoantipirina y ferricianuro
como agente oxidante. El color desarrollado es directamente proporcional a
la actividad enzimática y se mide a 520 nm

Cinético:
FA
p-nitrofenilfosfato + H2O -----> fosfato + p-nitrofenol
 GAMMA GLUTAMIL TRANSFERASA
• En relación con la vía biliar.
• Su obstrucción resulta en la elevación en el plasma.
• De gran utilidad en el Dx. De la obstruccion biliar cuando se dosa conjuntamente
F.Alcalina.
• Es una enzima inducible, y su concentración en suero aumenta con xenobióticos
(alcohol, drogas, etc.)
• Valores normales: < 35 U/l en varones y <25 U/l en mujeres
• Aumento importante: Hepatitis vírica, obstrucción biliar, metástasis hepáticas, enf.
Alcohólica.
• Aumento moderado: infecciones que afectan al hígado (citomegalovirus,
mononucleosis infecciosa)
 FUNDAMENTO DE LA
DETERMINACIÓN DE GGT
 LACTATO DESHIDROGENASA LDH
• Presente en todos los tejidos del cuerpo humano. 
• Niveles en la sangre son bajos.
• Tejidos dañados liberan LDH en el torrente sanguíneo.
• Aumento: Enfermedades del hígado, ataques cardiacos, anemia hemolítica,
trauma muscular, fracturas óseas, cáncer, infecciones tales como la
meningitis, la encefalitis o el VIH.
• Valores normales: < 480 U/l
• Aumento importante: infarto de miocardio (LDH1), hepatitis víricas
(LDH4, LDH5)
• Aumento moderado: hemólisis, accidente cerebro-vascular, distrofia
muscular.
 FUNDAMENTO DE LA
DETERMINACIÓN DE LDH
 TIEMPO DE PROTROMBINA

• Marcador de síntesis proteica (Factores de coagulación)

• Método manual o automatizado
• Muestra: plasma citratado
• VN: de 12 a 13 segundos
• El TP valora la vía extrínseca y común de la coagulación
( factores I,II,V,VII,IX,X)
• E. hepatocelular (cirrosis, hepatitis crónica y aguda, neoplasias), no
se sintetizan los factores → prolongación de TP. No se corrige con
Vit K.
• E. biliar obstructiva (tumor via biliar,cálculos, colestasis) bilis no
pasa al intestino no se absorben vitaminas liposolubles, Vit K, ↓
sintesis y TP se prolonga. Se corrige con Vit K intramuscular.
• Ingestión de cumarina: cumarínicos, dicumarol y warfarina,
interfieren en la producción de los factores dependientes de vitamina
K
 PROTEÍNAS PLASMÁTICAS
• La albúmina es el principal producto proteínico del hígado.
• Su semivida plasmática es larga (alrededor de 20 días), por lo que
cuando su síntesis se reduce, aunque sea bruscamente, el descenso de su
concentración plasmática se produce lentamente.
• La hipoalbuminemia es característica de la enfermedad hepática
avanzada.
• La concentración sérica total de globulinas se utiliza en algunas
ocasiones como medida aproximada de la gravedad de una hepatopatía.
• La a-fetoproteína (AFP) se sintetiza en el hígado fetal. En adultos
normales su concentración plasmática es muy baja, tiene interés en la
investigación del carcinoma hepatocelular, en el que las concentraciones
séricas se encuentran elevadas en el 80-90% de los casos.
 PATRONES DE PERFIL HEPÁTICO
Bilirrubina Transaminasas F. Alcalina Albúmina T.P
Patrón
S.Gilbert N a 5 BI N N N N

Hemòlisis

Hepatitis BD +BI Bt >500 U/l N a <3VN N N,

GPT>GOT >5X
Aguda

Hepatitis BD+BI Bt <300 U/l N a <3VN Dism. Prol

GPT>GOT No c VK
Crónica

Hepatopatía BD+BI Bt GOT: N a <3VN Dism. Prol

Alcohólica GPT>2 No cVK

Cirrosis

Colestasis BD+BI Bt N a <500U/l >4VN N– N

Dism. Prol sí
(Icter.Obst.) cVK
 PATRÓN: HEPATITIS AGUDA

• Causa: viral, tóxica, insuficiencia cardiaca.

• Bilirrubina: puede aumentar ambas fracciones, predominio
de BD. Bilirrubinuria
• Transaminasas: GPT>GOT, frecuentemente >500 U/l
• Fosfatasa alcalina: normal hasta <3 veces VN
• Albúmina: normal
• Tiempo Protrombina de >5x es mal pronóstico, no se
corrige con vitamina K.
 PATRÓN: HEPATITIS CRÓNICA

• Bilirrubina: pueden aumentar ambas,

predominio BD. Bilirrubinuria
• Transaminasas: GPT>GOT, <300 UI/l
• Fosfatasa alcalina: normal hasta <3 VN
• Albúmina: disminuida
• Tiempo de protrombina: prolongado y no se
corrige con Vitamina K parenteral
 PATRÓN: HEPATITIS ÁLCOHÓLICA,
CIRROSIS
• Bilirrubina: ambas fracciones pueden estar elevadas.
Bilirrubinuria
• Transaminasas: GOT:GPT >2 sugiere cirrosis o hepatitis
alcohólica.
• Fosfatasa alcalina: normal hasta <3 VN
• Albúmina: disminuida
• Tiempo de protrombina: prolongada y no se corrige con
Vitamina K parenteral.
• Requiere confirmar con gammaglutamiltranspeptidasa
(elevada)
HEPATITIS ALCOHÓLICA
U/L
600

500

400 GGT
ALP
300
ALT
200 AST

100

0
0 2 4 6 8
PATRÓN: ICTERICIA OBSTRUCTIVA
• Colestasis intra o extrahepática
• Bilirrubina: ambas fracciones pueden estar elevadas,
predominio BD. Bilirrubinuria
• Transaminasas: normal a elevación moderada, rara vez >500 U/l
• Fosfatasa alcalina: elevada, con frecuencia >4 veces valor
normal
• Albúmina: normal si es aguda, disminuida si es crónica
• Tiempo de protrombina: normal, prolongado pero si se corrige
con Vit K parenteral
ICTERICIA OBSTRUCTIVA

U/L

350
300
250
GGT
200 ALP
150 ALT
AST
100
50
0
0 2 4 6 8
CONCLUSIÓN

• El perfil hepático es un conjunto de exámenes de sangre que

indican si el hígado está funcionando bien.

Utilidad:
• Detección de lesión hepática, aunque sea leve.
• Diferenciar entre citolisis y colestasis y si es
posible, establecer un diagnóstico específico.
• Seguimiento de la enfermedad y evaluación del tratamiento.
• Determinación de la gravedad y pronóstico.
3. ENZIMAS PANCREATICAS
 OBJETIVOS
Al finalizar la unidad, el estudiante será capaz de:
- Describir las funciones de las enzimas pancreáticas.
- Mencionar que enzimas componen el perfil pancreático.
- Desarrollar la fisiopatología de la pancreatitis.
- Fundamentar los métodos de determinación de las
enzimas pancreáticas.
 CONTENIDO

• Introducción al páncreas exocrino.

• Descripción de la función de enzimas Pancreáticas.
• Amilasa.
• Lipasa.
• Tripsina.
• Pancreatitis.
• Métodos de detección e interpretación de resultados.
FUNCIONES DEL PÁNCREAS

• Endocrina

• Exocrina
 EL PÁNCREAS ES UNA FÁBRICA DE
ENZIMAS DIGESTIVAS
• Cuando el contenido gástrico entra en el duodeno, los
aminoácidos y ácidos grasos ya generados en el
estómago se transforman en estímulos potentes de las
células endocrinas del duodeno.
• Estas células liberan la hormona colecistocinina
(CCK),también llamada pancreozimina.
• La acidez del contenido gástrico que entra en el
duodeno estimula la liberación de secretina
 ESTIMULACIÓN DE LA
SECRECIÓN PANCREÁTICA
EL PÁNCREAS ES UNA FÁBRICA DE
ENZIMAS DIGESTIVAS
• Las secreciones pancreáticas aportan una mezcla de
enzimas para la digestión de casi todos los nutrientes
principales.
• La α-amilasa es secretada en grandes cantidades.
• Para la digestión de las proteínas, el páncreas aporta las
endopeptidasas y exopeptidasas: tripsina,
quimiotripsina y elastasa.
• Otras enzimas pancreáticas son la lipasa pancreática,
diversas fosfolipasas y nucleasas.
EL PÁNCREAS ES UNA FÁBRICA DE
ENZIMAS DIGESTIVAS

• En el intestino delgado, la lipasa pancreática y la

colipasa se unen a la superficie de las gotitas de grasa
en emulsión.
• La colipasa mantiene la actividad de la lipasa en
presencia de sales biliares, que de otra forma
inhibirían su actividad.
• La lipasa pancreática hidroliza los triglicéridos de los
alimentos para dar ácidos grasos libres y 2-
monoacilglicerol (2-monoglicéridos)
EL PÁNCREAS ES UNA FÁBRICA DE
ENZIMAS DIGESTIVAS

• Las disacaridasas y las

oligosacaridasas hidrolizan la
sacarosa y la lactosa, así como la
maltosa, la maltotriosa y las dextrinas
límite que se forman por la acción de
la α-amilasa sobre el almidón.
 MUCHAS ENZIMAS DIGESTIVAS
SON LIBERADAS EN FORMA DE
PRECURSORES INACTIVOS
• De entre las enzimas digestivas, las proteasas y las fos­folipasas son peligrosas.
• Se las debe mantener inactivas y controladas hasta que llegan a la luz del tubo
digestivo.
• Para prevenir la autodigestión, las enzimas peligrosas (pero no las lipasas y las
glicosidasas) son sintetizadas y segregadas en forma de precursores inactivos
denominados zimógenos.
• Los zimógenos son sintetizados en el retículo endoplásmico rugoso, almacenados
en vesículas de secreción, liberados mediante exocitosis y activados por escisión
proteolítica selectiva en la luz del tubo digestivo.
PÁNCREAS EXOCRINO
 PANCREATITIS
• La activación accidental de los zimógenos
dentro de las vías pancreáticas produce
pancreatitis, una enfermedad potencialmente
mortal en la que el páncreas se digiere a sí
mismo.
• Las enzimas incluso se vierten hacia la cavidad
abdominal, donde la lipasa pancreática
encuentra abundantes sustratos en el tejido
adiposo intraabdominal.
 PANCREATITIS
• En la mayoría de los casos se desconoce la causa
de la pancreatitis.
• Se asocia a alcoholismo, y en algunos casos se
puede detectar bloqueo de la ampolla de Vater
por un cálculo biliar.
• La pancreatitis se diagnostica determinando la
presencia de lipasa y amilasa en la sangre
PANCREATITIS
ENZIMAS PANCREÁTICAS CON
UTILIDAD DIAGNÓSTICA
Amilasa

Lipasa

Tripsina

Quimiotripsina

Elastasa
AMILASA PANCREÁTICA
(1-4 GLUCANGLUCANO HIDROLASA)
 AMILASA
• Desdoblamiento de almidón y glucógeno en boca, e intestino.
• Fuentes principales: células acinares pancreáticas, glándulas salivares.
• Plasma y orina (pancreática/salivar)
• Distribución tisular:

páncreas
glándulas salivares
testículos/ovarios
músculo esq.
pulmones

tejido adiposo
 AMILASA - UTILIDAD CLÍNICA
• Pancreatitis aguda
- 2-12 horas inicio dolor ( 4-6 veces)
- Pico máx. 12-24 horas
- Niveles basales 3-4 días
- No relación con la severidad
- Sensibilidad 70-75%
- Especificidad 30%
- 20% de pacientes con pancreatitis tienen
amilasa normal:
Demora 2-5 días
P. Crónica
HiperTG
 AMILASA - UTILIDAD CLÍNICA
• Pancreatitis aguda
- Amilasa en orina
- Amilasa sérica

• Pancreatitis crónica (2 a 3 veces), abscesos

pancreáticos, pseudoquiste, traumatismos.

• Cancer páncreas
 HIPERAMILASEMIAS E
HIPERAMILASURIAS DE ORIGEN NO
PANCREÁTICO
• Insuficiencia renal (ligeramente)
• Parotiditis y cálculos en glándulas salivares (2 veces lo normal)
• Cirugía maxilofacial
• Hiperamilasemia neoplásica: pulmón, testículo y ovario
• Quemaduras
• Transplante renal
• Traumatismo cerebral
• Drogas: opiáceos, heroína
• Alcoholismo
• Enfermedades vías biliares: coledocolitiasis
• Enfermedades intrabdominales: úlcera péptica, embarazo ectópico, peritonitis, obstrucción
intestinal
DETERMINACIÓN DE AMILASA

• 1. Método colorimétrico enzimático

• 2. Método cinético

• Muestra: Suero, no plasma porque los

anticoagulantes disminuyen la actividad de la
enzima.
 FUNDAMENTO MÉTODO
COLORIMÉTRICO
• El sustrato, almidón tamponado, se incuba con la muestra,
produciéndose la hidrólisis enzimática.
• Esta reacción se detiene por el agregado de reactivo de Iodo y
HCl, que al mismo tiempo produce color con el remanente de
almidón no hidrolizado.
• La disminución de color respecto de un sustrato color control
(sin muestra) es la medida de la actividad enzimática, que se
expresa en Unidades Amilolíticas /decilitro (UA/dl).
 MÉTODO COLORIMÉTRICO
Amilasa (muestra)
Almidon (reactivo A) Almidon (reactivo A)

Muestra Control 7’ 30’’

 MÉTODO COLORIMÉTRICO

Iodo + HCl (reactivo B) Iodo + HCl (reactivo B)

Poco almidon Todo el almidon,

residual, color color oscuro
suave

Muestra Control
 UNIDAD AMILOLÍTICA
• Unidad Amilolítica (UA) es la cantidad de enzima contenida en 100 ml de
muestra, que puede hidrolizar 10 mg de almidón en 30 minutos, en las
condiciones de la reacción.
• En esta técnica se incuban 20 ul de muestra con 0,5 mg de almidón contenidos
en 1 ml de Sustrato durante 7 minutos y medio, lo que equivale a incubar 100
ml de suero con 10.000 mg de almidón durante 30 minutos.
• Si todo el almidón fuera hidrolizado, la actividad amilásica de la muestra sería
de 1000 UA/dl.
• Para obtener las unidades de actividad amilásica, la fracción de almidón
digerido se multiplica por 1000.
VALORES NORMALES
 CÁLCULOS

Amilasa (UA/dl)= Abs control- Abs muestra *

1000
Abs control
FUNDAMENTO MÉTODO CINÉTICO

La α-amilasa hidroliza el sustrato definido 2-cloro-p-nitrofenilα-D-

maltotriósido (CNP-G3) formándose 2-cloro-p-nitrofenol (CNP),
formándose 2-cloro-nitrofenil-α-D-maltósido (CNPG2), maltotriosa (G3)
y glucosa. El CNP absorbe a 405 nm y la velocidad de aparición del color
es directamente proporcional a la actividad enzimática.
α-amilasa
CNP-G3 CNP + CNPG2 + G3 + G

Suero hasta 125 U/L

Orina ocasional hasta 680 U/L
 LIPASA
• Glicoproteína de bajo Pm

• Sales biliares y colipasa

 LIPASA
• Síntesis en células acinares pancreáticas

• 100 veces más que en otros tejidos

• Otros tejidos: estómago, pulmón, leucocitos

mucosa intestinal, tej. Adiposo

• Reabsorción tubular renal completa (no en orina )

 LIPASA - UTILIDAD CLÍNICA
• Pancreatitis aguda

- 4-8 horas inicio crisis ( 2-50)

- Pico máx. 24 horas
- niveles basales 8-14 días
- No relación con la severidad

• Lipasa normal en casos de hiperamilasemia no pancreática (parotiditis).

• Lipasa en pancreatitis aguda con amilasa normal

 MÉTODO DE DETERMINACIÓN DE
LIPASA (CINÉTICO)

• La lipasa hidroliza el sustrato definido 1,2-O-dilauril-

racglicerol-3-glutárico-(6’-metilresorufina)-éster para liberar
ácido glutárico-metilresorufina, compuesto inestable que se
descompone espontáneamente liberando un compuesto
coloreado (metilresorufina) que se mide a 570 nm. La
velocidad de aparición de color es directamente proporcional a
la actividad enzimática.
• Valor de referencia: 13 - 60 U/L
LO IDEAL….. MEDIR AMBAS
ENZIMAS ANTE LA SOSPECHA DE
PANCREATITIS

• Amilasa
97% especificidad
para pancreatitis aguda

• Lipasa